人类血型检测试剂盒及其制备方法与流程

文档序号:12174295阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人类血型检测试剂盒,其特征在于,包括检测条,所述检测条包括金结合物垫和反应膜,所述金结合物垫包被有胶体金标记的鼠抗人A抗原单克隆抗体、胶体金标记的鼠抗人B抗原单克隆抗体和胶体金标记的鼠抗人D抗原单克隆抗体;所述反应膜包括包被有鼠抗人B抗原单克隆抗体的B抗原检测线、包被有鼠抗人A抗原单克隆抗体的A抗原检测线、包被有鼠抗人D抗原单克隆抗体的Rh检测线和包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体的质控线。

2.根据权利要求1所述的人类血型检测试剂盒,其特征在于,所述鼠抗人B抗原单克隆抗体的浓度为1.0-5.0mg/mL,所述鼠抗人A抗原单克隆抗体的浓度为1.0-5.0mg/mL,所述鼠抗人D抗原单克隆抗体浓度为1.0-10.0mg/mL。

3.根据权利要求1所述的人类血型检测试剂盒,其特征在于,所述羊抗鼠IgG多克隆抗体浓度为4.0-10.0mg/mL。

4.根据权利要求1所述的人类血型检测试剂盒,其特征在于,还包括样本稀释液,该样本稀释液为磷酸盐缓冲液。

5.根据权利要求1至4任意一项所述的人类血型检测试剂盒,其特征在于,所述检测条放置于长方形塑料盒中,构成检测卡,该检测卡上设有样品孔和检测孔,所述样品孔与所述检测条的所述样品垫位置对应,所述检测孔对应所述检测条的所述检测线和所述质控线。

6.一种如权利要求1所述的人类血型检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)反应膜的制备:

稀释所述鼠抗人B抗原单克隆抗体、鼠抗人A抗原单克隆抗体、鼠抗人D抗原单克隆抗体和所述羊抗鼠IgG多克隆抗体,并喷涂至所述反应膜上,分别形成所述B抗原检测线、A抗原检测线、Rh检测线与质控线,干燥备用;

(2)金结合物垫的制备:

将所述鼠抗人B抗原单克隆抗体、鼠抗人A抗原单克隆抗体、鼠抗人D抗原单克隆抗体分别与胶体金进行偶联制得胶体金标记的鼠抗人B抗原单克隆抗体溶液、胶体金标记的鼠抗人A抗原单克隆抗体溶液、胶体金标记的鼠 抗人D抗原单克隆抗体溶液,均调整浓度,并混合为混合液,该混合液浸泡所述金结合物垫,铺金,干燥备用;

(3)切割装配:将所述反应膜、金结合物垫、粗纤维滤纸、样品垫装配至所述反应板,切割后形成所述检测条。

7.根据权利要求6所述的人类血型检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述鼠抗人A抗原单克隆抗体和鼠抗人B抗原单克隆抗体分别通过以下步骤制备获得:

(1)取正常人的红细胞,洗涤、离心后取上清;

(2)悬液免疫BALB/C小鼠,取脾脏,获得脾淋巴细胞悬液备用;

(3)骨髓瘤细胞与脾淋巴细胞通过聚乙二醇融合;

(4)选择培养基初步筛选、抗原特异性筛选及有限稀释、克隆化。

8.根据权利要求6或7所述的人类血型检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述胶体金标记的鼠抗人A抗原单克隆抗体、胶体金标记的鼠抗人B抗原单克隆抗体、胶体金标记的鼠抗人B抗原单克隆抗体的制备包括以下步骤:

(1)使用碳酸钾溶液调节胶体金pH值至8.0-9.0;

(2)加入单克隆抗体,搅拌;

(3)加入10%牛血清白蛋白溶液,搅拌;

(4)离心,弃去上清液;

(5)加入胶体金结合物稀释液,即得。

9.根据权利要求8所述的人类血型检测试剂盒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中使用碳酸钾溶液调节胶体金pH值至8.5。

10.根据权利要求6所述的人类血型检测试剂盒的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述胶体金标记的鼠抗人B抗原单克隆抗体溶液、胶体金标记的鼠抗人A抗原单克隆抗体溶液、胶体金标记的鼠抗人D抗原单克隆抗体溶液,均调整浓度至6-10μg/mL,混合为混合液。

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