针复合物分别对环境中的S-布洛芬进行定性定 量手性识别
[0029] (1):制备金纳米颗粒溶液：
[0030] 在经过王水浸泡并清洗后的100mL圆底烧杯中加入50mL超纯水，用洗净的lmL移 液管移取0. 5mL事先配置好的1 %的氯金酸水溶液于50mL超纯水中，使得溶液中氯金酸浓 度降低至0.01% (w/v)，将此溶液在油浴中加热恒温与92±4°C。在磁子的剧烈搅拌下，迅 速加入1. 6mL事先配置好的1 % (w/v)柠檬酸三钠溶液，继续搅拌，在反应的前三分钟，溶液 基本没变化，3分钟之后，溶液开始变蓝，几分钟后变为蓝紫，继续恒温搅拌，在20分钟之后 溶液变红，最后变成清亮透明的紫红色，即为金纳米颗粒溶液，浓度为25nmol。纳米金的粒 径和制备时加入的柠檬酸三钠的量是密切相关的，柠檬酸三钠用量越多，制得的纳米金的 粒径越小。
[0031] (2)制备S-布洛芬适配体，所述的S-布洛芬适配体的序列为：
[0032] 5' -SHACAGCGTGGGCGGTGTCGGAITITCGTATGGATGGGGATG-3'。将得到的S-布洛芬适 配体离心后加入Tris-HCl缓冲溶液溶解为1ymol/L溶液，放入4°C冰箱中备用；
[0033] (3)以S-布洛芬适配体为S-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上 述的金纳米颗粒溶液，100yL上述的S-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，分别加 入0、20、40、60、80、100、120yL浓度为100ymol/L的S-布洛芬标准溶液，用超纯水定容至 500yL，得到标准检测液，常温下反应30min后，通过裸眼观察，反应液由红色变为蓝色。根 据金纳米粒子聚沉引起其溶液变色程度的不同，在190-800nm波长范围内用UV-vis扫描， 得到紫外-可见吸收光谱，通过紫外分光光度计检则检测体系在650nm和520nm处的吸光 值A650和A520,并如图3所示，以布洛芬浓度为横坐标，A640/A520为纵坐标得到标准曲 线；确定S-布洛芬快速检测的线性回归方程为：y= 0. 0147x+0. 3627，R2 = 0. 9793。随着 S_布洛芬浓度的增大，纳米金在520nm处的吸收峰强度明显降低，在650nm处出现了新的吸 收峰，纳米金颗粒随着不同浓度的S-布洛芬加入发生了较大程度的团聚。
[0034] (4)以S-布洛芬适配体为S-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上述 的金纳米颗粒溶液，100yL上述的S-布洛芬适配体溶液，10yLlmol/L氯化钠溶液，50yL 浓度为100umol/L的S-布洛芬溶液，用超纯水定容至500yL，得到待测液，常温下反应 30min后，通过紫外分光光度计检则检测体系在650nm和520nm处的吸光值A650和A520， 根据标准曲线计算待测样本中S-布洛芬的浓度为9. 505ymol/L。
[0035] 对比例1 :以S-布洛芬适配体探针复合物分别对环境中的R-布洛芬进行定性定 量手性识别
[0036] (1):制备金纳米颗粒溶液：具体步骤与实施例1相同。
[0037] (2):制备S-布洛芬适配体，具体步骤与实施例1相同。
[0038] (3):以S-布洛芬适配体为S-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上 述的金纳米颗粒溶液，100yL上述的S-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，分别加 入0、20、40、60、80、100、120 1^浓度为100 11111〇1的1?-布洛芬标准溶液，用超纯水定容至 500yL，得到标准检测液，常温下反应30min后，在190-800nm波长范围内用UV-vis扫描， 得到紫外-可见吸收光谱，建立紫外吸收峰强度与手性布洛芬浓度之间的线性关系，确定 S-布洛芬快速检测的线性回归方程为：y= 0. 0006X+0. 2511，R2= 0. 1852。由此方程的斜 率和R2值可知，紫外吸收峰强度与R-布洛芬浓度之间的线性关系微弱。并且由图1可见， 纳米金颗粒的大部分仍然呈现分散状态，个别纳米金颗粒小成都的连在一起也为呈现紧密 团聚状态。
[0039] 实施例2 :以R-布洛芬适配体探针复合物分别对环境中的R-布洛芬进行定性定 量手性识别
[0040] (1):制备金纳米颗粒溶液：具体步骤与实施例1相同。
[0041] (2):制备R-布洛芬适配体，所述的R-布洛芬适配体的序列为：
[0042] 5 '-SHGCGAACGACTTCATAAAATGCTATAAGGITGCCCTCTGTC-3 '。将得到的R-布洛芬适 配体离心后加入Tris-HCl缓冲溶液溶解为1ymol/L溶液，放入4°C冰箱中备用；
[0043] (3):以R-布洛芬适配体为R-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上 述的纳米金溶液，100yL上述的R-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，分别加入0、 20、40、60、80、100、120yLlOOymolR-布洛芬标准溶液，用超纯水定容至500yL，得到标 准检测液。常温下反应30min后，由图2可见，随着R-布洛芬浓度的增大，纳米金颗粒随着 不同浓度的R-布洛芬加入发生了较大程度的团聚。根据金纳米粒子聚沉引起其溶液变色 程度的不同，在190-800nm波长范围内用UV-vis扫描，得到紫外-可见吸收光谱，通过紫外 分光光度计检则检测体系在650nm和520nm处的吸光值A650和A520,并如图3所示，以布 洛芬浓度为横坐标，A640/A520为纵坐标得到标准曲线，建立紫外吸收峰强度与手性布洛芬 浓度之间的线性关系，确定R-布洛芬快速检测的线性回归方程为：y= 0. 0064X+0. 4428，R2 =0. 9317。由此方程的斜率和R2值可知，紫外吸收峰强度与R-布洛芬浓度之间有较明显 的线性关系。
[0044] (4)以R-布洛芬适配体为R-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上述 的金纳米颗粒溶液，100yL上述的R-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，50yL浓度 为100ymol/L的R-布洛芬溶液，用超纯水定容至500yL，得到待测液，常温下反应30min 后，通过紫外分光光度计检则检测体系在650nm和520nm处的吸光值A650和A520,根据标 准曲线计算待测样本中R-布洛芬的浓度为9. 495ymol/L。
[0045] 对比例2 :以R-布洛芬适配体探针复合物分别对环境中的S-布洛芬进行定性定 量手性识别
[0046] (1):制备金纳米颗粒溶液：具体步骤与实施例2相同。
[0047] (2):制备R-布洛芬适配体，具体步骤与实施例2相同。
[0048] (3):以R-布洛芬适配体为R-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上 述的纳米金溶液，100yL上述的R-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，分别加入0、 20、40、60、80、100、120yLlnmo1的S-布洛芬标准溶液，用超纯水定容至500yL，得到标准 检测液。常温下反应30min后，在190-800nm波长范围内用UV-vis扫描，得到紫外-可见 吸收光谱，建立紫外吸收峰强度与手性布洛芬浓度之间的线性关系，确定S-布洛芬快速检 测的线性回归方程为：y= 0. 0009x+0. 2655,R2= 0. 3125。由此方程的斜率和R2值可知， 紫外吸收峰强度与S-布洛芬浓度之间的线性关系微弱。并且不论怎样改变S-布洛芬浓度 之间的浓度，反应液都不会从红色明显转变成蓝色，不同浓度的反应液基本呈现红色。
[0049] 实施例3 :以S-布洛芬适配体探针复合物分别对S、R-布洛芬混合物进行定性定 量手性识别
[0050] (1):制备金纳米颗粒溶液：具体步骤与实施例1相同。
[0051] (2):制备S-布洛芬适配体，具体步骤与实施例1相同。
[0052] (3)以S-布洛芬适配体为S-布洛芬的识别探针，在2mL离心管中加入200yL上 述的金纳米颗粒溶液，100yL上述的S-布洛芬适配体溶液，10yL1M氯化钠溶液，分别加 入0、20、40、60、80、100、120yL浓度为100ymol的S-布洛芬溶液并对应加入120、100、80、 60、40、20、0yL浓度为100ymol的的R-布洛芬溶液成混合液，用超纯水定容至500yL，常 温下反应30min后，在190-800nm波长范围内用UV-vis扫描。根据金纳米粒子聚沉引起 其溶液变色程度的不同，通过紫外分光光度计检则检测体系在650nm和520nm处的吸光值 A650和A520,并以布洛芬浓度为横坐标，A640/A520为纵坐标得到标准曲线。
[0053] 在优化的实验