度为25%的乙醇溶液中，温度升至55±2°C，浸泡8 h，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，将玻碳电极浸泡在0.25 mol/L氯酸金溶液中，浸泡时间为4 h，再放入质量百分浓度为30%的水合肼溶液中浸泡20 min，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，即得纳米金修饰玻碳电极；
(2)氧化碳纳米管的制备:在反应器中，分别加入，浓硫酸:28mL，碳纳米管:4g，过硫酸钾:4g，超声分散30min，再加入去离子水:40 1^，温度升至70±2°(:搅拌反应8 h，冷却至室温，过滤，用去离子水反复洗涤至滤液为中性，干燥，得到氧化碳纳米管；
(3)印迹溶胶的制备:在反应器中，分别加入，乙腈:9.5 mL，氧化碳纳米管:0.6g，丙烯酸:1.0g，乌头酸:0.7，偶氮二异丁腈:0.2，搅拌10 min，再加入紫杉醇:0.1g，温度升至65土2°C搅拌反应8 h，即得印迹溶胶；
(4)紫杉醇分子印迹传感器的制备方法:取步骤(3)的印迹溶胶于16yL滴加到步骤(I)制备的纳米金修饰玻碳电极上，置于红外灯下，挥发干溶剂后，将其用乙醇与盐酸(体积比为乙醇:盐酸为15:1)混合溶液浸泡12h，除去电极上的模板分子，即得紫杉醇分子印迹传感器。
[0016]实施例4
(1)纳米金修饰玻碳电极:将玻碳电极依次用0.3μπι、0.05μπιΑ1203粉末进行表面抛光，然后用高纯水超声清洗，用氮气吹干，将玻碳电极放入含3-巯丙基三乙氧基硅烷质量百分浓度为25%的乙醇溶液中，温度升至55±2°C，浸泡6.5 h，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，将玻碳电极浸泡在0.25 mol/L氯酸金溶液中，浸泡时间为2.5 h，再放入质量百分浓度为30%的水合肼溶液中浸泡20 min，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，即得纳米金修饰玻碳电极；
(2)氧化碳纳米管的制备:在反应器中，分别加入，浓硫酸:291^，碳纳米管:38，过硫酸钾:5g，超声分散22min，再加入去离子水:38 1^，温度升至70±2°(:搅拌反应6.5 h，冷却至室温，过滤，用去离子水反复洗涤至滤液为中性，干燥，得到氧化碳纳米管；
(3)印迹溶胶的制备:在反应器中，分别加入，乙腈:8.7 mL，氧化碳纳米管:0.7g，丙烯酸:1.2g，乌头酸:0.6，偶氮二异丁腈:0.3，搅拌10 min，再加入紫杉醇:0.3g，温度升至65土2°(:搅拌反应6.5 h，即得印迹溶胶；
(4)紫杉醇分子印迹传感器的制备方法:取步骤(3)的印迹溶胶于16yL滴加到步骤(I)制备的纳米金修饰玻碳电极上，置于红外灯下，挥发干溶剂后，将其用乙醇与盐酸(体积比为乙醇:盐酸为15:1)混合溶液浸泡15h，除去电极上的模板分子，即得紫杉醇分子印迹传感器。
[0017]实施例5
(1)纳米金修饰玻碳电极:将玻碳电极依次用0.3μπι、0.05μπιΑ1203粉末进行表面抛光，然后用高纯水超声清洗，用氮气吹干，将玻碳电极放入含3-巯丙基三乙氧基硅烷质量百分浓度为25%的乙醇溶液中，温度升至55±2°C，浸泡7.5 h，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，将玻碳电极浸泡在0.25 mol/L氯酸金溶液中，浸泡时间为3.5 h，再放入质量百分浓度为30%的水合肼溶液中浸泡20 min，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，即得纳米金修饰玻碳电极；
(2)氧化碳纳米管的制备:在反应器中，分别加入，浓硫酸:32mL，碳纳米管:Sg，过硫酸钾:2g，超声分散28min，再加入去离子水:34 1^，温度升至70±2°(:搅拌反应7.5 h，冷却至室温，过滤，用去离子水反复洗涤至滤液为中性，干燥，得到氧化碳纳米管；
(3)印迹溶胶的制备:在反应器中，分别加入，乙腈:9.2 mL，氧化碳纳米管:0.5g，丙烯酸:1.0g，乌头酸:1.0，偶氮二异丁腈:0.1，搅拌10 min，再加入紫杉醇:0.1g，温度升至65土2°C搅拌反应7 h，即得印迹溶胶； (4)紫杉醇分子印迹传感器的制备方法:取步骤(3)的印迹溶胶于16yL滴加到步骤(I)制备的纳米金修饰玻碳电极上，置于红外灯下，挥发干溶剂后，将其用乙醇与盐酸(体积比为乙醇:盐酸为15:1)混合溶液浸泡16h，除去电极上的模板分子，即得紫杉醇分子印迹传感器。
[0018]实施例6
将上述实施例1?5所制备的紫杉醇分子印迹传感器，用于紫杉醇的检测，步骤如下:
(1)标准溶液配制:配制一组包括空白标样在内的不同浓度的紫杉醇标准溶液，底液为pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液；
(2)工作曲线绘制:将Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为辅助电极，本申请实施例1~5所制备的紫杉醇分子印迹传感器作为工作电极组成三电极系统，连接CHI660B电化学工作站，在K3[Fe(CN)6]溶液中，采用循环伏安法在-0.10?0.4V电位范围内进行检测，空白标样的响应电流记为1，含有不同浓度的紫杉醇标准溶液的响应电流即为I1，响应电流降低的差值为Λ I=1-1i，ΔI与紫杉醇标准溶液的质量浓度c之间呈线性关系，绘制ΛI?c工作曲线；
(3)紫杉醇的检测:用待测样品代替步骤(I)中的紫杉醇标准溶液，按照步骤(2)的方法进行检测，根据响应电流降低的差值ΛΙ和工作曲线，得到待测样品中紫杉醇的含量；
所述K3 [Fe(CN)6]溶液的浓度为8mmo I/L;
所述pH 7.5的磷酸盐缓冲溶液的浓度在80 mmol/Lo
[0019]响应电流与紫杉醇的浓度在1.0 X 10—7?8.0 X 10—5mol/L范围内呈良好的线性关系，检测限为1.46X10—Vol/L将本发明制备的紫杉醇分子印迹传感器成功用于药品、生物样品中紫杉醇的检测中，回收率在95.49?105.2%之间，因此本发明制备的分子印迹传感器可广泛应用于生物医药、食品、环保检测等相关领域。
【主权项】
1.一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法，其特征在于，该方法具有以下工艺步骤: (1)纳米金修饰玻碳电极:将玻碳电极依次用0.3μπι、0.05μπιΑ1203粉末进行表面抛光，然后用高纯水超声清洗，用氮气吹干，将玻碳电极放入含3-巯丙基三乙氧基硅烷质量百分浓度为25%的乙醇溶液中，温度升至55 ±2°C，浸泡6?8 h，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，将玻碳电极浸泡在0.25 mol/L氯酸金溶液中，浸泡时间为2?4 h，再放入质量百分浓度为30%的水合肼溶液中浸泡20 min，取出用无水乙醇充分洗涤，用氮气吹干，即得纳米金修饰玻碳电极； (2)氧化碳纳米管的制备:在反应器中，按如下组成质量百分浓度加入，浓硫酸:52?62%，碳纳米管:3-8%，过硫酸钾:1.0-5%，超声分散20?30min，再加入32?40%去离子水，各组分含量之和为百分之百，温度升至70±2°C搅拌反应6?8 h，冷却至室温，过滤，用去离子水反复洗涤至滤液为中性，干燥，得到氧化碳纳米管； (3)印迹溶胶的制备:在反应器中，按如下组成质量百分浓度加入，乙腈:66?74%，氧化碳纳米管:5~8%，丙烯酸:10?18%，乌头酸:5?10%，偶氮二异丁腈:1~3%，搅拌10 min，再加入紫杉醇:1.0?3.0%，各组分含量之和为百分之百，温度升至65±2°C搅拌反应6?8 h，即得印迹溶胶； (4)紫杉醇分子印迹传感器的制备方法:取步骤(2)的印迹溶胶于16yL滴加到步骤(I)制备的纳米金修饰玻碳电极上，置于红外灯下，挥发干溶剂后，将其用乙醇与盐酸混合溶液浸泡12?16h，除去电极上的模板分子，即得紫杉醇分子印迹传感器。2.根据权利要求1所述的一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的丙烯酸与乌头酸质量比2:1为最优。3.根据权利要求1所述的一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的乙醇与盐酸混合溶液的体积比为乙醇:盐酸=15:1。4.根据权利要求1所述的一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法所制备的紫杉醇分子印迹传感器。5.根据权利要求1所述的一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法所制备的紫杉醇分子印迹传感器，其特征在于，紫杉醇分子印迹传感器对样品中紫杉醇测定的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种紫杉醇分子印迹传感器的制备方法，其特征在于，首先，将玻碳电极用3-巯丙基三乙氧基硅烷和氯酸金修饰，制备得到纳米金修饰玻碳电极；然后溶胶-凝胶印迹技术、层层自组装法和滴涂法相结合，在修饰玻碳电极表面成功地研制了一种具有特异选择性的紫杉醇印迹电化学传感器，本发明制备的紫杉醇分子印迹传感器的响应大大提高。该紫杉醇印迹传感器对紫杉醇表现出较高的亲和性和选择性。该紫杉醇分子印迹传感器与电化学工作站连接构成能够专一模板分子识别传感器。本发明制得的传感器成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速，可反复使用。
【IPC分类】G01N1/28, G01N27/48, G01N27/30, G01N27/26
【公开号】CN105572210
【申请号】CN201610087759
【发明人】李慧芝, 李志英, 朱学英
【申请人】济南大学
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年2月17日