本发明涉及一种树木的组织培养技术，具体为濒危疙瘩杨的组培繁殖技术。
背景技术：
疙瘩杨，是银白杨的一个变异品种，因其树干和大的枝干有环状或不规则的凸起，形似疙瘩，故而得名。它的枝杈稀疏、冠形松散、枝干尖削度大、表皮粗糙。其木材纹理纵横交错，在纵切面上显现出自然而无序的各种奇特美丽的图案，是一种极为珍稀的特种工艺用材树种。它的用途广泛，其原木抗纵横向压力远高于箭杆杨、新疆杨等普通杨树树种，可做木碗、木盆和其他器具、木制家具，以及用做室内雕刻艺术品，同时还是优良的绿化观赏树种等。
新疆当地疙瘩杨濒临灭绝，抢救野生疙瘩杨的任务异常紧迫。疙瘩杨的种源稀少，扦插繁殖材料有限，传统林木繁殖方法无法解决其繁殖保护问题，需要快速繁殖。
胡受军等发表的文章“疙瘩杨组培快繁技术及苗期管理”（新疆林业，2010，5）提供了一种利用组织培养快速繁殖疙瘩杨的技术方法，能够实现疙瘩杨的组培繁殖，但由于其培养基及激素配比选择及培养控制条件与方法不尽理想，其诱导成苗率低，繁殖系数、生根系数不高，并且移栽成活率不高，影响了组织培养的效果。需要进一步改进开发。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种可高效快速繁殖疙瘩杨的组培技术方法。
本发明提供的疙瘩杨组培快繁技术，包括外植体准备、诱导、增殖、生根、炼苗、移栽环节，其特征在于组织培养条件为PH值5.4-5.8，温度25℃-28℃，自然光照12h/d，各步骤如下：
（1）外植体准备。取当年生的无虫害、无病害的健壮的嫩枝条作为外植体，除去多余的叶片和叶柄，抹去枝条上的绒毛，用75%的酒精擦拭茎段和腋芽处，把处理好的茎杆剪成10cm左右，用膜或报纸包好放在温度为4℃的冰箱中冷藏12h，将冷藏过后的茎杆在洗洁精水中冲洗干净，在流动的自来水上冲洗1h， 将冲洗干净的枝条剪成1.5-2cm的茎段，每一个茎段带一个芽；用75%的酒精：0.1%的升汞为1:3的比例混合液对外枝体进行消毒6-8min，取出后用无菌水冲洗5-6次后备用。
（2）诱导。培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L，将前述整备的茎段接种在本培养基上，培养30d，新芽生长至4㎝高以上，每一节间约0.5-1㎝左右。
（3）增殖。培养基MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01-0.03mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L，将获得的诱导苗剪成1.5㎝左右的长度接种在本培养基上，20d后获得丛生芽。
（4）复壮。培养基为1/2MS+6BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将丛生芽切割分离为单株转接至本培养基上，培养20-30d。（5）生根。培养基为1/2MS+IBA0.1-0.2mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将复壮后的单株苗接种到本培养基上培养15d。
（6）炼苗。温室内炼苗，先开瓶炼苗3-4d，然后取出用水洗净根部的培养基，把洗好的瓶苗移栽到泥炭：珍珠岩为6:1的穴盘中，驯化期30d，前期空气湿度90%以上，温度25-28℃，后期空气湿度降低到75%以上，每7d喷施1次多菌灵1000倍液。
（7）移栽。经过驯化后的成苗移栽到营养钵内，基质为泥炭：珍珠岩为体积比6：1；30-50d后换大钵，再长30d后，植株高度30cm左右便可直接移入大田定植。
该方法激素配比合理，培养基经过优化，诱导率显著提高，并且增加了诱导后复壮环节，为后续生根成功打下基础，生根后经炼苗、两次转移训化，稳定后定植大田。诱导率98%，增殖系数4以上，15d生根率80%以上，生根条数为2-4条，生长健壮。移栽成活率95%以上。
具体实施方式
实施例1。
疙瘩杨的组培快繁技术，包括外植体准备、诱导、增殖、生根、炼苗、移栽环节，其特征在于组织培养条件为PH值5.4-5.8，温度25℃-28℃，自然光照12h/d，各步骤及条件如下：
（1）外植体准备。取当年生的无虫害、无病害的健壮的嫩枝条作为外植体，除去多余的叶片和叶柄，抹去枝条上的绒毛，用75%的酒精擦拭一遍茎段和腋芽处。把处理好的茎杆剪成10cm左右，用膜包好放在温度为4℃的冰箱中冷藏12h。将冷藏过后的茎杆在洗洁精水中冲洗干净，在流动的自来水上冲洗1h。将冲洗干净的枝条剪成1.5-2cm的茎段，每一个茎段带一个芽。用75%的酒精：0.1%的升汞为1:3的比例混合液对外枝体进行消毒6-8min，取出后用无菌水冲洗5-6次后备用。
（2）诱导。培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L。将前述整备的茎段接种在本培养基上，培养30d，新芽生长至4㎝高以上，每一节间约0.5-1㎝左右。
（3）增殖。培养基MS+6BA0.2mg/L+NAA0.03mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L，将获得的诱导苗剪成1.5㎝左右的长度接种在上述培养基上，20d后获得丛生芽。
（4）复壮。培养基为1/2MS+6BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将丛生芽切割分离为单株转接至本培养基上，培养30d。
（5）生根。培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将复壮后的单株苗接种到本培养基上培养15d。
（6）炼苗。温室内炼苗，先开瓶炼苗3-4d，然后取出用水洗净根部的培养基，把洗好的瓶苗移栽到泥炭：珍珠岩为6:1的穴盘中，驯化期30d，前期空气湿度90%以上，温度25-28℃，后期空气湿度降低到75%以上，每7d喷施1次多菌灵1000倍液。
（7）移栽。经过驯化后的成苗移栽到营养钵内，基质为泥炭：珍珠岩为体积比6：1；30d后换大钵，再长30d后，植株高度30cm左右便可直接移入大田定植。
本实施例为最优实施例。
与本实施例不同的实施例为在发明技术方案的激素取值范围内以及操作方法相近似的具体实施方法。包括增殖培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L或者MS+6BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L，以及生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L。