疙瘩杨组培快繁技术的制作方法

文档序号:12598971阅读:来源:国知局

技术特征:

1.疙瘩杨组培快繁技术,包括外植体准备、诱导、增殖、生根、炼苗、移栽环节,其特征在于组织培养条件为PH值5.4-5.8,温度25℃-28℃,自然光照12h/d,各步骤如下

(1)外植体准备:取当年生无虫害、无病害的健壮的嫩枝条作为外植体,除去多余的叶片和叶柄,抹去枝条上的绒毛,用75%的酒精擦拭茎段和腋芽处,把处理好的茎杆剪成10cm左右,用膜或报纸包好放在温度为4℃的冰箱中冷藏12h,将冷藏过后的茎杆在洗洁精水中冲洗干净,在流动的自来水上冲洗1h,将冲洗干净的枝条剪成1.5-2cm的茎段,每一个茎段带一个芽;用75%的酒精:0.1%的升汞为1:3的比例混合液对外枝体进行消毒6-8min,取出后用无菌水冲洗5-6次后备用;

(2)诱导:培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L,蔗糖浓度30g/L,琼脂5g/L,将前述整备的茎段接种在本培养基上,培养30d,新芽生长至4㎝高以上,每一节间约0.5-1㎝左右;

(3)增殖:培养基MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01-0.03mg/L,蔗糖浓度30g/L,琼脂5g/L,将获得的诱导苗剪成1.5㎝左右的长度接种在本培养基上,20d后获得丛生芽;

(4)复壮:培养基为1/2MS+6BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L,蔗糖40g/L,琼脂5.5g/L,将丛生芽切割分离为单株转接至本培养基上,培养20-30d;

(5)生根:培养基为1/2MS+IBA0.1-0.2mg/L,蔗糖40g/L,琼脂5.5g/L,将复壮后的单株苗接种到本培养基上培养15d;

(6)炼苗:温室内炼苗,先开瓶炼苗3-4d,然后取出用水洗净根部的培养基,把洗好的瓶苗移栽到泥炭:珍珠岩为6:1的穴盘中,驯化期30d,前期空气湿度90%以上,温度25-28℃,后期空气湿度降低到75%以上,每7d喷施1次多菌灵1000倍液;

(7)移栽:经过驯化后的成苗移栽到营养钵内,基质为泥炭:珍珠岩为体积比6:1;30-50d后换大钵,再长30d后,植株高度30cm左右便可直接移入大田定植。

2.如权利要求1所述的组培快繁技术,其特征在于所述的增殖培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.03mg/L,生根培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L。

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