化合物Quinolactacide的应用的制作方法

文档序号:11668809阅读:242来源:国知局

本发明涉及微生物来源杀菌剂,具体的说是化合物quinolactacide的应用。



背景技术:

马铃薯晚疫病又称疫病、马铃薯瘟,是导致马铃薯茎叶死亡和块茎腐烂的一种毁灭性真菌病害,发病严重时,植株叶片萎垂、卷缩,最终导致全株黑腐,造成马铃薯严重减产甚至绝收。马铃薯晚疫病在我国马铃薯主要产区均有发生,损失严重,一般年份损失30%~50%,大流行年份甚至造成绝收。目前防治手段主要依靠甲基托布津、多菌灵等化学合成农药,但是长期大量使用已经带来环境污染、农药残留超标等问题。与传统的化学合成农药相比,微生物来源杀菌剂具有对人畜和非靶标生物安全、环境兼容性好、不易产生抗性等优点。因此,微生物来源杀菌剂的开发与应用对人类健康、环境保护和农业的可持续发展具有重要的意义。

式(一)所示的化合物quinolactacide是由青霉菌penicilliumcitrinumthomf1539经发酵培养、提取分离而获得(masakiabe,tetsuyaimai,naokiishii,etal.quinolactacide,anewquinoloneinsecticidefrompenicilliumcitrinumthomf1539.biosci.biotechnol.biochem.2005,69(6),1202-1205)。在上述文献中通过试验证明:该化合物对桃蚜具有杀虫活性。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供化合物quinolactacide在制备防治马铃薯晚疫病菌的农用杀菌剂方面的应用。

为了实现上述目的,本发明采用的技术方案为:化合物quinolactacide的应用,所述化合物quinolactacide对马铃薯晚疫病菌(phytophthorainfestans)具有较好抑制效果,可用于制备农用杀菌剂;所述化合物quinolactacide的结构如式(一)所示。

所述的农用杀菌剂为:以式(一)所示的化合物为活性成分,加入农业上常用的助剂制备成可湿性粉剂、颗粒剂或缓释剂等。

本发明所具有的优点:式(一)所示化合物可由青霉菌经发酵培养、提取分离而获得,其对马铃薯晚疫病菌具有较好抑制活性,最小抑制浓度(mic)为8μg/ml,表明该quinolactacide化合物对马铃薯晚疫病菌具有较好抑制效果,可以作为具有杀菌作用的新农药成分或先导化合物。

本发明所涉及的quinolactacide化合物可以利用微生物进行规模发酵,具有生产工艺简单,周期短、产品成本低等特点;且只含有碳、氢和氧三种元素,在环境中易于降解,对人畜毒性较低。

具体实施方式

实施例1:化合物quinolactacide的制备

式(一)所示的化合物quinolactacide的制备参见文献masakiabe,tetsuyaimai,naokiishii,etal.quinolactacide,anewquinoloneinsecticidefrompenicilliumcitrinumthomf1539.biosci.biotechnol.biochem.2005,69(6),1202-1205。

实施例2:抑菌活性试验

采用微量稀释法,测定式(一)所示化合物对马铃薯晚疫病菌(phytophthorainfestans)的抑菌活性(《从天然产物到新农药创制-原理方法》,吴文君,2006,化学工业出版社)。

1)菌悬液的制备

将供试真菌接种于pda培养基表面于28℃培养72h后,吸取2ml无菌0.85%nacl溶液(含0.25%吐温-20)洗涤培养物,并用玻璃刮刀将菌落轻轻刮下。吸取适量菌悬液于无菌试管中,调至0.5麦氏比浊(相当于1.5×108cfu/ml)备用;

2)样品的配制

分别取1mg待测样品(式(一)化合物),溶解于100μldmso中,充分混匀后,吸取50μl样品溶液到另一只离心管中,接着加入50μldmso,得到浓度减半的样品溶液。按照此方法,得到12组浓度依次减半的样品溶液。

3)mic测定方法

(1)采用无菌操作,将倍比稀释后不同浓度的样品溶液分别加到无菌的96孔聚苯乙烯板中,第1至第12孔各加5μl的样品溶液,并以不加样品孔作为空白对照,加5μldmso溶液孔为溶剂对照。

(2)将相当于0.5麦氏比浊度的指示菌悬液,经沙氏培养基稀释1000倍后,取95μl依次加入到96孔板中,使得第1至第12孔的样品浓度依次为512、256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5和0.25μg/ml。以上所有样品均重复三次。轻轻震荡混匀后,将96孔板密封置于28℃生化培养箱中培养72h。

(3)在600nm波长下使用酶标仪测定每孔的吸光值,以在小孔内完全抑制指示菌生长的最低样品浓度为该化合物的mic。(注意:当阴性对照孔内指示菌明显生长实验才有意义;当实验出现单一的跳孔时,应记录抑制菌株生长的最高药物浓度;如出现多处跳孔,则不应报告结果,需重复实验。)

试验结果为:式(一)所示化合物对马铃薯晚疫病菌(phytophthorainfestans)的mic值为8μg/ml,具有较好抑菌活性。

上述实验结果证明本发明所涉及的化合物具有较好抑菌活性,可用于制备农用杀菌剂。

实施例3:可湿性粉剂

由青霉菌penicilliumcitrinumthomf1539经发酵培养(发酵培养过程可参见上述文献);将发酵液进行压滤和沉淀,将上清液浓缩,使式(一)所示化合物的含量为1.5-2.0wt%,以浓缩上清液质量为基数,加入25-35%白炭黑进行吸附,然后添加3-8%十二烷基硫酸钠,0.8-1.2%cmc和2-4%拉开粉,再加入凹凸棒土制成式(一)所示化合物的含量为0.5wt%的可湿性粉剂。

使用方法:500倍液喷雾在马铃薯茎叶上。



技术特征:

技术总结
本发明公开了化合物Quinolactacide的应用。该化合物的结构如式(一)所示,该化合物对马铃薯晚疫病菌具有较好抑制活性,最小抑制浓度(MIC)为8μg/mL,可以作为具有杀菌作用的新农药成分或先导化合物。该化合物为微生物来源天然产物,与传统的化学合成杀菌剂相比,环境兼容性好,且易于规模化生产。

技术研发人员:李光;李洪文;侯波
受保护的技术使用者:山东省农业科学院蔬菜花卉研究所
技术研发日:2017.05.02
技术公布日:2017.07.21
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1