一种黄花油点草组织培养与快速繁殖的方法
【专利摘要】本发明公开了一种黄花油点草组织培养与快速繁殖的方法，依次包括以下步骤1）外植体的消毒：剪取黄花油点草茎段，清洗后消毒，接种到添加植物生长调节剂的MS培养基中；2）腋芽的诱导；3)丛生芽的诱导；4）不定芽的增殖和壮苗；5）不定芽的生根培养；6）再生苗的炼苗和移栽。在上述步骤中采用了不同成分和配比的培养基。采用本发明方法，黄花油点草茎段腋芽诱导率达96.6%，丛生芽诱导率达90%左右，不定芽增殖倍数达5.6?5.8，幼苗生根率达97.1%以上，植株炼苗成活率达98.8%，植株移栽成活率达98%以上，按此方法，每年可以繁殖超过100万株幼苗。
【专利说明】
-种黄花油点草组织培养与快速繁殖的方法
技术领域
[0001] 本发明属于植物培养技术领域，具体设及一种黄花油点草组织培养与快速繁殖的 方法。
【背景技术】
[0002] 黄花油点草[macWaia (D. Don) Machride]，是百合科化iliaceae) 油点草属（rricjriis)多年生草本植物，产云南、四川、贵州、陕西、甘肃、河北、河南、湖南和 湖北等地。生于海拔280-2300米的山坡林下、路旁等处。其根或全草入药，名黑点草，也叫立 竹根、山黄瓜、黄瓜菜、大黄瓜香、瓜米菜，其性微寒，味甘，具清热除烦、活血消肿之功效，主 治胃热口渴、烦燥不安、劳伤、水肿;其花的颜色常有变化，由绿白色、淡黄色至近黄色，花被 片内面的斑点由紫黑色点状小块分布到紫褐色星散地分布，具有良好的观赏价值，有待于 商业化。油点草属植物在全世界约15种，国内有4种，分别为台湾油点草（Γ. 油 点草（Γ.似acrojooc/a)、黄花油点草（Γ.似acWaia)、紫花油点草（Γ.况〇如ni扣ra)，目前尚 未有该属植物的组织培养快速繁殖的研究报道。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是:针对现有技术存在的不足，提供一种成活率高，利 于实现产业化生产的黄花油点草组织培养与快速繁殖的方法。
[0004] 为实现本发明之目的，采用W下技术方案予W实现:一种黄花油点草组织培养与 快速繁殖的方法，其特征在于包括W下步骤： (1) 黄花油点草的消毒 4月至8月之间，剪取带蔽芽的茎段，先用软毛刷于自来水下轻柔刷洗，加入适量的洗洁 精溶液浸泡2 min,倾倒洗洁精溶液后用流水冲洗0.5 h后，在紫外灯消毒30 minW上的超 净工作台里将茎段转入70%的酒精溶液中浸泡1 min,用无菌水冲洗3次，浸泡入滴加有2滴 吐溫-80的0.1% HgCb溶液内浸泡消毒12-13 min,然后用无菌水充分浸洗3次，即可得到消 完毒的外植体； (2) 蔽芽的诱导 将上一步得到的的外植体，W正常的极性方向插入到装有添加 NAA 0.1-0.5 g/L，6-BA 1.0-5.0 mg/L的MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加 量为8 g/L，活性炭的添加量为0-2.0 g/L，抑为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高溫高压灭菌 20 min;接种好的培养瓶先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25± 1)°C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度为30-40皿ol/(m2?s)，光源为白色节能灯； (3) 丛生芽的诱导 待上一步培养的蔽芽长出后，在紫外灯灭菌30 min的超净工作台里切下带蔽芽的茎 段，W正常的极性方向接种到装有添加 TDZ 0-2.0 mg/L，6-BA 0-5.0 mg/L的MS基本培养基 的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量 为0.5 g/L，抑为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随 后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25 + 1) °C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30- 40皿ol/(m2 · S)，光源为白色节能灯； (4)不定芽的增殖 将上一步诱导获得的不定芽丛切成2-3株不定芽的芽块，接种到装有添加6-84 0- 6.0mg/L，IAA 0-3.0 mg/L的MS基本培养基的培养基中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/ L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，抑为5.8-6.0，培养基曾于12 rC下高 溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为（25±1) °C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40皿ol/(m2 ?8)，光源为白色节能灯； 巧)再生植株的生根培养 切取叶片嫩绿、生长旺盛且2~3 cm高的不定芽，插入到添加 NAA 0-1.0 mg/L，AC 0.5 mg的12.5%-100% MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为10-50 g/L，琼脂 添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0,培养基曾于12rC下高溫高压 灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25±irC，光照 时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40皿ol/(m2 · S); (6)炼苗移栽 待生根的组培苗的苗高长至5 cmW上，根长超过5 cm时，松开组培瓶的瓶盖，往瓶中注 入少量清水，防止培养基干裂，但先不移开瓶盖，12 h后半挪开瓶盖，再过12 h，移走瓶盖， 让灯光直照再生植株培养2 d;然后小屯、地将培养基捣碎，拿出再生植株，用水浸润根部过 夜后，小屯、将残留的琼脂冲洗干净，将植株定植于珍珠岩、泥炭重量比为1:(1-5)的混合基 质中，诱透水并用透明的聚乙締塑料薄膜覆盖W保溫保湿，室内溫度控制在15-25Γ，光源 可采用自然光或白色节能灯;第8 d松开薄膜，使与外面空气相通，第9 d掲开薄膜，经常于 叶面喷雾保持湿润，适应3-5 d后可移栽大田中。
[0005] 作为优选方案:用于丛生芽诱导的材料为步骤(1)和(2)获得的无菌萌发的蔽芽。
[0006] 作为优选方案:所述步骤(2)中MS基本培养基中添加了6-BA 2.0 mg/L，NAA 0.2 mg/L，活性炭0.5 mg/L。
[0007] 作为优选方案:所述步骤(3)中MS基本培养基中添加了TDZ 0.5 mg/L，6-BA 1.0- 2.0 mg/L。
[000引作为优选方案:所述步骤(4)中MS基本培养基中添加了6-BA 2.0 mg/L，IAA 0.5- 1.0 mg/L。
[0009] 作为优选方案:所述步骤巧）中的生根培养基为25%MS基本培养基，NAA 0.2 mg/L， 薦糖 15-20 g/L。
[0010] 作为优选方案:所述步骤(6)中混合基质中珍珠岩与泥炭的重量比为1:2。
[0011] 与现有技术相比较，本发明的有益效果是:采用本发明的方法，能够快速地获得植 株，利于产业化生产。采用本发明方法，黄花油点草茎段蔽芽诱导率达96.6%，丛生芽诱导率 达90%左右，不定芽增殖倍数达5.6-5.8，幼苗生根率为97.1%W上，幼苗炼苗成活率达 98.8%，植株移栽成活率达98%W上，按此方法，在一年内可繁殖出幼苗超过100万株。
【具体实施方式】
[001^ 实施例1 本实施例提供一种组织培养与快速繁殖的方法，包括W下步骤： (1) 黄花油点草的消毒 4月至8月之间，剪取带蔽芽的茎段，先用软毛刷于自来水下轻柔刷洗，加入适量的洗洁 精溶液浸泡2 min,倾倒洗洁精溶液后用流水冲洗0.5 h后，在紫外灯消毒30 minW上的超 净工作台里将茎段转入70%的酒精溶液中浸泡1 min,用无菌水冲洗3次，浸泡入滴加有2滴 吐溫-80的0.1% HgCb溶液内浸泡消毒12-13 min,然后用无菌水充分浸洗3次。经此步骤消 毒的外植体，接种培养基20 d后统计发现，其污染率3.7%，成活率在91.8%; (2) 蔽芽的诱导 将上一步得到的的外植体，W正常的极性方向插入到装有添加 NAA 0.2 g/L，6-BA 2.0 mg/L的MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为8 g/ L，活性炭(AC)的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于12rC下高溫高压灭菌20 min;接种好的培养瓶先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25±1) °C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度为30-40 ymol/(m2 ?8)，光源为白色节能灯;最早 培养5 d后蔽芽出现明显的萌动，平均出现萌动的时间为8.6 d;30 d统计蔽芽的萌发率达 96.6%； (3) 丛生芽的诱导 待上一步培养的蔽芽长出后，在紫外灯灭菌30 min的超净工作台里切下带蔽芽的茎 段，W正常的极性方向接种到装有添加 TDZ 0.5 mg/L，6-BA 1.0-2.0 mg/L的MS基本培养基 的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量 为0.5 g/L，抑为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随 后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25 + 1) °C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30- 40皿ol/(m2-s)，光源为白色节能灯;在培养9加寸节间膨大起来，14 d开始出现丛生芽， 30 d统计丛生芽诱导率为90%左右； (4) 不定芽的增殖 将上一步诱导获得的不定芽丛切成2-3株不定芽的芽块，W正常的极性方向接种到装 有添加6-BA 2.0mg/L，IAA 0.5-1.0 mg/L的MS基本培养基的培养基中，该培养基中的薦糖 添加量为30 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，抑为5.8-6.0,培养基 曾于12rC下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫 度为(25±1)°C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40 ymol/(m2-s)，光源为白色节 能灯;30 d统计不定芽的增殖倍数为5.6-5.8，不定芽的生长正常，叶色浓绿； 巧)再生植株的生根培养 切取叶片嫩绿、生长旺盛且2~3 cm高的不定芽，插入到添加 NAA 0.2 mg/L，AC 0.5 mg 的25% MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为15-20 g/L，琼脂添加量为 8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于121°(：下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25±irC，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40 ymol/(m2-s);生根最早在培养7 d后出现，30 d统计后发现 平均出根时间为8.8 d，生根率为97.1%W上； (6)炼苗移栽 待生根的组培苗的苗高长至5 cmW上，根长超过5 cm时，松开组培瓶的瓶盖，往瓶中注 入少量清水，防止培养基干裂，但先不移开瓶盖，12 h后半挪开瓶盖，再过12 h，移走瓶盖， 让灯光直照再生植株培养2 d;然后小屯、地将培养基捣碎，拿出再生植株，用水浸润根部过 夜后，小屯、将残留的琼脂冲洗干净，将植株定植于珍珠岩、泥炭重量比为1:2的混合基质 中，诱透水并用透明的聚乙締塑料薄膜覆盖W保溫保湿，室内溫度控制在15-25Γ，光源可 采用自然光或白色节能灯;第8 d松开薄膜，使与外面空气相通，第9 d掲开薄膜，经常于叶 面喷雾保持湿润，适应5 d后统计发现炼苗成活率为98.8%，炼好苗后，小屯、挖出移栽入大 田，按常规管理，移栽成活率可达98%W上。
[0013] 文中设及的缩略词： 6-BA 6-节氨基腺嚷岭 AC 活性炭 IAA 吗I噪乙酸 NAA 糞乙酸 TDZ 嚷苯隆(脱叶脈） MS Murashige和Skoog(1962) 实施例2 本实施例与实施例1的区别在于步骤(2)蔽芽的诱导：W正常的极性方向插入到装有添 加 NAA 0.1-0.6 mg/L，6-BA 1.0-6.0 mg/L的MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖 添加量为30 g/L，琼脂添加量为8 g/L，AC添加量为0-2.0 g/L，pH为5.8-6.0,培养基曾于 12rC下高溫高压灭菌20 min;接种好的培养瓶先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条 件为:培养溫度为（25±1)°C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度为30-40皿ol/(m2· S )，光源为白色节能灯;30 d后统计发现，蔽芽诱导率在0-97.9%之间，蔽芽出芽平均时间为 7.7-15.4 d之间，其中 WNAA 0.2 mg/L，6-BA 2.0 mg/L，AC 0.5 g/L效果最佳，蔽芽诱导率 为98.7%，蔽芽出芽平均时间为8.2 d。结果还表明随着6-BA浓度提高，蔽芽诱导率增加，随 着NAA浓度增加，蔽芽生长速度加快。蔽芽在萌发过程中可看到外植体周围的培养基产生褐 色，而AC可去除褐化物质，但过多的AC却吸附过多营养，易导致生长的减缓。
[0014] 表1不同处理对蔽芽诱导率和蔽芽出芽平均时间的影响
实施例3 本实施例与实施例1的区别在于步骤(3)丛生芽的诱导:在紫外灯灭菌30 min的超净工 作台里切下带蔽芽的茎段，W正常的极性方向接种到装有添加 TDZ 0-2.0 mg/L，6-BA 0- 6.0 mg/L的MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为 8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于121°(：下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25±irC，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40皿ol/(m2-s)，光源为白色节能灯。30 d后统计发现，不定芽 诱导率介于0-91.8%之间，不定芽数为1.0-8.8之间，其中说15，了02 0.5 111旨/1，6-84 2.0111邑/ L效果最佳，不定芽诱导率在90%左右，不定芽数在6.4-6.5，而且不定芽叶色浓绿，生长良 好，株高和茎粗适中。结果还表明，6-BA对于丛生芽的诱导效果较弱，TDZ较强，两者组合效 果更佳。
[0015] 表2不同处理对丛生芽诱导的影响
实施例4 本实施例与实施例1的区别在于步骤(4)丛生芽的增殖:将上一步诱导获得的不定芽丛 切成2-3株不定芽的芽块，接种到装有添加6-BA 0-6.0mg/L，IAA 0-3.0 mg/L的MS基本培养 基的培养基中，该培养基中的薦糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加 量为0.5 g/L，抑为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高溫高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜， 随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25±irC，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度 30-40 ymol/(m2-s)，光源为白色节能灯。30 d后统计发现，各培养基中不定芽的增殖倍数 在1.0-6.2之间，高的生长素和细胞分裂素均容易产生玻璃化现象，表现最佳的培养基为 MS，6-BA 2.0 mg/L，IAA 0.5-1.0 mg/L其增殖倍数在5.6-5.8,且无玻璃化苗，植株粗壮，且 生长较快。
[QQ16] 表3不同处理对不定芽增殖的影响_
实施例5 本实施例与实施例1的区别在于步骤(5)再生植株的生根培养:切取叶片嫩绿、生长旺 盛且2~3 cm高的不定芽，插入到添加 NAA 0-1.0 mg/L，活性炭0.5 mg/L的12.5%-100% MS基 本培养基的培养瓶中，该培养基中的薦糖添加量为10-50 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性 炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0,培养基曾于12rC下高溫高压灭菌20 min;先置于黑 暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养溫度为(25 ± 1 rC，光照时间为14 h光/10 h暗， 光照强度30-40 4111〇1/(1112*3);30(1时统计发现，最早生根时间8-14(1，生根率在59.8- 98.8%，说明较易生根，MS基本培养基的浓度对于生根基本无影响，只不过太低的浓度下生 根的再生植株生长柔弱；薦糖浓度对于不定芽的生根影响也不大;最佳的组合为25%MS，NAA 0.2 mg/L，薦糖15-20 g/L，生根时间早，最早7 d就可W生根，生根率可达97.1%?上，根粗 适中，叶绿浓绿，适于炼苗移栽。
[0017] 表4不同培养基对生根的影响
实施例6 本实施例与实施例1的区别在于步骤(6)炼苗移栽:待生根的组培苗的苗高长至5 cmW 上，根长超过5 cm时，松开组培瓶的瓶盖，往瓶中注入少量清水，防止培养基干裂，但先不移 开瓶盖，12 h后半挪开瓶盖，再过12 h，移走瓶盖，让灯光直照再生植株培养2 d;然后小屯、 地将培养基捣碎，拿出再生植株，用水浸润根部过夜后，小屯、将残留的琼脂冲洗干净，将植 株定植于珍珠岩、泥炭重量比为1:(1-5)的混合基质中，诱透水并用透明的聚乙締塑料薄 膜覆盖W保溫保湿，室内溫度控制在15-25Γ，光源可采用自然光或白色节能灯;第8 d松开 薄膜，使与外面空气相通，第9 d掲开薄膜，经常于叶面喷雾保持湿润，适应3-5 d后可移栽 大田中。适应5 d后统计发现，随着泥炭的比例提高，幼苗的生长变得健壮，但炼苗成活率却 有小幅下降，运主要是因为珍珠岩在培养基中起到保水透气的作用，而泥炭提供幼苗生长 所需的营养。综合来看，珍珠岩与泥炭的比例在1:2时，炼苗成活率和幼苗生长达到最佳。
[0018] 表5不同栽培基质对炼苗成活率的影响
对比实施例1至6可知，实施例1为最优选的实施例，实施例1的每个步骤均采用了实施 例2至6所述的最佳培养条件，能够获得最高的植株产量。
【主权项】
1. 一种黄花油点草组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于包括以下步骤： (1)黄花油点草的消毒 4月至8月之间，剪取带腋芽的茎段，先用软毛刷于自来水下轻柔刷洗，加入适量的洗洁 精溶液浸泡2 min，倾倒洗洁精溶液后用流水冲洗0.5 h后，在紫外灯消毒30 min以上的超 净工作台里将茎段转入70%的酒精溶液中浸泡I min，用无菌水冲洗3次，浸泡入滴加有2滴 吐温-80的0.1% HgCl2溶液内浸泡消毒11-13 min，然后用无菌水充分浸洗3次，即可得到消 完毒的外植体； 腋芽的诱导 将上一步得到的的外植体，以正常的极性方向插入到装有添加祖六0.1-0.611^/1，6-BA 1.0-6.0 mg/L的MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的蔗糖添加量为30 g/L，琼脂添 加量为8 g/L，活性炭的添加量为0-2.0 g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于121°(：下高温高压灭 菌20 min;接种好的培养瓶先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养温度为(25 ±1)°C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度为30-40 ym〇l/(m2.s)，光源为白色节能灯； (3) 丛生芽的诱导 待上一步培养的腋芽长出后，在紫外灯灭菌30 min的超净工作台里切下带腋芽的茎 段，以正常的极性方向接种到装有添加 TDZ 0-2.0 mg/L，6-BA 0-5.0 mg/L的MS基本培养基 的培养瓶中，该培养基中的蔗糖添加量为30 g/L，琼脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量 为0.5 g/L，pH为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高温高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随 后光照培养，培养条件为:培养温度为(25 ± I) °C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30_ 40 ymol/(m2 · s)，光源为白色节能灯； (4) 不定芽的增殖 将上一步诱导获得的不定芽丛切成2-3株不定芽的芽块，接种到装有添加6-BA 0-6.0 mg/L，IAA 0-3.0 mg/L的MS基本培养基的培养基中，该培养基中的蔗糖添加量为30 g/L，琼 脂添加量为8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0,培养基曾于121°C下高温高 压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养温度为（25±1)°C，光 照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40 ym〇l/(m2.s)，光源为白色节能灯； (5 )再生植株的生根培养 切取叶片嫩绿、生长旺盛且2~3 cm高的不定芽，插入到添加 NAA 0.2 mg/L，活性炭0.5 mg/L的25% MS基本培养基的培养瓶中，该培养基中的蔗糖添加量为15-20 g/L，琼脂添加量 为8.0 g/L，活性炭的添加量为0.5 g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于121°(：下高温高压灭菌20 min;先置于黑暗中过夜，随后光照培养，培养条件为:培养温度为(25±1)°C，光照时间为14 h光/10 h暗，光照强度30-40 ym〇l/(m2 · s); (6)炼苗移栽 待生根的组培苗的苗高长至5 cm以上，根长超过5 cm时，松开组培瓶的瓶盖，往瓶中注 入少量清水，防止培养基干裂，但先不移开瓶盖，12 h后半挪开瓶盖，再过12 h，移走瓶盖， 让灯光直照再生植株培养2 d;然后小心地将培养基捣碎，拿出再生植株，用水浸润根部过 夜后，小心将残留的琼脂冲洗干净，将植株定植于珍珠岩、泥炭重量比为1:(1-5)的混合基 质中，浇透水并用透明的聚乙烯塑料薄膜覆盖以保温保湿，室内温度控制在15-25Γ，光源 可采用自然光或白色节能灯;第8 d松开薄膜，使与外面空气相通，第9 d揭开薄膜，经常于 叶面喷雾保持湿润，适应3-5 d后可移栽大田中。2. 根据权利要求1所述的一种组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于：用于丛生芽 诱导的材料为经步骤(1)和(2)获得的无菌萌发的腋芽，长度为2 cm左右。3. 根据权利要求1所述的一种组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于:所述步骤(2) 中MS基本培养基中添加了6-BA 2.0 mg/L，NAA 0.2 mg/L，活性炭0.5 mg/L。4. 根据权利要求1所述的一种组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于:所述步骤(3) 中MS基本培养基中添加了TDZ 0.5 mg/L，6-BA 1.0-2.0 mg/L。5. 根据权利要求1所述的一种组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于:所述步骤(4) 中MS基本培养基中添加了6-BA 2.0 mg/L，IAA 0.5-1.0 mg/L。6. 根据权利要求1所述的一种组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于:所述步骤(6) 中混合基质中珍珠岩与泥炭的重量比为1:2。
【文档编号】A01H4/00GK105918124SQ201610291162
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年5月5日
【发明人】熊金波, 周伟, 黄文娟, 张进杰
【申请人】宁波大学