专利名称：富含三萜类化合物糖肽的生理功能调节剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种制备生理功能调节剂的制备方法。
背景技术：
已有技术 云芝是一种富含三萜类化合物糖肽的名贵药材，能够促进蛋白质和核酸的 合成，具有很强的免疫及生理调节功能，能够保肝、抗病毒、抗肿瘤。已有技术生理功能调 节剂，是对人体及动物机体有益的一种生理功能调节剂。已有技术的不足之处，是其中所含 三萜类化合物糖肽少，以致其生理调节功能效果不够理想。
发明内容
所要解决的技术问题是提供一种富含三萜类化合物云芝糖肽生理功能调节剂制备方法。 解决其技术问题的技术方案，富含三萜类化合物云芝糖肽的生理功能调节剂的制备方法, 包含如下步骤
A、制备云芝发酵液分以下五步进行
a、 制备斜面培养云芝菌种将植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及琼脂粉按照重量比植 物蛋白胨酵母膏葡萄糖；琼脂粉水=10: 4: 30: 20: 1000的比例，配制成斜面培养基， 装入试管，加温至121°C灭菌30分钟，制成斜面培养基，冷却至27nC,制成30a-80"斜面， 按照重量比云芝菌种斜面培养基=1: IOO的比例，将云芝菌种接入斜面培养基中，在27t 温度下静止培养5天，得到斜面培养云芝菌种；
云芝菌种采用中国微生物菌种保藏中心的保藏号为CMGCC NO. 5.161杂色云芝菌株， 经过筛逸，得到富含三萜类化合物云芝糖肽的去芝菌株作为菌种。
b、 制备摇瓶培养云芝菌种将植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及磷酸二氢钾按照重量 比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖磷酸二氢钾水=10: 1: 30: 0.6: 1000的比例配置成摇 瓶培养基，装入摇瓶，加温至121。C灭菌30分钟，冷却至27-C,按照重量比斜面培养云芝菌 种摇瓶培养基=10: IOO的比例，将步骤Aa所得的斜面培养云芝菌种接入摇瓶培养基中， 在温度为27°C转速为80-120转/分的摇床上培养4天，得到摇瓶培养云芝菌种；
C、制备一级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20:
40.6: IOOO的比例配置成一级种子培养基，装入种子罐中，加温至12rc灭菌30分钟，冷却 至27。C，按照重量比摇瓶培养云芝菌种 一级种子培养基=10: 100的比例，将步骤Ab所得 的摇瓶培养云芝菌种接入一级种子培养基中，在温度为27°(:，通气条件下，培养3天，得到 一级种子培养云芝菌种；
d、 制备二级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20:
0.6: 1000的比例，配置成二级种子培养基，装入种子罐中，加温至i2rc灭菌3o分钟，冷
却至27。C，按照重量比一级种子培养云芝菌种二级种子培养基=5: IOO的比例，将步骤Ac 所得的一级种子培养云芝菌种接入二级种子培养基中，在温度为27aC通气条件下，培养3天， 得到二级种子培养云芝菌种；
e、 制备云芝深层发酵液按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20: 0.6: 1000的比例配置成云芝深层发酵液培养基，装入发酵罐中，加温至121°C灭菌30分钟，冷 却至27"C,按照重量比二级种子培养云芝菌种云芝深层发酵液培养基=5: 100的比例，将 步骤Ad所得的二级种子培养云芝菌种接入云芝深层发酵液培养基中，在温度27°C，通气条 件下，培养3天，得到含三萜类化合物云芝糖肽的云芝深层发酵液；
B、 制备植物蛋白云芝发酵液
按照重量比植物蛋白粉云芝深层发酵液=(8-20): IOO的比例,将植物蛋白粉加入步骤 Ae所得的云芝深层发酵液中，煮沸30-60分钟，得到植物蛋白云芝发酵液；
植物蛋白可以使用大豆蛋白粉、花生蛋白粉、玉米蛋白粉、碗豆蛋白粉、棉籽蛋白粉、 菜籽蛋白粉；小麦蛋白粉和芝麻蛋白粉；
C、 制备云芝发酵酶解液将步骤B所得的植物蛋白云芝发酵液冷却至55"C，按照重量 比酶植物蛋白云芝发酵液=(0.5-5): 1000的比例，将酶加入植物蛋白云芝发酵液中，以 25-120转/分钟的速度搅拌0. 5-30小时，得到富含三萜类化合物糖肽的云芝发酵酶解液；
酶可以使用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、葡聚糖酶、淀粉酶、 纤维素酶中的一种或几种；
D、 灭酶将步骤C所得云芝发酵酶解液升温至90-C-100°C，加温10-30分钟进行灭酶;
E、 干燥将步骤D所得的灭酶后的云芝发酵酶解液，以进风温度为80°C-180aC的喷雾 干燥机烘干，至其中水分重量含量小于10%，得到成品。
有益效果本发明应用于制备富含三萜类化合物云芝糖肽的生理功能调节剂。有益效果 是，所制成的富含三萜类化合物糖肽的生理功能调节剂，具有多种生物活性，能够去除植物蛋白的抗营养因子，可以增强免疫力和抗病能力，促进生长，可以用于人的营养、保健，也 可以用于动物词料；其中的富含三萜化合物云芝糖肽能明显降低金葡菌、大肠杆菌、痢疾杆 菌等致病菌感染，用于断奶仔猪可防止仔猪红白痢的发生，促进肠道绒毛细胞的发育，提高 消化率，增进食欲，减少断奶应激，从而提高仔猪成活率和窝重；用于哺乳母猪，可提高采 食量和泌乳量；用于禽类喂养，可保障肠道健康，减少应激，提高料肉比。
具体实施例方式
具体实施方式
，包含如下步骤
A、制备云芝发酵液分以下五步进行
a、 制备斜面培养云芝菌种按照重量比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖琼脂粉水 =10: 4: 30: 20: 1000的比例，配制成斜面培养基，装入试管，加温至121°C灭菌30分钟， 制成斜面培养基，冷却至27nC，制成60"斜面，按照云芝菌种斜面培养基=1: IOO的重量比，
将云芝菌种接入斜面培养基中，在27。C温度下静止培养5天，得到斜面培养云芝菌种；
云芝菌种釆用中国微生物菌种保藏中心的保藏号为CMGCC NO. 5.161杂色云芝菌株， 经过筛选，得到富含三萜类化合物云芝糖肽的云芝菌株作为菌种。
b、 制备摇瓶培养云芝菌种按照重量比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖磷酸二氢钾 水=10: 1: 30: 0.6: 1000的比例配置成摇瓶培养基，装入摇瓶，加温至121°C灭菌30分钟， 冷却至27。C，按照斜面培养云芝菌种摇瓶培养基=10: 100的比例，将步骤Aa所得的斜面 培养云芝菌种接入摇瓶培养基中，在温度为27。C转速为60转/分的摇床上培养4天，得到摇 瓶培养云芝菌种；
C、制备一级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20:
0.6: 1000的比例配置成一级种子培养基，装入种子罐中，加温至12rc灭菌30分钟，冷却 至27"C,按照重量比摇瓶培养云芝菌种 一级种子培养基=10: 100的比例，将步骤Ab所得 的摇瓶培养云芝菌种接入一级种子培养基中，在温度为27"C，通气条件下，得到一级种子培 养云芝菌种
d、制备二级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20: 0.6: 1000的比例，配置成二级种子培养基，装入种子罐中，加温至12rC灭菌30分钟，冷 却至27"C，按照重量比一级种子培养云芝菌种二级种子培养基=5: IOO的比例，将步骤Ac 所得的一级种子培养云芝菌种接入二级种子培养基中，在温度为27°C通气条件下，培养3天，
得到二级种子培养云芝菌种；e、制备云芝深层发酵液按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氢钾水=20: 20: 0.6: 1000的比例配置成云芝深层发酵液培养基，装入发酵罐中，加温至121""C灭菌30分钟，冷 却至27°C，按照重量比二级种子培养云芝菌种云芝深层发酵液培养基=5: 100的比例，将 步骤Ad所得的二级种子培养云芝菌种接入云芝深层发酵液培养基中，在温度27°C，通气条 件下，培养3天，得到含三萜类化合物云芝糖肽的云芝深层发酵液；
B、 制备植物蛋白云芝发酵液
按照重量比植物蛋白粉云芝深层发酵液=10: lOO的比例,将大豆蛋白粉加入步骤Ae所 得的云芝深层发酵液中，煮沸60分钟，得到植物蛋白云芝发酵液；
C、 制备云芝发酵酶解液将步骤B所得的植物蛋白云芝发酵液冷却至55。C，按照重量 比酶植物蛋白云芝发酵液=4: 1000的比例，将酸性蛋白酶加入植物蛋白云芝发酵液中，以 100转/分钟的速度搅拌20小时，得到富含三萜类化合物糖肽的云芝发酵酶解液；
D、 灭酶将步骤C所得云芝发酵酶解液升温至100"C，加温30分钟进行灭醵；
E、 干燥将步骤D所得的灭酶后的云芝发酵酶解液，以进风温度为1209C的喷雾干燥 机烘干，至其中水分重量含量小于10%，得到成品。
权利要求
1、富含三萜类化合物云芝糖肽的生理功能调节剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤A、制备云芝发酵液分以下五步进行a、制备斜面培养云芝菌种将植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及琼脂粉按照重量比植物蛋白胨∶酵母膏∶葡萄糖∶琼脂粉∶水＝10∶4∶30∶20∶1000的比例，配制成斜面培养基，装入试管，加温至121℃灭菌30分钟，制成斜面培养基，冷却至27℃，制成30°-80°斜面，按照重量比云芝菌种∶斜面培养基＝1∶100的比例，将云芝菌种接入斜面培养基中，在27℃温度下静止培养5天，得到斜面培养云芝菌种；云芝菌种采用中国微生物菌种保藏中心的保藏号为CMGCC N0.5.161杂色云芝菌株，经过筛选，得到富含三萜类化合物云芝糖肽的云芝菌株作为菌种。b、制备摇瓶培养云芝菌种将植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及磷酸二氢钾按照重量比植物蛋白胨∶酵母膏∶葡萄糖∶磷酸二氢钾∶水＝10∶1∶30∶0.6∶1000的比例配置成摇瓶培养基，装入摇瓶，加温至121℃灭菌30分钟，冷却至27℃，按照重量比斜面培养云芝菌种摇瓶培养基＝10∶100的比例，将步骤Aa所得的斜面培养云芝菌种接入摇瓶培养基中，在温度为27℃转速为80-120转/分的摇床上培养4天，得到摇瓶培养云芝菌种；c、制备一级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氢钾∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例配置成一级种子培养基，装入种子罐中，加温至121℃灭菌30分钟，冷却至27℃，按照重量比摇瓶培养云芝菌种一级种子培养基＝10∶100，将步骤Ab所得的摇瓶培养云芝菌种接入一级种子培养基中，在温度为27℃，通气条件下，培养3天，得到一级种子培养云芝菌种；d、制备二级种子培养云芝菌种按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氢钾∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例，配置成二级种子培养基，装入种子罐中，加温至121℃灭菌30分钟，冷却至27℃，按照重量比一级种子培养云芝菌种二级种子培养基＝5∶100的比例，将步骤Ac所得的一级种子培养云芝菌种接入二级种子培养基中，在温度为27℃通气条件下，培养3天，得到二级种子培养云芝菌种；e、制备云芝深层发酵液按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氢钾∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例配置成云芝深层发酵液培养基，装入发酵罐中，加温至121℃灭菌30分钟，冷却至27℃，按照重量比二级种子培养云芝菌种云芝深层发酵液培养基＝5∶100的比例，将步骤Ad所得的二级种子培养云芝菌种接入云芝深层发酵液培养基中，在温度27℃，通气条件下，培养3天，得到含三萜类化合物云芝糖肽的云芝深层发酵液；B、制备植物蛋白云芝发酵液按照重量比植物蛋白粉∶云芝深层发酵液＝(8-20)∶100的比例，将植物蛋白粉加入步骤Ae所得的云芝深层发酵液中，煮沸30-60分钟，得到植物蛋白云芝发酵液；C、制备云芝发酵酶解液将步骤B所得的植物蛋白云芝发酵液冷却至55℃，按照重量比酶∶植物蛋白云芝发酵液＝(1-5)∶1000的比例，将酶加入植物蛋白云芝发酵液中，以25-120转/分钟的速度搅拌0.5-30小时，得到富含三萜类化合物糖肽的云芝发酵酶解液；D、灭酶将步骤C所得云芝发酵酶解液升温至90℃-100℃，加温10-30分钟进行灭酶；E、干燥将步骤D所得的灭酶后的云芝发酵酶解液，以进风温度为80℃-180℃的喷雾干燥机烘干，至其中水分重量含量小于10％，得到成品。
全文摘要
富含三萜类化合物糖肽的生理功能调节剂的制备方法，涉及一种制备生理功能调节剂的制备方法。所要解决的技术问题是，提供一种制备富含三萜类化合物糖肽的生理功能调节剂的制备方法。解决其技术问题的技术方案，包含如下5个步骤制备云芝发酵液，包含制备斜面培养云芝菌种、制备摇瓶培养云芝菌种、制备一级种子培养云芝菌种、制备二级种子培养云芝菌种及制备云芝深层发酵液；制备植物蛋白云芝发酵液；制备云芝发酵酶解液；灭酶及干燥。本发明应用于制备富含三萜类化合物云芝糖肽的生理功能调节剂。有益效果是所制成的生理功能调节剂，具有多种生物活性，能去除植物蛋白抗营养因子，增强免疫力和抗病能力，促进生长，可用于人的营养、保健，也可用于动物饲料。
文档编号A23L1/305GK101601434SQ200810069828
公开日2009年12月16日 申请日期2008年6月13日 优先权日2008年6月13日
发明者丽 任 申请人:丽 任