专利名称：属于植物乳杆菌的新型乳酸菌及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及适于各种果汁发酵的属于植物乳杆菌的新型乳酸菌以及含有该乳酸菌的饮食品等。
背景技术：
据认为，随着人年龄的增长，大肠杆菌等有害菌会占优势，有害菌所生成的各种有害物质会对人体带来不良影响。乳酸菌可从自然界中广泛分离出，在人的肠道内，通过乳酸的生成，可将肠内的PH维持在酸性，抑制大肠杆菌等腐败菌、病原菌在肠内的生长和增殖， 显示出肠内环境改善效果。并且，乳酸菌不仅具有该肠内环境改善效果，而且还显示出了改善便秘、防御感染、提高免疫力的作用、抗过敏效果、癌症预防效果等有益的生理效果。因此，为了将这些被称为益生菌的有用细菌供给至肠内来增进健康，人们摄取含有这些菌的活菌的乳酸菌饮料、发酵乳、制剂等。在这样的乳酸菌饮料、发酵乳、活菌制剂等中所用的乳酸菌主要是适于酸奶或以奶酪来源为代表的乳原料的发酵的乳酸菌，具体地说，为干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophiles)、乳酸乳球菌(LactococcusIactis)等菌株。另一方面，近年来，消费者的喜好呈多样化，希望开发出以乳原料以外的原料、例如以蔬菜汁或果汁等为发酵底物的益生菌中所用的菌株。但是，对于迄今为止在乳酸菌饮料等的制造中所用的上述菌株来说，在以蔬菜汁或果汁等为发酵底物的情况下，无法达成用于得到作为益生菌的效果的较高的到达活菌数(到達生菌数)。迄今为止，作为对蔬菜汁或果汁进行发酵的能力优异的乳酸菌，已知有属于植物乳杆菌的乳酸菌。例如，已知植物乳杆菌ATCC 14431在以将浓缩胡萝卜汁(可溶性固体成分36质量％(下文简称为“ ％”))稀释6倍的液体作为发酵底物时达到了 107CFU/ml以上的活菌数(专利文献I)。另外，作为适于在降低了有机酸含量的果汁中进行发酵的乳酸菌，已知有植物乳杆菌299v(DSM 9843)。该植物乳杆菌299v(DSM 9843)中具有较强的后酸性化、显著的官能性缺陷、产生二氧化碳气体等缺点，但已知也有通过降低果汁中的有机酸含量而对其进行抑制的技术(专利文献2)。但是，对于这些属于植物乳杆菌的菌株来说，其针对各种蔬菜汁或果汁并不能总是得到较高的到达活菌数浓度，特别是在通常被认为不适于作为乳酸菌的发酵底物的葡萄等的果汁中无法进行使用。现有技术文献专利文献专利文献I :日本特开2001-252012号公报
专利文献2 :日本特表2008-541774号公报
发明内容
发明所要解决的课题因而，本发明的课题在于提供新型的乳酸菌及含有该乳酸菌的饮食品等，该乳酸菌属于植物乳杆菌，即使在以各种蔬菜汁或果汁作为发酵底物的情况下也具有较高的到达活菌数，具有优异的发酵能力。解决课题的手段本发明人为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，对于以特定的100%果汁 为发酵底物时的到达活菌数均为108CFU/ml以上的属于植物乳杆菌的乳酸菌来说，即使在以各种蔬菜汁或果汁为发酵底物的情况下，也有较高的到达活菌数，从而完成了本发明。S卩，本发明涉及一种属于植物乳杆菌(Lactobacillus pi ant arum)的乳酸菌,其在以葡萄和橙的100%果汁为发酵底物时，到达活菌数均为108CFU/ml以上。本发明还涉及一种饮食品，其含有上述乳酸菌。本发明进一步涉及一种发酵物，其是通过将上述乳酸菌接种于食品材料中并进行发酵而得到的。另外，本发明还涉及一种饮食品，其含有上述发酵物。此外，本发明进一步涉及一种发酵物的制造方法，其特征在于，将上述乳酸菌接种于食品材料中并进行发酵。发明的效果本发明的属于植物乳杆菌的乳酸菌以各种蔬菜汁或果汁(特别是果汁)为发酵底物时达到了 108CFU/ml以上的活菌数，可以制备以各种发酵底物为基础的益生菌饮料等饮食品。另外，特别是本发明的属于植物乳杆菌的乳酸菌中进行保藏的2种菌株是不具有质粒的，因而可以提供品质稳定的饮料等饮食品。
具体实施例方式本说明书中的100%果汁表示的是在JAS法的果汁饮料品质表示基准中满足100%果汁基准的果汁。作为果汁的制法，下述任意之一均可对果实的榨取物进行热处理等，之后进行冷冻保存的“直接果汁”；或者通过加热使水分蒸发来进行浓缩，之后进行冷冻保存的“浓缩还原果汁”。在“浓缩还原果汁”中，作为果汁的浓缩倍率，优选为2 10倍、进一步优选为3 8倍是适当的。另外，只要在JAS法的果汁饮料品质表示基准中满足100%果汁的基准，也可以添加糖类、香料、抗氧化剂等。并且，本说明书中，所谓到达活菌数表示的是如下得到的活菌数作为前培养，利用在121°C进行了 15分钟高压釜灭菌的乳酸菌MRS肉汤(Lactobacilli MRS Broth7Difco社制造)培养基将种菌培养至稳态，具体地说在30°C 37°C进行16 24小时培养，之后将O. 4%容量的前培养液接种至100%果汁等发酵底物中，在37°C进行48小时培养，该培养后的活菌数即为到达活菌数。另外，活菌数的测定使用MRS琼脂平板来进行。另外，表示到达活菌数的单位CFU/ml表示的是在培养基中接种Iml时的菌落形成能力。
另外，本说明书中所谓的不具有质粒表示的是如下情况按照常规方法由新鲜的乳酸菌培养液Iml中制备质粒DNA，利用O. 7%的琼脂糖凝胶进行电泳后，利用溴化乙锭对凝胶进行染色，在UV照射下可以确认到无质粒DNA。本发明的属于植物乳杆菌的乳酸菌(下文称为“本发明乳酸菌”)在以葡萄和橙的100%果汁为发酵底物时，到达活菌数均为108CFU/ml以上、优选为108CFU/ml IOltlCFU/ml ο本发明的乳酸菌是如下得到 的对于按照常规方法利用MRS琼脂平板从酱菜(漬汁物)、发酵茶、人粪便等中分离出的植物乳杆菌，基于在上述发酵底物中的到达活菌数进行筛选，从而得到本发明的乳酸菌。通过筛选，从上述分离出的植物乳杆菌中得到下述4种菌株。 植物乳杆菌 Τ 10015株·植物乳杆菌 Τ 0069株·植物乳杆菌 Τ 0148株·植物乳杆菌 Τ 0132株这4种菌株之中，YIT 0069,YIT 0148,YIT 0132在以葡萄、葡萄柚、橙、菠萝(pineapple)和苹果的100%果汁为发酵底物时，用各自的到达活菌数(CFU/ml)除以IO8并相加而得到的增殖分数值(増殖7 ^ 7値)为25以上。该增殖分数值为对植物乳杆菌是否适于果汁发酵进行判断的指标，其优选为25以上、进一步优选为30 50，YIT 0148和 Τ 0132的增殖分数值为30 41，因而可以特别适宜地用于果汁的发酵。另外，YIT 0132和 Τ 0148不具有质粒。在微生物的质粒中通常具有抗生素抗性，其向其它微生物传递，可能会导致具有抗生素抗性的病原菌的出现。并且，在目前也还不能充分阐明质粒上功能不明的基因对其它微生物的影响，因而从确保菌株安全性这一方面考虑，优选不具有质粒。并且，质粒在传代中或培养中有可能会缺失，从而可能会使微生物的性状不稳定。但是，由于YIT 0132和 Τ 0148不具有质粒，因而可保持制品的稳定品质。1 YIT 0132 和 Τ 0148 分别被命名为植物乳杆菌 Τ 0132 (LactobacillusPI ant arum YIT 0132)和植物乳杆菌 YIT 0148 (Lactobacillus pi ant arum YIT 0148),于2010年2月24日以保藏编号FERM BP-11349和FERM BP-11350在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(〒305-8566茨城县筑波市东I 丁目I番地I中央第6)进行了国际保藏。这些菌株具有以下所示的细菌学性质。<利用乳酸菌MRS肉汤在37°C培养24小时后的 Τ 0132和 Τ 0148的细菌学
性质〉(各性质)表I
权利要求
1.一种属于植物乳杆菌的乳酸菌，其在以葡萄和橙的100%果汁为发酵底物时，到达活菌数均为108CFU/ml以上。
2.如权利要求I所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌，其中，该乳酸菌在以葡萄、葡萄柚、橙、菠萝和苹果的100%果汁为发酵底物时，用各自的到达活菌数除以IO8并相加而得到的增殖分数值为25以上，所述到达活菌数的单位为CFU/ml。
3.如权利要求I或2所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌，其中，该乳酸菌不具有质粒。
4.如权利要求I至3的任一项所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌，其中，该乳酸菌为植物乳杆菌 YIT 0132 即 FERM BP-11349、或为植物乳杆菌 Τ 0148 即 FERMBP-11350
5.一种饮食品，该饮食品含有权利要求I至4的任一项所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌。
6.一种发酵物，该发酵物是通过将权利要求I至4的任一项所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌接种于食品材料中并进行发酵而得到的。
7.一种饮食品，该饮食品含有权利要求6所述的发酵物。
8.一种发酵物的制造方法，其特征在于，将权利要求I至4的任一项所述的属于植物乳杆菌的乳酸菌接种于食品材料中并进行发酵。
全文摘要
本发明提供新型的乳酸菌等，该乳酸菌属于植物乳杆菌，即使在以各种蔬菜汁或果汁为发酵底物的情况下，也有较高的到达活菌数，具有优异的发酵能力。该属于植物乳杆菌的乳酸菌的特征在于，在以葡萄和橙的100%果汁为发酵底物时，到达活菌数均为108CFU/ml以上。
文档编号A23L2/38GK102971413SQ20118001441
公开日2013年3月13日 申请日期2011年3月15日 优先权日2010年3月19日
发明者饭野透, 增冈范江, 石川文保, 吉村公一, 林田英士 申请人:株式会社益力多本社