专利名称：一种重金属汞快速检测卡及其检测方法
技术领域：
本发明涉及重金属检测，尤其涉及ー种重金属汞快速检测卡及其检测方法。
背景技术：
随着工业的发展，水质和土壤受重金属的污染问题严重，这将对人体健康造成不良影响。目前出现的重金属检测需要经过强酸、高压、高温样品消化，再用原子吸收仪等设备检测，针对重金属检测样品前处理工序多、检测周期长、需要专业设备和专业操作人员、检测废液污染环境问题，提供ー种重金属快速检测的方法和/或产品，对满足目前对于现场重金属快速检测和大量样品筛选的市场需求，填补国内外的空白非常重要。酶抑制法因具有快速、简便、样品需要量少等优点，受到国内外学者的关注。目前用于痕量重金属測定的常用酶有脲酶、过氧化物酶、黄嘌吟氧化酶、葡萄糖氧化酶、丁酰胆 碱脂酶和异柠檬酸脱氢酶等，由于脲酶廉价易得，故而使用最广泛。脲酶是一种高效的尿素分解催化剂，化学反应速度是常规化学催化的1014倍。脲酶有助于植物和微生物体利用内源性和外源性尿素作为氮源并能将分解产生的氨合成机体蛋白质。目前，商品化脲酶产品主要是从由洋刀豆中提取，国内由于缺乏洋刀豆资源，故我国需要的脲酶依赖进ロ。酶法灵敏度高，但选择性较差，对单一重金属例子的检测存在一定的困难，目前大多数酶法仅适用于水样的检测，其他样品检测的报道不多。若能实现酶法的广谱性检测，将能得到普遍应用，与其他仪器、方法的联用(如传感器，纸片等)是今后的发展方向，以及对多元素的同时分析也将是研发热点之一。
发明内容
本发明的目的在于提供ー种重金属汞快速检测卡及其检测方法。为解决上述问题，本发明采用的技术方案为
ー种重金属汞快速检测卡，其结构由下至上依次为底板、吸附薄片、盖膜，所述底板上分別固定有至少ー个吸附显色剂的薄片、至少ー个吸附脲酶的薄片，薄片相互不重叠，其中，単位面积的薄片吸附的脲酶与显色剂的用量比为3 U :1. 6 3. 2 mL，显色剂含有如下质量百分比的组分酚红0. 05 2. 5%，尿素0. 8 2%。优选的，显色剂由如下质量百分比的组分组成酚红0. 05 2. 5%，尿素0. 8 2%，无水こ醇10 20%，余量为水。优选的，显色剂由如下质量百分比的组分组成酚红0. 1%，尿素0.8%，无水こ醇10 20%，余量为水。优选的，脲酶为青豆脲酶。优选的，青豆脲酶的制备方法向青豆中加入こ醇水溶液，浸泡，粉碎，离心，上清液为青豆脲酶液，将上清液干燥得青豆脲酶。优选的，薄片由吸附有显色剂或脲酶的吸水滤纸构成。优选的，底板由防水材料制成。
重金属汞的快速检测方法，包括以下步骤
1)待检物为固体，将待检物粉碎，加入水，混匀，调节pH至7. 0 8. 0，得待检液；待检物为液体，调节pH至7. 0 8. 0，得待检液；
2)采用上述的重金属汞快速检测卡，揭去其盖膜，将待检液加于吸附脲酶的薄片上，于35 40°C反应10 15min ；
3)将重金属汞快速检测卡对折，使步骤2)吸附脲酶的薄片和吸附显色剂的薄片接触，于35 40°C反应3 5min ；
4)打开重金属汞快速检测卡，观察步骤3)吸附显色剂的薄片的顔色，根据颜色判断是否存在重金属汞。优选的，步骤I)将固体待检物配制成0. lg/mL的待检液。 优选的，步骤2)取IOOy L的待检液加于吸附脲酶的薄片上。本发明的有益效果是
本发明的检测卡能快速、准确、方便地检测大于或等于0. 2mg/L的汞含量；本发明的检测卡成本低，操作简便，检测时间短，无需专业人员，反应灵敏，易于观察判读；本发明的检测卡无毒无害，不会对环境造成污染。
图I是重金属汞快速检测卡的结构示意图。
具体实施例方式ー种重金属汞快速检测卡，其结构如图I所示，注1为盖膜、2为吸附显色剂的薄片、3为吸附脲酶的薄片、5为底板。薄片粘附在底板5上，盖膜I的边缘粘附在底板相对应的边缘处，盖膜I能盖住薄片2和3，薄片2和薄片3相互不重叠，且其中间为对折线，沿对折线向内对折，可使薄片2和薄片3相叠并相互接触。重金属汞快速检测卡，底板由防水材料制成，盖膜透明，吸附显色剂的薄片由吸附有显色剂的吸水滤纸构成，吸附脲酶的薄片由吸附有脲酶的吸水滤纸构成。重金属汞的快速检测方法，包括以下步骤
1)待检物为固体，取待检物25g粉碎，加入纯化水，混匀，调节pH至7. 0 8. 0，得
0.lg/mL的待检液；待检物为液体，调节pH至7. 0 8. 0，得待检液；
2)采用上述的重金属汞快速检测卡，揭去其盖膜，将IOOy L的待检液加于吸附脲酶的薄片上，于35 40°C反应10 15min ；
3)将重金属汞快速检测卡对折，使步骤2)吸附脲酶的薄片和吸附显色剂的薄片接触，于35 40°C反应3 5min ；
4)打开重金属汞快速检测卡，观察步骤3)吸附显色剂的薄片的顔色，根据颜色判断是否存在重金属汞。优选的，步骤I)将固体待检物配制成0. lg/mL的待检液。优选的，步骤2)取IOOy L的待检液加于吸附脲酶的薄片上。结果判断桃红色为阴性，微红色为阳性，黄色为强阳性。阴性表示待检物汞含量(0. 2mg/L,阳性或强阳性表示待检物汞含量彡0. 2mg/L。
下面结合具体的实施例对本发明作进ー步的说明，但并不局限如此。实施例所述百分比为质量百分比。实施例所述的青豆脲酶液的制备方法为按Ig =IOmL的比例向青豆中加入10%(wt)こ醇水溶液,浸泡24 h,粉碎，10000r/min离心30min,上清液即为青豆脲酶液。实施例I
重金属汞快速检测卡的制作将直径为15_的吸水滤纸和直径为12_的吸水滤纸分别粘于底板上，并将盖膜连接好后，取20 y L显色剂加到吸水滤纸(直径15mm)上，取IOy L脲酶液加到另ー张吸水滤纸(直径12mm)上，室温抽湿2h后盖上盖膜，放入包装袋密封，4 8で保存。其中，显色剂由酚红和尿素混合溶于こ醇水溶液组成，其配方酚红0. 1%、尿素
0.8%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/ml。实施例2
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素0. 8%、无水こ醇15%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。实施例3
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素0. 8%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 6 U/mL。实施例4
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素0. 8%、无水こ醇17%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 0 U/mL。实施例5
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素0. 8%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 4 U/mL。实施例6
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素2%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。实施例7
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素2%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 6 U/mL。实施例8
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 1%、尿素2%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. OU/mL。实施例9
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红1%、尿素2%、无水こ醇17%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 4 U/mL。实施例10
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2%、尿素0. 8%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。实施例11重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素I. 5%、无水こ醇15%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 6 U/mL。实施例12
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素0. 8%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 0 U/mL。实施例13
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素0. 8%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 4 U/mL。实施例14
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素2%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。实施例15
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素2%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 6 U/mL。实施例16
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素2%、无水こ醇17%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 0 U/mL。实施例17
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 5%、尿素2%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为2. 4U/mL。实施例18
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 05%、尿素2%、无水こ醇20%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。对比例I
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红0. 05%、尿素0. 7%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。对比例2
重金属汞快速检测卡的制作同实施例1，其中，显色剂配方酚红2. 7%、尿素2. 5%、无水こ醇10%、余量为水；脲酶液为青豆脲酶液，脲酶液浓度为I. 2 U/mL。灵敏度实验
将汞(ニ价汞)溶于纯化水，配制成不同浓度的待检液，用以上实施例及对比例的重金属汞快速检测卡分别检测，所用重金属汞快速检测卡的显色剂由不同比例的酚红和尿素组成，检测方法如下
1)采用重金属汞快速检测卡，揭去其盖膜，将速测卡沿对折线向外折叠，使吸附脲酶的薄片朝下，吸附显色剂的薄片朝上；
2)取100ii L待检液加于吸附脲酶的薄片上，于37で反应IOmin ；
3)将重金属汞快速检测卡沿对折线向内折叠，使步骤2)吸附脲酶的薄片和吸附显色剂的薄片接触，于37°C反应3min ；
4)打开重金属汞快速检测卡，观察吸附显色剂的薄片的顔色，根据颜色判断是否存在重金属汞。检测结果见表1，表中“ + ”代表对空白对照显阳性，表示脲酶受抑制程度较大，颜色为黄色或者浅红色；“一 ”代表脲酶收抑制程度较小，桃红色为阴性。由表可知，本发明的重金属汞快速检测卡均能检测大于0. 2mg/L的汞含量；其中，实施例I 5的检测卡的检出限均为0. 2mg/L,实施例6 18的检出限均为0. 5mg/,可见,实施例I 5的检测效果最好，故显色剂浓度为酚红0. 1%，尿素0. 8%的检测效果最好，能检测到的汞浓度> 0. 2mg/L。
权利要求
1.ー种重金属汞快速检测卡，其结构由下至上依次为底板、吸附薄片、盖膜，所述底板上分別固定有至少ー个吸附显色剂的薄片、至少ー个吸附脲酶的薄片，薄片相互不重叠，其中，単位面积的薄片吸附的脲酶与显色剂的用量比为3 U :1. 6 3. 2 mL，显色剂含有如下质量百分比的组分酚红0. 05 2. 5%，尿素0. 8 2%。
2.根据权利要求I所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于显色剂由如下质量百分比的组分组成酚红0. 05 2. 5%，尿素0. 8 2%，无水こ醇10 20%，余量为水。
3.根据权利要求2所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于显色剂由如下质量百分比的组分组成酚红0. 1%，尿素0. 8%，无水こ醇10 20%，余量为水。
4.根据权利要求I所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于脲酶为青豆脲酶。
5.根据权利要求5所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于青豆脲酶的制备方法向青豆中加入こ醇水溶液，浸泡，粉碎，离心，上清液为青豆脲酶液，将上清液干燥得青豆脲酶。
6.根据权利要求I所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于薄片由吸附有显色剂或脲酶的吸水滤纸构成。
7.根据权利要求I所述的重金属汞快速检测卡，其特征在于底板由防水材料制成。
8.重金属汞的快速检测方法，包括以下步骤 1)待检物为固体，将待检物粉碎，加入水，混匀，调节pH至7.0 8. 0，得待检液；待检物为液体，调节pH至7. 0 8. 0，得待检液； 2)采用权利要求I所述的重金属汞快速检测卡，揭去其盖膜，将待检液加于吸附脲酶的薄片上，于35 40°C反应10 15min ； 3)将重金属汞快速检测卡对折，使步骤2)吸附脲酶的薄片和吸附显色剂的薄片接触，于35 40°C反应3 5min ； 4)打开重金属汞快速检测卡，观察步骤3)吸附显色剂的薄片的顔色，根据颜色判断是否存在重金属汞。
9.根据权利要求8所述的重金属汞的快速检测方法，其特征在于步骤I)将固体待检物配制成0. lg/mL的待检液。
10.根据权利要求8所述的重金属汞的快速检测方法，其特征在于步骤2)取IOOyL的待检液加于吸附脲酶的薄片上。
全文摘要
本发明公开了一种重金属汞快速检测卡及其检测方法，该检测卡结构由下至上依次为底板、吸附薄片、盖膜，所述底板上分别固定有至少一个吸附显色剂的薄片、至少一个吸附脲酶的薄片，薄片相互不重叠，其中，单位面积的薄片吸附的脲酶与显色剂的用量比为3U1.6～3.2mL，显色剂含有如下质量百分比的组分酚红0.05～2.5%，尿素0.8～2%。本发明的检测卡能快速、准确、方便地检测大于或等于0.2mg/L汞的含量；本发明的检测卡成本低，操作简便，检测时间短，无需专业人员，反应灵敏，易于观察判读；本发明的检测卡无毒无害，不会对环境造成污染。
文档编号C12Q1/58GK102776266SQ201210261039
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月26日 优先权日2012年7月26日
发明者卢新, 谢俊平, 贺取华 申请人:广州绿洲生化科技股份有限公司