专利名称：一种海参活性胶原蛋白的提取方法
技术领域：
本发明涉及胶原蛋白提取技术领域，具体涉及一种海参活性胶原蛋白的提取方法。
背景技术：
海参中含有大量的胶原蛋白，具有抗凝血、免疫调节、降血脂、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用，而保持活性的海参胶原蛋白的应用价值更高，但目前胶原蛋白的提取工艺均会破坏其三维螺旋结构，大大降低了其胶原蛋白的科研及应用价值。发明内容
为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种海参活性胶原蛋白的提取方法。
本发明的技术方案是包括以下提取步骤(1)把鲜活海参除去内脏，用剪刀剔除内壁肌肉层，剩余海参体壁用刀切成碎块；(2)加入10倍重量的蒸馏水，搅拌30min，用纱布滤出，再加入10倍重量的蒸馏水重洗一次；(3)然后将海参碎块放于10倍重量的O.1 mol/L Tris-HCl溶液中，溶液pH为8. 0，还含有4 m mol/L的EDTA，搅拌过夜；(4)用纱布过滤后，再用蒸馏水洗2次，置于10倍重量的蒸馏水中搅拌过夜，溶液中即充满絮状胶原纤维，用纱布滤出未解离的海参块，重复上述操作；(5)将溶液以12000rpm离心30min ；(6)所得胶原纤维沉淀加入25倍体积的O.1 mol/L NaOH溶液中，搅拌2d ；(7)12000rpm离心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍体积的O. 5 mol/L乙酸,加入O.5%的胃蛋白酶，搅拌、消化2天；(8)12000rpm离心30min，上清液缓慢加入研磨精细的NaCl，溶液终浓度为O. 9 mol/ L，搅拌过夜；(9)12000rpm离心30min,去上清,沉淀加入少许0. 5 mol/L乙酸溶解,转入透析袋内对0.1 mol/L乙酸透析2d，再用蒸馏水透析2d，冷冻干燥后即得活性胶原蛋白，以上所有 操作均在4°C下进行。
本发明工艺简单，提取率高，且胶原蛋白的三维螺旋结构保存完好，具有较高的科研和应用价值。
具体实施方式
实施例1一种即食海参加工新工艺，包括以下提取步骤(1)把鲜活海参除去内脏，用剪刀剔除内壁肌肉层，剩余海参体壁用刀切成碎块；(2)加入10倍重量的蒸馏水，搅拌30min，用纱布滤出，再加入10倍重量的蒸馏水重洗一次；(3)然后将海参碎块放于10倍重量的O.1 mol/L Tris-HCl溶液中，溶液pH为8. 0，还含有4 m mol/L的EDTA，搅拌过夜；(4)用纱布过滤后，再用蒸馏水洗2次，置于10倍重量的蒸馏水中搅拌过夜，溶液中即充满絮状胶原纤维，用纱布滤出未解离的刺参块，重复上述操作；(5)将溶液以12000rpm离心30min ；(6)所得胶原纤维沉淀加入25倍体积的O.1 mol/L NaOH溶液中，搅拌2d ；(7)12000rpm离心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍体积的O. 5 mol/L乙酸,加入O.5%的胃蛋白酶，搅拌、消化2天；(8)12000rpm离心30min，上清液缓慢加入研磨精细的NaCl，溶液终浓度为O. 9 mol/ L，搅拌过夜；(9)12000rpm离心30min,去上清,沉淀加入少许0. 5 mol/L乙酸溶解,转入透析袋内对0.1 mol/L乙酸透析2d，再用蒸馏水透析2d，冷冻干燥后即得活性胶原蛋白，以上所有操作均在4°C下进行。
上述实施例不作为对本发明的限定，凡在本发明的范围内所作的任何修改、等同替换、改进等，均属于本发明的保护范 围。
权利要求
1.一种海参活性胶原蛋白的提取方法，其特征在于包括以下提取步骤(1)把鲜活海参除去内脏，用剪刀剔除内壁肌肉层，剩余海参体壁用刀切成碎块；(2)加入10倍重量的蒸馏水，搅拌30min，用纱布滤出，再加入10倍重量的蒸馏水重洗一次；(3)然后将海参碎块放于10倍重量的1.1 mo l/L Tris-HCl溶液中，溶液pH为8. 0，还含有4 m mo l/L的EDTA，搅拌过夜；(4)用纱布过滤后，再用蒸馏水洗2次，置于10倍重量的蒸馏水中搅拌过夜，溶液中即充满絮状胶原纤维，用纱布滤出未解离的海参块，重复上述操作；(5)将溶液以12000rpm离心30min ；(6)所得胶原纤维沉淀加入25倍体积的0.1 mol/L NaOH溶液中，搅拌2d ；(7)12000rpm离心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍体积的0. 5 mol/L乙酸,加入.1.5%的胃蛋白酶，搅拌、消化2天；(8)12000rpm离心30min，上清液缓慢加入研磨精细的NaCl，溶液终浓度为O. 9 mol/ L，搅拌过夜；(9)12000rpm离心30min,去上清,沉淀加入少许0. 5 mol/L乙酸溶解,转入透析袋内对0.1 mol/l乙酸透析2d，再用蒸馏水透析2d，冷冻干燥后即得活性胶原蛋白，以上所有操作均在4°C下进行。
全文摘要
本发明涉及一种海参活性胶原蛋白的提取方法，将把鲜活海参除去内脏，切成碎块，用蒸馏水搅拌，过滤后再用Tris-HCl搅拌，过滤后，离心所得胶原纤维沉淀加入NaOH溶液中，搅拌、离心，沉淀加入含胃蛋白酶的乙酸溶液中，搅拌过夜，离心，沉淀透析后得活性胶原蛋白，以上所有操作均在0～4℃条件下进行。本发明工艺简单，提取率高，且胶原蛋白的三维螺旋结构保存完好，具有较高的科研和应用价值。
文档编号C12P21/06GK103060409SQ201210589099
公开日2013年4月24日 申请日期2012年12月29日 优先权日2012年12月29日
发明者周伟丽 申请人:青岛安芙兰生物科技有限公司