专利名称：一株绿脓杆菌及其应用的制作方法
技术领域：
本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一株绿脓杆菌及其应用。
背景技术：
近几十年来，我国水产养殖业迅猛发展，集约化、高密度养殖规模日益扩大，但由于种投饵造成养殖水体中积累大量的残饵，以及养殖动物的粪便及动植物尸体等原因导致水体氮元素含量严重超标，富营养化加剧，使得养殖生态环境遭到破坏，鱼虾病害频发，最终造成巨大的经济损失。研究表明，氨氮是水相环境中氮的主要形态，也是造成水体富营养化的主要污染物，其中以铵态氮最多，铵态氮中的非离子形态对水产动物具有较强的毒性，且随着PH和温度而变化，氨氮过高极易容易造成水产养殖动物死亡。目前，水产养殖生产过程中，人们控制氨氮污染的办法通常是通过换注新水降低氨氮浓度，采用曝气方式使部分氨氮逸出水面，例如采用氯消毒去除氨氮，或使用氧合器等来调节水质。由于上述方法不能使氨氮完全能降低到水质要求标准，例如受水源限制，或是鱼类发生气泡病、细菌性鳃病等，因此对氨氮污染的控制效果并不理想。而近年来，微生物脱氮技术去除的微生物技术开始迅速发展，微生物降解氨氮的效率稳定，二次污染小的优点受到水产养殖及环保产业的高度关注，这就要求能够筛选到具有高效氨氮降解功能的微生物。
发明内容
本发明的目的是提供一株绿脓杆菌及其应用，所述绿脓杆菌筛选自南美白对虾养殖塘的底泥，能高效降解水体中的氨态氮，可广泛应用于对水产养殖及生活废水的处理。
本发明一方面提供了一株绿胺杆菌AN5 (Pseudomonas aeruginosa AN5),已于2013年3月6日保藏于位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC N0:M2013068o本发明的微生物可应用于水体净化领域。本发明的另一方面提供了含有上述绿脓杆菌的微生物制剂及其应用。上述绿脓杆菌可以菌粉的形式制成微生物添加剂，制备过程为:将绿脓杆菌AN5活化、扩大培养，经液态发酵，离心收集菌泥，加入淀粉载体，烘干制成菌量为100 1000亿/g的菌粉。上述绿脓杆菌AN5菌粉用于养殖废水或生活污水的净化处理。本发明从南美白对虾养殖塘底泥中筛选到一株绿脓杆菌AN5。该菌株能高效降解水体中的铵态氮，且该菌株营养需要简单，繁殖力强，可开发为水产微生物制剂及废水处理齐U，应用前景广阔。
具体实施方式
实施例1:绿脓杆菌AN5分离筛选及鉴定1、筛选的污泥取自江苏射阳南美白对虾养殖塘。2、培养基:I)富集培养基:葡萄糖5g、硫酸铵2g、氯化钠2g、硫酸亚铁0.4g、磷酸氢二钾lg、ρΗ7.2，硫酸镁 0.5g、水 IOOOmL ；2)分离培养基:富集培养基基础上加20g的琼脂粉；3)筛选培养基:葡萄糖5g、硫酸铵0.225g、氯化钠lg、磷酸氢二钾0.5g、pH7.2、硫酸镁0.25g、去离子水定容至IOOOmL,其中氨氮含量为45mg/L，分装于250mL小三角瓶，每瓶IOOmL, 121°C 灭菌 30min。
4)葡萄糖蛋白胨液体培养基:蛋白胨5g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾2g、氯化钠5g，水IOOOmL, pH7.0，过滤分装，121°C灭菌 30min。3、筛选:取南美白对虾养殖塘污泥，加一半水搅匀，经1000r/min离心5min后，取上清接种于富集培养基，于30°C培养，富集7d，且每隔Id向其中加入硫酸铵溶液1ml，以淘汰不能利用NH4+的微生物。发酵液经梯度稀释后涂布在倒置的分离培养基平板上，于30°C培养，挑取平板上长出的单菌落进行重复分离纯化，直到得到单菌株的纯培养，本次实验共获得10株单菌落，并分别依次命名为AN1、AN2、AN3至AN10。将纯化得到的菌株接种到筛选培养基中，测试各菌株在30°C、150r/min培养24h时上述10株菌对氨氮的降解情况，其中菌株AN5对氨氮的降解率最高，达71.93% (表I)。表1:10株菌在24h降解氨氮的实验结果
权利要求
1.一种绿脓杆菌，其特征在于，所述的绿脓杆菌的保藏编号为CCTCC N0:M2013068o
2.权利要求1所述的绿脓杆菌在水体净化领域中的应用。
3.—种微生物制剂，所述的微生物制剂包含有权利要求1所述的绿脓杆菌。
4.权利要求3所述的微生物制剂，所述的微生物制剂为微生物菌粉，是将权利要求1所述的绿脓杆菌活化、扩大培养，经液态发酵，离心收集菌泥，加入淀粉载体，烘干制成菌量为100 1000亿/g的菌粉。
5.权利要求3或4所述的微生物制剂在养殖废水或生活污水净化处理中的应用。
全文摘要
本发明的目的是提供一株绿脓杆菌及其应用，所述绿脓杆菌绿脓杆菌AN5(Pseudomonas aeruginosa AN5)，其保藏编号为CCTCC NO:M2013068。本发明的绿脓杆菌可应用于水体净化领域。本发明从南美白对虾养殖塘底泥中筛选到一株绿脓杆菌AN5。该菌株能高效降解水体中的铵态氮，且该菌株繁殖力强，可开发为水产微生物制剂及废水处理剂，应用前景广阔。
文档编号C12N11/10GK103146621SQ20131009523
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月21日 优先权日2013年3月21日
发明者武玉强, 李自英 申请人:青岛蔚蓝生物集团有限公司