本发明涉及一种微生物水果保鲜剂，属于生物技术领域。
背景技术
随着人民生活水平提高,水果的新鲜和营养价值得到很大的重视,因此对水果保鲜的要求也越来越高。如何延长水果的贮藏时间,保持其品质不变,已成为当前消费者所普遍关心和亟待解决的问题。据调查,我国目前由于保鲜技术问题,致使果品每年损耗率在20%~25%。
目前较先进的保鲜技术主要有临界低温高湿保鲜、低剂量辐射预处理保鲜、高压保鲜、基因工程保鲜、涂膜保鲜和生物保鲜等。化学防腐剂对人体的毒副作用、致癌已让人们意识到它的危险性。物理防腐保鲜方法要求技术性强、设备维修难、成本比较高。生物保鲜物质直接来源于生物体自身组成成分或其代谢产物,具有无味、无毒、安全等特点,此外生物保鲜物质一般都可被生物降解,不会造成二次污染。
水果保鲜大多采用物理或化学方法。物理方法一般需要专门的设备，投资大，操作复杂，运行费用高。该法用于大范围采后第一时间内水果保鲜有很大的困难。化学方法一般使用化学保鲜剂对水果作浸泡或涂膜等处理，对人体健康存在较严重的隐患。在纸板表面涂敷保鲜涂层制成保鲜纸板（纸箱）来保鲜水果，是一种绿色、有效的方法。保鲜纸板（纸箱）对水果既有保鲜作用，又可作为一种贮运包装材料。纸质包装材料，可生物降解，对环境无污染，是一种可再生的绿色包装材料，近年来发展较快。草莓是一种人工栽培的蔬菜型水果，肉质柔软多汁，皮薄娇嫩，极易损伤和腐烂。虽然近年来草莓保鲜技术较多，但其效果均不理想。
本发明旨在发明一种微生物水果保鲜剂，其使用天然益生菌微生物进行发酵获得，可以有效保鲜水果，尤其是草莓等非常脆弱柔软的水果，只需要喷洒即可，没有伤害。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种微生物水果保鲜剂，其使用天然益生菌微生物进行发酵获得，可以有效保鲜水果，尤其是草莓等非常脆弱柔软的水果，只需要喷洒即可，没有伤害。
现有技术公开过一种地衣芽孢杆菌，为地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)zju-x1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmccno.9688，其主要用于产生抗菌肽。本发明人首次发现将其运用于保持冬枣的酥脆口感，保持甜度的效果，由于抗菌肽的效果，还具有降低霉变的作用。
现有技术还公开过一株枯草芽孢杆菌菌株xp，其分类命名为bacillussubtilis，该菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏号为：cctccno：m2011452，保藏日期：2011年12月9日，保藏单位地址：湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号（武汉大学）。其应用于烟草。
本发明人首次发现联合运用这两个菌株，可以取得预料不到的水果保鲜效果。
本发明是这样实现的：
一种微生物水果保鲜剂的制备方法，其步骤如下：
（1）发酵地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)zju-x1：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，水苏糖2-4g蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将地衣芽孢杆菌zju-x1按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵3-7小时，获得保鲜剂1；
（2）发酵枯草芽孢杆菌菌株xp：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，海藻糖2-4g，维生素c0.5g，蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将枯草芽孢杆菌菌株xp按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵1-3小时，获得保鲜剂2；
（3）按照质量比1:2混合保鲜剂1和2。
本发明保鲜剂的使用方法为：
稀释100倍后均匀喷洒于水果，喷洒量为保鲜剂的重量为新鲜水果的千分之一。
本发明的优点：
一种生物保鲜脆冬枣的方法，其使用天然益生菌微生物进行发酵获得，可以有效保鲜冬枣，保持其酥脆的硬度，蔗糖含量，降低霉变。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
实施例1
一种微生物水果保鲜剂的制备方法，其步骤如下：
（1）发酵地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)zju-x1：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，水苏糖2-4g蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将地衣芽孢杆菌zju-x1按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵3-7小时，获得保鲜剂1；
（2）发酵枯草芽孢杆菌菌株xp：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，海藻糖2-4g，维生素c0.5g，蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将枯草芽孢杆菌菌株xp按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵1-3小时，获得保鲜剂2；
（3）按照质量比1:2混合保鲜剂1和2。
本发明保鲜剂的使用方法为：
稀释100倍后均匀喷洒于水果，喷洒量为保鲜剂的重量为新鲜水果的千分之一。
实施例2：
一种微生物水果保鲜剂的制备方法，其步骤如下：
（1）发酵地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)zju-x1：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，水苏糖2-4g蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将地衣芽孢杆菌zju-x1按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵3-7小时，获得保鲜剂1；
（2）发酵枯草芽孢杆菌菌株xp：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，海藻糖2-4g，维生素c0.5g，蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将枯草芽孢杆菌菌株xp按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵1-3小时，获得保鲜剂2；
（3）按照质量比1:2混合保鲜剂1和2。
本发明保鲜剂的使用方法为：
稀释100倍后均匀喷洒于水果，喷洒量为保鲜剂的重量为新鲜水果的千分之一。
实施例3
一种微生物水果保鲜剂的制备方法，其步骤如下：
（1）发酵地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)zju-x1：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，水苏糖2-4g蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将地衣芽孢杆菌zju-x1按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵3-7小时，获得保鲜剂1；
（2）发酵枯草芽孢杆菌菌株xp：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2-3g，海藻糖2-4g，维生素c0.5g，蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将枯草芽孢杆菌菌株xp按照接种量10%接种入lb培养基，37-39℃发酵1-3小时，获得保鲜剂2；
（3）按照质量比1:2混合保鲜剂1和2。
本发明保鲜剂的使用方法为：
稀释100倍后均匀喷洒于水果，喷洒量为保鲜剂的重量为新鲜水果的千分之一。
实施例4
对照组：
一种生物保鲜脆冬枣的方法，其步骤如下：
（1）发酵：
配置lb培养基(均为质量浓度g/l)：蛋白胨20g，k2hpo4.3h2o2.5g，mgso40.73g，甘油15.0ml，琼脂15.0g，玉米淀粉2.8g，水苏糖2.8g蒸馏水定容至1.0l；ph7.0,121℃，15min灭菌；
将地衣芽孢杆菌zju-x1按照接种量10%接种入lb培养基，38℃发酵4小时，获得保鲜剂；
（2）保鲜：
将保鲜剂稀释100倍，均匀喷洒于冬枣即可。
使可溶性固形物含量23.8%的果实，25℃贮藏30d检测效果：
对照果实贮藏10d后，长霉、腐烂果逐渐增加，至30d时霉果率高达96.7%。本发明处理后的冬枣，贮藏30d时霉果率仅1.9%，而且果肉硬度保存率为91.9。
实施例1-3的结果分别为：
贮藏30d时霉果率仅0.2%，而且果肉硬度保存率为99.8。
贮藏30d时霉果率仅0.2%，而且果肉硬度保存率为99.6。
贮藏30d时霉果率仅0.2%，而且果肉硬度保存率为99.7。
实施例5
草莓保鲜实验：
将保鲜剂稀释100倍，均匀喷洒于草莓即可。
将草莓装入保鲜纸板盒中，密封后在10~12℃下贮藏5d分别打开，测定各项指标。初始硬度为0.125/kg。
空白对照组的失水率为11.2%，硬度为0.001/kg。
实施例1-3的结果分别为：
失水率为1.8%，硬度为0.123/kg。
失水率为1.1%，硬度为0.120/kg。
失水率为1.7%，硬度为0.119kg。
可见，本发明的保鲜剂对草莓具有很好的保鲜效果。
可见，本发明的方法在常温下具有很好的贮藏保鲜效果。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，本领域的普通技术人员可以理解：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物限定。