一种微生物饲料添加剂及其制备工艺和应用
【专利摘要】本发明公开了一种微生物饲料添加剂及其制备工艺和应用，由以下组分按重量份数配比制成：德氏乳杆菌16～33份、枯草芽孢杆菌12～29份、酿酒酵母8～26份、葡萄糖6～19份、1,5?D?脱水果糖7～16份、磷酸氢二钾3～11份、蛋白胨8～21份、蔗糖9～17份、糖化酶3～9份、蒸馏水28～46份。本发明所述的微生物饲料添加剂具有较好抑菌效果、耐受性强，且能够在猪肠道内长期定植，存活率高。
【专利说明】
[0001] 一种微生物饲料添加剂及其制备工艺和应用
技术领域
[0002] 本发明涉及饲料添加剂领域，尤其涉及一种微生物饲料添加剂及其制备工艺和应 用。
[0003]
【背景技术】
[0004] 饲料添加剂是添加在饲料中的一种可食性物质，以调节动物消化道微生态平衡、 促进动物生长、提高饲料转化率、增强动物免疫功能和动物体能、降低饲养成本及改善饲料 产品的品质为目的，旨在提高动物的营养水平及补充足够的营养。饲料添加剂是动物配合 饲料的核心，是决定其使用效果和质量的最活跃、最重要的因素。在动物常规饲料中添加各 种制剂，是当前国内外采用的能提高动物生产性能及饲料利用率、显著增加养殖经济效益 的最简单、最有效的方法和途径。本世纪初，研究人员就开始从事饲料添加的研究，伴随饲 料工业和养殖业的迅速发展，饲料添加剂的研发和应用取得了很大进展，目前饲料添加剂 年使用量超过800万吨，产值约100多亿美元，品种已达数百种。
[0005] 目前，添加剂的负面作用也越来越受到人们的关注，主要体现在以下几个方面： (1)抗生素的长期使用可导致病原菌产生抗药性;（2)频繁大量使用抗生素可引起畜禽内源 性感染或二重感染；（3)抗生素的长期使用可削弱畜禽机体的免疫功能，造成抗病力下降， 影响对营养和免疫方面的调节;（4)抗生素对动物消化道正常菌群有抑制或杀灭作用，长期 使用可导致机体内菌群失调、过敏反应及药物残留等一系列问题；（5)抗生素与维生素及矿 物质元素之间有相互拮抗作用。上述缺陷致使畜禽发病、死亡，同时，也影响人类饮食安全， 从而很大程度上制约了畜牧业的发展，其负面效应引起了世界各国的高度重视。
[0006] 由于猪体消化道的特殊环境，胃酸的pH值一般为2.5~3.5左右，且存在一定浓度 的胆盐和消化酶，胆汁液和胆汁盐能通过乳化作用消化脂肪性食物，而细菌的细胞膜由脂 质和脂肪酸构成，胆汁可直接作用于它们。一些生产菌株在被动物摄入后，不能有效耐受消 化道内胆汁酸等的作用，从而无法长时间在肠道内定植并发挥作用。
[0007]
【发明内容】
[0008] 本发明解决的技术问题是:为了获得一种具有较好抑菌效果、耐受性强，且能够在 猪肠道内长期定植，存活率高的微生物饲料添加剂，本发明提供了一种微生物饲料添加剂 及其制备工艺和应用。
[0009] 技术方案:一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌 16~33份、枯草芽孢杆菌12~29份、酿酒酵母8~26份、葡萄糖6~19份、1，5-D-脱水果糖7~ 16份、磷酸氢二钾3~11份、蛋白胨8~21份、鹿糖9~17份、糖化酶3~9份、蒸馏水28~46份。
[0010] 优选的，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌25份、枯草芽孢杆菌21份、 酿酒酵母23份、葡萄糖16份、1，5-D-脱水果糖11份、磷酸氢二钾8份、蛋白胨16份、鹿糖14份、 糖化酶7份、蒸馏水39份。
[0011] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、36~42 °C恒温摇床培养1.5~4小时； (2) 种子罐扩大培养:按2~8%(v/w)的接种量加入发酵罐中，在36~42°C、pH值为6.5~ 7.8的条件下进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤(2)收集的菌体按6~ll%(v/w)接种到发酵罐中，培养温度为36~ 42°C，200~400 r/min低速搅拌，pH值为6.5~7.8，培养14~20小时；按重量份计:培养基成 分为：牛肉膏19~34份、氯化钠11~20份、水合硫酸镁1~6份、水合硫酸锰1~8份、淀粉酶1 ~4份、葡聚糖6~18份、水18~34份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙2~8份、延长培养1~2小时，收集菌体； (5) 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、鹿糖、糖化酶和蒸馏水，在25~29 °C条件下，120~300r/min低速搅 拌15~30分钟，8~12 °C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0012] 优选的，步骤（1)中将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化， 500mL三角瓶、38 °C恒温摇床培养3小时。
[0013]优选的，步骤(2)中按6%( v/w)的接种量加入发酵罐中，在38°C、pH值为7.2的条件 下进行种子液的发酵培养，收集菌体。
[0014]优选的，步骤(3)中将步骤(2)收集的菌体按8%(v/w)接种到发酵罐中，培养温度为 38 °C，300r/min低速搅拌，pH值为7.2，培养18小时；按重量份计：培养基成分为：牛肉膏28 份、氯化钠18份、水合硫酸镁4份、水合硫酸锰6份、淀粉酶2份、葡聚糖13份、水27份。
[0015] 优选的，步骤(4)中向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙6份、延长培养1.6小时， 收集菌体。
[0016] 优选的，步骤(5)中将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄 糖、1，5-D-脱水果糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在26 °C条件下，240r/min 低速搅拌24分钟，10°C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0017] 所述的微生物饲料添加剂在育肥猪饲养中的应用。
[0018] 优选的，所述微生物饲料添加剂在育肥猪基础日粮中的添加比例为4~11%。
[0019] 有益效果:本发明所述的微生物饲料添加剂具有较好抑菌效果、耐受性强，且能够 在猪肠道内长期定植，存活率高。
[0020]
【具体实施方式】
[0021] 实施例1 一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌16份、枯草芽孢 杆菌12份、酿酒酵母8份、葡萄糖6份、1，5-D-脱水果糖7份、磷酸氢二钾3份、蛋白胨8份、蔗糖 9份、糖化酶3份、蒸馏水28份。
[0022] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、36 °C恒温摇床培养1.5小时； (2) 种子罐扩大培养:按2%(以《)的接种量加入发酵罐中，在36°(：4田直为6.5的条件下 进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤（2)收集的菌体按6%( v/w)接种到发酵罐中，培养温度为36 °C， 200r/min低速搅拌，pH值为6.5，培养14小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏19份、氯化 钠11份、水合硫酸镁1份、水合硫酸锰1份、淀粉酶1份、葡聚糖6份、水18份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙2份、延长培养1小时，收集菌体； (5) 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、鹿糖、糖化酶和蒸馏水，在25 °C条件下，120r/min低速搅拌15分钟， 8 °C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0023] 实施例2 一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌25份、枯草芽孢 杆菌21份、酿酒酵母23份、葡萄糖16份、1，5-D-脱水果糖11份、磷酸氢二钾8份、蛋白胨16份、 蔗糖14份、糖化酶7份、蒸馏水39份。
[0024] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、38 °C恒温摇床培养3小时； (2) 种子罐扩大培养:按6%(以《)的接种量加入发酵罐中，在38°(：4田直为7.2的条件下 进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤（2)收集的菌体按8%( v/w)接种到发酵罐中，培养温度为38 °C， 300r/min低速搅拌，pH值为7.2，培养18小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏28份、氯化 钠18份、水合硫酸镁4份、水合硫酸锰6份、淀粉酶2份、葡聚糖13份、水27份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙6份、延长培养1.6小时，收集菌体； (5) 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在26 °C条件下，240r/min低速搅拌24分钟， l〇°C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0025] 实施例3 一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌33份、枯草芽孢 杆菌29份、酿酒酵母26份、葡萄糖19份、1，5-D-脱水果糖16份、磷酸氢二钾11份、蛋白胨21 份、蔗糖17份、糖化酶9份、蒸馏水46份。
[0026] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、42 °C恒温摇床培养4小时； (2) 种子罐扩大培养:按8%&/^)的接种量加入发酵罐中，在42°(：411值为7.8的条件下 进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤(2)收集的菌体按ll%(v/w)接种到发酵罐中，培养温度为42°C， 400 r/min低速搅拌，pH值为7.8，培养20小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏34份、氯 化钠20份、水合硫酸镁6份、水合硫酸锰8份、淀粉酶4份、葡聚糖18份、水34份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙8份、延长培养2小时，收集菌体； (5) 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在29 °C条件下，300r/min低速搅拌30分钟， 12 °C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0027] 对照例1 与实施例2的区别在于，未进行延长培养，具体如下： 一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌25份、枯草芽孢 杆菌21份、酿酒酵母23份、葡萄糖16份、1，5-D-脱水果糖11份、磷酸氢二钾8份、蛋白胨16份、 蔗糖14份、糖化酶7份、蒸馏水39份。
[0028] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、38 °C恒温摇床培养3小时； (2) 种子罐扩大培养:按6%(以《)的接种量加入发酵罐中，在38°(：4田直为7.2的条件下 进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤（2)收集的菌体按8%( v/w)接种到发酵罐中，培养温度为38 °C， 300r/min低速搅拌，pH值为7.2，培养18小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏28份、氯化 钠18份、水合硫酸镁4份、水合硫酸锰6份、淀粉酶2份、葡聚糖13份、水27份； (4) 将步骤(3)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在26 °C条件下，240r/min低速搅拌24分钟， l〇°C低温干燥获得微生物饲料添加剂。
[0029] 对照例2 与实施例2的区别在于，未加入1，5-D-脱水果糖。
[0030] 一种微生物饲料添加剂，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌25份、枯草 芽孢杆菌21份、酿酒酵母23份、葡萄糖16份、磷酸氢二钾8份、蛋白胨16份、蔗糖14份、糖化酶 7份、蒸馏水39份。
[0031 ] -种微生物饲料添加剂的制备工艺，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、38 °C恒温摇床培养3小时； (2) 种子罐扩大培养:按6%(以《)的接种量加入发酵罐中，在38°(：4田直为7.2的条件下 进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤（2)收集的菌体按8%( v/w)接种到发酵罐中，培养温度为38 °C， 300r/min低速搅拌，pH值为7.2，培养18小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏28份、氯化 钠18份、水合硫酸镁4份、水合硫酸锰6份、淀粉酶2份、葡聚糖13份、水27份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙6份、延长培养1.6小时，收集菌体； (5)将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、磷酸氢二钾、蛋 白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在26 °C条件下，240r/min低速搅拌24分钟，10 °C低温干燥获得 微生物饲料添加剂。
[0032] 实施例4 将实施例1~3和对照例制备获得的微生物添加剂用来饲养育肥猪，其在基础日粮中的 添加比例为8%，结果如下表所示：
从表中可以看出，延长培养可以有效促进牲畜的生长;实施例2相对于对照例2来说，加 入了 1，5-D-脱水果糖进行发酵，饲料能够有效地提高牲畜的瘦肉率。
【主权项】
1. 一种微生物饲料添加剂，其特征在于，由以下组分按重量份数配比制成:德氏乳杆菌 16~33份、枯草芽孢杆菌12~29份、酿酒酵母8~26份、葡萄糖6~19份、1，5-D-脱水果糖7~ 16份、磷酸氢二钾3~11份、蛋白胨8~21份、鹿糖9~17份、糖化酶3~9份、蒸馏水28~46份。2. 根据权利要求1所述的一种微生物饲料添加剂，其特征在于，由以下组分按重量份数 配比制成:德氏乳杆菌25份、枯草芽孢杆菌21份、酿酒酵母23份、葡萄糖16份、1，5-D-脱水果 糖11份、磷酸氢二钾8份、蛋白胨16份、蔗糖14份、糖化酶7份、蒸馏水39份。3. 权利要求1所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，包含以下流程： (1) 种子活化:将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角 瓶、36~42 °C恒温摇床培养1.5~4小时； (2) 种子罐扩大培养:按2~8%(v/w)的接种量加入发酵罐中，在36~42°C、pH值为6.5~ 7.8的条件下进行种子液的发酵培养，收集菌体； (3) 发酵培养:将步骤(2)收集的菌体按6~11 %(v/w)接种到发酵罐中，培养温度为36~ 42°C，200~400 r/min低速搅拌，pH值为6.5~7.8，培养14~20小时；按重量份计:培养基成 分为：牛肉膏19~34份、氯化钠11~20份、水合硫酸镁1~6份、水合硫酸锰1~8份、淀粉酶1 ~4份、葡聚糖6~18份、水18~34份； (4) 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙2~8份、延长培养1~2小时，收集菌体； (5) 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果 糖、磷酸氢二钾、蛋白胨、鹿糖、糖化酶和蒸馏水，在25~29 °C条件下，120~300r/min低速搅 拌15~30分钟，8~12 °C低温干燥获得微生物饲料添加剂。4. 根据权利要求3所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，步骤（1)中 将冰冻保存的德氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活化，500mL三角瓶、38°C恒温摇床培 养3小时。5. 根据权利要求3所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，步骤(2)中 按6%( v/w)的接种量加入发酵罐中，在38°C、pH值为7.2的条件下进行种子液的发酵培养，收 集菌体。6. 根据权利要求3所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，步骤(3)中 将步骤(2)收集的菌体按8%(v/w)接种到发酵罐中，培养温度为38°C，300r/min低速搅拌，pH 值为7.2，培养18小时；按重量份计:培养基成分为：牛肉膏28份、氯化钠18份、水合硫酸镁4 份、水合硫酸锰6份、淀粉酶2份、葡聚糖13份、水27份。7. 根据权利要求3所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，步骤(4)中 向步骤(3)培养后的菌体中添加氯化钙6份、延长培养1.6小时，收集菌体。8. 根据权利要求3所述的一种微生物饲料添加剂的制备工艺，其特征在于，步骤(5)中 将步骤(4)收集的菌体浓缩、干燥得到半成品，向其中添加葡萄糖、1，5-D-脱水果糖、磷酸氢 二钾、蛋白胨、蔗糖、糖化酶和蒸馏水，在26 °C条件下，240r/min低速搅拌24分钟，10 °C低温 干燥获得微生物饲料添加剂。9. 权利要求1所述的微生物饲料添加剂在育肥猪饲养中的应用。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述微生物饲料添加剂在育肥猪基础日 粮中的添加比例为4~11 %。
【文档编号】A23K20/22GK105851484SQ201610174374
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年3月24日
【发明人】宋介珍
【申请人】宋介珍