一种黑布林提取物及其制备方法以及该提取物在卷烟中的应用的制作方法
【专利摘要】一种黑布林提取物及其制备方法以及该提取物在卷烟中的应用，涉及植物提取及其应用。由依次包括以下步骤的方法制得：提取、酶解、灭酶处理、柱色谱分离、浓缩。将所述黑布林提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，按烟草物料质量的0.1%-1%喷洒于烟草物料中。与现有技术相比，本发明通过采用生物酶进行生物技术处理，使得提取物中的淀粉、果胶等大分子被降解；同时选用柱色谱分离，可除掉大部分在后续会影响烟草加香效果的鞣质等大分子物质，确保黑布林提取物中有效成分的含量。且黑布林提取物应用于卷烟中后，能够极大地改善卷烟内在品质，使香气质量提高，烟气柔和、细腻、津甜，基本不产生杂气，基本无刺激且余味干净舒适。
【专利说明】一种黑布林提取物及其制备方法以及该提取物在卷烟中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物提取及其应用，具体涉及一种黑布林提取物及其制备方法以及该提取物在卷烟中的应用。
【背景技术】
[0002]黑布林为蔷薇科李属植物，果实含有丰富的糖，维生素，果酸，氨基酸等营养成分。具有很高的营养价值，黑布林的保健功能十分突出，有生津利尿，清肝养肝，解郁毒，清湿热的作用。
[0003]传统的工艺中，黑布林提取物的提取工艺通常采用水、乙醇的混合溶剂经过蒸馏、过滤、浓缩得到。并且，到目前为止，黑布林提取物通常被应用于医药、饮料和保健品等产品中，尚未应用到卷烟中。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对上面所述，提供一种提取物中的淀粉、果胶等大分子被降解，同时可除掉提取物中大部分鞣质等大分子物质黑布林提取物。
[0005]本发明的另一目的是一种黑布林提取物的制备方法以及该提取物在卷烟中的应用。
[0006]一种黑布林提取物的制备方法，依次包括以下步骤:
①提取:将黑布林加入其质量8~15倍的水，浸泡4小时，提取后得到提取液，冷却，使用150~200目的筛网过滤所述提取液得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得粗得物；
②酶解:按粗提物中淀粉和果胶的重量百分比加入复合生物酶，在45-55°C温度下酶解24-72小时；
③灭酶处理:将步骤②中酶解结束后的混合液加热到80~90°C保持15~30min进行酶灭活；将灭酶后的混合液过滤处理得滤液，将所述滤液减压浓缩，得酶解提取物；
④柱色谱分离:将步骤③中得到的酶解提取物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，用水和/或乙醇冲洗，收集洗脱液；
⑤浓缩:将步骤④中得到的洗脱液进行减压浓缩，所述浓缩后的粘稠状溶液即为黑布林提取物。
[0007]优选的，步骤①中所述提取是在50_70°C条件下蒸馏3-5小时。
[0008]优选的，步骤②中所述复合生物酶包括淀粉酶和果胶酶；其中淀粉酶的添加量为粗提物中淀粉重量的0.5-1.5%，果胶酶的添加量为粗提物中果胶重量的1-3% ;所用淀粉酶的酶活为1-3万u/ml，果胶酶的酶活为4-6万u/ml ;粗提物中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，粗提物中果胶含量测定按照咔唑比色法。
[0009]优选的，所述步骤④中层析所用填料为聚酰胺树脂，用量为所述上清液质量的I~5倍，所述填料的径高比1: 4~1: 10，吸附流速为0.5~4.0BV/h，洗脱流速为0.5~4.0BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为60~80目。
[0010]一种黑布林提取物，采用上述方法制备得到。
[0011]本发明所述黑布林提取物在卷烟中的应用:将所述黑布林提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，按烟草物料质量的0.1%-1%喷洒于烟草物料中。
[0012]优选的，所述有机溶剂为丙二醇、山梨醇、木糖醇和甘油中的一种，或者其中任意两种以上的混合液。
[0013]本发明的有益效果是:与现有技术相比，本发明通过采用生物酶进行生物技术处理，使得提取物中的淀粉、果胶等大分子被降解；同时选用柱色谱分离，可除掉大部分在后续会影响烟草加香效果的鞣质等大分子物质，确保黑布林提取物中有效成分的含量。且黑布林提取物应用于卷烟中后，能够极大地改善卷烟内在品质，使香气质量提高，烟气柔和、细腻、津甜，基本不产生杂气，基本无刺激且余味干净舒适。
【具体实施方式】
[0014]下面结合【具体实施方式】对本发明做进一步详细说明。
[0015]实施例1。
[0016]取黑布林300克，放入蒸馏瓶，加入2400克水，浸泡4小时，在50°C下蒸馏3小时，冷却后，用200目滤网过滤得滤液，将滤液浓缩至300克，得粗提物。对粗提物进行淀粉、果胶含量测定。其中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，果胶含量测定按照咔唑比色法。按照粗提物中淀粉、果胶含量的0.5%、1.0 % (所述为重量百分比)分别加入淀粉酶、果胶酶，所用两 种酶的活力单位分别为:淀粉酶酶活I万u/ml，果胶酶酶活4万u/ml(均为国际标准单位)。在45°C条件下搅拌酶解24小时。然后，对酶解液加热至80°C，保持温度15分钟，冷却后，采用减压浓缩方法，将酶解液浓缩至100g，得酶解物。将酶解物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，层析所用填料为为聚酰胺树脂，用量为所述上清液质量的2倍，所述填料的径高比1:4，吸附流速为1.0 BV/h，洗脱流速为1.0 BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为60目。洗脱液经过减压浓缩至100g，即为黑布林提取物I。
[0017]实施例2。
[0018]取黑布林300克，放入蒸馏瓶，加入3000克水，浸泡4小时，在60°C下蒸馏4小时，冷却后，用200目滤网过滤得滤液，将滤液浓缩至300克，得粗提物。对粗提物进行淀粉、果胶含量测定。其中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，果胶含量测定按照咔唑比色法。按照粗提物中淀粉、果胶含量的1.0 %、2.0 % (所述为重量百分比)分别加入淀粉酶、果胶酶，所用两种酶的活力单位分别为:淀粉酶酶活2万u/ml，果胶酶酶活5万u/ml(均为国际标准单位)。在50°C条件下搅拌酶解48小时。然后，对酶解液加热至85°C，保持温度20分钟，冷却后，采用减压浓缩方法，将酶解液浓缩至100g，得酶解物。将酶解物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，层析所用填料为为聚酰胺树脂，用量为所述上清液质量的3倍，所述填料的径高比1:6，吸附流速为2.0 BV/h，洗脱流速为2.0 BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为70目。洗脱液经过减压浓缩至100g，即为黑布林提取物II。
[0019]实施例3。
[0020]取黑布林300克，放入蒸馏瓶，加入3600克水，浸泡4小时，在70°C下蒸馏5小时，冷却后，用150目滤网过滤得滤液，将滤液浓缩至300克，得粗提物。对粗提物进行淀粉、果胶含量测定。其中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，果胶含量测定按照咔唑比色法。按照粗提物中淀粉、果胶含量的1.5 %、3.0 % (所述为重量百分比)分别加入淀粉酶、果胶酶，所用两种酶的活力单位分别为:淀粉酶酶活3万u/ml，果胶酶酶活6万u/ml(均为国际标准单位)。在55°C条件下搅拌酶解72小时。然后，对酶解液加热至90°C，保持温度30分钟，冷却后，采用减压浓缩方法，将酶解液浓缩至100g，得酶解物。将酶解物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，层析所用填料为为聚酰胺树脂，用量为所述上清液质量的4倍，所述填料的径高比1:8，吸附流速为3.0 BV/h，洗脱流速为3.0 BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为80目。洗脱液经过减压浓缩至100g，即为黑布林提取物III。
[0021]将黑布林提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍。其中，有机溶剂可为丙二醇、山梨醇、木糖醇或甘油，或者其中任意2种以上的混合液。在制备卷烟前，将黑布林提取物1、I1、ΠΙ稀释液按照0.1%-1%的质量比例喷洒在烤烟烟叶表面。接着，按常规的卷烟工艺进行处理，即在喷施黑布林提取物的稀释液后，将烤烟烟丝贮存4小时，再经过切丝、烘丝、加香、贮丝、卷接和包装工序制成卷烟成品。
[0022]试验测试:将上述实施方式中制得的黑布林提取物1、I1、111均用50%丙二醇溶液稀释至10倍，然后喷洒在同一种中档空白(未加香加料)烤烟烟丝表面。各黑布林提取物均设定4种添加量进行试验(添加量为烟丝的0.1%、0.5%、0.8%、1.0%)。后续处理按常规的卷烟工艺进行，即在喷施黑布林提取物的稀释液后，将烤烟烟丝贮存4小时，再经过切丝、烘丝、加香、贮丝、卷接和包装工序制成卷烟成品。由8人组成的评吸小组分别对上述样品进行评吸对比，得到的总体感官试验结果如下表所示。其中，将空白样品的内在品质均设定为0，相对于空白样品内在品质有所改进(如香气增加，枯焦杂气减轻，烟气的甜润性提高，口感变好)，则相应得正分，分值越高，改进越好；相对于空白样品内在品质有所降低(如香气减少，枯焦杂气增加，烟气的甜润性减少，口感变差)，则相应得负分，负分越低，改进越差。
【权利要求】
1.一种黑布林提取物，由依次包括以下步骤的方法制得: ①提取:将黑布林加入其质量8~15倍的水，浸泡4小时，提取后得到提取液，冷却，使用150~200目的筛网过滤所述提取液得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得粗得物； ②酶解:按粗提物中淀粉和果胶的重量百分比加入复合生物酶，在45-55°C温度下酶解24-72小时； ③灭酶处理:将步骤②中酶解结束后的混合液加热到80~90°C保持15~30min进行酶灭活；将灭酶后的混合液过滤处理得滤液，将所述滤液减压浓缩，得酶解提取物； ④柱色谱分离:将步骤③中得到的酶解提取物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，用水和/或乙醇冲洗，收集洗脱液； ⑤浓缩:将步骤④中得到的洗脱液进行减压浓缩，所述浓缩后的粘稠状溶液即为黑布林提取物。
2.根据权利要求1所述的一种黑布林提取物，其特征在于:步骤①中所述提取是在50-70°C条件下蒸馏3-5小时。
3.根据权利要求1所述的一种黑布林提取物，其特征在于:步骤②中所述复合生物酶包括淀粉酶和果胶酶；其中淀粉酶的添加量为粗提物中淀粉重量的0.5-1.5%，果胶酶的添加量为粗提物中果胶重量的1-3%;所用淀粉酶的酶活为1-3万u/ml，果胶酶的酶活为4-6万u/ml ;粗提物中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，粗提物中果胶含量测定按照咔唑比色法。
4.根据权利要求1所述的一种黑布林提取物，其特征在于:所述步骤④中层析所用填料为聚酰胺树脂，用量为所 述上清液质量的I~5倍，所述填料的径高比1: 4~1: 10，吸附流速为0.5~4.0BV/h,洗脱流速为0.5~4.0BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为60~80目。
5.一种黑布林提取物的制备方法，依次包括以下步骤: ①提取:将黑布林加入其质量8~15倍的水，浸泡4小时，提取后得到提取液，冷却，使用150~200目的筛网过滤所述提取液得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得粗得物； ②酶解:按粗提物中淀粉和果胶的重量百分比加入复合生物酶，在45-55°C温度下酶解24-72小时； ③灭酶处理:将步骤②中酶解结束后的混合液加热到80~90°C保持15~30min进行酶灭活；将灭酶后的混合液过滤处理得滤液，将所述滤液减压浓缩，得酶解提取物； ④柱色谱分离:将步骤③中得到的酶解提取物离心，得到上清液，将上清液进行层析柱纯化，用水和/或乙醇冲洗，收集洗脱液； ⑤浓缩:将步骤④中得到的洗脱液进行减压浓缩，所述浓缩后的粘稠状溶液即为黑布林提取物。
6.根据权利要求5所述的一种黑布林提取物的制备方法，其特征在于:步骤①中所述提取是在50-70°C条件下蒸馏3-5小时。
7.根据权利要求5所述的一种黑布林提取物的制备方法，其特征在于:步骤②中所述复合生物酶包括淀粉酶和果胶酶；其中淀粉酶的添加量为粗提物中淀粉重量的0.5-1.5%，果胶酶的添加量为粗提物中果胶重 量的1-3% ;所用淀粉酶的酶活为1-3万u/ml，果胶酶的酶活为4-6万u/ml ;粗提物中淀粉含量测定按照盐酸水解-铜还原直接滴定法，粗提物中果胶含量测定按照咔唑比色法。
8.根据权利要求5所述的一种黑布林提取物的制备方法，其特征在于:所述步骤④中层析所用填料为聚酰胺树脂，用量为所述上清液质量的I~5倍，所述填料的径高比1: 4~1: 10，吸附流速为0.5~4.0BV/h，洗脱流速为0.5~4.0BV/h ;所述聚酰胺树脂的粒度为60~80目。
9.权利要求1所述的一种黑布林提取物在卷烟中的应用，其特征在于:将所述黑布林提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，按烟草物料质量的0.1%-1%喷洒于烟草物料中。
10.根据权利要求9所述的一种黑布林提取物在卷烟中的应用，其特征在于:所述有机溶剂为丙二醇、山梨醇、木糖醇和甘油中的一 种，或者其中任意两种以上的混合液。
【文档编号】A24B15/24GK103881815SQ201210560172
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2012年12月21日 优先权日:2012年12月21日
【发明者】邓宇, 蔡继宝, 田耀伟, 陶冶, 戴水平, 周平 申请人:江西中烟工业有限责任公司