专利名称：高质量的银杏叶提取物及制作工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及中成药制作工艺领域，特别适用于抑制血栓及扩张血管，保护大脑及器官移植排斥反应，减少心肌梗塞及气管过敏，抗休克及肿瘤以及对泌尿系统有一定作用的一种高质量的银杏叶提取物及制作工艺。
背景技术：
心血管疾病是目前人类最主要而且死亡率最高的疾病。银杏叶制剂在治疗心血管疾病上的重要作用越来越凸现出来。但目前银杏叶制剂只能作为辅助药剂，而且日服用量大(4-6片/日)，服用次数多，不方便，日服用价格偏高，极大的影响了该产品在临床上应有的作用。其主要原因就是目前银杏制剂的有效成份含量标准，采用的是1976年德国Schwabe AG制定的24/6(银杏黄酮甙24％，内酯6％)之标准。由于该标准的有效成份含量偏低，造成了疗效不显著，服用量大，价格偏高，而且只能作为辅助药(二线药)使用等诸多问题，这也是美国FDA始终未将其批准为处方药的原因。目前国际上已经有一些较高含量的产品出现，美国和加拿大有28/8含量的制剂，英国有30/10含量的制剂。
造成银杏叶含量偏低的原因是银杏叶中黄酮(0.45％-1.89％)和内酯(0.03％-0.37％)等有效成份含量低，提取工艺困难，限制了银杏制剂中有效成份的绝对含量。
国内外使用最为广泛的方法是树脂吸附纯化法，最高能得到含黄酮苷27.4％和银杏总内酯10.6％。超临界CO2提取法，中试装置和实验方法，所得的提取物中银杏黄酮含量为28％，银杏内酯含量为7.2％，但此方法的生产成本太高，不适宜工业化规模生产。实验阶段的方法有高速逆流色谱技术提取法，能提取高含量的纯品，供检测用。另有专利报道，可以用银杏叶粗提物(24/6)分离得高含量黄酮、内酯，但其中的超声波提取工艺只能限于实验室小试，在工业规模化生产上是不可实现的，而且只能从已有基础的银杏叶提取物粗品(24/6)开始。能从银杏叶开始，并适合工业规模化生产，产品质量能达到31-40％-11-15％的还未见报道。
国际国内的采用的离子柱法，都是一次性的将黄酮和内酯两种成份洗脱下来，所以含量不可调整，只能是固定的24/6或28/8，而且质量波动的现象很严重；在国际上越来越重视指纹图谱的今天，必需寻求一种有效的方法来解决这个问题。
发明内容
本发明的目的是提出一种新的、有效的提高银杏叶制剂的有效成份含量，充分发挥银杏制剂作用，且疗效明确，服用方便，日服用价格低，具有极大市场竞争力的高质量银杏叶提取物及制作工艺。
本发明的技术方案是这样解决的。
所述的高质量银杏叶提取物及其制作工艺，其特征在于a、银杏叶提取物组份银杏叶提取物的有效成份主要有黄酮甙和内酯两大类，银杏黄酮甙主要有槲皮素甙、山柰酚甙及异鼠李素；其内酯主要有A、B、C和白果内酯，具有二萜倍半萜结构。
银杏叶提取物组份为31-40％黄酮甙，11-15％内酯；b、制作工艺银杏叶以60％丙酮动态提取，减压浓缩，水沉，离心，上柱，离子交换柱采用混合树脂，通过混合树脂能有效的将黄酮和内酯两种成份分别洗脱，分别收集，再用化学方法对黄酮和内酯进行分别精制，使黄酮甙含量达到40-50％，内酯含量达到50-65％，按百分比含量将黄酮和内酯进行调配，使终产品的黄酮甙、内酯含量稳定的控制在31-40％/11-15％的质量标准上；工艺流程提取→浓缩→离心→离子交换柱分离→浓缩→干燥→装袋→成品；制作步骤银杏干叶，丙酮，动态提取两次，收集提取液，真空浓缩，水沉，静置过液；上清液于每分一万转的高速离心机中离心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗内酯；离心液过离子交换柱，离子交换柱由大孔树脂，与骤酰胺树脂混装，装柱前两种树脂混合均匀，混均后用碱液处理，离心液上柱达饱和后，先用少量工艺水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱内酯，与沉淀物中萃出的粗内酯合并；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉40％50％，内酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之标准规格的银杏干粉。
用市售银杏叶粗提物，银杏黄酮含量≤24％/内酯≤6％，离心液过离子交换柱，离子交换柱由大孔树脂，与骤酰胺树脂混装，装柱前两种树脂混合均匀，混均后用碱液处理，离心液上柱达饱和后，先用少量工艺水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱内酯，与沉淀物中萃出的粗内酯合并；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉40％～50％，内酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之标准规格的银杏干粉。
C、溶媒在制作工艺中，提取、分离步骤中所用的溶剂可以是丙酮、甲醇、乙醇、乙酸、乙酯。
上述方案中，所述的剂量及服用方法为片剂或胶囊，片(粒)重200mg，含银杏叶提取物(35/12)40mg，其中总黄酮甙14mg，银杏内酯4.8mg，一天一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
药理(1)抑制血栓，扩张血管银杏内酯是一血小板活化因子(PAF)的强竞争性拮抗剂。银杏内酯不仅预防该血小板因子诱导血栓形成，也加速血栓溶解。
银杏叶黄酮能舒张血管。其槲皮素、山柰酚及异鼠李素三个化合物具有扩张血管和解除痉挛作用。此外能扩张冠脉血管增加冠脉流量。
(2)减少心肌梗塞银杏内酯能阻止心肌衰退，抑制缺氧引起的冠状动脉收缩，明显地抑制心室纤维化作用和减少梗塞程度。
(3)保护大脑银杏提取物能改善脑的代谢，保护脑免受各种形式缺血引起的低氧损害。银杏内酯能促进穿透性大脑损伤的恢复，对大脑及血脑屏障有保护作用，并对脑代谢和神经递质有一定影响。
(4)减少气管过敏银杏内酯可阻止抗原引起的支气管收缩，对正常人的支气管收缩有部分保护作用。银杏内酯对各种气道过敏具有保护作用。
(5)对泌尿系统的作用银杏内酯能抑制PAF，内毒素及肌注甘油等引起鼠肾小球滤过速度和肾血流量的减少。
(6)抗休克作用休克是一个多因素参与的复杂病理过程，应用PAF特异性受体拮抗剂银杏内酯可较好地逆转多种休克状态，提高存活率。
(7)抗肿瘤作用银杏内酯A、B、C或单独用银杏内酯B可以应用于转移癌的治疗。它能提高抗癌化疗剂的效果，减少不良反应，使得耐细胞毒药物的癌细胞对化疗剂更为敏感有效。
(8)保护器官移植排斥反应银杏内酯可改善对肺的保护，有利于肺长期保存后的肺移植。银杏内酯可应用于肺移植的供体和受体中，使远距离肺移植成为可能药性甘、苦、涩，平。归心、肺经。
本发明充分发挥银杏制剂的作用，创造一套特殊工艺，工艺的最大特点是将黄酮甙和内酯分别洗脱，分别精制，按产品所需百分比要求进行调配，达到产品质量高，且稳定的结果。在中药制剂向国际化迈进的今天，通过调配方式满足恒定的指纹图谱，是尤为重要的工艺。
本发明把银杏叶制剂的有效成份含量从24/6(银杏黄酮甙24％，内酯6％)提高到35/12(银杏黄酮甙35％，内酯12％)的国际领先水平。高质量银杏叶制剂显著地提高了银杏产品的疗效，根据英国Morris公司的临床显示，一天只需一片(粒)。疗效提高了，服用方便了，患者日服一片的价格也大大低于24/6的4-6片(粒)，在临床使用上有一个质的飞跃。从而能使我国的银杏叶相关产业摆脱低水平重复、产品不稳定等因素造成的落后局面，使之有能力参与国际大市场竞争。本发明具有一箭双雕的作用，既能配出高质量银杏叶提取物，又能有效地控制质量波动问题，并通过多批次产品的共同调配，完全满足指纹图谱的需要，彻底摆脱中成药质量不稳定的局面，使中药在国际上树立起不败的地位。
具体实施例方式
，下面通过实施例进一步描述本发明，本发明不限于所述实施例。
施实例1(1)制作600公斤银杏干叶，3吨80％甲醇，动态提取两次，收集提取液，真空浓缩，水沉，静置过液；上清液于每分一万转的高速离心机中离心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗内酯；离心液过离子交换柱(离子交换柱由50％的大孔树脂HPD-600，与50％的骤酰胺树脂混装)，离心液上柱达饱和后，先用少量工艺水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱，洗脱液浓缩后与沉淀物中萃出的粗内酯合并，蒸馏水洗液的后部份弃之；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；洗脱下来的粗黄酮甙干粉含量在25％左右，粗内酯干粉含量在35％左右。粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉30％～42％，内酯干粉45％～55％。按32％/11％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，如调配(2)，充分混均，配成32％/11％之标准规格的银杏干粉。调配例见(2)。
(2)调配按100公斤银杏提取物干粉中含纯黄酮甙32公斤、纯内酯11公斤计，需40％的银杏黄酮粉32％÷40％＝80公斤需55％的内酯粉11％÷55％＝20公斤80公斤40％的黄酮粉加20公斤55％的内酯粉进行总混，成为100公斤含银杏黄酮甙32％和内酯11％的高规格银杏产品中间体。加辅料制成片(粒)重为200克，含银杏叶提取物40.00mg，其中含总黄酮甙元12.80mg，银杏总内酯4.40mg的制剂。
(3)组份上述工艺制成的产品组份为32％黄酮，11％内酯。
(4)剂量32/11的高质量银杏叶片，剂量为银杏叶提取物40.00mg，其中总黄酮甙元12.80mg，银杏总内酯4.40mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
施实例2(35/12)(1)制作600公斤银杏干叶，3吨60％丙酮，动态提取两次，收集提取液，真空浓缩，水沉，静置过液；上清液于每分一万转的高速离心机中离心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗内酯；离心液过离子交换柱(离子交换柱由50％的大孔树脂HPD-600，与50％的骤酰胺树脂混装，装柱前一定要注意两种树脂混合均匀，混均后用PH8的碱液处理)，离心液上柱达饱和后，先用少量水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱内酯，与沉淀物中萃出的粗内酯合并；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；洗脱下来的粗黄酮甙干粉含量在32％左右，粗内酯干粉含量在40％左右。粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉40％～50％，内酯干粉50％～65％。按35％/12％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成35％/12％之标准规格的银杏干粉。调配例见(2)。
(2)调配按100公斤银杏提取物干粉中含纯黄酮甙35公斤、纯内酯12公斤计，需45％的银杏黄酮粉35％÷45％＝78公斤需55％的内酯粉12％÷55％＝22公斤78公斤45％的黄酮粉加22公斤55％的内酯粉进行总混，成为100公斤含银杏黄酮甙35％和内酯12％的高规格银杏产品中间体。加辅料制成片(粒)重为200克，含银杏叶提取物40.00mg，其中含总黄酮甙元14mg，银杏总内酯4.8mg的制剂。
(3)组份上述工艺制成的产品组份为35％黄酮，12％内酯。
(4)剂量35/12的高质量银杏叶片，剂量为银杏叶提取物40.00mg，其中总黄酮甙元14.00mg，银杏总内酯4.80mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
施实例3(39/14)(1)制作市售银杏叶粗提物(银杏黄酮含量≤24％/内酯≤6％)25公斤，500公斤80％甲醇，加温60℃，搅拌至全溶，室温静置4小时；上清液于离心机中离心；离心液过离子交换柱 (离子交换柱由50％的大孔树脂HPD-600，与50％的骤酰胺树脂混装)，离心液上柱达饱和后，先用少量水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱、收集内酯；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；洗脱下来的粗黄酮甙干粉含量在38％左右，粗内酯干粉含量在48％左右。粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉45％～55％，内酯干粉55％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，将＞45％的黄酮甙干粉和＞55％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成39％/14％之标准规格的银杏干粉。调配例见(2)。
(2)调配按100公斤银杏提取物干粉中含纯黄酮甙39公斤、纯内酯14公斤计，
需50％的银杏黄酮粉39％÷50％＝78公斤需65％的内酯粉14％÷65％＝22公斤78公斤50％的黄酮粉加22公斤65％的内酯粉进行总混，成为100公斤含银杏黄酮甙39％和内酯14％的高规格银杏产品中间体。加辅料制成片(粒)重为200克，含银杏叶提取物40.00mg，其中含总黄酮甙元15.60mg，银杏总内酯5.60mg的制剂。
(3)组份上述工艺制成的产品组份为39％黄酮，14％内酯。
(4)剂量39/14的高质量银杏叶片，剂量为银杏叶提取物40.00mg，其中总黄酮甙元15.60mg，银杏总内酯5.60mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
权利要求
1.一种活血化瘀，通脉舒络的高质量银杏叶提取物及制作工艺，其特征在于a、银杏叶提取物组份银杏叶提取物的有效成份主要有黄酮甙和内酯两大类，银杏黄酮甙主要有槲皮素甙、山柰酚甙及异鼠李素；其内酯主要有A、B、C和白果内酯，具有二萜倍半萜结构。银杏叶提取物组份为31-40％黄酮甙，11-15％内酯；b、制作工艺银杏叶以60％丙酮动态提取，减压浓缩，水沉，离心，上柱，离子交换柱采用混合树脂，通过混合树脂能有效的将黄酮和内酯两种成份分别洗脱，分别收集，再用化学方法对黄酮和内酯进行分别精制，使黄酮甙含量达到40-50％，内酯含量达到50-65％，按百分比含量将黄酮和内酯进行调配，使终产品的黄酮甙、内酯含量稳定的控制在31-40％/11-15％的质量标准上；工艺流程提取→浓缩→离心→离子交换柱分离→浓缩→干燥→装袋→成品；制作步骤银杏干叶，丙酮，动态提取两次，收集提取液，真空浓缩，水沉，静置过液；上清液于每分一万转的高速离心机中离心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗内酯；离心液过离子交换柱，离子交换柱由大孔树脂，与骤酰胺树脂混装，装柱前两种树脂充分混合均匀，混均后用碱液处理，离心液上柱达饱和后，先用少量工艺水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱内酯，与沉淀物中萃出的粗内酯合并；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉40％～50％，内酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之标准规格的银杏干粉。用市售银杏叶粗提物，银杏黄酮含量≤24％/内酯≤6％，用有机溶剂溶解，离心液过离子交换柱，离子交换柱由大孔树脂，与骤酰胺树脂混装，装柱前两种树脂混合均匀，混均后用碱液处理，离心液上柱达饱和后，先用少量工艺水洗去部份杂质，再用乙酸乙酯洗脱内酯，与沉淀物中萃出的粗内酯合并；然后用丙酮洗脱黄酮甙；将洗脱液干燥，待处理；粗黄酮甙和粗内酯分别再用有机溶剂各精制一次，得黄酮甙干粉40％～50％，内酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，将＞40％的黄酮甙干粉和＞50％的内酯干粉各按百分比要求加入适当的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之标准规格的银杏干粉。C、溶媒在制作工艺中，提取、分离步骤中所用的溶剂可以是丙酮、甲醇、乙醇、乙酸、乙酯。
2.根据权利要求1所述的高含量银杏提取物及制作工艺，其特征在于剂量及服用方法为片剂或胶囊，片(粒)重200mg，含银杏叶提取物(35/12)40mg，其中总黄酮甙14mg，银杏内酯4.8mg，一天一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
全文摘要
一种活血化淤，通脉舒络的高质量银杏叶提取物及制作工艺，a.银杏叶提取物组份，银杏叶提取物组份为31－40％黄酮甙，11－15％内酯；b.制作工艺，银杏叶以60％丙酮动态提取，减压浓缩，水沉，离心，上柱，离子交换柱采用混合树脂，通过混合树脂能有效的将黄酮的内酯两种成分分别洗脱，分别收集，再用化学方法对黄酮和内酯进行分别精制，使黄酮甙含量达到40－50％，内酯含量达到50－65％，按百分比含量将黄酮和内进行调配，使终产品的黄酮甙、内酯含量稳定的控制在31－40％/1 1－15％的质量标准上；工艺流程提取→浓缩→离心→离子交换柱分离→浓缩→干燥→装袋→成品；c.溶媒。其疗效提高，降低了成本，使用方便，为患者提供了福音。
文档编号A61P7/00GK1602920SQ20041004035
公开日2005年4月6日 申请日期2004年8月3日 优先权日2004年8月3日
发明者石雁羽 申请人:石雁羽