专利名称：克拉霉素多晶型物的制备方法和新的多晶型物Ⅳ的制作方法
技术领域：
本发明涉及克拉霉素多晶型物II的制备方法，该方法是将克拉霉素多晶型物0在水中制浆。本发明还涉及克拉霉素多晶型物IV的制备方法。
通过在水中制浆，可以将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素。在不同的条件下，可以形成新的克拉霉素多晶型物，定义为IV型。本发明涉及所形成的克拉霉素多晶形物在药物组合物中的应用及其应用方法。
背景技术：
6-O-甲基红霉素A(克拉霉素)是与红霉素A有关的半合成大环内酯抗生素。克拉霉素对革兰氏阳性菌、某些革兰氏阴性菌、厌氧菌、支原体和衣原体具有出色的抗菌活性。它在酸性条件下稳定，并且是口服有效的。克拉霉素适用于治疗儿童和成人的上呼吸道感染。克拉霉素在酸性条件下稳定，并且是口服有效的。
克拉霉素的化学结构是
已经确定了几种结晶形式的克拉霉素和/或克拉霉素的溶剂化物″0型″、″I型″和″II型″，如在U.S.5,945,405中所述。克拉霉素的结晶形式通常通过粉末X-射线衍射图确定。不同结晶形式的克拉霉素可以具有不同的热稳定性、造价、溶解特征和生物可利用率。
已有报道，在专利文献中所述的克拉霉素的不同制备方法可以产生不同形式的克拉霉素。已有报道，将粗品克拉霉素纯化，使其从一种形式转化为另一种形式。例如，已有报道，通过从乙醇中重结晶以纯化化合物的方法得到最初形式的0型溶剂化物(参见U.S.专利5,945,405)或者得到最初形式的I型物质(参见U.S.5,858,986)。0型溶剂化物可以用作治疗剂，如在U.S.5,945,405中所述。′405号专利公开了通过在约0℃至约50℃的温度下干燥除去溶剂，可以将0型溶剂化物转化为非溶剂化的I型物质。据报道，与I型相比，另一种形式-II型是热动力学相对稳定的。目前在美国以商标Biaxin出售的克拉霉素是用II型物质配制的。
已经描述了几种将克拉霉素从0型或I型转化为II型的方法。其中一种方法，如在U.S.4,945,405和U.S.5,858,986中所述的，是在真空下、在约70℃至110℃之间，将0型物质加热。按照该专利，首先将0型溶剂化物转化为I型克拉霉素，然后转化为II型克拉霉素。该方法描述于U.S.4,945,405和U.S.5,858,986中。然而，无论是在能源还是原料处理上，从0型转化至II型的该真空干燥步骤都是昂贵的。已有报道，当I型克拉霉素从各种溶剂包括乙醇和水中结晶时，形成了II型克拉霉素(US5,844,105)。
发明内容
本发明涉及通过将0型克拉霉素在水中制浆而制备多晶形克拉霉素的方法。通过在水中制浆，可以将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素。
在不同条件下，可以形成新的多晶形克拉霉素，即IV型。该条件例如包括在低温下用氢氧化钠中和克拉霉素与甲酸的盐的条件下，从乙醇水溶液中沉淀。
本发明涉及所形成的克拉霉素多晶形物在药物组合物中的应用及其使用方法。
本发明涉及将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素的方法，该方法包括将0型克拉霉素在水中制浆。本发明还涉及通过将红霉素A转化为克拉霉素、然后通过制浆将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素制备II型克拉霉素的方法。
此外，本发明涉及新的多晶形克拉霉素，即IV型克拉霉素，其制备方法，含有IV型克拉霉素的药物组合物以及用IV型克拉霉素作为治疗剂的方法。
可以通过粉末X-射线衍射图谱确定IV型克拉霉素的特征，IV型克拉霉素具有以下特征峰7.6°±0.2，8.1°±0.2，9.4°±0.2，11.0°±0.2，12.0°±0.2，15.4°±0.2，16.5°±0.2，18.7°±0.2，和19.3°±0.2.
图1显示了IV型克拉霉素6-O-甲基红霉素A的粉末X-射线衍射图谱。
具体实施例方式
我们发现，通过简单地将0型克拉霉素在水中制浆，0型克拉霉素转化为II型。与先前所述的0型至II型的转化方法相比，本发明0型克拉霉素转化为II型克拉霉素的方法更简单并且更便宜，先前所述的方法需要例如在高温下进行长时间的加热。
在不同的条件下，形成新的多晶形克拉霉素，我们称之为″IV型″。我们的IV型克拉霉素可以如先前已知形式的克拉霉素一样使用。可以将其配制成包括治疗有效量IV型克拉霉素与一种或多种可药用载体的药物组合物。那些药物组合物可以作为治疗有效的抗生素给药。本发明的每一方面将在下文中作更详细的描述。
除非另外指明或者根据上下文需要，术语″6-O-甲基红霉素A″与″克拉霉素″在本文中可以互换使用，并且是指包括任何结晶形式或其混合物的克拉霉素，以及含有任何纯度6-O-甲基红霉素A的无定形固体、糖浆或半固体。
本文所用术语″0型″是指6-O-甲基红霉素A的0型结晶或0型溶剂化物。0型溶剂化物是通过下列粉末X-射线衍射图谱中的2-θ角位置确定其特征的4.6°±0.2，6.5°±0.2，7.6°±0.2，9.2°±0.2，10.2°±0.2，11.0°±0.2，11.6°±0.2，12.5°±0.2，13.8°±0.2，14.8°±0.2，17.0°±0.2，18.2°±0.2，18.9°±0.2和19.5°±0.2.该图谱根据溶剂可以有一些改变。例如0型乙醇化物可以由下列2-θ角位置确定其特征4.7°±0.2.
6.6°±0.2，7.7°±0.2，9.3°±0.2，10.4°±0.2，11.1°±0.2，11.9°±0.2，12.7°±0.2，13.9°±0.2，15.0°±0.2，17.2°±0.2，18.5°±0.2，19.1°±0.2，19.7°±0.2，23.1°±0.2和24.0°±0.2.本文所用术语″I型″是指克拉霉素的I型结晶。I型结晶是通过下列粉末X-射线衍射图谱中的2-θ角位置确定其特征的5.2±0.2，6.7±0.2，10.2°±0.2，12.3±0.2，14.2°±0.2，15.4°±0.2，15.7°±0.2，和16.4±0.2.还通过差示扫描量热法在132.2℃的放热转换、以及在223.4℃和283.3℃的吸热峰、然后是在306.9℃的放热峰确定I型结晶的特征。
本文所用术语″II型″是指克拉霉素的II型结晶。II型结晶是通过下列粉末X-射线衍射图谱中的2-θ角位置确定其特征的8.5°±0.2，9.5±0.2，10.8°±0.2，11.5±0.2，11.9±0.2，12.4±0.2，13.7°±0.2，14.1°±0.2，15.2±0.2，16.5±0.2，16.9°±0.2，17.3°±0.2，18.1±0.2，18.4°±0.2，19.0°±0.2，19.9±0.2，和20.5±0.2.还通过在223.4℃熔融、以及通过差示扫描量热法在283.3℃的吸热峰确定II型结晶的特征。
II型克拉霉素的形成本发明涉及将0型克拉霉素化为II型克拉霉素的方法，该方法包括将0型克拉霉素在水中制浆。本发明还涉及由红霉素A制备II型克拉霉素的方法，该方法包括将0型克拉霉素在水中制浆。在一个具体实施方案中，该方法包括首先将红霉素A转化为克拉霉素，然后将0型克拉霉素在水中制浆形成II型克拉霉素。有几种方法可以由红霉素A形成克拉霉素，如下文进一步所述。在其中一些方法中，克拉霉素最初的形成形式是0型。在其他方法中，克拉霉素最初的形成形式不是0型，而是其他形式，这些形式随后转化为0型。
本文所用术语″制浆″是包括在液体、优选水中搅拌颗粒。
在本发明中，例如通过用乙醇处理克拉霉素、过滤并用乙醇洗涤沉淀，得到克拉霉素的湿固体。该湿固体在水中、优选在室温制浆1小时。制浆步骤可以包括搅拌克拉霉素与水。
通过制浆，由0型克拉霉素转化为II型克拉霉素之后，可以将所得晶状II型克拉霉素分离，优选通过过滤并在烘箱、优选在真空烘箱中，在室温至约70℃、优选约40℃至约60℃、更优选约50℃下干燥进行分离。优选的是，在真空下进行干燥。
在包括本文所述的0型转化为II型的任何实施方案的制浆步骤中，将0型克拉霉素在每克0型克拉霉素约2至约25毫升水中制浆。更优选的是，将0型克拉霉素在每克0型克拉霉素约3至约10毫升水中制浆。最优选的是，将0型克拉霉素在每克0型克拉霉素约5毫升水中制浆。
出于本说明书的目的，室温是约20℃至约25℃。
本文所用术语″处理″是指克拉霉素的悬浮、溶解、洗涤、混合、结晶或从任何上述溶剂中重结晶。
如上所述，本发明II型克拉霉素的制备方法可以包括首先将红霉素A转化为克拉霉素，之后将0型克拉霉素与水制浆形成II型克拉霉素。红霉素A向克拉霉素的转化可以按照本领域专业人员常用的任何方法进行。通常，通过将红霉素A的6-羟基甲基化制备克拉霉素。然而，在转化过程中需要保护各基团，特别是红霉素A位置上的羟基，该羟基可能在6-羟基烷基化之前与烷基化试剂进行反应。克拉霉素制备方法的实例描述在例如U.S.4,331,803、4,670,549、4,672,109、4,990,602、5,858,986、5,844,105和5,945,405中，这些文献均全文结合在本文中作为参考。例如U.S.4,990,602和5,858,986描述了从红霉素A制备克拉霉素的方法，其中用取代的肟基保护9-氧代基，保护C-2′和C-4″羟基，将C-6羟基甲基化和脱肟化以及除去保护基。还可以使用已有的或将来会有的将红霉素A转化为克拉霉素的各种其他方法。
通过将0型制浆形成的II型克拉霉素本发明还涉及由0型克拉霉素在水中制浆制备的II型克拉霉素，以及包括由0型克拉霉素在水中制浆制备的II型克拉霉素的药物制剂。
本实施方案的药物组合物包括治疗有效量的由0型克拉霉素在水中制浆制备的II型克拉霉素或其可药用盐与一种或多种可药用载体。该组合物可以如下述的含IV型克拉霉素组合物一样给药。
IV型克拉霉素本发明一方面提供了新的被定义为IV型的多晶形克拉霉素或其可药用盐。该新的克拉霉素形式的粉末X-射线衍射图谱具有以下2θ特征峰7.6°±0.2，8.1°±0.2，9.4°±0.2，11.0°±0.2，12.0°±0.2，15.4°±0.2，16.5°±0.2，18.7°±0.2，和19.3°±0.2图1所示为本发明范围内IV型克拉霉素化合物的X-射线衍射图谱。
包括IV型克拉霉素的药物组合物本发明另一方面提供了药物组合物，其中包括治疗有效量的IV型克拉霉素或其可药用盐以及一种或多种可药用载体。
除非另外指明，本文所用术语″IV型克拉霉素″是指包括IV型克拉霉素以及含有任何纯度IV型克拉霉素的固体、糖浆或半固体。
本发明的药物组合物通过合理医学判断内任何可接受的途径对人或其他动物给药，例如口服、经直肠、非肠道、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(例如以粉末、软膏或滴剂形式)、经颊或者经口腔或鼻喷雾给药。本发明药物组合物优选配制成口服的固体或液体形式、非肠道注射液形式或直肠给药形式。
本文所用术语″非肠道″给药是指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输注的给药方式。
本发明非肠道注射的药物组合物包括例如可药用的无菌水溶液或非水溶液、分散液、悬浮液或乳液以及在临用前配制成无菌注射溶液或分散液的无菌粉末。合适的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和聚乙二醇等)及其适当的混合物、植物油(例如橄榄油)和可注射有机酯例如油酸乙酯。例如，通过使用包衣材料如卵磷脂，如果是分散液则通过保持所需的粒度，以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。
本发明的药物组合物还可以含有一种或多种辅剂例如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。通过包括各种抗菌剂和杀真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚和山梨酸等，可以确保预防微生物的作用。在本发明的药物组合物中还可以包括一种或多种等渗剂例如糖和氯化钠等。通过包括延迟吸收的物质例如一硬脂酸铝和明胶可以使可注射药物剂型延迟吸收。
在某些情况下，为了延长IV型克拉霉素的作用，希望减缓IV型克拉霉素皮下或肌内注射的吸收。这例如可以通过使用水溶性差的结晶或非晶形物质的液体悬浮液实现。因此，IV型克拉霉素的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又取决于结晶大小和结晶形式。或者，通过将IV型克拉霉素溶解或者悬浮在油状赋形剂中，可以延迟非肠道给药的IV型克拉霉素的吸收。
通过在生物可降解聚合物例如聚交酯-聚乙醇酸交酯中形成IV型克拉霉素的微囊基质，制成可注射的药物储库形式。根据药物与聚合物的比例以及所用特定聚合物的性质，可以控制IV型克拉霉素的释放速度。其他可生物降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还可以通过将IV型克拉霉素包封在脂质体或者与机体组织相容的微乳液中，制备可注射的药物储库制剂。
可以将可注射制剂灭菌，例如，通过细菌保留滤器过滤，或者通过掺入无菌固体组合物形式的杀菌剂，该制剂可以在临用前溶解或者分散在无菌水或其他无菌可注射介质中。
口服固体剂型包括胶囊、片、丸、粉末和颗粒。在该固体剂型中，将IV型克拉霉素与至少一种惰性可药用赋形剂或载体混合，该药物赋形剂或载体包括柠檬酸钠或磷酸二钙和/或a)填充剂或增量剂例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)致湿剂例如甘油，d)崩解剂例如琼脂、碳酸钙、土豆淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液延缓剂例如石蜡，F)吸收促进剂例如季铵化合物，g)润湿剂例如鲸蜡醇和甘油一硬脂酸酯，h)吸收剂例如高岭土和膨润土，和i)润滑剂例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物。对于胶囊、片剂和丸剂，该剂型中还可以包括缓冲剂。
类似形式的固体组合物还可以用作软和硬填充明胶胶囊的填充剂，该制剂使用赋形剂例如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等。
可以使用包衣和壳例如肠溶衣和药物制剂领域公知的其他包衣制备片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒这样的固体剂型。它们可以任选地含有不透明剂，并且还可以配制成使IV型克拉霉素仅仅或者优先在肠道的某些部位释放，任选地以延迟的方式释放。可以使用的包埋组合物包括聚合物和蜡。
如果需要，活性化合物还可以用一种或多种赋形剂例如上述赋形剂制成微胶囊形式。
口服液体剂型包括可药用乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了IV型克拉霉素之外，液体剂型可以含有该领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、加溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇脂肪酸酯及其混合物。
本发明的口服组合物还可以包括一种或多种辅剂例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
悬浮液除了含有活性化合物之外，可以含有悬浮剂例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧化乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、aluminummetahydroxide、膨润土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。
直肠或阴道给药组合物优选栓剂，可以通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合进行制备，这些赋形剂或载体在室温为固体、而在体温为液体，因此在直肠或阴道腔中融化，并释放出IV型克拉霉素。
本发明化合物还可以以脂质体形式给药。正如本领域所知的，脂质体通常是由磷脂或其他类脂物质产生的。脂质体由分散在含水介质中的单层或多层水合液晶形成。可以使用任何无毒、生理可接受并且可代谢的能形成脂质体的脂质。除了本发明化合物之外，该脂质体形式的组合物可以含有稳定剂、防腐剂和赋形剂等。优选的脂质是磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，可以是天然的和合成的。形成脂质体的方法是本领域已知的。参见例如Prescott，Ed.，Methods in Cell Biology，卷XIV，AcademicPress，New York，N.Y.(1976)，33页以及下列。
本发明化合物的局部给药剂型包括粉末、喷雾剂、软膏和吸入剂。在无菌条件下，根据需要，将IV型克拉霉素与可药用载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用制剂，即眼用软膏、粉末和溶液也包括在本发明范围内。
使用IV型克拉霉素作为治疗剂的方法6-O-甲基红霉素适于用作抗菌剂。克拉霉素对于治疗感染是尤为有效的，特别是通过口服给药，因此它是有用的抗菌剂。
因此，本发明一方面提供了IV型克拉霉素或其可药用盐作为治疗剂的方法。尤其是，本发明的一个具体实施方案是治疗需要该治疗的哺乳动物细菌感染的方法，该方法包括对哺乳动物施用治疗有效量的IV型克拉霉素。
IV型克拉霉素在本发明组合物中的实际剂量可以改变，以获得对特定患者、组合物和给药方式能有效达到所需治疗反应的IV型克拉霉素的量。剂量的选择取决于各种因素，例如特定化合物的活性、给药途径、所治疗病症的严重程度、患者的身材大小和病症以及接受治疗患者的继往病史。当然，本领域专业人员可以从低于达到所需疗效的剂量开始使用IV型克拉霉素，并逐渐增加剂量直至达到所需的效果。因此，适当的治疗有效量可以由医生、兽医或其他在确定适当治疗剂量方面有经验的健康保护专业人员确定。
IV型克拉霉素的制备方法本发明的另一具体实施方案提供了IV型克拉霉素的制备方法，该方法包括将红霉素A转化为IV型克拉霉素。
如上所述，通常通过将红霉素A的6-羟基甲基化制备克拉霉素。在转化过程中需要保护各基团，特别是红霉素A2′和4″位的羟基。例如U.S.4,990,602和5,858,986描述了从红霉素A制备克拉霉素的方法，其中将C-9羰基肟化，保护C-2′和C-4″羟基，将C-6羟基甲基化并脱肟化以及除去保护基。
在红霉素A转化为IV型克拉霉素的方法中，首先将红霉素A转化为在2′和/或4″位具有保护基的肟形式红霉素A，例如6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟。该肟是按照本领域通常已知的方法制备的。6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟是在肟上具有2-甲氧基丙-2-基取代基并且在2′和4″位具有甲硅烷基保护基的肟形式红霉素A。该肟可以被例如不是2-甲氧基丙-2-基的烷氧基烷基取代，并且2′和/或4″位可以例如用保护基如不是三甲基甲硅烷基的甲硅烷基取代。在2′和4″位合适的保护基的实例包括例如三取代的甲硅烷基、酰基、烷基羰基、烷氧羰基、低级烯基一羰基、低级烷氧羰基、烷基羰基或芳基羰基或者该领域已知的其他基团，包括例如在U.S.5,837,829中列举的那些。肟可以用本领域已知的基团保护，例如在U.S.4,990,602或5,837,829中列举的那些，上述专利结合在本文中作为参考。
如上所述，当6位甲基化时，在6-羟基烷基化过程中，保护基保护各个位置以防止可能发生的与烷基化试剂的反应。尽管按照本领域专业人员已知的任何方法均可以将红霉素A转化为被保护的肟，例如6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟，但是在优选的方法中，首先将红霉素A肟化，然后将保护基加到2′和4″位上。
在U.S.5,858,986和4,990,602中说明了适宜的肟化和加保护基的方法，其中教导了本发明可以使用的一般肟化方法，例如将红霉素A与取代的羟胺R1ONH2反应，或者在碱存在下将红霉素A与羟胺盐酸盐反应，或者在酸存在下将红霉素A与羟胺反应，然后与R1X反应，其中R1烷氧基烷基。U.S.5,858,986和4,990,602还描述了用甲硅烷基保护两个羟基(即2′和4″位)的适宜方法。该两个羟基可以同时保护或者采用彼此不同的步骤保护。
然后通过用酸和脱肟剂处理，使6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟(或者其他保护起来的肟)脱去保护基和脱肟化，得到克拉霉素。本发明所用合适的脱肟剂的实例包括无机氧化硫化合物例如亚硫酸氢钠、焦硫酸钠、硫代硫酸钠、亚硫酸钠、连二亚硫酸钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸氢钠、连二硫酸钠、亚硫酸氢钾、硫代硫酸钾和偏亚硫酸氢钾等。特别优选的脱肟剂是偏亚硫酸氢钠和亚硫酸氢钠等。脱保护可以在脱肟化之前发生，或者通过用酸例如甲酸和脱肟剂处理，脱保护与脱肟化可以在单一步骤(″单罐″合成)中完成。
6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟、酸、脱肟剂和水溶液(优选乙醇水溶液)的混合物在回流下搅拌足以基本上完成反应的时间。然后将该混合物冷却至约0℃，并在此温度加入氢氧化钠溶液(浓度为约20％至约48％，优选约48％)直至反应混合物的pH值达到大于8、优选大于10、最优选约10至约11。然后分离结晶的克拉霉素，优选经过滤分离。然后将湿的物质转入反应器中，在约室温和搅拌下用约1小时加入水。然后过滤固体，用水洗涤，并在烘箱中干燥，得到IV型克拉霉素。在烘箱中的干燥优选在室温至约50℃的温度进行，更优选在约40-50℃的温度下进行，更优选的是在约50℃进行。优选在真空烘箱中进行干燥。
提供以下实施例以使本领域专业人员能够实施本发明，并且这些实施例仅用于说明本发明。这些实施例不应理解为限制权利要求书中所定义的本发明的范围。
实施例1在回流下，将克拉霉素(5g，分析～95％)溶解在60毫升乙醇中。然后将该溶液冷却至约10℃，滤出沉淀，用5毫升冷乙醇洗涤。得到6克湿的固体，其粉末X-射线衍射分析(PXRD)表明为0型克拉霉素结晶。
在室温和搅拌下，将所得产物在25毫升水中制浆约1小时，然后滤出固体物质。对该湿产物进行粉末X-射线衍射分析，测定该产物为II型多晶形物。该产物在约50℃真空干燥。终产物为4.5克纯的II型多晶形克拉霉素(分析超出98％)。
实施例2向6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟(40g)、乙醇(120ml)、水(120ml)和偏亚硫酸氢钠(40.8g)的混合物中加入甲酸(2.8ml)，然后将该混合物加热回流。在回流下继续搅拌4小时。然后将该混合物冷却至约0℃。在此温度加入氢氧化钠溶液(47％)直至反应混合物的pH达到约11。滤出形成的沉淀，用160毫升水洗涤两次。将湿的物质转入反应器中，在室温加入4倍体积的水并搅拌约1小时。滤出固体，用水(130ml)洗涤，并在50℃真空干燥，得到26克IV型克拉霉素。
实施例2所示为本发明的一个具体实施方案，其中包括了IV型6-O-甲基红霉素A的制备方法。很显然，根据上述公开，本领域专业人员可以使用类似的方法，只要所得产物是IV型6-O-甲基红霉素A，其中根据例如产物的有效性或制造或成本的约束等因素，使用了不同的脱肟剂、酸等和/或与该实施例中所例举的不同的用量。类似地，显而易见，只要所得产物是IV型6-O-甲基红霉素A，本领域专业人员可以在上述典型方法中增加步骤，例如另外的纯化步骤。
实施例1所示为本发明的一个具体实施方案，其中包括了通过制浆将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素。很显然，根据上述公开，本领域专业人员可以使用类似的方法，只要所得产物是II型克拉霉素，其中方法参数可以不同于该实施例中所用的那些，例如采用不同的量、温度、分离技术等。
本发明提供了通过在水中制浆将0型克拉霉素转化为II型克拉霉素的方法，包括通过制浆由0型克拉霉素制备的II型克拉霉素的药物组合物，IV型克拉霉素，包括IV型克拉霉素的药物组合物，使用IV型克拉霉素的治疗方法以及IV型克拉霉素的制备方法。
尽管本发明已经结合某些示例性实施方案进行了描述，但是上述具体实施方案仍然有许多变化，这对于本领域专业人员来说是显而易见的，尽管没有以例证的方式对其中的要素或步骤进行详述。应该理解，这些变化均包括在本发明的教导之内。
权利要求
1.IV型克拉霉素，其特征在于粉末X-射线衍射的2θ值为7.6°±0.2，8.1°±0.2，9.4°±0.2，11.0°±0.2，12.0°±0.2，15.4°±0.2，16.5°±0.2，18.7°±0.2，和19.3°±0.2。
2.一种药物组合物，其含有治疗有效量的IV型克拉霉素与至少一种可药用载体。
3.权利要求2的药物组合物，其中该组合物是粉末形式。
4.权利要求2的药物组合物，其中该组合物是悬浮液形式。
5.权利要求2的药物组合物，其中该组合物是软膏形式。
6.IV型克拉霉素在制备对需要治疗的哺乳动物进行细菌感染治疗所用药物中的用途。
7.权利要求6的用途，其中IV型克拉霉素通过选自下列的方法对所述哺乳动物给药口服、直肠、非肠道、脑池内、阴道内、腹膜内、局部、经颊和鼻。
8.IV型克拉霉素的制备方法，其包括(a)将红霉素A转化为红霉素A肟，其具有一个或多个在肟上的保护基、以及在2′和4″位之一或两者上的具有保护基；(b)将红霉素A肟与水溶液、脱肟剂和甲酸混合；(c)在回流温度下加热步骤(b)中形成的混合物，时间足以完成脱肟反应；(d)将步骤(c)的混合物冷却至0℃；和(e)向步骤(d)的混合物中加入氢氧化钠溶液直至混合物的pH达到大于8。
9.权利要求8的方法，其中脱肟剂是偏亚硫酸氢钠。
10.权利要求8的方法，其中步骤(b)中的水溶液是乙醇水溶液。
11.权利要求8或10的方法，其中在步骤(e)中加入氢氧化钠溶液直至混合物的pH达到大于10。
12.权利要求8或10的方法，其中在步骤(e)中加入氢氧化钠溶液直至混合物的pH达到10至11。
13.权利要求8的方法，其还包括在加入氢氧化钠溶液后分离步骤(e)中结晶的克拉霉素。
14.权利要求13的方法，还包括干燥所述克拉霉素，得到IV型克拉霉素。
15.权利要求8的方法，其在步骤(e)之后还包括以下步骤(f)从步骤(e)的混合物中分离结晶的克拉霉素，(g)将步骤(f)的克拉霉素转入反应器中，并用水在室温下处理该混合物，(h)过滤并用水洗涤步骤(g)的克拉霉素，和(i)干燥步骤(h)的克拉霉素，得到IV型克拉霉素，其中步骤(b)中的水溶液是乙醇水溶液。
16.权利要求15的方法，其中脱肟剂是偏亚硫酸氢钠。
17.权利要求15的方法，其中步骤(i)的干燥在室温至50℃的温度下进行。
18.权利要求15的方法，其中步骤(i)的干燥在真空烘箱中进行。
19.权利要求15的方法，其中步骤(a)中的6-O-甲基红霉素A肟是6-O-甲基-2′，4″-二(三甲基甲硅烷基)红霉素A 9-O-(2-甲氧基丙-2-基)肟。
20.权利要求19的方法，其中脱肟剂是偏亚硫酸氢钠。
21.权利要求19的方法，其中步骤(i)的干燥在室温至50℃的温度下进行。
22.权利要求19的方法，其中步骤(i)的干燥在真空烘箱中进行。
全文摘要
本发明涉及O型克拉霉素转化为II型克拉霉素的方法，包括将O型克拉霉素在水中制浆。本发明还涉及II型克拉霉素的制备方法，该方法是将红霉素A转化为克拉霉素，然后通过制浆将O型克拉霉素转化II型克拉霉素。本发明还涉及新的IV型克拉霉素、其制备方法、含有该化合物的药物组合物以及使用该化合物作为治疗剂的方法。
文档编号A61P31/04GK1666991SQ20051000448
公开日2005年9月14日 申请日期2000年12月15日 优先权日1999年12月16日
发明者I·阿夫鲁托夫, I·利夫施茨, R·博罗乔维茨, B·马萨瓦, E·施瓦茨 申请人:特瓦制药工业有限公司