专利名称：一种复方黄藤素冻干粉针剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种包含黄藤素、鱼腥草挥发油包合物的药物组合物及其制备方法和应用，本发明制剂又称复方黄藤素冻干粉针剂。
背景技术：
黄藤素是由防己科植物黄藤(Fibranrea recisa)的藤茎和根提取的总生物碱，主要为掌叶防己碱(palmatine)，尚含有小蘖碱，其药理作用为对多种革兰氏阳性和阴性菌有抑制作用，并具有增强白细胞巨噬能力的作用。目前已有片剂、注射液、胶囊剂及栓剂，具有清热解毒功效，用于治疗上呼吸道感染、扁桃体炎、肠炎、痢疾、泌尿道感染、外科及妇科细菌感染性炎症等。
鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜(Houttuyniacordata Thunb)的全草，主要有效成分为鱼腥草挥发油，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋等功效，主治肺脓疡，痰热咳嗽，白带，尿路感染，痈疖等症。鱼腥草及其制剂因具有抗菌、抗病毒、抗过敏、抗肿瘤、抗炎止痛、增强机体免疫功能、抗钩端螺旋体、利尿等作用而广泛应用于临床的呼吸系统疾病、消化系统疾病、泌尿系统疾病、妇科疾病、五官科疾病、肿瘤疾病和水痘、带状疱疹、腮腺炎、银屑病等其他疾病。
在资料检索中未发现有以黄藤素、鱼腥草挥发油组方的药物组合物的任何报道。
发明内容
在研究中我们发现，将黄藤素和鱼腥草挥发油合用，能发挥协同增效作用，显著增强黄藤素制剂的药理作用，且药理作用更加全面，经反复试验和研究，我们优选了黄藤素和鱼腥草挥发油的最佳组方用量和比例，并将鱼腥草挥发油进行包合，包合物和黄藤素加适宜药用辅料，制备成本发明复方黄藤素冻干粉针剂。药理实验证明，本发明复方黄藤素冻干粉针剂药理作用显著。
本发明的目的是公开一种稳定性好、药效更加显著的药物组合物，即复方黄藤素冻干粉针剂。
本发明的另一个目的是公开了上述复方黄藤素冻干粉针剂的制备方法。
本发明还公开了上述复方黄藤素冻干粉针剂在治疗妇科炎症、菌痢、肠炎、呼吸道及泌尿道感染、外科感染、眼结膜炎等病症中的应用。
本发明通过以下技术方案实现一、工艺制法(1)鱼腥草挥发油包合方法一取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加适量水，加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10-20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌2-4小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
方法二取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加适量水，加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10-20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡45-90分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素1-2重量份，鱼腥草挥发油包合物0.5-4重量份，药用辅料3-5.5重量份。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入药用辅料，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
本发明所述黄藤素系用黄藤根茎采用文献2(黄祖良等。从黄藤中提取黄藤素工艺的改进.基层中药杂志.2001，15(3)17-18)方法提取、精制得到的结晶，黄藤素含量＞97％。
本发明所述鱼腥草挥发油为由中药鱼腥草经水蒸气蒸馏或超临界萃取提取得到的挥发油类成分。
随着黄藤素的开发利用，黄藤的野生药用原料的采挖已经使原料药资源出现短缺。本发明将黄藤素与鱼腥草挥发油组方，一方面可以增强黄藤素制剂的药效，另一方面可以减少黄藤素的用量，能使有限资源发挥出更大的作用，不仅对保护资源有利，而且能使更多的患者受益。
鱼腥草挥发油为从鱼腥草中提取得到的挥发油类成分，该类成分在水中溶解性差，且挥发油类成分具有一定挥发性，稳定性差，本发明将鱼腥草挥发油用羟丙基-β-环糊精进行了包合，羟丙基-β-环糊精为水溶性的包合物，用其包合的挥发油成分制成的粉针剂在溶液中溶解性好，注射时吸收好，生物利用度高，患者痛感小，易于被患者愉快的接受；而且用羟丙基-β-环糊精对挥发油进行包合，使其在制备、贮藏、运输的过程中不易挥发，不易被空气氧化而变质，增加了挥发油的稳定性，提高了制剂的质量和疗效。
二、稳定性试验为了进一步比较包合工艺对鱼腥草挥发油的稳定性的影响，将本发明复方黄藤素冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)与鱼腥草挥发油(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)分别置常温下考察，其中鱼腥草挥发油密封置安瓶中，以甲基正壬酮含量为指标进行考察。
甲基正壬酮的测定方法以聚乙二醇-20M为固定液。涂布浓度为10％；柱温为120±5℃；理论塔板数按甲基正壬酮峰计算，不得低于1000，取甲基正壬酮对照品加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作对照品溶液。取样品，置圆底烧瓶中，加水25ml，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分，再加乙酸乙酯3ml，连接回流冷凝管。加热回流2h，停止加热，放置片刻，分取乙酸乙酯层，测定器再用乙酸乙酯洗涤3次，每次2ml，合并洗涤液，置蒸发器中60℃水浴，通氮气蒸至将干，定量转移至2ml量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各4μl，注入气相色谱仪，计算，即得。检测分析结果见表1(以0月含量为100％计)表1 稳定性试验甲基正壬酮含量变化结果(％)
以上实验结果表明本发明将鱼腥草挥发油用羟丙基-β-环糊精包合后稳定性明显提高，有利于制剂的质量控制。
三、药理实施例为了充分说明本发明制剂处方的选择具有科学性、合理性，本发明研究人员以黄藤素注射液为对照，对本发明制剂进行了药效学研究。
试药与动物本发明复方黄藤素冻干粉针剂(由广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；黄藤素注射液(云南植物药业有限公司)；生理盐水(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；健康昆明系小鼠，体重18-22g，雌雄各半；Wistar大鼠，体重180-220g，雌雄各半(均由广东省实验动物中心提供)；金黄葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、霉菌、淋球菌(均由广州疾病预防中心提供)。
1.抗菌试验1.1体外抑菌试验取直径6mm的滤纸片，放入药物溶液(配置成相应临床用药浓度)中浸泡16h，120℃下湿热灭菌备用，将上述供试菌液各取0.5ml与相应固体培养基，在超净工作台内制成含菌平板，取含浸出汁的滤纸片贴在含菌平板上，每皿贴5片，每菌做3次重复，细菌置37℃生化培养箱内培养48h，测定24h、48h后滤纸片的抑菌圈大小，比较抑菌效果，结果见表2。
表2 对供试菌种的抑制效果供试菌种 黄藤素注射液本发明复方黄藤素冻干粉针剂抑菌直径(mm)抑菌直径(mm)24h48h 24h48h金黄葡萄球菌10.0 10.0 11.0 11.5大肠杆菌8.07.5 8.58.5肺炎杆菌8.58.5 9.59.0痢疾杆菌6.56.0 7.57.0绿脓杆菌7.57.0 8.08.0霉菌6.56.0 7.06.5淋球菌 5.56.0 6.06.5上述抑菌实验结果表明，本发明的复方黄藤素冻干粉针剂与黄藤素注射液相比具有更好的抗菌作用。
1.2对真菌抑制作用采用管碟法测定本发明黄藤素粉针剂对真菌抑制作用，并与黄藤素注射液进行比较，药剂浓度为0.1mg/管，测定结果见表3
表3 对真菌抑制作用的比较抑菌圈直径(mm)组别AsPergilius fumigatus Candida albicans黄藤素注射液 14.5 25.0本发明复方黄藤素冻干粉针剂20.0 32.0实验结果表明本发明复方黄藤素冻干粉针剂对以上真菌的抑制作用明显强于黄藤素注射液。
2.镇痛试验2.1对小鼠热板致痛作用的影响取体重20±2g雌性小鼠3只，随机分为3组，即空白对照组、本发明黄藤素粉针剂组、黄藤素注射液组，空白对照组给予0.2ml生理盐水尾静脉注射，给药组尾静脉注射6g药物/kg，连续给药3天，末次给药后1h将各鼠分别固定于55±0.5℃的热板仪中，以舔后足作为“疼痛”的反应指标，观察给药后小鼠对热板痛的反应时间，结果见表42.2对醋酸引起的扭体反应的影响取体重20±2g小鼠，雌雄各半，分组及给药方法同2.1，连续给药3天，末次给药后1h，腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/20g体重，观察10min内的小鼠扭体次数，结果见表4表4 镇痛试验结果(X±SD)组别热板痛反应时间(s)扭体次数对照组 10.9±4.2 28.5±4.0黄藤素注射液 14.7±3.8*21.0±2.6*本发明复方黄藤素冻干粉针剂 18.5±4.6**16.5±3.3**注与对照组比较*P＜0.05**P＜0.01试验结果表明本发明黄藤素粉针剂的镇痛作用比黄藤素注射液更为显著。
3.抗炎试验
3.1对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响采用角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法，分别取大鼠30只，分成对照组及本发明复方黄藤素冻干粉针剂组、黄藤素注射液组，对照组每只静脉注射0.9％生理盐水1ml/100g，给药组每只按1ml/100g静脉注射浓度分别为4g/kg的药物稀释液，然后立即向大鼠足趾注射0.1ml 1％的角叉菜胶溶液，1小时后测定大鼠足趾肿胀体积，并计算抑制肿胀体积百分率，结果见表5表5 抗炎试验结果组别 抑制率对照组3.10±0.9黄藤素注射液 46.2±4.6**本发明复方黄藤素冻干粉针剂67.5±5.5**Δ注**与对照组比较*P＜0.01，与黄藤素注射液组比较ΔP＜0.053.2对小鼠耳二甲苯致炎的影响取体重20±2g小鼠30只，雌雄各半，分组及给药方法同2.1，于末次给药后30min，将二甲苯0.02ml涂于小鼠左耳，1h后脱臼处死小鼠，剪下二耳，打孔称重，以左耳与右耳片重量差值为肿胀度，结果见表6。
表6 对小鼠耳二甲苯致炎的影响结果(X±SD)组别肿胀度差值(mg) 抑制率(％)对照组 7.8±1.5黄藤素注射液组 4.0±1.248.7±5.6**本发明复方黄藤素冻干粉针剂 3.0±0.961.5±6.2**Δ注与对照组比较**P＜0.01，与黄藤素注射液组比较ΔP＜0.05结果表明本发明的复方黄藤素冻干粉针剂抗炎作用明显好于黄藤素注射液。
4.对免疫功能的影响参照朱作金等报道的方法(黄藤素对大鼠免疫功能的影响。广西医科大学学报。1995，12(4)518-519)，测定了本发明复方黄藤素冻干粉针剂和黄藤素注射液对大鼠免疫功能的影响，结果见表7表7 对免疫功能的影响组别 PMN ANAE RFC[x±s％/500] MIT对照组 73.0±4.165.0±3.8 8.2±2.0 0.3970±0.140黄藤素注射液80.3±3.7*69.5±4.1*13.6±3.3*0.3415±0.076本发明复方黄藤素冻干粉针剂 86.8±4.2**74.3±4.5**18.4±3.5**0.2787±0.089*注与对照组比较*P＜0.05**P＜0.01试验结果本发明黄藤素粉针剂对免疫的调节作用好于黄藤素注射液。
结论以上全部药理实验结果表明本发明以黄藤素和鱼腥草挥发油为原料组方的复方黄藤素冻干粉针剂药理作用与黄藤素注射液比较明显增强。由此说明本发明的药物组合物组方科学合理，用本发明制备方法制成的复方黄藤素冻干粉针剂具有实际意义。
四、制备实施例以下实施例旨在进一步举例说明，而不是限制本发明。
实施例1(1)取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌2小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素10g，鱼腥草挥发油包合物10g，甘露醇40g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入甘露醇，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例2(1)取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡90分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素10g，鱼腥草挥发油包合物20g，葡萄糖50g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入葡萄糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例3(1)取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌4小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素10g，鱼腥草挥发油包合物40g，果聚糖30g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入果聚糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例4(1)取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡45分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素20g，鱼腥草挥发油包合物5g，乳糖55g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入乳糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例5(1)取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌3小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素15g，鱼腥草挥发油包合物10g，右旋糖酐55g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入右旋糖酐，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例6(1)取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶15的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡60分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素15g，鱼腥草挥发油包合物15g，甘露醇30g，葡萄糖20g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入甘露醇、葡萄糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例7(1)取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶15的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌2小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素15g，鱼腥草挥发油包合物20g，甘露醇30g，乳糖15g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入甘露醇、乳糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
实施例8(1)取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶18的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡90分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。
(2)制剂处方黄藤素15，鱼腥草挥发油包合物30g，甘露醇25g，果聚糖10g。
(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入甘露醇、果聚糖，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
权利要求
1.一种复方黄藤素冻干份针剂，其特征在于该药物的有效成分是由下述重量份组分组成的黄藤素1-2份，鱼腥草挥发油包合物0.5-4份。
2.一种复方黄藤素冻干份针剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)鱼腥草挥发油包合方法一取鱼腥草挥发油，采用饱和水溶液法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10-20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，50℃-60℃保温条件下搅拌2-4小时，室温下继续搅拌2小时，冷藏过夜，抽滤，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。方法二取鱼腥草挥发油，采用超声法用羟丙基-β-环糊精进行包合羟丙基-β-环糊精加水加热溶解，冷至室温，制成饱和水溶液，按照鱼腥草挥发油∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10-20的比例(v/g)加入鱼腥草挥发油，移至超声波发生器中超声振荡45-90分钟，控制温度45℃以下，静置，滤过，滤渣低温干燥，得到鱼腥草挥发油包合物。(2)制剂处方黄藤素1-2重量份，鱼腥草挥发油包合物0.5-4重量份，药用辅料3-5.5重量份。(3)将上述黄藤素，鱼腥草挥发油包合物合并，用注射用水溶解，加入药用辅料，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，包装得到本发明复方黄藤素冻干粉针剂。
3.根据权利要求1所述的复方黄藤素冻干粉针剂在治疗妇科炎症、菌痢、肠炎、呼吸道及泌尿道感染、外科感染、眼结膜炎中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种含黄藤素、鱼腥草挥发油包合物的药物组合物及其制备和应用，其特点在于它是由鱼腥草提取的有效部位鱼腥草挥发油的羟丙基－β－环糊精包合物和由黄藤中提取纯化得到的黄藤素与药用辅料组成，制备成冻干粉针剂。药理实验结果表明，本发明复方黄藤素冻干粉针剂具有更好的药理作用。
文档编号A61K31/4375GK1686119SQ20051005677
公开日2005年10月26日 申请日期2005年3月25日 优先权日2005年3月25日
发明者张海峰 申请人:张海峰