专利名称：：无色涡鞭毛藻抗氧化提取物的生产和用途的制作方法无色涡鞭毛藻抗氧化提取物的生产和用途本发明涉及无色涡鞭毛藻(Crypthecodiniumsp)的提取物，其生产方法和用途，特别是针对含有一或多种长链多不饱和脂肪酸和/或一或多种长链多不饱和脂肪酸酯的脂肪酸组合物的抗氧化稳定性。长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)是人体新陈代谢的必需脂肪酸。PUFAs可以细分为两大家族，除了其起始于亚油酸的w-6PUFAs家族，还有其起源于a-亚麻酸的"-3PUFAs家族。PUFAs是细胞膜、视网膜、脑膜的重要组成元件和诸如前列腺素、血栓素和白细胞三烯这些重要激素的前体。除了作为组成元件的功能外，近年来不断发现PUFAs直接对人体器官和疾病具有多重有益效果。大量的临床研究发现PUFAs对治愈和减缓病情作出了重要贡献，例如癌症、类风湿性关节炎、高血压、神经性皮炎和许多其他疾病。在这些情况下二十二碳六烯酸(DHA;全-顺-4，7，10,13，16，19-二十二碳六烯酸)及其衍生物，特别是DHA酯，就常常特别具有优势，因为这种酯(特别是乙酯和甘油三酯)倾向于具有宜人的口感，容易被消化系统吸收。这些发现原先造成了国际机构和权威推荐控制每日需摄入PUFAs的事实。PUFAs不能由人体从头合成，因为缺少将双键在〉C9位置导入碳链中的酶系统(缺少厶12-去饱和酶)。人们只能通过饮食中的脂肪酸前体(如a-亚麻酸)的供应合成多不饱和脂肪酸。然而，这个量是否能够满足多不饱和脂肪酸的需求有待讨论。绝大多数的必需脂肪酸通过饮食摄取。特别是植物油富含o-6脂肪酸(例如月见草油含有Y-亚油酸(GLA))但链长只达到C18，鱼油和微生物来源的油含"-3脂肪酸(例如鲑鱼油含有二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA;全-顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸))。大体上，鱼油和微生物来源的油是多不饱和脂肪酸的唯一商业来源。然而通常所需的PUFAs的含量过低，并且存在于混合物中，这样也可能存在显示拮抗作用的PUFAs。为了摄取每日推荐剂量的PUFAs，因此必须要摄入大量的油。特别地，这适用于必须消耗高剂量PUFAs的病人(例如囊性纤维化病)。为了尽可能以耙向方式达到单独PUFAs的效果，必须使用富集的或高纯度的PUFAs。因此在现有技术中迫切需要高纯度PUFAs。很多方法被单独或组合起来使用以从大量天然存在的来源中分离(或至少浓縮)和回收脂肪酸及其衍生物。这些方法包括低温分步结晶、分子蒸馏、尿素加合物结晶、金属盐溶液提取、反相柱分离超临界流体分部和HPLC方法。考虑到PUFAs对氧化作用的敏感，通常必须加入合适的抗氧化剂来稳定。为了这个目的，商业上特别使用天然生育酚，又特别是提取自大豆油的a-、P-、Y-和S-生育酚和/或生育三烯酚类的混合物。此外已知一些化合物，例如棕榈酸抗坏血酸酯酯，能协同作用。因此除了生育酚，它们也能被使用。然而天然抗氧化剂的效果并不能随着浓度的增加而无限增加。例如，a-生育酚早至100ppm其活性就逆转，并且发生促氧化作用。这意味着过量可能引起不利后果。可替代地，公布的WO03092628提出了一种在温和条件下作用逐步加强的油的用途。这种情况下必须以该方式进行制备，即首先将含200680002978.5说明书第3/17页多不饱和脂肪酸的生物量与酶反应然后分离脂质。尽管该方法获得的油起初氧化程度不高，然而它还是显示出多不饱和脂肪酸氧化性质的敏感性。根据现有技术，因此本发明的目的是显示脂肪酸组合物增强的抗氧化稳定性的可能。在这种情况下要尽可能增加抗氧化活性，但不能加入对健康有害的物质，从而使脂肪酸组合物能无保留地应用在食品领域。本发明的另一个目的是详细说明生产本发明脂肪酸组合物的方法，它使得可以尽可能以简单的方式大规模廉价生产。此外还应指出本发明的脂肪酸组合物应用于特别有优势的领域。尽管没有明确指出，但可以从申请文本中明确推出或不可避免地导出的这些或其他目的能通过无色涡鞭毛藻的提取物达到。权利要求1的从属权利要求描述了本发明提取物的有利修饰。权利要求11-19要求保护的范围是对抗氧化剂稳定的脂肪酸组合物。方法权利要求保护特别适用于生产本发明脂肪酸组合物的模式，用途权利要求描述了特别适用于本发明脂肪酸组合物应用的优势领域。通过提供无色涡鞭毛藻的抗氧化提取物，以不容易预见的方式成功获得了具有特别高抗氧化活性的提取物，这种提取物特别适用于使脂肪酸组合物抗氧化稳定，特别是含有至少一种不饱和脂肪酸和/或至少一种不饱和脂肪酸酯的脂肪酸组合物。这样根据本发明无需添加对健康有害的物质就能增加抗氧化活性，即可以放心将本发明的脂肪酸组合物应用到食品领域。例如隐甲藻(Crythecodiniumcohnii)油已用于婴儿食品中，在美国归于GRAS(通常认为是安全的)一类。本发明的脂肪酸组合物能以简单的方式大规模廉价地生产。本发明的脂肪酸组合物含有至少一种来自于无色涡鞭毛藻，优选隐甲藻的抗氧化提取物。申请文件中"脂肪酸组合物"的表达不仅包括含有游离脂肪酸的组合物，也包括含有脂肪酸衍生物优选脂肪酸酯，特别是脂肪酸甘油三酯的组合物，这样脂肪酸根大体上一致或不同。本发明的脂肪酸表示脂肪羧酸，它可以是饱和的，或单不饱和，或多不饱和，优选含6-30个碳原子。无色涡鞭毛藻中获得的提取物本身己知。根据本发明，不仅可使用无色涡鞭毛藻野生菌株提取物，还可以使用无色涡鞭毛藻菌株的突变体或重组体。申请文件中"无色涡鞭毛藻提取物"的表达包括所有用溶剂从无色涡鞭毛藻生物量，优选为油中提取获得的组合物，溶剂优选有机溶剂和/或超临界溶剂，特别是有机溶剂。同样可以使用溶剂混合物。本发明的提取物具有优选比其来源的生物量具有更大的抗氧化活性。因此优选它的过氧化物值小于最初使用的优选为新鲜分离的其来源的生物量的过氧化物值，并且优选为提取物来源的生物量过氧化物值的最多50.0%，更优选最多25.0%，有利地最多10.0%，特别是最多1.0%。这种情况下，过氧化物值优选用AOCS(美国油类化学家协会)官方方法Cd-3d63的说明测定，有利地在2周的敞开贮存之后。本发明提取物的抗氧化能力大于15000Trolox等价物，更优选为大于20000Trolox等价物，有利地大于25000Trolox等价物，特别优选大于30000Trolox等价物，又特别大于35000Trolox等价物(ug/ml)。Trolox⑧是6-羟基-2，5，7,8-四甲基色烷-2-羧酸惯常使用的商品名。根据本发明"生物体的生物量"的表达不仅包括生物体的全部细胞，还包括生物体的个体细胞组分。无色涡鞭毛藻提取物通过培养微生物、从培养物收获生物量、分解生物量和分离提取物有利地获得。为了分离提取物，优选使用有机溶剂提取的方法，特别是用己烷或超临界液体。本发明特别优选用有机溶剂提取的方法。有利地，用己垸浸透干的生物量从而提取生物量中的提取物。这种用有机溶剂提取在WO9737032、WO9743362和EP515460和其他内容一起得到描述。还可以在JournalofDispersionScienceandTechology，10，561-579，1989"BiotechnologicalProcessesfortheProductionofPUFAs"中发现特别广泛的描述。可替代地，也可以不使用溶剂进行提取。申请文件中一个特别有利的方法在EP-A-1178118中记载。该方法通过生产生物量的水相悬浮液，利用离心将油相与水相分离而避免使用溶剂。根据本发明特别优选的变型，通过纯机械挤压来自无色涡鞭毛藻的生物量，接着用至少一种有机溶剂或至少一种超临界溶剂，优选有机溶剂，特别是己垸提取，从而获得提取物。根据本发明的另一种特别优选的变型，通过蒸馏获得提取物。在本发明的文本中，也证明能特别有优势的是优选用具有1-12个碳原子的脂肪醇，优选为具有l-6个碳原子，特别是具有l-4个碳原子将生物量进行酯交换。这样能够特别证明甲醇和乙醇，特别是乙醇的用途。酯交换优选在酸催化下进行，特别是用硫酸和/或盐酸。根据另一种特别优选的变型，酯交换通过酶而实现。酯交换后的生物量随后优选用至少一种有机溶剂或至少一种超临界溶剂提取，优选用有机溶剂，特别是己烷。溶剂的总体积与反应量(包括所加的水)的比例也能在一个大范围内变化，特别优选是1:3到4:3。根据特别优选的实施方式，混合物是通过最终组合在一起的多种溶剂提取的。在这个实施方式的上下文中，优选使用无色涡鞭毛藻生物量的己烷提取物作为被酯交换的生物量，其然后如上所述被酯交换。这个过程用作抗氧化提取物的浓縮和纯化。有利地，基于总重量，用该方式浓縮和纯化的提取物的具有6-30个碳原子的脂肪酸的含量，和包含具有6-30个碳原子的脂肪酸烷基根的脂肪酸酯的含量，小于20.0%重量，优选小于10.0%重量，特别是小于5.0%重量。提取物的组成可以在宽范围内变化。在本发明第一个特别优选的实施方式中，来自无色涡鞭毛藻的提取物通过以下步骤获得i)皂化无色涡鞭毛藻生物量，和ii)用溶剂提取被皂化的生物量，该溶剂在25X:时的水溶解度小于0.1g溶剂/克水。优选地，在这种情况下，遵循DGF方法F-II1(75)的步骤。生物量能被本身已知的方法皂化。在这种情况下特别证明了在醇溶液中，优选为甲醇和/或乙醇溶液中，生物量与至少一种碱金属氢氧化物，优选NaOH和/或KOH，特别是KOH的反应。皂化作用特别合适的反应温度范围为25-100°C。皂化产物混合物的提取可以在宽的范围内变化。根据一个优选的变型，在混合物中加水，用25"C时水溶解度小于0.1g溶剂/克水的溶剂进行提取。溶剂的总体积与反应量(包括加入的水)体积的比例在宽的范围内变化，特别优选从l:3到4:3。根据一个特别优选的实施方式，混合物是通过最终组合在一起的多种溶剂提取的。本发明特别适合的溶剂包括有机溶剂二氯甲垸、乙醚、甲乙酮、乙酸乙酯、石油醚、戊烷和己烷，也包括超临界溶剂丙垸、丁烷和二氧化碳，有机溶剂中特别是乙醚和己垸，最优选乙醚。剩余的水可以从提取溶剂层除去，例如通过盐水洗涤(即是说饱和盐溶液)该层，通过分子筛干燥和/或无水盐干燥(例如硫酸钠或硫酸镁)。提取以后，优选浓縮提取物，有利地通过部分或完全蒸发溶剂。在本发明的另一个特别优选的实施方式中，用具有1-12个，优选具有l-6个，特别是l-4个碳原子的醇，禾P/或具有3-6个，优选3-4个碳原子的酮，提取无色涡鞭毛藻生物量，获得无色涡鞭毛藻提取物。这种情况下，用醇提取要优选于用酮提取。每种情况下，特别适合该目的的单独的或是在混合物中的醇是甲醇和乙醇。特别适合的酮包括丙酮和/或甲乙酮，特别是丙酮。在该实施方式中，优选使用无色涡鞭毛藻的生物量的己烷提取物作为而后用醇和/或酮反提取的生物量。这个过程用作抗氧化提取物的浓縮和纯化。有利地，基于总重量，用该方式浓縮和纯化的提取物的具有6-30个碳原子的脂肪酸含量，含具有6-30个碳原子的脂肪酸垸基根的脂肪酸酯的含量，小于20.0%重量，优选小于10.0%重量，特别是小于5.0%重量。这种情况下醇或酮的总体积与生物量的体积的比例变化范围广，特别优选是3:l到3:4。根据特别优选的实施方式，混合物是通过最终组合在一起的多种醇或酮提取的。提取以后，优选浓縮提取物，有利地通过部分或完全蒸发溶剂。这种方法获得的提取物再次优选用具有3-6个碳原子的酮提取，更优选用丙酮和/或甲乙酮，特别是丙酮提取。这种情况下酮的总体积与第一次提取物的体积的比例变化范围广，特别优选是3:l到3:4。根据特别优选的实施方式，第一次的提取物是通过最终组合在一起的多种酮提取的。提取以后，优选浓縮得到的第二次提取物，有利地通过部分或完全蒸发溶剂。本发明中，脂肪酸组合物另外包含与无色涡鞭毛藻不同的生物量组分，优选破囊壶菌(Thraustochytriales)的生物量，特别是Ulkeniasp.的生物量。与无色涡鞭毛藻不同的生物量同样本身已知。根据本发明，不仅能够使用野生型菌株的生物量，也能使用高效产DHA(全-顺-4，7,10，13,16，19-二十二碳六烯酸)和/或DPA(全-顺-4，7,10,13,16-二十二碳五烯酸)的突变或重组菌株的生物量。这种突变或重组菌株包括与使用相同基质的原始野生型菌株的百分比相比，脂肪中含有更高百分比例DHA和/或DPA的微生物，和/或与使用相同基质的原始野生型菌株生产的量相比，含有更高的脂质总量。根据本发明特别优选的实施方式，本发明的脂肪酸组合物包含不同于无色涡鞭毛藻的生物量的提取物。这种情况下的提取物通过培养被讨论的微生物、从培养物收获生物量、分解生物量和分离提取物有利地获得。本文中非常有利的方法在WO03/033631Al中描述，其公开内容在此清楚地引入作为参考。为了分离提取物，优选使用有机溶剂提取的方法，特别是己烷，或用超临界液体提取。有利地，用己烷浸透干的生物量从而提取生物量中的提取物。这种用有机溶剂提取在WO9737032、WO9743362和EP515460和其他内容一起得到描述。还可以在JournalofDispersionScienceandTechology，lO,561-579,1989"BiotechnologicalProcessesfortheProductionofPUFAs"中发现特别广泛的描述。可替代地，也可以不使用溶剂进行提取。申请文件中一个特别有利的方法在EP-A-1178118中记载。该方法通过生产生物量的水相悬浮液，利用离心将油相与水相分离而避免使用溶剂。根据本发明特别优选的变型，通过纯机械挤压不同于无色涡鞭毛藻的生物量，接着用至少一种有机溶剂或超临界溶剂，优选用至少一种有机溶剂，特别是己垸提取，从而获得提取物。在本发明的文本中，也证明能特别有优势地优选用具有l-12个碳原子，优选为l-6个碳原子，特别是l-4个碳原子的脂肪醇使生物量进行酯交换。这样能够特别证明甲醇和乙醇，特别是乙醇的用途。酯交换优选在酸催化下进行，特别是利用硫酸和/或盐酸。酯交换后的生物量随后优选用一种有机溶剂，特别是己垸提取。溶剂的总体积与反应量(包括所加的水)体积的比例也能在一个大范围内变化，特别优选是l:3到4:3。根据特别优选的实施方式，混合物是通过最终组合在一起的多种溶剂提取的。生物量的组成可以在宽范围内变化。优选地，不同于无色涡鞭毛藻的生物量包括至少一种多不饱和脂肪酸和/或至少一种脂肪酸酯，有利地为一种脂肪酸烷基酯，优选甘油酯，特别是甘油三酯，它含有至少一个多不饱和脂肪酸根，优选有6-30个碳原子。根据特别优选的实施方式，生物量中至少10%，特别优选至少25。X，特别是至少30%的脂肪酸和/或脂肪酸根是DHA或DHA根。此处用的表达"甘油酯"是甘油和至少一种脂肪酸的酯，其中甘油的1-3个羟基基团被一个或多个脂肪酸根酯化。当存在多个脂肪酸根时，这些脂肪酸根可以是相同的或是不同的。在很多适合的起始材料中，绝大多数甘油酯是甘油三酯，即是说三个脂肪酸根和甘油的酯。这种情况下每一个脂肪酸根可以是饱和的(即是说碳原子之间的所有键是单键)或不饱和的(即是说至少有一个碳碳双键或三键)。此处不饱和脂肪酸根的类型有时指定"。这个数字给出了第一个双键的位置，从脂肪酸或脂肪酸根末端的甲基基团开始计数。本发明的脂肪酸组合物单独组分的相对分数大体上可以自由选择，与各自用途相对应。然而本发明发现非常特别有利的是，当每种情况下基于脂肪酸组合物的总重量包含0.1-50.00%重量，优选0.01-25.0Q/^重量，有利地0.2-10.0%重量，特别是0.5-5.0%重量的来自无色涡鞭毛藻的抗氧化提取物，以及50.0-99.9%重量，优选75.0-99.9%重量，有利地90.0-99.8%重量，特别是95.0-99.5%重量的不同于无色涡鞭毛藻生物量的组分，与上述相对分数合起来优选为100%重量。本发明的脂肪酸组合物具有相对高分数的多不饱和脂肪酸，每一种情况下基于其总重量优选包含至少10.0%重量，有利地为至少25.0%重量，更优选为至少50.0。％重量，特别是至少70.0%重量的二十二碳六烯酸(全-顺-4，7，10，13,16，19-二十二碳六烯酸)和/或二十二碳六烯酸垸基酯(全-顺-4,7，10，13,6,19-二十二碳六烯酸垸基酯)，优选二十二碳六烯酸、二十二碳六烯酸甲酯和/或二十二碳六烯酸乙酯。与常规稳定的脂肪酸组合物相比，本发明的脂肪酸组合物对氧化作用具有更高的稳定性而与众不同。因此不必须添加已知的抗氧化剂，例如a-，e-，Y-和/或S-生育酚。因此，本发明的脂肪酸组合物根据第一个优选实施方式不含有另外的抗氧化剂。然而，既然本发明的脂肪酸组合物的抗氧化稳定性常常能通过其他抗氧化剂的加入而增强，本发明的一个特别优选实施方式中的脂肪酸组合物包含至少一种抗氧化剂，优选能协同作用的抗氧化剂，优选至少一种生育三烯酚，a-,P-，Y-和/或S-生育酚和棕榈酸抗坏血酸酯酯，每一种情况下基于脂肪酸组合物的总重量该组分的相对分数优选为0.01-5.0%重量，特别是0.05-0.5%重量。本发明的脂肪酸用已知的方法生产，优选通过相应组分的混合。这种情况下已经证明特别有利的是溶解来自无色涡鞭毛藻的抗氧化提取物和在溶剂中将不同于无色涡鞭毛藻的生物量的组分彼此分离，溶剂优选石油醚、己烷、戊垸、乙醇、甲醇、乙腈、二氯甲垸、甲乙酮、乙醚和/或乙酸乙酯，有利地为己垸和/或乙醚，特别是乙醚，然后将溶液相互混合，随即除去溶剂，优选通过蒸发除去。根据本发明的另一个优选实施方式，组分混合时不用添加溶剂，这样使用的合适的升高的温度优选的范围为25'C-8(TC，特别是25t:-60。C。本发明的脂肪酸组合物可能的应用领域对于本领域技术人员而言是显而易见的。它们特别适用于PUFAs和PUFA酯所显示的应用。在这些情况下本发明的脂肪酸组合物常常被直接使用。然而，对于一些应用来说，需要提前皂化脂肪酸酯或在液相中提前皂化脂肪酸酯。例如可以通过在乙醇中与KOH反应，随后用无机或有机酸酸化来达到。本发明的脂肪酸组合物特别用作药物组合物中的活性成分或组分、化妆品制剂中的组分、食品添加剂、食物成分、功能食品组分以及用于生产高浓縮的PUFA的二级产品，如酯和酸。本发明将在稍后的实施例中得到更加详细的描述，而不将发明概念限制于此。确定下列脂肪酸组合物的诱导时间、过氧化物值和/或抗氧化能力对照1使用如Yokochi等人，Appl.Microb.Biotechnol.，(1998)，49,pp.72-76中描述生产的"含DHA的油"。它进行了常规已知方法步骤的完全精炼，下文指定这种油简称作"含DHA的油"。对照2-17表1详细列出"含DHA的油"+棕榈酸抗坏血酸酯酯和/或生育酚混合物(加入0.14X⑧CovioxT70，天然生育酚混合物)的量。实施例1根据DGF法F-IIl(75)得到提取物。称重5.02g隐甲藻原油(己垸提取物)放入250ml圆底烧瓶，再与20mg连苯三酚、40ml甲醇、10ml60%强度的氢氧化钾溶液(g/v)和3块沸石混合。80'C热水水浴中，样品在回流和温和的氮流中皂化20分钟。冷却后，皂液用40ml双蒸水冲洗三次，50ml乙醚冲洗两次，放入500ml分液漏斗。用乙醚小心回荡进行第一次提取。水相放入600ml玻璃烧杯。乙醚相用40ml双蒸水重新冲洗，水被导入水相。乙醚相被导入1000ml圆底烧瓶。如此描述(加入乙醚，提取等)再次处理水相四次直到变为无色。合并的乙醚相用旋转式蒸发器浓縮，使用油泵干燥，称重。产生了921mg提取物。其与4g"含DHA的油"(对照5;含0.1%的生育酚)混合，再加入10ml乙醚而充分混合。移去乙醚后，获得橙色的油。实施例2称重41.9g隐甲藻原油放入500ml圆底烧瓶，与120ml甲醇和磁力搅拌棒混合。该批量在磁力搅拌器上剧烈搅拌3小时。上层的甲醇相慢慢倒入250ml圆底烧瓶。该批次的油再次与100ml甲醇混合，再次冲洗一小时。将油-甲醇混合物置于100ml分液漏斗，甲醇相转移到前面的甲醇相中。用旋转式蒸发器浓縮，通过油泵干燥。产生760mg提取物。"含DHA的油"(对照5;含0.1%的生育酚)与2%重量的提取物充分混合。实施例3与实施例2的脂肪酸组合物的方法类似，除了使用的"含DHA的油"(对照1)与4%重量的提取物充分混合。实施例4隐甲藻的干生物量用甲醇直接提取，这样也一同提取了大分数的磷脂，从而得到粘稠的产物。"含DHA的油"(对照l)与4%重量的提取物充分混合。实施例5隐甲藻的干生物量用甲醇直接提取，这样也一同提取大分数的磷脂，从而得到非常粘稠的产物。为了除去这些化合物，提取物再次用丙酮洗涤，溶于丙酮的组分形成了隐甲藻丙酮提取物。"含DHA的油"(对照l)与4。Z重量的丙酮提取物充分混合。实施例6与实施例2的脂肪酸组合物的方法类似，除了使用的"含DHA的油"(对照1)与4%重量的提取物充分混合。确定氧化稳定性测定仪(Rancimatdertermination)仪器:743Rancimat生产商:Metrohm仪器设置方法(与AOCS法Cdl2b-92类似)温度80°C气体流速20L/h停止标准终点法步骤和测量原理称取测量用的油(3g)放入反应容器，置于加热块上，暴露于确定的温度和气流中。形成易挥发的氧化产物，如甲酸，它们经由气体管道转移至测量容器，在其中用导电电极在蒸馏水中测量导电率。随着时间记录导电率直到终点。从曲线上可以自动形成二级导数，在鞍点具有最大值。到达鞍点的时间叫做诱导时间。各样品的稳定性越高，诱导时间就越长。因此，通过比较检测的诱导时间，可得出样品抗氧化状态的结论以及可以有效比较抗氧化剂之间的活性。对于以上列出的材料，测量的诱导时间总结在表1。表l:氧化稳定性测试的诱导时间<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>AP:棕榈酸抗坏血酸酯Toc:生育酚混合物UvA:未皂化的级分(见上文)MeOH-extr:MeOH提取物(见上文)Ace-extr:丙酮提取物(见上文)过氧化值的确定上述材料室温下暗处在开口的100ml锥形烧瓶中贮存预定时间，然后分析它们的过氧化值。按照AOCS(美国油脂化学家协会)官方方法Cd-3d63的详细说明测定过氧化值。获得的结果总结在表2。它们显示与未添加稳定剂的"含DHA的油"(对照1)或常规方法稳定的"含DHA的油"(对照2)相比，通过使用甲醇提取物(实施例3)可以显著增加抗氧化稳定性。在这些情况下，另外添加生育酚能使抗氧化稳定性进一步增加。重量Toc+0.05。/。重量AP11.6对照160.2%重量丁00+0.1%重量AP10.6对照170.2%重量Toc+0.2。/。重量AP7.0实施例118.7。/。重量UVA+0.1。/。重量Toc17,9实施例22.0。/o重量MeOH-extr+0.1。/o重量Toc14.3实施例64.0。/o重量MeOH-extr+O.P/o重量Toc17.6实施例54%重量Ace-extr41.5AP:棕榈酸抗坏血酸酯表2:开口贮存后的过氧化值<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>抗氧化能力的确定对照1和5以及实施例5的抗氧化活性如下确定方法用Photochem法测量样品。Photochem⑧根据光化学发光法(PLC)操作。使用光敏剂产生超氧化物阴离子根，可通过它们与化学发光物质(例如鲁米诺)的反应来检测或是通过产生的光来探测。样品中出现的自由根捕获剂(抗氧化剂)越多，光化学发光以浓度依赖的方式减弱的强度就越强。结果以等价的Trolox浓度单位报道。使用标准试剂盒操作仪器，从而测量单个抗氧化剂和超氧化物岐化酶的抗氧化能力。为了确定Trolox的等价物，用n-己烷稀释样品，直接用来测量。获得的结果总结在表3表3:—些样品的抗氧化能力<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>可以看出本发明的实施例具有相对高的抗氧化能力。必须指出本文中加入的提取物的量不等价于混合物中抗氧化活性量。例如，可以进一步纯化，产生的提取物具有更大的抗氧化活性。当然，保护范围覆盖更高度纯的浓縮物直到抗氧化活性化合物。权利要求1.来自无色涡鞭毛藻(Crypthecodiniumsp)的抗氧化提取物。2.如权利要求1所述的提取物，其特征在于抗氧化能力大于25000Trolox等价物。3.如权利要求2所述的提取物，其特征在于提取物通过以下步骤获得i)皂化无色涡鞭毛藻的生物量，和ii)用在25'C时的水溶解度小于O.lg溶剂/g水的溶剂提取被皂化的生物量。4.如权利要求所述3的提取物，其特征在于提取物可通过用己烷、戊烷、乙酸乙酯、乙醚、二氯甲烷、二甲乙酮和/或超临界二氧化碳，提取来自无色涡鞭毛藻的皂化生物量而获得。5.如权利要求2所述的提取物，其特征在于提取物可通过用具有1-12个碳原子的醇和/或3-6个碳原子的酮提取无色涡鞭毛藻的生物量而获得。6.如权利要求5所述的提取物，其特征在于提取物可通过用甲醇、异丙醇、丙酮和/或乙醇提取无色涡鞭毛藻的生物量而获得。7.如权利要求5或6所述的提取物，其特征在于提取物可通过用具有1-12个碳原子的醇提取随后用酮提取无色涡鞭毛藻的生物量而获得。8.如上述至少一个权利要求所述的提取物，其特征在于提取物是来自隐甲藻(Crypthecodiniumcohnii)的提取物。9.如上述至少一个权利要求所述的提取物，其特征在于提取物可通过将无色涡鞭毛藻的生物量进行酯交换的方法而获得。10.如上述至少一个权利要求所述的提取物，其特征在于提取物可通过机械方法提取无色涡鞭毛藻生物量而获得。11.包含至少一种不饱和脂肪酸的脂肪酸组合物，其特征在于脂肪酸组合物包含如上述至少一个权利要求所述的至少一种提取物和来自不同于无色涡鞭毛藻的生物量组分。12.如权利要求ll所述的脂肪酸组合物，其特征在于它包含破囊壶菌(Thraustochytriales)的生物量组分。13.如权利要求12所述的脂肪酸组合物，其特征在于它包含Ulkeniasp的生物量组分。14.如权利要求11-13中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物，其特征在于通过将不同于无色涡鞭毛藻的生物量进行酯交换的方法，获得不同于无色涡鞭毛藻的生物量的组分。15.如权利要求11-14中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物，其特征在于，每一种情况下基于脂肪酸组合物的总重量，它包含0.1-50.0%重量的如权利要求1-10至少一个权利要求所述的至少一种提取物，和50.0-99.9%重量的不同于无色涡鞭毛藻的生物量的组分。16.如之前权利要求11-15中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物，其特征在于基于其总重量，包含至少25.0%重量的二十二碳六烯酸和/或二十二碳六烯酸垸基酯。17.如之前权利要求11-16中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物，其特征在于包含至少一种抗氧化剂。18.如权利要求17所述的脂肪酸组合物，其特征在于包含a-、0-、Y-和/或S-生育酚和/或至少一种生育三烯酚。19.如权利要求18所述的脂肪酸组合物，其特征在于另外包含棕榈酸抗坏血酸酯。20.生产如之前权利要求11-19中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物的方法，其特征在于如权利要求1-10中至少一个权利要求所述的至少一种提取物和不同于无色涡鞭毛藻的至少一种生物量的组分互相混合。21.如权利要求11-19中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物的用途，用作药物组合物中的活性成分或组分。22.如权利要求11-19中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物的用途，用作化妆品制剂组分。23.如权利要求11-19中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物的用途，用作食品添加剂和/或食品成分。24.如权利要求11-19中至少一个权利要求所述的脂肪酸组合物的用途，用于动物饲料成分。全文摘要本发明涉及无色涡鞭毛藻(Crypthecodiniumsp)的抗氧化提取物。本发明还涉及含有一种或多种多不饱和脂肪酸和/或一种或多种多不饱和脂肪酸酯和根据本发明的至少一种提取物和不同于无色涡鞭毛藻生物量的组分的脂肪酸组合物，和涉及生产该脂肪酸组合物的方法和其用途。文档编号A61K8/97GK101106913SQ200680002978公开日2008年1月16日申请日期2006年1月26日优先权日2005年1月26日发明者多琳·诺伊曼,德克·法布里蒂乌斯申请人:努特诺瓦营养产品及食品成分有限公司