专利名称：：一种治疗产后恶露不行的中药组合物及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法，特别是涉及一种治疗产后恶露不行的中药组合物及其制备方法和质量控制方法。
背景技术：
：恶露，是指胎儿娩出后，阴道流出的血样分泌物。恶露可以分为血性恶露、浆性恶露以及白恶露。正常的恶露有血腥气味，但不臭，开始呈鲜红色或深红色，含大量血液、小血块以及坏死脱膜组织，这种恶露被称为血性恶露，血性恶露一般持续3-7天。l周以后，恶露就会变成淡黄色，含血量减少，有较多的阴道及宫颈粘液，而且含有细菌，这种恶露被称为浆性恶露。2周以后，恶露由淡黄色变为白色，内含大量白细胞、蜕膜细胞和表皮细胞，此种恶露被称为白恶露。正常恶露一般3周左右干净。产后随子宫蜕膜的脱落，含有血液、坏死蜕膜组织经阴道排出，称为恶露。如恶露持续3周以上不止者，称为"产后恶露不绝"，又称"产后恶露不行"。相当于西医的晚期产后出血。出血的原因有子宫复旧不良、感染或胎盘部分残留(胞衣不下)等，后者有时需刮宫治疗。产后恶露淋漓不止可能诱发感染，导致子宫内膜炎，也可能是滋养叶细胞疾病。中医认为，恶露不行多属冲任不调，气血运行失常所致。其病因多由气虚下陷，冲任不固，不能摄血；或血分有热，热扰冲任，迫血下行；或瘀血内阻，血不归经引起。根据临床的症状表现可分为气虚、血瘀、血热等三种类型。1.气虚由于产时耗气，气虚不能收摄，而使子宫复旧不佳而淋漓出血不止。产后3周以上恶露不止，色淡不臭，面色皖白，倦怠少气，纳少便溏。苔薄，舌淡，脉细弱。2.血瘀产时受寒，寒与血相搏结而成瘀阻，新血不生而淋漓不绝。或部分胞衣组织残留于宫腔，也可致恶露不绝。产后3周恶露不止，量少或多，挟有血块，色紫黯，小腹胀痛。舌紫黯或有紫斑，脉弦细而涩。3.血热产妇素体阴虚，因分娩亡血伤津，阴液更亏而致阴虚内热。或因产时不顺，肝郁化热，热迫血妄行，恶露逾期不止。或因产后体虚，湿热病邪乘虚而入，滞留子宫内而致恶露淋漓不止。产后3周恶露不止，或多或少，如酱色，伴秽臭，小腹胀痛拒按，低热持续不退，口干少饮，溲赤。苔黄腻或薄黄石红，脉细数。发明一种用于产后恶露不行，少腹疼痛，也可试用于上节育环后引起的阴道流血，月经过多。
发明内容本发明目的在于提供一种治疗产后恶露不行的中药组合物；本发明目的还在于提供一种治疗产后恶露不行的中药组合物制备方法；本发明目的还在于提供一种治疗产后恶露不行的中药组合物的质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明所述的治疗产后恶露不行的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的当归100-300重量份川芎40-180重量份桃仁10-90重量份干姜(炭)10-50重量份益母草200-400重量份川断10-90重量份本发明所述的治疗产后恶露不行的中药组合物可由如下重量比的原料药制成的川芎40-180重量份干姜(炭)10-50重量份红花10-50重量份川芎120-170重量份干姜(炭)20-40重量份红花30-50重量份当归100-300重量份桃仁10-90重量份益母草200-400重量份甘草(炙)10-50重量份；上述原料优选配比为当归100-200重量份桃仁40-80重量份益母草320-380重量份甘草(炙)30-50重量份；上述原料优选配比为当归140重量份川芎130重量份桃仁60重量份干姜(炭)30重量份益母草350重量份红花40重量份甘草(炙)40重量份；本发明所述的组合物可按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊、口服液、滴丸、喷雾剂、颗粒剂等临床可接受的剂型；所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质等。本发明所述的中药组合物颗粒制剂的制备方法为-原料药粉碎成粗粉，加8-12倍量水提取挥发油5-8小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮2-3次，每次加6-8倍量水煎l-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量，混匀，制成颗粒，于50-7(TC烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，即得。本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取制剂相当于所述组合物原料药3g，加氨水数滴使湿润,再加氯仿15-25ml，于水浴上回流10-25分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加P/。盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液l滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液l滴，即发生白色沉淀；(2)取制剂相当于所述组合物原料药9g,，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml，加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取4-6次，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取4-6次，合并碱液，用醋酸乙酯洗2-4次，每次10-20ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗2-4次，每次10-20ml，弃去苯液，继用乙醚提取4-6次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20pl、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以85-95:20-30:3-5苯-二氧六环-醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取制剂相当于所述组合物原料药9g,，加40ml无水乙醇，分2-4次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15pl、5pl分别点于同一硅胶H板上，以0.5-1.3:0.2-1.2氯仿-甲醇为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；20-30:70-80:1-2.5甲醇-水-醋酸为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，力口90-100:4-7甲醇-甲酸的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；供试品溶液的制备取制剂相当于所述组合物原料药4.5g，，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(90-100:4-7)的混合溶液25ml，称定重量，超声处理25-35分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(90-100:4-6)的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；测定方法:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10M1，注入液相色谱仪，测定,即得。本发明药物组合物质量控制方法优选如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取制剂相当于所述组合物原料药3g,,加氨水数滴使湿润，再加氯仿20ml，于水浴上回流15分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液l滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液l滴，即发生白色沉淀；(2)取制剂相当于所述组合物原料药9g,，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml，加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取5次，每次乙醚量分别为20、20、15、15、10ml，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取5次，每次2%碳酸钠溶液量分别为20、20、15、15、10ml,合并碱液，用醋酸乙酯洗3次，每次15ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗3次，每次15ml，弃去苯液，继用乙醚提取5次，每次乙醚量分别为20、20、15、15、10ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20pl、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以90:25:4苯-二氧六环-醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取制剂相当于所述组合物原料药9g，，加40ml无水乙醇，分3次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15pl、5pl分别点于同一硅胶H板上，以1:1氯仿-甲醇为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6X150mm，5um);25:75:1.8甲醇-水-醋酸为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加95:5甲醇-甲酸的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用0.45um微孔滤膜滤过，即得；供试品溶液的制备取制剂相当于所述组合物原料药4.5g，，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液25ml，称定重量，超声处理(功率250W,频率40KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用95:5甲醇-甲酸的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，即得；测定方法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各lOpl,注入液相色谱仪，测定,即得。本发明组合物具有很好的药效，具有很好的活血、祛瘀、止痛作用，本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品要相比其他方法测定的产品在药理效果上表现的更为稳定。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例l药理试验选取本发明实验药物组本发明药物组I(实施例6制剂)本发明药物组n(按实施例5制剂)本发明药物组in(按实施例i制剂)本发明药物组IV(按实施例7制剂)i镇痛i.i对热板法所致小鼠疼痛的影响选用体重为18—22g并先以55'C测定痛阈在30s内健康的雌性小鼠，凡在30s内不舔后爪或逃避的小鼠弃之不用。将痛阈合格的小鼠60只，随机分成6组，甲组皮下注射安痛定0.1ml/10g;乙组皮下注射生理盐水0.1ml/10g;丙、丁、戊、己组灌服本发明药物组I、II、III、IY0.10ml/10gi合药后测定不同时间的痛阈变化，见表l表1痛经舒对热板法所致小鼠疼痛的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注①各组药前PX).05，③与④相比P〈0.05，⑥与⑦相比P0.05，⑧与(D相比P〈0.05,②与④PX).05，⑤与⑦相比P〈0.05。结果见表，各组药前痛阈无显著差异(P>0.05)，本发明药物组0.10ml/10g，在30min时可显著提高小鼠痛阈(PO.05),在lh内与生理盐水组比较都有显著性差异，15min与安痛定组比较无差异性，30min与安痛定组比较有显著差异(P<0.05)，说明本发明药物组有显著镇痛作用。1.2冰醋酸所致小鼠扭体反应取体重1822g的健康小鼠70只，随机分7组，甲组灌服安痛定0.1ml/10g;乙组灌服生理盐水0.1ml/10g;丙、丁、戊、己组灌服本发明药物组I、II、III、IV0.10ml/10g;灌服20min后腹腔注射0.7%冰醋酸0.1ml/10g。观察记录小鼠20min内扭体次数，结果见下表2表2对小鼠扭体反应的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注空白与安痛定及本发明药物组相比P〈0.01，安痛定及本发明药物组相比P〉0.05。结果表明本发明药物组有明显的抑制冰醋酸所引起的扭体反应其效果与安痛定组相似。2PGF^类似物或縮宫素作用对子宫的影响2.1对大鼠在体子宫的影响取健康未孕雌性大鼠20只，分成两组，实验前按0.2mg/100g皮下注射乙烯雌酚，每天1次，注射3天后，以戊巴比妥钠腹腔麻醉，仰卧于实验台上剖腹，找出一侧子宫角，将宫角的阴道端和卵巢端分别缝合于特制固定罩底部两端支点上，在宫角中缝一细线，通过滑轮把牵引线连接在传感器上，然后将腹壁围绕固定罩底部四周缝合，闭合腹腔通过MS-302多媒体化生物信号记录分析系统记录实验过程。取上述大鼠向腹腔注入洛氏营养液10ml，描记正常收縮曲线，甲组腹腔注入本发明药物组I0.5ml,2min后腹腔注入PGF2a类似物0.05mg/0.5ml,描记10min;乙组先给PGF2a类似物0.05mg/0.5ml,使子宫呈收缩后，再注入本发明药物组I0.5ml，记录结果，见下表3:表3对大鼠在体子宫的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>结果表明本发明药物组I对PGFh类似物所致的子宫痉挛性收縮有明显的拮抗和阻断作用。2.2在PGF^类似物或縮宫素作用下药物对离体子宫平滑肌的影响选健康未孕雌性大鼠70只，分成7组，实验前0.2mg/100g皮下注射乙烯雌酚，每天1次，注射3天后，用乙醚吸入麻醉迅速剖取子宫，剪取子宫2cm，将其置于盛有30ml，洛氏液的小槽内，连于传感器上，水浴保持(36±0.5)。C，由通气钩向槽内通入氧气，用MS-302多媒体化生物信号记录分析系统记录正常收缩曲线，然后加入氯前列烯醇(PGF^类似物)5ug/0.5ml或縮宫素注射液0.5ug/5ml，使子宫平滑肌强烈收縮，稳定后加入本发明药物组0.6ml或痛经调理液0.4ml，观察记录给药后10min子宫平滑肌收縮张力、频率，结果见下表4及表5表4在PGF2a类似物或縮宫素作用下药物对离体子宫平滑肌张力的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注①与④，②与⑤，③与⑥相比P〈0.05，⑦⑧⑨组间P〉0.05结果表明在PGF2a类似物或縮宫素对大鼠子宫平滑肌收缩力上升不明显，但可以使张力增强，频率加快，给本发明药物组可使子宫平滑肌收縮幅度下降，张力下降，频率降低，冲洗药液后，其张力可逐渐恢复，本发明药物组I、II、III、IV对氯前列烯醇及縮宫素所致大鼠离体子宫平滑肌有明显抑制作用，有显著性差异。本发明药物组I、II、III、IV能明显增加大鼠离体子宫的收縮张力、收縮频率和收縮振幅。3活血化淤试验动物模型建立和分组以雄性大鼠为血瘀动物模型[l]。选用6—8月龄Wistar雄性大鼠48只,体重550士56g,随机分为阳性药物组，本发明药物组I、II、III、IV和模型组。以上共分6组，每组8只,分别每天灌服给予本发明药物组I、II、III、IVl.24gkg—1、阳性药物5.5mgkg"，连续22d，末次给药lh后采血。3.1血小板聚集功能(PAG)测定经颈动脉采血型3mL，加3.8枸椽酸钠溶液抗凝(1:9)于塑料管内,混匀,2h内以1000rmin"离心10min，制备富含血小板血浆(RRP)并吸出，剩余部分以3000rmin"离心15min得乏血小板血浆(PPP)，ADP为诱导剂,用TYXN291智能血液凝集仪测定lmin血小板聚集率[PAG(l)]，5min血小板聚集率[PAG(5)]，最大聚集率[PAG(Max)]。结果见表6表6对血小板聚集功能影响(x士s乂n-8)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注:与模型组相比:①PO.01,与阳性药物组相比:③P〈0.01由上表可见,本发明药物组I、II、III、IV均能明显抑制血小板聚集,其中高剂量组作用优于阳性药物(PO.Ol)。3.2血浆纤维蛋白原(FIB)测定颈动脉采血3mL,加3.8枸橼酸钠溶液抗凝(l:9),混匀，1000r'min"离心10min,制备富含血小板血浆，吸取制备的富含血小板血桨，按免疫透射比浊法用半自动生化分析仪测定，实验结果见表7、8、9。表7对全血黏度的影响(x土s)(r^8)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注:与模型组相比P<0.05，②P0.01。表9对RBC压积、RBC聚集指数、RBC电泳时间影响(x士s)(n-8)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注:与模型组相比①P0.05，②PO.01;与阳性对照组相比P<0.01。由表7、8结果可见，本发明药物组I、II、III、IV均能显著降低全血黏度;各组均能降低全血还原黏度。由表8、9结果可见，本发明药物组I、II、III、IV均能明显縮短大鼠RBC电泳时间,各组能降低血浆FIB含量。作用与阳性对照组比较有明显效果。4抗血栓形成4.1血栓素B2(TXB2)和62酮2前列腺素F1a(62keto2PGFla)测定经颈动脉采血3mL,本发明药物组2ED2TA，Na2溶液约0.2mL抗凝，混匀，4""C离心3500r'min",15min,分离血浆,TXB2、62keto2PGFla采用放射免疫法测定。全部操作按放免分析测定试剂盒说明书要求进行。实验结果见表io表10对血浆TXB2、62keto2PGFla含量影响(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注:与模型组相比:①PO.05,②PO.01,与低剂量组相比:③P0.01。由表10可见,用药各组均能降低鼠体内TXB2的含量,其中本发明药物组I、II、III、IV血浆TXB2含量均减少;各组血浆TXB2与62keto2PGFla比值较模型组明显降低(P〈0.05、PO.Ol)。4.2体外血栓测定颈动脉采血1.8mL，迅速注入直径为4mm血栓环内，放入体外血栓形成仪转盘上旋转15min后取下，将环内血栓倒在滤纸上，吸去余血,测量其长度、温重，干重。实验结果见表ll表ll对体外血栓形成的影响(x土s)(n-8)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注:与模型组相比P<0.01，与阳性对照组相比②P0.01。由结果看出，用药各组均有抗血栓作用，以中药高剂量效果最佳。未出现血栓，并优于阳性对照。实验例2鉴别筛选实验我们取本发明药物不同制剂，分别进行显微鉴别，证明该鉴别方法稳定，适用于本工艺制备方法下的所有制剂的薄层鉴别。1、益母草的薄层鉴别方法1)供试品溶液的制备供试品溶液的制备方法，根据所鉴别药物的具体有效成份确定，本发明药物中对益母草的鉴别主要是其中盐酸水苏碱的鉴别。采用正交试验以确定有效的分离提取方法。供试品溶液制备方法之一取本品，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇使溶解，作为供试品溶液。同法制备益母草药材的阴性供试品溶液。供试品溶液制备方法之二取本品，研细，加40ml无水乙醇，分3次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液。同法制备益母草药材的阴性供试品溶液。2)上述鉴别方法(2)中展开剂配比的优选吸取按上述方法制备的供试品溶液15ul，盐酸水苏碱的对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯一二氧六环一醋酸配比为(90:25:4)(75:25:4)，醋酸乙酯一无水乙醇一盐酸配比为(3:7:1)，正丁醇一盐酸一水配比为(1-10:0.2-3:0.1-2)，正丁醇一盐酸一乙酸乙酯配比为(8:3:1)为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，喷改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇，至斑点显色清晰。观察各薄层板上供试品展开的效果，结果见下表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>从上表可以看出展开剂为苯一二氧六环一醋酸，配比为(90:25:4)时,供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、斑点分离不好等现象。3)上述鉴别方法(2)中盐酸水苏碱检测限的测定，每lml对照品溶液中含0.05mg、O.lmg、0.2mg、0.3mg，取15ul。对照品溶液5nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯一二氧六环一醋酸配比为(90:25:4)为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，喷改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇，至斑点显色清晰。观察薄层板上供试品主斑点显色的效果，结果见下表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>从上表可以看出供试品浓度在0.2mg/ml时，在薄层板上显色清晰，适合试验要求。顾将10、定为盐酸水苏碱的检测限。因此，将供试品浓度定为2mg/ml以上，点样量15ul。4)上述鉴别方法(2)中样品溶液浓度的优选，每lml供试品溶液中含本品lg、3g、0.5g、0.7g。对照品溶液lul供试品溶液3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯一二氧六环一醋酸配比为(90:25:4)为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，喷改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇，至斑点显色清晰。观察薄层板上供试品主斑点显色的效果，结果见下表-样品浓度/mlO.lg0.3g0.5g0.7g显色效果供试品在相应对照品位置无斑点供试品在相应对照品位置斑点颜色浅，但有时不可见供试品在相应对照品位置斑点清晰供试品在相应对照品位置斑点显色十分清晰从上表可以看出供试品浓度在0.5g/ml时，在薄层板上显色清晰，适合试验要求。顾将5g/ml定为盐酸水苏碱的供试品浓度。4)阴性对照试验取缺益母草的阴性样品，照上述鉴别方法(2)中供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，展开后在对照品溶液对应位置上没有出现相应斑点，说明所选取的鉴别实验专属性强。实验例3含量测定实验检测仪器(室温检测)Agilent1100型高效液相色谱仪；十八烷基硅烷键合硅胶(4.6X150mm,5um)厂家:AgilentTechnologies安捷伦科技有限公司(中国)流动相甲醇-水-冰醋酸(25:75:1.8)检测波长330nm流速l.Oml/min柱温室温对照品来源阿魏酸购于中国药品生物制品检定所批号0773-9910测定方法取按[含量测定]项下供试品溶液的制备方法制备样品液；并按[制法]项下制备缺川芎和当归的空白样品，制备阴性对照液。用微孔滤膜(0.45"m)滤过。分别精密吸取阴性对照液、对照品液与供试品溶液各10"1，注入液相色谱仪，测定，即得。1.含量测定方法考察(1)稳定性试验对照品溶液，分别于配制后O、2、4、6、12、24小时，依法测定，结果表明，其在24小时内基本稳定，结果见下表时间(hr)02461224峰面积262.31573264.54422265.75272266.76435261.81965267.89224RSD(0/0)0.9161(2)线性关系考察取对照品溶液(0.00526mg/ml)摇匀，分别精密吸取l、3、5、7、9、注入高效液相色谱仪，测定峰面积，结果见下表，并绘制标准曲线，表明阿魏酸在0.00526ng-0.05786ng间呈线性关系，其回归方程为Area=4752.682781XAmt+6.03859(r=0.999403)进样量(yg)0.005260.015780.026300.036820.047340.05786峰面积28.2405580.44932133.97548183.39479233.81390276.32550(3)精密度试验精密吸取供试品溶液，(批号03110401)1(^1，重复进样5次，求得相对标准偏差<2%，结果见下表次数12345峰面积143.05620140.15735146.75420144.74504145.72687<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(4)重现性试验按正文方法，取同一批号(批号03110502)样品5份,分别进行测定，求得相对标准偏差<2%，结果见下表<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(5)回收率试验精密称取已知含量的同一批号(批号03110502)的样品l.Og再分别精密加入阿魏酸对照品溶液(5.26ug/ml)10ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>根据以上数据，将含量限度定为本品每袋含川芎和当归按阿魏酸(C10H1QO4)计，不得少于0.1mg。下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果具体实施方式实施例l:颗粒剂当归140g川穹130g桃仁60g干姜(炭)30g益母草350g川断40g以上六味，粉碎成粗粉，加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量,混匀，制成颗粒，于6(TC烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，制成466g，即得。实施例2:软胶囊当归140g川芎130g桃仁60g干姜(炭)30g益母草350g川断40g甘草(炙)40g;以上七味，粉碎成粗粉，加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，于6(TC烘干，粉碎，加入植物油及上述挥发油，混匀，制成77粒，即得。实施例3:泡腾剂当归140g川芎130g桃仁60g干姜(炭)30g益母草350g红花30-50g以上七味，粉碎成粗粉，加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖及泡腾剂适量，混匀，制成颗粒，于6(TC烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，制成466g，即得。实施例4:口服液当归180g川芎150g桃仁50g干姜(炭)30g益母草350g川断40g甘草(炙)40g;以上七味，粉碎成粗粉，加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量，混匀，喷入挥发油，加入香精与防腐剂适量，滤过，调整总量至770ml，搅匀，灭菌，灌装，即得。实施例5:胶囊剂当归160g川芎120g桃仁70g干姜(炭)40g益母草360g红花30g甘草(炙)35g;以上七味，粉碎成粗粉,加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量，混匀，制成颗粒，于6(TC烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，装胶囊，制成77粒,即得。实施例6:片剂当归140g川芎130g桃仁60g干姜(炭)30g益母草350g红花40g甘草(炙)40g;以上七味，粉碎成粗粉,加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量，混匀，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，于60。C烘干，压片，即得。实施例7:颗粒当归240g川芎90g桃仁24g甘草(炙)15g干姜(炭)15g益母草300g红花15g以上七味，粉碎成粗粉,加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，另入红糖适量，混匀，制成颗粒，于60'C烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，制成466g,即得。鉴别(1)取本品2g，加氨水数滴使湿润，再加氯仿20ml，于水浴上回流15分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液1滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液1滴，即发生白色沉淀；(2)取本品6g，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml,加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并碱液，用醋酸乙酯洗3次，每次15ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗3次，每次15ml，弃去苯液，继用乙醚提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20Kl、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-二氧六环-醋酸(90:25:4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取本品6g，加40ml无水乙醇，分3次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15|il、5pl分别点于同一硅胶H板上，以氯仿-甲醇(1:1)为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定-照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6X150mm,5um);甲醇-水-醋酸(25:75:1.8)为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；供试品溶液的制备取本品装量差异项下颗粒适量，研细，精密称取约3g，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液25ml，称定重量，超声处理(功率250W,频率40KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；测定方法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10^1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每袋含川芎和当归以阿魏酸(Cu)HH)04)计，不得少于0.1mg。功能与主治活血、祛瘀、止痛。用于产后恶露不行，少腹疼痛，也可试用于上节育环后引起的阴道流血，月经过多。规格每袋装6g，相当于原药材9g。权利要求1、一种治疗产后恶露不行的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为当归100-300重量份川芎40-180重量份桃仁10-90重量份干姜(炭)10-50重量份益母草200-400重量份川断10-90重量份。2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物中的原料药组成中当归100-300重量份川芎40-180重量份桃仁10-90重量份干姜(炭)10-50重量份益母草200-400重量份红花10-50重量份甘草(炙)10-50重量份。3、如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为当归100-200重量份川芎120-170重量份桃仁40-80重量份干姜(炭)20-40重量份益母草320-380重量份红花30-50重量份甘草(炙)30-50重量份。4、如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为当归140重量份川芎130重量份桃仁60重量份干姜(炭)30重量份益母草350重量份红花40重量份甘草(炙)40重量份。5、如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为当归160重量份川芎120重量份桃仁70重量份干姜(炭)40重量份益母草360重量份红花30重量份甘草(炙)35重量份。6、如权利要求1-5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为原料药粉碎成粗粉，加8-12倍量水提取挥发油5-8小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮2-3次，每次加6-8倍量水煎l-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓縮成稠膏，加入红糖适量，混匀，制成颗粒，于50-70。C烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，即得。7、如权利要求1-5所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取制剂相当于所述组合物原料药3g，加氨水数滴使湿润，再加氯仿15-25ml，于水浴上回流10-25分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加le/。盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液l滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液l滴，即发生白色沉淀；(2)取制剂相当于所述组合物原料药9g,，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml，加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取4-6次，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取4-6次，合并碱液，用醋酸乙酯洗2-4次，每次10-20ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗2-4次，每次10-20ml，弃去苯液，继用乙醚提取4-6次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20W、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以85-95:20-30:3-5苯-二氧六环-醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取制剂相当于所述组合物原料药9g，，加40ml无水乙醇，分2-4次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15pl、5pl分别点于同一硅胶H板上，以0.5-1.3:0.2-1.2氯仿-甲醇为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开,晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；20-30:70-80:1-2.5甲醇-水-醋酸为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加90-100:4-7甲醇-甲酸的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；供试品溶液的制备取制剂相当于所述组合物原料药4.5g，，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(90-100:4-7)的混合溶液25ml,称定重量，超声处理25-35分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(90-100:4-6)的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；测定方法:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各iopi，注入液相色谱仪，测定,即得。8、如权利要求7所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取制剂相当于所述组合物原料药3g，，加氨水数滴使湿润，再加氯仿20ml，于水浴上回流15分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液l滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液l滴，即发生白色沉淀；(2)取制剂相当于所述组合物原料药9g，，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml，加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取5次，每次乙醚量分别为20、20、15、15、10ml，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取5次，每次2%碳酸钠溶液量分别为20、20、15、15、10ml，合并碱液，用醋酸乙酯洗3次，每次15ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗3次，每次15ml，弃去苯液，继用乙醚提取5次，每次乙醚量分别为20、20、15、15、10ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液2(^1、对照品溶液5inl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以90:25:4苯-二氧六环-醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取制剂相当于所述组合物原料药9g,，加40ml无水乙醇，分3次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15pl、5pl分别点于同一硅胶H板上，以1:1氯仿-甲醇为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6X150mm,5um);25:75:1.8甲醇-水-醋酸为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加95:5甲醇-甲酸的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用0.45um微孔滤膜滤过，即得；供试品溶液的制备取制剂相当于所述组合物原料药4.5g，，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液25ml，称定重量，超声处理(功率250W,频率40KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用95:5甲醇-甲酸的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，即得；测定方法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各iow，注入液相色谱仪，测定，即得。9、如权利要求8所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下方法选取如下原料药物制成颗粒剂当归240重量份川芎90重量份桃仁24重量份甘草(炎)15重量份干姜(炭)15重量份益母草300重量份红花15重量份；以上七味，粉碎成粗粉，加10倍量水提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮二次，第一次加8倍量水2小时，第二次加6倍量水1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓缩成稠膏，另入红糖适量，混匀，制成颗粒，于6(TC烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，制成466重量份,即得。质量控制方法包括鉴别和含量测定鉴别-(1)取本品2g，加氨水数滴使湿润，再加氯仿20ml，于水浴上回流15分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸lml溶解，分别取盐酸溶液34滴于二个表面皿上，一个加碘化铋钾试液1滴，即发生橙红色沉淀；另一个加硅钨酸试液1滴，即发生白色沉淀；(2)取本品6g，加适量硅藻土研磨均匀，置索氏提取器中，以甲醇适量，加热回流至提取液近无色，回收甲醇，残渣加水50ml,加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并提取液，用2%碳酸钠溶液提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并碱液，用醋酸乙酯洗3次，每次15ml，弃去醋酸乙酯液，碱液加盐酸酸化至PH为23，再用苯洗3次，每次15ml，弃去苯液，继用乙醚提取5次(20、20、15、15、10ml)，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20pl、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-二氧六环-醋酸(90:25:4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色荧光斑点；(3)取本品6g，加40ml无水乙醇，分3次振摇提取，提取液蒸干，残渣加1.5ml乙醇溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加适量乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液各15pl、5pl分别点于同一硅胶H板上，以氯仿-甲醇(1:1)为展开剂，展开槽内放一盛氨水的小烧杯进行氨蒸气预饱和，展开，晾干后，以改良碘化泌钾，电热吹风至干燥，再喷10%硫酸乙醇溶液，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6X150mm,5um);甲醇-水-醋酸(25:75:1.8)为流动相；检测波长为330nm;理论板数按阿魏酸计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液，制成每lml中含5ug的溶液，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；供试品溶液的制备取本品装量差异项下颗粒适量，研细，精密称取约3g，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率40KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(95:5)的混合溶液补足减失的重量后，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得；测定方法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各lOpl,注入液相色谱仪，测定，即得。全文摘要本发明公开了一种治疗产后恶露不行的药物组合物及制备方法和质量控制方法。本发明的药物组合物原料药组成为当归、川芎、桃仁、干姜(炭)、益母草、川断组成，制备方法为原料药粉碎成粗粉，加8-12倍量水提取挥发油5-8小时，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再加水煎煮2-3次，每次加6-8倍量水煎1-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述溶液合并，浓缩成稠膏，另入红糖适量，混匀，制成颗粒，于50-70℃烘干，粉碎，用乙醇制成颗粒，喷入挥发油，即得。本发明采用高效液相色谱法对阿魏酸进行含量测定。本发明药物组合物用于治疗产后恶露不行，少腹疼痛具备很好的疗效。文档编号A61K9/16GK101288762SQ20071009855公开日2008年10月22日申请日期2007年4月20日优先权日2007年4月20日发明者付建家,付立家申请人:北京亚东生物制药有限公司