专利名称：：具有防辐射、抗氧化以及保护dna作用的组合物及用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物及用途，具体来说是灵芝多糖和从海洋鱼类中提取的海洋蛋白肽配伍剂及在制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品中的应用。属医药和食品保健领域。
背景技术：
：-近年来，由于科学技术的进步，核原子能、"Coy、X射线、放射性同位素等的应用；通讯设备、电器、电磁场、微波等新技术、新产品的开发；辐射在矿产等资源探测中的不断使用；以及放射疗法在肿瘤治疗中的广泛应用等，导致世界范围内的放射性污染程度在不断扩大，给生物界带来了潜在的、慢性的副作用和急性伤害。急性大剂量辐射损伤可引起严重的急性放射病或综合症(acuteradiationsyndrome,ARS)，急性全身照射在剂量低于1Gy时，少数人可出现头晕、乏力、食欲下降等轻微症状，血象暂时性改变等。慢性放射损伤是指在较长时间内分散接受一定剂量的照射。慢性放射有五大危害一是使红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白减少，造血细胞受损而导致造血障碍；二是引起眼睛白内障，是最早发生和最常见病症；三是远期预后可能导致脱发、早衰、诱发细胞遗传学改变，白血病及其它恶性肿瘤；四是使生育能力下降，甚至导致精子和卵子中染色体畸变和基因突变，引起不育或后代畸形；五是可能导致生长发育障碍，严重时引起寿命縮短。辐射对人体的损害，主要有两条作用途径一是，可以直接作用于细胞的大分子上，引起电离激发化学键断裂，使分子变性和细胞结构破坏，如作用于胞核或胞质中的遗传物质DNA、RNA等，或细胞膜脂质、酶系等，使其直接受到损伤；二是，可以作用于机体内水分子，使其发生电离和激发，产生大量的具有强氧化性能的自由基和活化分子，H+、*0H、H202、H20、等。这些自由基及活化分子化学性质活跃，很容易与细胞、组织中大分子受体作用，使生物大分子受到间接损伤。生物分子损伤，可导致细胞代谢失常，功能和结构破坏甚至死亡。细胞的损伤和死亡可引起组织和器官原发损伤，或通过神经和体液的作用引起机体的继发损伤，一些大分子细胞和器官有时具有一定修复、再生和代偿能力，有些细胞因此可能改变结构，如基因突变，染色体畸变等，远期效应还可诱发癌症。众所周知，癌症是当今危害人类生命健康最严重的疾病之一。在癌症综合治疗中，70%80%的患者需要放射治疗和化学治疗，而放疗中会产生大量的a、e和Y射线电离辐射，在杀死癌细胞的同时，也大量损伤人体的正常细胞和组织，使患者免疫功能下降，白细胞大量减少，胃肠功能紊乱及产生活性氧类(ROS)和自由基等副作用，致使患者不能继续进行有效治疗并影响患者治疗后的康复。此外，随着科技和生产的发展，各种产生放射性物质的仪器、装置、电脑和电视大量涌现，亦会给直接长期接触或使用上述产品的人们身体造成损伤。由此可见，辐射损伤已经严重危害到人类的健康，对其防护的研究具有深远以及现实的意义。辐射的防护除了应加强严格的管理措施外，另一个重要的方面是开发防辐射的药物及功能食品，通过对新功能食品的经常服用，达到减少辐射损伤或对辐射损伤进行有效的修复。目前，辐射防护剂多为巯基类化合物，在有效剂量时普遍毒性较大。生物活性肽是指具有特殊生理功能的肽类物质。肽与蛋白质都是氨基酸以酰胺键互相连接在一起形成的化合物，不同的是肽的氨基酸聚合度小，蛋白质的聚合度大。在结构上，肽处于氨基酸和蛋白质的中间位置，但它具有氨基酸与蛋白质所不能替代的功能。长期以来，人们仅仅把食物蛋白质当作一种营养丰富的成分，认为蛋白质只有水解成游离氨基酸后才能被吸收。但是近年来的研究发现，蛋白质经消化道酶促水解后，主要以10个或10个以下氨基酸组成的寡肽形式被吸收。寡肽比单个氨基酸的吸收更有效，并能直接参与蛋白质的合成，因此提高了机体对蛋白质的利用率。自然界中存在着大量的生物活性肽，它们在生物活动中起着非常重要的作用，分别具有改善和提高矿物质吸收、抗氧化、抗菌、抗肿瘤、保护心血管、免疫调节、抗衰老等作用。应用这些活性肽可以作为药物、疫苗以及保健品等。大量研究证明，当人体内缺乏一些调节生理功能的肽时，会导致人体机能的改变。因此从营养学的角度出发，在食物结构调整以满足人体必需氨基酸需要的同时，适当补充某些生物活性肽对增强防病、抗病能力以及延缓衰老都具有深远意义。目前，开发和研究生物活性肽类食品在国际保健品行业中已成为一个焦点。许多天然的生物活性肽具有改善和提高矿物质吸收的特性，它们有特异、安全和较高的活性，这类生物制剂具有重要的应用价值。海洋是地球上资源最丰富的领域，由于海洋生物物种的生态环境比陆生生物复杂得多，其赋予海洋生物的某些特异的化学结构是陆地生物体内尚未发现的，这使得海洋成为创新药物与功能性保健食品的资源宝库。自20世纪70年代以来，人们已经从海洋生物中分离出数十万种化学结构新颖及特异的高活性、高药效的生物活性物质，包括肽类、蛋白质类、多糖类、生物碱类、萜类、大环聚酯类等。海洋生物活性物质中肽类是数量最庞大的一类化合物，达数万种之多，浙江海氏生物科技有限公司生产的海洋蛋白肽(企业标准号为Q/HSBS3-2006,浙江舟山市技术监督局备案号为Q330900.X20.1123—2006，卫生许可证是浙卫食证字2006第33090310003号)就是其中之一。海洋蛋白肽是以来源广泛的海洋鱼类(三文鱼、大马哈鱼、罗非鱼等)的鱼肉为原料，通过水解制造出分子量在1002000的寡肽混合物，具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点，目前只作为补充蛋白质的食品营养添加剂。迄今为止，还没有关于海洋蛋白肽，尤其是海洋蛋白肽与灵芝多糖配伍制剂在抗辐射药品、防辐射保健食品以及抗辐射食品中应用的任何报导。
发明内容本发明是为了解决现有技术所存在的辐射防护剂毒性较大的技术问题，提供一种容易吸收、吸收快、低粘度及水溶性好的具有抗辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物及用途。本发明的技术解决方案是一种具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物，其特征在于由海洋蛋白肽和灵芝多糖按重量比为18:1的比例配制而成。所述的灵芝多糖是取灵芝孢子粉置于低温条件下，按常规物理抗氧化破壁法提取精华，纯度达80%以上。一种具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物作为制备防辐射药物、或防辐射食品的用途。所述防辐射药物、防辐射保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂或口服液。所述防辐射食品为淀粉制品、乳及乳制品、豆制品或烘焙制品。本发明是以现有的海洋蛋白肽为原料，并以灵芝孢子粉为原料在低温条件下，按常规物理抗氧化破壁法提取精华，制造出纯度达80%以上的灵芝多糖，将海洋蛋白肽与灵芝多糖按重量比为18:1进行配伍，所得制剂具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。本发明制剂对辐照小鼠30d存活率和平均存活时间、外周血白细胞数、骨髓细胞DNA含量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)以及半数溶血值(HC5Q)均有所提高，具有防辐射的功效，且其防辐射效果优于单独给予灵芝多糖。将其应用于制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品，可解决现有巯基类化合物所普遍存在的毒性较大的问题，为通过饮食减少辐射损伤或对辐射损伤进行有效修复提供一种新途径。该产品适合电脑前工作者、手机人群、放射工作室医务人员及暴露在射线、电磁辐射下的广大人群以及放疗患者等。具体实施例方式下面将结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。实施例以浙江海氏生物科技有限公司生产的海洋蛋白肽(企业标准号为Q/HSBS3-2006，浙江舟山市技术监督局备案号为Q330900.X20.1123—2006)为原料，取灵芝孢子粉置于低温条件下，按常规物理抗氧化破壁法提取精华，制成纯度达80%以上的灵芝多糖。将海洋蛋白肽和灵芝多糖按重量比为18:1的比例配制而成，所生产的配伍制剂可在制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品中的应用，与其他药用或食用辅料制成的防辐射药物和防辐射保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液等；防辐射食品是将海洋蛋白肽与灵芝多糖添加到淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品中等。本发明制剂防辐射的动物实验研究。1.实验方法清洁级ICR健康雌性小鼠，体重1822g，北京大学医学部实验动物部提供。小鼠适应性喂养后，按体重随机分6组空白对照组、辐射对照组、4个实验组，即灵芝多糖组(GLP)、海洋蛋白肽(MPP)和灵芝多糖配伍(MPP+GLP)高、中和低剂量组，剂量分别为0.025g/kgBW、0.475g/kgBW、0.2375g/kgBW和0.12375g/kgBW，海洋蛋白肽(MPP)和灵芝多糖配伍(MPP+GLP)高、中和低剂量组的剂量分别相当于人每天用量的30、10和5倍。受试物按不同比例掺于饲料中，空白对照组和辐射对照组给予正常饲料。每周称鼻体重以及进食量，实验期间动物自由进食、饮水。2.实验内容2.1小鼠30天存活实验除空白对照组外，其余5组于喂养不同饲料第14天，用^CoY射线对动物进行一次性全身照射(吸收的总剂量为8Gy)，辐射后，继续给予饲料，记录小鼠30d存活数量和死亡小鼠平均活存时间。2.2外周血白细胞计数除空白对照组外，其余5组于喂养不同伺料第14天，一次性全身照射(吸收的总剂量为4.5Gy)后的第3天和第14天，测定外周血白细胞数。2.3骨髓细胞DNA含量测定除空白对照组外，其余5组于喂养不同饲料第14天，一次性全身照射(吸收的总剂量为4.5Gy)后的第3天，测定骨髓细胞DNA含量。2.4血中超氧化物歧化酶(SOD)活性实验除空白对照组外，其余5组于喂养不同饲料第14天，一次性全身照射(吸收的总剂量为4.5Gy)后，继续喂养14天后，测定血清超氧化物歧化酶(SOD)水平。2.5血清溶血素实验除空白对照组外，其余5组于喂养不同饲料第30灭，一次性全身照射(吸收的总剂量为6Gy)24h后，测定血清半数溶血值(HC50)。3.结果3.1本发明制剂对辐照小鼠30d存活率和平均存活时间的影响由表1可见，全身一次性照射^CoY射线(8Gy)后，与辐射对照组比较，MPP+GLP高剂量组的30d存活率显著提高，MPP+GLP高和中剂量组的平均存活时间与辐射对照组比较显著延长(P<0.01)，且MPP+GLP高剂量组的效果优于GLP组。表1本发明制剂对辐照小鼠30d存活率和平均存活时间的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>GLP组10466025.5士6.31bMPP+GLP高10388027.5士5.52bMPP+GLP中10466024.3土7.65bMPP+GLP{氐10644019.3士9.53aa:与空白对照组比较，PO.01;b:与辐射对照组比较，P<0.013.2本发明制剂对辐射小鼠外周血白细胞数的影响由表2可见，全身一次性照射^CoY射线(4.5Gy)后3天，各辐照组白细胞数均显著低于空白对照组(PO.Ol)，表明辐射损伤模型成立。GLP、MPP+GLP高剂量组与辐射对照组比较，升高白细胞作用有显著性(P<0.05)，且MPP+GLP高剂量组的效果优于GLP组。照射后14天，GLP、MPP+GLP高、中和低剂量组与辐射对照组比较，升高白细胞作用均有显著性(P<0.05)，且MPP+GLP高和低剂量组的效果优于GLP组。表2海洋蛋白肽对辐射小鼠外周血白细胞数的影响S~~照射前白细胞照射后3天白细胞照射后14天白细数数(X109/L)数(X1。9/L)胞数(X1()9/L)空白对照组108.40土0.967.68±1.71b4.05±1.25b辐射对照组108.50±0.710.77±0.13a0.83±0.16aGLP组107.58±0.921.66士0.31ab1.94±0.68abMPP+GLP高108.41±0.741.81±0.28ab2.15±1.16abMPP+GLP中108.07±1.571.15±0.18aL74士0.54abMPP+GLP低107.80±1.06U7土0.15a1.99±0.70aba:与空白对照组比较，PO.01;b:与辐射对照组比较，PO.053.3本发明制剂对对辐射小鼠骨髓细胞DNA含量的影响由表3可见，全身一次性照射^CoY射线(4.5Gy)后3天，各辐射组骨髓细胞DNA含量均显著低于空白对照组(P<0.01)。与辐射对照组比较，GLP、MPP+GLP高剂量组的骨髓细胞DNA含量有显著提高(P<0.05)，且MPP+GLP高剂量组的效果优于GLP组。表3本发明制剂对辐射小鼠骨髓细胞DNA含量的影响组别只数骨髓细胞DNA含量(OD260nm)空白对照组101.16±0.228b辐射对照组100.31±0.098aGLP组100.40±0.068abMPP+GLP高剂it组100.42±0.094abMPP+GLP中剂lt组100.37±0.062aMPP+GLP《氐齐lji!组100.35±0.071aa:与空白对照组比较，P<0.01;b:与辐射对照组比较，P<0.053.4本发明制剂对辐射小鼠血超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响由表4可见，全身一次性照射^CoY射线(4.5Gy)后14天，与辐射对照组比较，GLP、MPP+GLP高、中剂量组小鼠血清中超氧化物歧化酶SOD含量有显著提高(P<0.05)，且MPP+GLP高剂量组的效果优于GLP组。表4本发明制剂对辐射小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响组别只数照射后14天血清SOD含量(U/ml)空白对照组10446.48±22.13b辐射对照组10398.45±20.98aGLP组10425.21±16,03abMPP+GLP高齐Uit组10434.30士12.29bMPP+GLP中剂i!组10419.23±19.65abMPP+GLP低剂it组10413.59±20.77aa:与空白对照组比较，P<0.05;b:与辐射对照组比较，PO.053.5本发明制剂对辐射小鼠血清溶血素的影响由表5可见，全身一次性照射^CoY射线(6Gy)24h后，与辐射对照组比较，GLP、MPP+GLP高和中剂量组对小鼠血清中半数溶血值有显著提高作用(PO.Ol)，且MPP+GLP高剂量组的效果优于GLP组。表5本发明制剂对辐射小鼠血清半数溶血值(HC5())的影响组别只数照射后14天血清半数溶血值(HC50)空白对照组10138.22±6.22b辐射对照组1075.87±6.91aGLP组1092.38±5.62abMPP+GLP高齐lji隨1096.34±6.21abMPP+GLP中齐Uii组1088.04±6.62abMPP+GLP低齐Ui!组1079.52±6.02aa:与空白对照组比较，P<0.01;b:与辐射对照组比较，P<0.014.结论结果显示，本发明制剂一海洋蛋白肽和灵芝多糖配伍剂，对辐照小鼠30d存活率和平均存活时间、外周血白细胞数、骨髓细胞DNA含量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)以及半数溶血值(HC5。)均有所提高，具有防辐射、增强免疫、保护DNA以及抗氧化的作用，且配伍剂的效果优于单独给予灵芝多糖的效果，按照卫生部《保健食品功能学评价程序和检验方法》对辐射危害有辅助保护功能的评价标准，其对辐射危害有辅助保护功能的作用。权利要求1.一种具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物，其特征在于由海洋蛋白肽和灵芝多糖按重量比为18∶1的比例配制而成。2.根据权利要求1所述的具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物，其特征在于所述的灵芝多糖是取灵芝孢子粉置于低温条件下，按常规物理抗氧化破壁法提取精华，纯度达80%以上。3.—种如权利要求1所述的具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物作为制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品的用途。4.根据权利要求3所述具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物作为制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品的用途，其特征在于所述防辐射药物或防辐射食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂或口服液。5.根据权利要求3所述具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物作为制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品的用途，其特征在于所述防辐射食品为淀粉制品、乳或乳制品、豆制品或烘焙制品。全文摘要本发明公开一种具有防辐射、抗氧化以及保护DNA作用的组合物，是由海洋蛋白肽和灵芝多糖按重量比为18∶1的比例配制而成，作为制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品的用途。所得制剂具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。本发明制剂对辐照小鼠30d存活率和平均存活时间、外周血白细胞数、骨髓细胞DNA含量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)以及半数溶血值(HC<sub>50</sub>)均有所提高，具有防辐射的功效，且其防辐射效果优于单独给予灵芝多糖。将其应用于制备防辐射药物、防辐射保健食品或防辐射食品，可解决现有巯基类化合物所普遍存在的毒性较大的问题。文档编号A61K38/17GK101168047SQ20071015764公开日2008年4月30日申请日期2007年10月24日优先权日2007年10月24日发明者勇李,杨睿悦,蔡木易申请人:珍奥集团股份有限公司