专利名称：：一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法
技术领域：
I木发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，以及该药物组合物的制备方法，属于中药领域。[
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溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)又叫慢性非特异性结肠炎(简称溃结)，本病常常迁延不愈，反复发作，难以根除，是世界公认的难治性疾病，现已被世界卫生组织列为疑难病之一。本病在全球范围内均有发生，现有研究资料表明其流行病学特征受地域、种族、年龄等影响较大，北欧、西欧、北美的发病率高于世界其他地区，其发病率在5/10万一12/10万之间，另一份来自以色列的研究报告指出其发病率高达167/10万人，任何年龄均可发病，多见于20—40岁，约占70%,男女发病率无明显差别。我国虽发病率较欧美低，但己有研究报道指出，随着人们生活环境和生活方式的改变，近年来UC发病率已有增加的趋势，在过去的10年里，我国部分地区炎症性肠病的发病率增加了4倍，其中尤以UC的增加更为明显，因此，进行溃疡性结肠炎药物的研究具有实际的意义。溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，UC)是一种主要累及直肠、结肠粘膜的慢性非特异性炎症。病程迁延不愈，长达十几年甚至几十年。一般认为本病约80%为周期性发作，10—15%的患者呈慢性过程，5_10%表现为急性发作，须行紧急的外科手术治疗。病情反复发作，虽然许多患者可以长期完全缓解，但大宗的病例研究表明，在本病发病后18年里，只有1%的患者无复发，累及保持2年不复发的可能性只有20%，10年不复发的不到5%。而且病程越长，恶变的危险性越高，病程大于20年则恶变率可达30%。该病属于中医"泄泻"、"下痢"等范畴，急重症者则为中医的"肠风下血"、"肠擗脏毒"。临床以腹痛、腹泻、粘液血便、里急后重为主要表现，中型和重型患者可出现发热、消痩、低蛋白血症、贫血等表现。常常引起大量便血、中毒性巨结肠、肠穿孔、息肉、癌变、肠狭窄、直肠及肛周病变、肝脏病变、关节炎、皮肤损害、眼病、血栓栓塞性并发症、牛长迟滞、小肠炎等多种并发症。UC的其病因和发病机制尚不清楚，可能是环境因素、免疫、遗传、感染等多种因素相互作用，某种抗原的持续刺激，启动了肠道免疫和炎症过程，最终导致免疫反应过度亢进和难于自限，近年来氧自由基损伤、某些细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-a)、白介素等在UC发病中的作用受到重视。目前，西医治疗UC的主要药物为氨基酸水杨酸类、皮质类固醇、免疫抑制剂等，这些药物的初期效果尚可，长期使用存在较多副作用。现代中医对UC的病因病机、治则治法与辨证论治研究较多，积累了丰富的经，取得了许多西药所无法取得的效果，正日益受到国内外学者的高度重视。溃疡性结肠炎的中成药研制、开发近几年取得了较快发展，上市的品种主要有复方黄连素片、补脾益肠丸、结肠炎丸、加味香连丸、肠炎宁胶囊、固本益肠片、清肠栓、止泻灵冲剂、泻痢固肠丸、胃肠安丸、健脾理肠片、止湾定胶囊等二十余种，虽然这些品种在改善UC症状、减少复发等方面有一定的治疗作用，但要达到疗效明确、控制复发、改善预后的目的，仍需进行不断的探索与研制新药。[
发明内容本发明的目的在于提供一种治疗溃疡性结肠炎的中药新药，以及它的制备方法。本发明的目的是这样实现的一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，其特征在于它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。该药物组合物的制备方法包括以下步骤a)按重量配比5-15:5-15分别称取黄连、苍术备用；b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉，苍术提取挥发油后，殘渣再水提，形成浸膏粉。c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成形。溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)或慢性非特异性结肠炎(简称溃结)，是一种主要累及直肠、结肠粘膜的慢性非特异性炎症。病程迁延不愈，长达十几年甚至几十年，亦有发生癌变的可能性。临床以腹痛、腹泻、粘液血便、里急后重为主要表现，中型和重型患者可出现发热、消痩、低蛋白血症、贫血等表现。木病归属于中医"久泄"、"久痢""休息痢"等病症范畴，虽病变机制复杂，但其主要机制与以下二点关系密切。1、以湿邪内盛为标《素问*阴阳应象大论》说"清气在下，则生飧泻……湿盛则濡泻。"《难经》亦指出"湿多成五泄"。《医学心悟*泄泻》中提到"书云，湿多成五泻，泻之属湿也，明矣"。当湿之产牛，或因外感，内客于脾，或因饮食不节，脾胃受损，水反为湿；或情志失调，肝木乘脾，运化失常。湿性重浊黏滞，故发病多缓慢，病程长，反复难愈。湿为阴邪，其性趋下，故病位始于大肠。初病正气较强，湿邪从阳化热，或因嗜食肥甘，湿热内生，以致形成大肠湿热证，大肠者传导之官，湿热留恋肠府，气机受阻，损伤肠络，故见腹痛、下痢脓血、里急后重等症。2、以脾气虚弱为本脾有化生水谷精微、运化水湿、主升清等功能，是人体后天之木、气血生化之源。喜燥恶湿是脾的特点，湿邪内盛，则易困阻脾气；迁延不愈，使脾气日渐虚损，导致脾运化水湿及气血生化功能障碍、脾气不升、清气下泻，出现久泄久痢、气血虚弱之象。总之湿邪内盛、从阳化热、脾气虚弱，虚实夹杂是溃疡性结肠炎发生、发展的重要中医病机特点，得到后世医家的认同。本药物组合物正是针对UC的上述病机特点，在清热燥湿健脾、虚实兼顾的治法指导下组方用药。药味精简，全方寒温并用以协调阴阳、泻补同行以兼顾虚实，有利于UC肠道郁积湿热的清除、脾气虚弱的恢复，方证相符。且现代药理研究证实本药物组合物各单味药分别含有抗溃汤、抗炎、抗菌等药理活性成分。因此本方对于UC的治疗既符合中医理论指导，又具有现代药理学的客观依据。本发明(药物组合物)由黄连、苍术等药组成。各药配伍比例为5-15:5-15，上述药物组合物按比例称取后,黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，殘渣再水提，形成浸膏粉；将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，干燥后即得本发明(药物组合物)粉末剂。方中黄连具有清热燥湿，《本草正义》谓"黄连大苦大寒，苦燥湿，寒胜热，能泻降一切有余之湿火.....中以平肝胃之呕吐，下以通腹痛之滞下，皆燥湿清热之效也"。现代药理研究证实黄连及其主要有效成分小檗碱具有说广谱抗菌、抗炎、抗腹泻、抗溃疡等作用。方中苍术性辛、温，味苦，具有燥湿健脾之功，《珍珠囊》认为苍术"能健胃安脾，诸湿肿非此不能除。"《木草纲目》谓"治脾湿下流，浊沥带下，滑泻肠风。"现代药理研究证实苍术提取物能调节运动功能，有较强的抗溃疡、增强胃肠道粘膜保护作用，同时具有一定程度的抗毒杀菌效应。总之木复方药物中黄连、苍术二药相伍，寒热并用以协调阴阳、泻补同行以兼顾虚实，有利于溃疡性结肠炎湿浊、郁热之标实的清除、脾(胃)之木虚的恢复，方证相符。且现代药理研究证实黄连、苍术中均含有抗炎抗菌、止泻抗溃疡的药理活性成分，因此，本方对于溃疡性结肠炎的治疗既符合中医理论指导，又具有药理客观依据。溃疡性结肠炎是一标实本虚之病，标实以湿浊郁热为主，本虚突出的表现为脾气虚弱。本发明药物组合物具有清热燥湿以治标、补益脾(胃)以治本的作用，本方组方精简，寒温同用、清补兼施。对慢性溃疡性结肠炎疗效突出。实施例l:本发明所述药物组合物主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。a)按重量配比5-15:5-15分别称取黄连、苍术备用；b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；肉桂提取挥发油；苍术提取挥发油后，再水提，形成浸膏粉；c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成口服剂型。例如可加工成颗粒剂(冲服剂)、片剂(素片、包衣片、分散片、速崩片、泡腾片等)、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊)、口服液体剂。实施例2:按重量配比10:15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得本发明(药物组合物)。实施例3:按重量配比10:IO分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得本发明(药物组合物)。实施例4:按重量配比10:5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l,制得本发明(药物组合物)。实施例5:按重量配比15:5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得木发明(药物组合物)。实施例6:按重量配比5:15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得木发明(药物组合物)。实施例7:按重量配比5:5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得本发明(药物组合物)。实施例8:按重量配比15:15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例l，制得本发明(药物组合物)。本发明(药物组合物)对大鼠溃疡性结肠炎效应观察1材料与方法1.1药品和试剂受试药物本发明药物组合物，浸膏粉，用蒸馏水溶解，即3.5g生药/ml。市面对照药物复方黄连素片(黄连、木香等)，四川省天基生物药业有限公司，批号Z51021615，每片含盐酸小檗碱30mg。溶媒对照氯化钠注射液(生理盐水)，由山东长富洁晶药业有限公司生产，批号07020821。三硝基苯磺酸，为SIGMA产品。SOD和MDA检测试剂盒，为南京建成生物工程公司产品，生产批号分别为20071207和20071216。TNF-a和IL-6检测试剂盒为深圳晶美生物工程有限公司口广叩o1.2仪器MP120-1电子天平，为上海第二天平仪器厂产品；LDZ5-2离心机，为北京医用离心机厂产品。1.3实验动物清洁级SD大鼠，体重160-200g，合格证号2006A064;由中山大学实验动物中心提供。1.4造模方法取体重160g190g健康大鼠60只，随机分为观察组低(1.5g牛药/kg)、中(3g牛药/kg)、高(6g牛药/kg)组，市面对照药复方黄连素(0.14g/kg)组，正常对照组(给予牛理盐水)和模型对照组(给予牛理盐水)，每组10只。大鼠禁食24h后，用大鼠灌胃管从肛门插入至肠内8cm，除正常对照组大鼠灌牛理盐水外，其余各组大鼠均注入50%乙醇配制的三硝基苯磺酸组成的混合药液0.5ml/只(100mg/kg)，倒置鼠30s，使药液达全结肠，然后放回笼内饲养。造模第2天开始给药，连续给药14天。造模第14天，以3%戊巴比妥钠麻醉，从腹腔静脉抽血，分离血清。1.5药物剂量剂量设定按每人每天20g生药算，折算成大鼠剂量约为3g/kg，此剂量为实验中剂量，取上下2倍剂量分别为高剂量和低剂量，则大鼠给药低、中、高剂量每天分别为1.5g生药/kg、3g生药/kg、6g生药/kg。阳性对照药物复方黄连素片，O.lg/片，按成人每天口服0.9g算,折算成大鼠剂量约为每天0.14g/kg。药物稀释方法、给药途径及体积取同一批号的各实验所用药品，用蒸馏水配成所需浓度的药液。给药途径灌胃给药。大鼠给药容积为1.0ml/100g。1.6检测指标1.6.1症状观察分别在造模第l、4、7、10、14d观察大鼠粪便，并利用粪便潜血试纸对每只大鼠粪便进行隐血检测，记录大鼠发生腹泻、血便的例数。并于造模前以及造模后7d、14d对各组大鼠进行体重称量并记录。1.6.2结肠黏膜组织损伤评分将距肛门10cm长末端结肠取出，沿肠系膜纵行切开，用冰生理盐水冲洗。将黏膜向上展开，观察黏膜损伤并参照文献方法及标准评价CMDI，评分标准为0为无损伤；l为轻度充血,水肿，表面光滑，无糜烂或溃疡；2为充血水肿，黏膜粗糙呈颗粒状，有糜烂或肠黏连；3为高度充血水肿，黏膜表面有坏死及溃疡形成，渍疡最大纵径〈1cm，肠壁增厚或表面有坏死及炎症；4为在3分基础上溃疡最大纵径Mcm，或全肠壁坏死。1.6.3病理组织切片观察取肛门以上6cm处肠段，置10。/。中性甲酸中固定，石蜡包埋，行4um厚连续切片，作HE染色，进行光镜下观察。1.6.4检测血清和结肠组织中超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量8SOD活性采用微量快速测定法，取血清或组织匀浆液1OOu1加入盛有5ml生理盐水刻度离心管中，2000r/min离心10min，弃尽上清液，加预冷双蒸水O.2ml95%乙醇O.lml、三氯甲脘O.lml,振摇片刻，3000r/min离心10min，取上清液，再按试剂盒要求检测；MDA含量按改良八木国夫法测定。1.7统计学处理所有实验数据均以；±逮示。计量数据采用Microsoftexcel进行方差分析及组间检验。2结果2.1—般状态及腹泻与便血情况正常对照组大鼠活动如常，反应机警，毛发有光泽，饮食正常，体重增长较多，无腹泻及便血；造模组大鼠精神萎靡，毛发无光泽，饮食减少，均出现不同程度的腹泻、便血，体重有所下降，无死亡出现。与模型组相比，观察组各组以及复方黄连素组大鼠发生腹泻、便血例数明显减少，对体重无明显影响，结果见表l-l和表l-2。表l-l各组大鼠发生腹泻和便血的数量(n=10)组另ljId腹泻例数(只)4d7d10d14dld便血例数(4d7d只)10d14d正常组0000000000模型组1010109910101099观察组低108764108665观察组中107642107532观察组高106532106522复方黄连素107653106543表l-2对结肠炎大鼠体重的影响(；±s)_组别剂量N造模前体重造模7d体重造模14d体重<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与正常对照组比4交*为P<0.01;给药各组与才莫型组比4交A为P<0.052.2结肠黏膜组织损伤评分将大鼠解剖后观察结肠外观及黏膜表面发现，模型组大鼠的结肠有多例与相邻脏器有轻度的粘连，结肠充血水肿，在距肛门8cm的肠段有较大的溃疡病灶，病灶处结肠壁增厚，肠黏膜表面发生溃疡糜烂成糊状。给药各组大鼠结肠充血水肿等炎性症状明显改善，溃疡面积减小，修复愈合较好。与模型组比较，观察组各剂量均明显改善修复(P〈0.01)。其中观察组中、高剂量修复损伤效果明显优于复方黄连素组(P〈0.05)。具体结果见表1-3。表l-3对结肠炎大鼠肉眼结肠黏膜组织损伤评分(；±^)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与正常对照组比较并P〈0.01;与模型对照组比较*P<0.05**P<0.01;与复方黄连素组组比较，A为P〈0.052.3结肠组织病理学变化正常组大鼠结肠组织结构清晰，黏膜完整，肠腺丰富，排列紧密；模型组大鼠结肠组织黏膜坏死脱落，溃疡形成，溃疡面积较大，大量屮性粒细胞沒润，腺体排列不齐或消失；与模型组比较，观察组高剂量组大鼠结肠组织均表现肠黏膜上皮少数脱落缺损，溃疡区域明显减少，黏膜周围上皮增牛修复，大部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织增生显著，腺体排列较整齐，表现出明显的改善修复效果。观察组中剂量大鼠肠黏膜上皮脱落缺损明显减轻，溃疡区域明显减少，黏膜周围上皮增生修复，大部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织增生，腺体排列较整齐，表现出明显的改善修复效果。观察组低剂量大鼠肠黏膜上皮脱落缺损相对减轻，溃疡区域减少，黏膜周围上皮增生修复，部分覆盖，炎细胞浸润较明显，肉芽组织增生，部分腺体排列不齐，有一定改善修复效果。复方黄连素片组大鼠肠黏膜上皮脱落缺损减轻，溃疡区域减少，黏膜周围上皮增生修复，部分覆盖，肉芽组织增生，部分腺体排列不齐，少数粘膜上皮还有出血点，炎细胞浸润明显，多数有一定改善修复效果。总的来说，观察组中、高剂量修复较佳，优于复方黄连素组，复方黄连素组与观察组低剂量组相近。2.4血清和结肠组织中SOD活性和MDA含量与正常对照组比较，模型组大鼠血清与结肠组织中SOD活力明显下降(P〈0.01)，MDA含量显著上升(P〈0.01)。观察组各剂量组与复方黄连素组均能明显抑制SOD的下降和MDA的上升((P〈0.05或P〈0.01).苍术合剂中、高剂量组血清SOD水平明显高于黄连素组(P〈0.05);观察组中剂量组组织SOD水平明显高于黄连素组(P〈0.05)。详细如表1-4所示。表l-4对血清以及肠组织SOD和MDA的影响(；±s)_血清SOD血清MDA肠组织SOD肠组织MDA(u/ml)(umol/U(u/ml)(umol/U正常对照组一10106.7±19.35.41±1.7581.5±18.90.74±0.23模型对照组_1074.9±15,4#9.02±1.99#48.4±13.0#1.32±0.38#观察组低1.51090.5±15.0*6.68±1.42**65,2±12.5**0.90±0.23**剂组别g/kg只观察组中310100.4±13.5**A6.02士1.53林75.3±11.5**A0.84±0.18**H察纟且高610103.5±14.7**A6.03士1.44林70.1±10.0**0.78±0.19林复方黄连素0.141088.l土ll.3*7.10±1.59*62.9±13.5*0.86±0.24**注与正常对照组比较'P〈0.01;与模型对照组比较，*P<0.05**P<0.01;与复方黄连素组比4交，A为P〈0.05结论本药物组合物具有明显抗大鼠溃疡性结肠炎的效应，其作用可能与抗氧化、抑制肠道氧化应激损伤密切相关。权利要求1、一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，其特征在于它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。2、一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物的制备方法，它包括以下步骤a)按重量配比5-15:5-15分别称取黄连、苍术备用；b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，殘渣再水提形成浸膏粉；c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成形。3、根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于将黄连、苍术提取加工成治疗溃疡性结肠炎的口服剂型、肠道给药剂型，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液体剂、肠道给药液体剂、栓剂等。全文摘要本发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法。它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。该药物的制备方法包括a)按重量配比分别称取黄连、苍术备用；b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，残渣再水提形成浸膏粉；c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成口服剂型。本发明药物具有清热燥湿以治标、健脾补益以治本的作用，对慢性溃疡性结肠炎疗效突出。文档编号A61P1/00GK101601743SQ20081002869公开日2009年12月16日申请日期2008年6月10日优先权日2008年6月10日发明者刘培庆,刘慰华,宁海蓉,郭芬芬,陈凤英,黄文革,黄河清申请人:中山大学