专利名称：富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及富含半乳糖的多糖在药物制备中的应用，具体涉及富含半乳糖 的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用。
背景技术：
炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎与克隆氏病，是一类与免疫失调、 菌群紊乱及遗传因素相关的自身免疫性疾病；在欧美国家，IBD的发病率高达 150-200/10万[l];在亚洲地区，包括我国香港、上海，正呈快速跃升趋势[2〗。 近年来，我国人群高热量、高蛋白，低纤维食品摄入量明显增多，IBD的发病 率逐年上升，目前尚无治疗IBD的特效药物。IBD尤其是渍疡性结肠炎，反复 发作、迁延不愈容易引起癌变，在西方国家平均癌变率达25%，病程25-30年 患者的癌变率高达43%;结肠癌病死率高，位居肿瘤死亡率第三位[3-4]。由于 IBD发病人群日渐年轻化，发病年龄向20-30岁人群聚集，因此阻止IBD，尤 其是溃疡性结肠炎的癌变是结肠癌发病率降低的重要措施，是提高患病人群生 活质量的重要手段。目前，针对性的预防措施包括①定期结肠镜检，早期诊 断治疗；②进行预防性结肠切除术；③试用非甾体抗炎药控制炎症，以期预防 结肠癌发生[5]。这些方法或缺乏针对性，或具有伤害性、或长期使用具有严重 的副作用；因此，阐明炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎癌变的关键环节对炎症 性肠病癌变的预防具有十分重要的意义。
一般认为，膳食中适当摄入新鲜蔬菜、水果等可降低肿瘤的发生率[6]。然 而膳食纤维是否可以阻止炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎向结肠癌转变，尚无 研究报道。更无阻止炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎向结肠癌转变的药物用于 临床。目前尚未检索到与本项目类似的报道。 参考文献 Delaunoit T， Limburg PJ， Goldberg函，Lymp JF， Loft:u,s EV Jr. Colorectal cancer prognosis among patients with inflammatory bowel disease. Clin GastroenterolH印atol 2006; 4(3): 335-342 [2] Sung JJY, Lau JYW， Goh KL, Leung WK. Increasing incidence of colorectal cancer
in Asia: implications for screening. Lancet 2005; 6: 871-876 [3] Chung DC. The genetic basis of colorectal cancer: insights into critical pathways
of tumorigenesis. Gastroenterology 2000; 119: 854-865 [4] Munkholm P. The incidence and prevalence of colorectal cancer in inflammatory
bowel disease. A] iment Pharmacol Ther 2003; 18 (s叩ple2): 1-5 [5] Collins Jr. RH， FeldmanM, Fordtran JS. Colon cancer, dysplasia, and surveillance
in patients with ulcerative colitis: a critical review.New Engl J Med 1987;
316: 1654-1658 Doll, R. : An overview of the epidemiological evidence linking diet and cancer. P Nutr Soc 1990; 49: 119 - 13
发明内容
本发明提出了富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应 用，以填补预防炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎癌变药物的空白。
本发明提供的技术方案是富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变 的药物中的应用，该改性多糖包括改性天然胶或改性植物多糖。
所述改性天然胶的制备方法是将果胶、瓜儿胶、刺槐豆胶经过酶水解
(pH=4-5)，或碱(pH==9-10)与酸(pH=3-5)水解，或硼氢化钠还原，或甲醇 皂化后，醇沉、透析、半乳糖苷酶酶解(pH=4-6， 37°C)，以暴露末端半乳糖， 经过醇沉、透析、浓縮、冻干获得改性天然胶。采用凝胶色谱法或分子量截流 方法，获得目的分子量(5000-50000Da)的含半乳糖的天然胶；
所述改性植物多糖的提取方法是将芦荟、枸杞子、苹果、大麥或大黄粉 碎，乙醇回流去除脂溶性成分后，水回流、乙醇沉淀、透析、浓縮、冻干，获得 粗多糖；将粗多糖经过半乳糖苷酶酶解(pH=4-6， 37°C)，以暴露末端半乳糖， 经过醇沉、透析、浓縮、冻干获得改性天然胶。采用凝胶色谱法或分子量截流 方法，获得目的分子量(5000-2.00000Da)的含半乳糖的多糖。
本发明的特点本发明以galectin-3为药物耙点，采用galectin-3的外源性 配体调节galectin-3及其配体的变化，阻止galectin-3与其配体的结合，从而调节galectin-3在炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎发生发展过程中对细胞增殖与 凋亡的影响，达到阻止炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎癌变的目的。此外源性 配体为富含半乳糖的多糖。
癌症是一种可以预防的疾病，本发明的目的旨在提供一种阻止炎症性肠病 尤其是渍疡性结肠炎癌变的药物，这种药物是富含半乳糖的多糖，可影响炎症 性肠病尤其是溃疡性结肠炎发病中期和结肠癌高表达的半乳糖凝集素家族成员 galectin-3。本项目研究表明，在溃疡性结肠炎向结肠癌转变的过程中，galectin -3的核质比经历了规律性地变化炎症早期表达明显下降，炎症中期则明显升 高；炎症晚期、癌前病变到癌症早期的表达明显下降；结肠癌转移时，galectin -3表达再次明显增高。依据galectin -3可以识别半乳糖并结合的特点，我们采 用富含半乳糖多糖预防IBD的癌变，根据galectin -3的变化规律设计了药物的 给药时间，在galectin -3高表达的结肠炎症中期给予IBD大鼠富含半乳糖多糖 后可以阻止卯％以上的结肠癌发生。
图1是果胶结构模式图； 图2是瓜尔胶结构模式图。
具体实施例方式
下面将结合实施例对本发明做详细的说明。 本发明涉及的多糖原料说明如下
果胶参见图l， 一种多糖胶，由半乳糖醛酸聚合构成
瓜尔胶参见图2， 一种非离子多糖胶主要由半乳糖和甘露糖聚合而成； 属于天然半乳甘露聚糖，它以聚甘露糖为分子主链，D-吡喃甘露糖单元之间以 P (1-4)键连接。而D--吡喃半乳糖则以a (l-6)键连接在聚甘露糖主链上。瓜尔
胶中甘露糖与半乳糖单元之摩尔比为2:i。
刺槐豆胶为无色、无味的植物胚乳精制多糖，主要含有甘露糖及半乳搪。 目前已知果胶、瓜儿胶、刺槐豆胶等含有半乳糖单糖的天然胶具有调节肠道菌 群、降血脂的作用，但该作用也未在制药领域中得到应用。
芦荟多糖、枸杞子多糖、苹果多糖、大枣多糖及大黄多糖富含半乳糖，具有明显的免疫调节作用，该作用尚未在制药领域中得到应用。 上面所说的富含半乳糖的改性多糖的制备方法如下
所述的改性天然胶的制备方法是将含有半乳糖的天然胶经过多糖酶
(pH=4-5)水解后，或者经过碱(pH二-9-10)与酸(pH=3-5)水解后，或者通 过甲醇皂化(1NNaOH，24小时)，或者通过硼氢化钠还原后，醇沉、透析、浓 縮、冻干，获得改性天然胶。改性天然胶经过半乳糖苷酶水解(PH=4-6， 37°C)， 醇沉、透析、浓縮、冻干。凝胶层析或分子量截流获得目的分子量(5000-50000Da) 的含有半乳糖的改性天然胶。其具体的制备方法通过实施例1 4进行详细地说 明。
所述的改性植物多糖的提取方式为:将芦荟、枸杞子、苹果、大枣、大黄等 粉碎，乙醇回流去除脂溶性成分后，热水提取、乙醇沉淀、透析、浓縮、冻干， 获得粗多糖。粗多糖经过半乳糖苷酶水解(PH=4-6， 37°C)，暴露末端半乳糖， 经过醇沉、透析、浓縮、冻干，获得具有Galectin-3亲和力的多糖，然后采用 凝胶层析或分子量截流等方法分离纯化得到5000-200000Da多糖组分。其具体 的制备方法通过实施例5 8进行详细地说明。
本发明还提供了富含半乳糖的改性多糖在制备阻止炎症性肠病癌变，特别 是结肠炎的药物中的应用在1， 2-二甲肼(DMH)或氧化偶氮甲烷(AOM) 或右旋葡聚糖酐钠(DSS)或l， 2-二甲肼(DMH)合用右旋葡聚糖酐钠(DSS) 或氧化偶氮甲垸(AOM)合用右旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠从溃疡性结肠炎 向结肠癌发展的过程中，将上述天然胶按照50mg/kg， 100mg/kg， 200mg/kg， 植物多糖按照100mg/kg， 200mg/kg， 400mg/kg在galectin-3表达变化的结肠炎 症中期给予小鼠，在模型的第20周，处死一半小鼠，进行大体观察和结肠组织 病理观察。结果表明，对照组20只给予DMH+DSS的小鼠在第20周全部18-10 只小鼠发展成为结肠腺癌，而每组20只给予DMH+DSS+多糖的小鼠1-6只发 展为结肠腺癌，其余小鼠全部被控制在炎症状态。至第40周处死剩余小鼠，结 果表明，给予多糖用于预防溃疡性结肠炎癌变小鼠结肠仍然处于炎症状态，未 见到肿瘤生成。
下面将描述本发明所涉及富含半乳糖的改性多糖的制备方法，以及该药物的特性以及对1， 2-二甲肼(DMH)或氧化偶氮甲烷(AOM)或右旋葡聚糖酐钠(DSS) 或1， 2-二甲肼(DMH)合用右旋葡聚糖酐钠(DSS)或氧化偶氮甲垸(A0M)合 用右旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎相关结肠癌的药理实验结果 来说明该药物在制药领域中的新用途，但本发明并不局限于下述实施例。
所述的临床给药时间是通过监测galectin -3在溃疡性结肠炎病程中高表达 的时间点。
实施例1
取100g果胶，微湿润后，与果胶酶37"孵育4小时(pH=4-6)，调pH值 至中性，过夜，采用HPLC检测酯化度，醇沉、透析、测定分子量，凝胶层析 或分子量截流，获得分子量5000-50000Da的果胶。
实施例2
取100g瓜儿胶，微湿润后，回流4小时(pH=9-10)，调pH值至中性，过 夜，再回流2小时(pH=3-4)，醇沉、透析、浓縮、冻干。采用半乳糖苷酶水 解(pH二4-6， 37°C),醇沉、透析、浓缩、冻干。凝胶层析或分子量截流获得目 的分子量(5000-50000Da)的瓜儿胶。
实施例3
取100g刺槐豆胶，微湿润后，用甲醇回流(1NNaOH， 24小时)，调pH 值至中性，过夜，醇沉、透析、浓縮、冻干。采用半乳糖苷酶水解(pH:=4-6， 37°C)，醇沉、透析、浓縮、冻干。凝胶层析或分子量截流获得目的分子量 (5000-50000Da)的刺槐豆胶。
实施例4
将2g果胶分批加入400mL 0.5M的HCl/咪唑溶液(pH=7)，强力搅拌至溶 液各相均匀，称取10gNaBH4少量多次加入到上述溶液中，室温下强力搅拌4h， 加入25 mL乙酸终止反应，继续搅拌30min后加入足量无水乙醇出现胶状沉淀， 过滤，60。/。乙醇和5Q/oHCl洗涤沉淀2次，60%乙醇洗涤沉淀2次，足量无水乙 醇再次沉淀，减压抽滤至干，6(TC烘箱干燥过夜，获得改性果胶。然后采用半 乳糖苷酶水解(pH=4-6， 3'rC)，醇沉、透析、浓缩、冻干。凝胶层析或分子量 截流获得目的分子量(5000-50000Da)的果胶。实施例5
取100g芦荟粗多糖，用半乳糖苷酶水解以暴露末端半乳糖(pH=4.5-6.5， 37°C)。改构多糖经过醇沉、透析、浓縮、获得冻干粉。采用凝胶层析分离纯化 或分子量截流而得到5000-200000Da多糖组分。
实施例6
取100g枸杞子粗多糖，用半乳糖苷酶水解以暴露末端半乳糖(pH二4.5-6.5， 37°C)。改构多糖经过醇沉、透析、浓缩、获得冻干粉。采用凝胶层析分离纯化 或分子量截流而得到5000-200000Da多糖组分。
实施例7
取100g苹果粗多糖，用半乳糖苷酶水解以暴露末端半乳糖(pH=4.5-6.5， 37°C)。改构多糖经过醇沉、透析、浓缩、获得冻干粉。采用凝胶层析分离纯化 或分子量截流而得到5000-200000Da多糖组分。
实施例8
取100g大枣粗多糖，用半乳糖苷酶水解以暴露末端半乳糖(pH=4.5-6.5, 37°C)。改构多糖经过醇沉、透析、浓縮、获得冻干粉。采用凝胶层析分离纯化 或分子量截流而得到5000-200000Da多糖组分。
实施例9
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性果胶3个剂量治疗组(各20只)。采用l， 2-二甲肼(DMH)和右旋葡 聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予改性果胶50~200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF 标准的动物试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各 处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模 型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予果胶干预的 小鼠在第20周仅见到3只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见到其余小 鼠结肠癌的形成。说明改性果胶能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例10
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10只)、酶解果胶3个剂量治疗组(各20只)。连续给予2%右旋葡聚糖酐钠(DSS) 5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型，检测 galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时给予酶解果胶50~200mg/kg 预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在 模型复制的第20周、第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。 试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的20只小鼠形成 了结肠癌，而给予酶解果胶干预的小鼠在第20周仅见到2只小鼠出现肿瘤，继 续饲养20周，仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明酶解果胶能够非常明显 地抑制结肠炎相关的癌症形成。 实施例11
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、皂化果胶3个剂量治疗组(各20只)。采用氧化偶氮甲烷(AOM)腹腔 注射15mg/l(g诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予皂化果胶50 200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF 标准的动物试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各 处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模 型组小鼠在第20周，2次试验的19只小鼠形成了结肠癌，而给予皂化果胶干 预的小鼠在第20周仅见到5只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见到其 余小鼠结肠癌的形成。说明皂化果胶能够非常明显地抑制结肠炎症相关的癌症 形成。
实施例12
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、水解瓜儿胶3个剂量治疗组(各20只)。采用1， 2-二甲肼(DMH)和右旋 葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectiii-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予水解瓜儿胶50~200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在 SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40 周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明， 模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予水解瓜儿胶干预的小鼠在第20周仅见到4只小鼠出现肿瘤，继续词养20周，仍然未见
到其余小鼠结肠癌的形成。说明水解瓜儿胶能够非常明显地抑制结肠炎相关的
癌症形成。
实施例13
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组UO 只)、酶解瓜儿胶3个剂量治疗组(各20只)。连续给予P/。右旋葡聚糖酐钠(DSS) 5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型诱导小 鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时给予酶 解瓜儿胶50 200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物试验室饲养。 采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一半小鼠，观察小鼠 的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在第20周，2次 试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予酶解瓜儿胶干预的小鼠在第20周仅见 到5只小鼠出现肿瘤，继续词养20周，仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说 明酶解瓜儿胶能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例14
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、皂化瓜儿胶3个剂量治疗组(各20只)。采用氧化偶氮甲垸(AOM)腹腔 注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予皂化瓜儿胶50 200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在 SPF标准的动物试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40 周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明， 模型组小鼠在第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予皂化瓜儿 胶干预的小鼠在第20周仅见到7只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见 到其余小鼠结肠癌的形成。说明皂化瓜儿胶能够非常明显地抑制结肠炎相关的 癌症形成。
实施例15
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、酶解刺槐豆胶3个剂量治疗组(各20只)。采用1,2-二甲肼(固H)和右旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化， 在galectin-3高表达时给予酶解刺槐豆胶50~200mg/kg预防结肠癌的形成。小 鼠在SPF标准的动物试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予酶 解剌槐豆胶干预的小鼠在第20周仅见到5只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明酶解刺槐豆胶能够非常明显地抑制结 肠炎相关的癌症形成。 实施例16
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、水解剌槐豆胶3个剂量治疗组(各20只)。连续给予1%右旋葡聚糖酐钠 (DSS)5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型 诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时 给予水解刺槐豆胶50 200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物试 验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一半小鼠， 观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在第20 周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予水解刺槐豆胶干预的小鼠在第 2.0周仅见到4只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见到其余小鼠结肠癌 的形成。说明水解刺槐豆胶能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例17
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、皂化刺槐豆胶3个剂量治疗组(各20只)。采用氧化偶氮甲烷(AOM)腹 腔注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予皂化刺槐豆胶50~200mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在 SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40 周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明， 模型组小鼠在第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予皂化刺槐 豆胶干预的小鼠在第20周仅见到9只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明皂化剌槐豆胶能够非常明显地抑制结肠炎相 关的癌症形成。 实施例18
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性枸杞子多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用l， 2-二甲肼(DMH)和 右旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化， 在galectin-3高表达时给予改性枸杞子多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。 小鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改 性枸杞子多糖干预的小鼠在第20周仅见到5只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性枸杞子多糖能够非常明显地抑制 结肠炎相关的癌症形成。
实施例19
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性枸杞子多糖3个剂量治疗组(各20只)。连续给予1%右旋葡聚糖酐 钠(DSS) 5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模 型诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达 时给予改性枸杞子多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的 动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一 半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小 鼠在第2'0周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予改性枸杞子多糖干 预的小鼠在第20周仅见到4只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍然未见到其 余小鼠结肠癌的形成。说明改性枸杞子多糖能够非常明显地抑制结肠炎相关的 癌症形成。
实施例20
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性枸杞子多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用采用氧化偶氮甲烷(AOM)腹腔注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予改性枸杞子多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小 鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予改 性枸杞子多糖千预的小鼠在第20周仅见到7只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性枸杞子多糖能够非常明显地抑制 结肠炎相关的癌症形成。 实施例21
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性芦荟多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用1， 2-二甲肼(DMH)和右 旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化， 在galectin-3高表达时给予改性戸荟多糖100~400mg/kg预防结肠癌的形成。小 鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改 性芦荟多糖干预的小鼠在第20周仅见到5只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性芦荟多糖能够非常明显地抑制结 肠炎相关的癌症形成。
实施例22
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性芦荟多糖3个剂量治疗组(各20只)。连续给予1%右旋葡聚糖酐钠 (DSS) 5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型 诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时 给予改性芦荟多糖100~400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物 试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一半小 鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在 第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予改性芦荟多糖干预的小鼠在第20周仅见到4只小鼠出现肿瘤，继续词养20周，仍然未见到其余小鼠
结肠癌的形成。说明改性卢荟多糖能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例23
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性戶荟多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用采用氧化偶氮甲烷(AOM) 腹腔注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予改性芦荟多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠 在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第 40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表 明，模型组小鼠在第20周，2次试验的19只小鼠形成了结肠癌，而给予改性 芦荟多糖干预的小鼠在第20周仅见到7只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍 然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性芦荟多糖能够非常明显地抑制结肠 炎相关的癌症形成。
实施例24
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性大黄多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用l， 2-二甲肼(DMH)和右 旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化， 在galectin-3高表达时给予改性大黄多糖100~400mg/kg预防结肠癌的形成。小 鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改 性大黄多糖干预的小鼠在第20周仅见到5只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性大黄多糖能够非常明显地抑制结 肠炎相关的癌症形成。
实施例25
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性大黄多糖3个剂量治疗组(各20只)。连续给予1°/。右旋葡聚糖酐钠 (DSS) 5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时 给予改性大黄多糖100~400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物 试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一半小 鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在 第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予改性大黄多糖干预的小 鼠在第20周仅见到6只小鼠出现肿瘤，继续词养20周，仍然未见到其余小鼠 结肠癌的形成。说明改性大黄多糖能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。 实施例26
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(10 只)、改性大黄多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用采用氧化偶氮甲烷(AOM) 腹腔注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予改性大黄多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠 在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第 40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表 明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改性 大黄多糖干预的小鼠在第20周仅见到8只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍 然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性大黄多糖能够非常明显地抑制结肠 炎相关的癌症形成。
实施例27
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性苹果多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用l， 2-二甲肼(DMH)和右 旋葡聚糖酐钠(DSS)诱导小鼠结肠癌模型，检测galectiri-3的核质表达变化， 在galectin-3高表达时给予改性苹果多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小 鼠在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、 第40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果 表明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改 性苹果多糖干预的小鼠在第20周仅见到3只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周， 仍然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性苹果多糖能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例28
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性苹果多糖3个剂量治疗组(各20只)。连续给予1%右旋葡聚糖酐钠 (DSS)5天，停药2天，为一个循环，共进行4个循环，诱导小鼠结肠癌模型 诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在galectin-3高表达时 给予改性苹果多糖100~400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠在SPF标准的动物 试验室词养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第40周各处死一半小 鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表明，模型组小鼠在 第20周，2次试验的20只小鼠形成了结肠癌，而给予改性苹果多糖干预的小 鼠在第20周仅见到6只小鼠出现肿瘤，继续词养20周，仍然未见到其余小鼠 结肠癌的形成。说明改性苹果多糖能够非常明显地抑制结肠炎相关的癌症形成。
实施例29
取140只ICR小鼠，分为2次试验，每次试验各70只，分别为模型组(IO 只)、改性苹果多糖3个剂量治疗组(各20只)。采用采用氧化偶氮甲烷(AOM) 腹腔注射15mg/kg诱导小鼠结肠癌模型，检测galectin-3的核质表达变化，在 galectin-3高表达时给予改性苹果多糖100 400mg/kg预防结肠癌的形成。小鼠 在SPF标准的动物试验室饲养。采用双盲法，分别在模型复制的第20周、第 40周各处死一半小鼠，观察小鼠的结肠肿瘤形成情况。试验重复2次。结果表 明，模型组小鼠在第20周，2次试验的18只小鼠形成了结肠癌，而给予改性 苹果多糖干预的小鼠在第20周仅见到8只小鼠出现肿瘤，继续饲养20周，仍 然未见到其余小鼠结肠癌的形成。说明改性苹果多糖能够非常明显地抑制结肠 炎相关的癌症形成。
本发明不仅限于说明书中所列举的实施例，而且还包括未罗列的但依据本 发明思路的内容。本发明的药物剂型可以是片剂、胶囊剂，供口服。
权利要求
1、富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用，改性多糖包括改性天然胶或改性植物多糖。
2、 如权利要求1所述的富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用，其特征在于所述改性天然胶的制备方法是将果胶、瓜儿胶、刺槐豆胶经过酶水解(pH二4-5)，或碱(pH二9-10)与酸(pH:3-5)水解，或硼氢 化钠还原，或甲醇皂化后，醇沉、透析、浓縮、冻干；采用半乳糖苷酶水解(p^4-6， 37°C)，醇沉、透析、浓縮、冻干。
3、 如权利要求1或2所述的富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变 的药物中的应用，其特征在于所述改性植物多糖的制备方法是从苹果、声荟、 枸杞子、大枣或大黄获得的粗多糖，经过半乳糖苷酶水解以暴露末端半乳糖(pH=4.5-6.5， 37°C)，改构多糖经过醇沉、透析、浓縮、获得冻干粉。
全文摘要
本发明涉及富含半乳糖的多糖在药物制备中的应用，具体涉及富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用。本发明为填补预防炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎癌变药物的空白，现提供的技术方案是富含半乳糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用，该改性多糖包括改性天然胶或改性植物多糖。本发明以galectin-3为药物靶点，采用galectin-3的外源性配体调节galectin-3及其配体的变化，阻止galectin-3与其配体的结合，从而调节galectin-3在炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎发生发展过程中对细胞增殖与凋亡的影响，达到阻止炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎癌变的目的。
文档编号A61K31/736GK101306013SQ20081015008
公开日2008年11月19日 申请日期2008年6月19日 优先权日2008年6月19日
发明者莉 刘, 阳 孙, 李宇华, 梅其炳 申请人:中国人民解放军第四军医大学