专利名称：：环烯醚萜类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明属医药
技术领域：
，具体涉及环烯醚萜类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
：肿瘤是引起人类死亡的主要原因之一。中国卫生部日前公布2006年城乡居民主要死亡原因。统计显示，恶性肿瘤已成为首要死因。可见肿瘤的预防和治疗十分迫切。药物治疗是肿瘤的主要治疗手段之一。目前，虽然开发出了几十种抗肿瘤药物，有效的延长了患者的生命或者提高了患者的生存质量。其中有些抗肿瘤的药物治疗疗效非常显著，如药物治疗小儿急性白血病等。但肿瘤的药物研究和开发还面临巨大挑战，如抗肿瘤药物多为细胞毒药物，其副作用明显，限制了这些药物疗效的发挥。著名肿瘤病因学家、中国工程院院士程书钧认为当今医学对于肿瘤的防治依然处于初级阶段。中药有几千年的人体毒性实验的基础，也许中药会在抗肿瘤方面走在世界的前列。从天然产物中寻找高效低毒的抗肿瘤活性的先导化合物一直是新药研究的热点。蜘蛛香，又名马蹄香、老虎七、印度缬草，系败酱科缬草属植物。《本草纲目》记载"蜘蛛香出蜀西茂松藩山中。草根也，黑色有粗须，状如蜘蛛及藁本，穹芎穷，气味芳香"。中国药典1977年版曾予以收载，贵州民间用其治疗心腹疼痛、风湿麻木及筋肉酸痛，并可镇静、顺气，消食，治发痧、止水泄，用菜油调敷治蜘蛛疮等。昆明等地区每年端午节前后，民间喜爱用蜘蛛香作烟熏剂，用来驱除害虫。化学成分研究表明，蜘蛛香含有挥发油、环烯醚砲以及黄酮类成分。药理研究结果表明，蜘蛛香水提液具有镇静催眠作用、抗菌及病毒作用，同时对犬、兔等有降血压作用。研究表明缬草素、二氢缬草素及缬草醚醛具有细胞毒作用，其中缬草素对宫颈鳞癌细胞、胃腺癌细胞及肺腺癌细胞均有杀死作用。尽管对蜘蛛香的研究巳经具有一定的规模，但对其化学成分等的研究仍然不够全面系统，尤其是对其中的环烯醚萜类成分研究得不够透彻。因此我们对蜘蛛香进行了系统深入的化学成分研究，以期进一步明确其化学成分，为天然药物化学的研究积累资料；从其中发现具有良好活性尤其是抗肿瘤活性的天然产物，为后续的深入开发研究提供物质基础。
发明内容本发明的目的在于提出环烯醚萜类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明进一步还提供以该环烯醚萜类化合物为活性成分的，用于治疗肿瘤的药物组合物。本发明提出的用于制备抗肿瘤药物的环烯醚萜类化合物，具有以下结构通式:式中R!为氢、14个碳的烃基、乙酰基、异戊酰基、CC-取代乙酰氧基异戊酰基、f3—取代乙酰氧基异戊酰基或(X-取代异戊酰氧基异戊酰基；R2为乙酰基或异戊酰基；R3为氢、乙酰基、异戊酰基或卩—取代乙酰氧基异戊酰基；R4为氢、羟基；Rs为乙酰基、卩—取代乙酰氧基异戊酰基、cx-取代异戊酰氧基异戊酰基或邻羟基苯甲酰基。以上环烯醚萜类化合物分别在蜘蛛香或败酱科缬草属其它植物中，可以从植物中提取分离制备得到，也可以通过化学合成方式获得。本发明提出的药物组合物含有治疗有效量的环烯醚萜类化合物为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。其中，活性成分的重量含量为5-95%。上文所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如稀释剂、赋形剂如水等；填充剂如淀粉、蔗糖等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六垸醇；吸附载体如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、和聚乙二醇等。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。本发明化合物可以组合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等或制成液体制剂如水或油悬浮剂，或其它液体制剂如糖浆、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、栓剂、鼻喷雾剂和注射剂。本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。具体实施例方式下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例l:环烯醚萜类化合物的制备干燥的蜘蛛香药材25kg，粉碎后以95%乙醇渗漉提取，提取液减压回收乙醇至体积为20L，过滤，滤液依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集各萃取部分并浓縮成浸膏，其中氯仿萃取部分浸膏120g，乙酸乙酯萃取部分浸膏180g。将得到的氯仿萃取部分和乙酸乙酯萃取部分分别进行硅胶柱层析，以不同比例的氯仿一甲醇进行梯度洗脱，薄层色谱检测，并结合SephadexLH-20、制备液相色谱对化合物进行纯化，得到化合物42个，采用UV、MS、'HNMR、13CNMR、2DNMR等手段进行结构鉴定，鉴定了其中的环烯醚萜类成分21个。其结构式、名称等见表l。表l21个环烯醚萜化合物的名称和结构<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实施例2:环烯醚萜化合物的细胞毒活性实验1、实验材料1.1、受试样品如表1所述的21个环烯醚萜类化合物分别用DMSO(Merck)溶解后，加入PBS(-)配成1000ng/ml的溶液或均匀的混悬液，然后用含DMS0的PBS(-)稀释。1.2、细胞株A549(人肺癌细胞)PC3(人前列腺癌细胞)HCT-8(人结肠腺癌细胞)Bel7402(人肝癌细胞)1.3、培养液RPMI1640+15。/。NBS+双抗1.4、其他材料全自动酶标仪型号WellscanMK-2，生产厂商Labsystems进口96孔培养板等。2、试验方法MTT法96孔板每孔加入浓度为46X1()4个/ml的细胞悬液100(J，置37°C，5%(302培养箱内。24h后，加入样品液，设双复孔，37°C,5%(202作用72h。每孔加入5mg/ml的MTT溶液20^，作用4h后加入溶解液，100pl/孔，置培养箱内，溶解后用MK-2全自动酶标仪测570nmOD值。3、试验结果结果见表2，结果显示，该21个环烯醚萜类化合物对人肺癌细胞，人前列腺癌细胞，人结肠腺癌细胞，人肝癌细胞均有较好的抑制活性，很好的抗肿瘤作用，具有良好的开发前景。实施例3环烯醚萜化合物对小鼠S180肉瘤(实体型)的疗效实验1、实验材料1.1受试样品如表1所述21个环烯醚萜类化合物分别用少量吐温一80助溶后用0.5。/。CMC配成溶液。1.2动物品系昆明种小鼠来源第二军医大学实验动物中心提供。合格证号沪动合证字107号体重18—20g性别雌性。1.3移植性肿瘤小鼠S180肉瘤，由上海医药工业研究院传代维持。2、实验方法取生长良好的小鼠S180肉瘤腹水，用生理盐水以l:4稀释，每只小鼠腋皮下接种0.2ml，随机分组，分为对照组，环磷酰胺组(CTX组，20mg/kg，ipX7)、给药(5mg/kg)组，接种后次日起给药，给药体积为0.5ml/20g体重，连续灌胃7天。接种后10日脱颈处死动物，称动物体重后解剖取瘤块，称瘤重。结果判定根据以下公式:对照组平均瘤重一给药组平均瘤重肿瘤抑制率％=-"00%对照组平均瘤重3、实验结果21个环烯醚萜类化合物均有显著的抑瘤作用。实验结果见表3。<table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>表321个环烯醚萜化合物对小鼠S180肉瘤的抑制作用组别剂量(mg/kg)给药方案动物数始终动物体重(g)(去瘤后)瘤重(g)±SD抑瘤率%空白对照(溶剂)pox7151526.56±3.271.65±0.91CTX20ipx7151526.21±2.840.71±0.4956.97zzx-lpo><7101025.17±2.640.65±0.31*60.61zzx-之pox7101025.08±2.370.68±0.35*58.79zzx-3pox7101026.01±2.650.72±0.29*56.36zzx4pox7101025.45±2.160.62±0.33*62.42zzx-5pox7101025.63±1.890.74士0.3P55.15zzx陽6pox7101025.29±2.140.62±0.27*56.36zzx-"75pox7101024.87±2.080.64士0.33*61.21zzx-8pox7101025.05±2.950.72±0.34*56.36zzx-9po><7101026.14±2.5658.79zzx-10pox7101025.33±3.140.70±032*57.58zzx-llpox7101026,27±3.090.65士0.28*60.61zzx-12pox7101026.01±2.550.68±0.25*58.79zzx-13pox7101024.98±2.820.74±0.31*55.15zzx-14pox7101025.37±2.690.69士0.23*58.18zzx-15pox7101024.83±2.370.70±0.29*57.58zzx-16pox7101025.81±2.650.63士0.27^61.82zzx-17pox7101025.95±3.110.74±0.33*55.15zzx-185pox7101026.15±2.760.67±0.25*59.39<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>权利要求1、一种环烯醚萜类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，该环烯醚萜类化合物具有以下结构通式之一种式中R1为氢、1～4个碳的烃基、乙酰基、异戊酰基、α-取代乙酰氧基异戊酰基、β—取代乙酰氧基异戊酰基或α-取代异戊酰氧基异戊酰基；R2为乙酰基或异戊酰基；R3为氢、乙酰基、异戊酰基或β—取代乙酰氧基异戊酰基；R4为氢、羟基；R5为乙酰基、β—取代乙酰氧基异戊酰基或α-取代异戊酰氧基异戊酰基或邻羟基苯甲酰基。2、根据权利要求l所述的应用，其特征在于所述的环烯醚萜类化合物从植物中提取或化学合成得到。3、一种抗肿瘤的药物组合物，其特征在于含有权利要求1所述的环烯醚萜类活性成分和药学上可接受的载体。4、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于活性成分的重量含量为595%。全文摘要本发明属医药
技术领域：
，具体涉及环烯醚萜类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。经动物试验表明，所述化合物对多种癌细胞有明显抑制作用，并无毒副作用，因此可用于制备抗肿瘤药物；本发明进一步还提供以该环烯醚萜类化合物为活性成分的，用于治疗肿瘤的药物组合物。本发明的化合物可以从植物中提取得到，也可以用化学合成方法获得。文档编号A61K31/352GK101444500SQ20081020774公开日2009年6月3日申请日期2008年12月25日优先权日2008年12月25日发明者磊单,张卫东,徐希科,李慧梁,生林,柳润辉,沈云亨,娟苏申请人:中国人民解放军第二军医大学