3-(取代二氢异吲哚酮-2-基)-2,6-哌啶二酮晶体Ⅳ及其药用组合物的制作方法

专利名称：：3-(取代二氢异吲哚酮-2-基)-2,6-哌啶二酮晶体Ⅳ及其药用组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及药物化合物的晶型，更具体地说，涉及3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体IV，另外，本发明还涉及该晶体的制备方法及其药用组合物。
背景技术：
：Muller等在"Amino-substitutedthalidomideanalogs:PotentinhibitorsοfTNF-αproduction"(Bioorganic&MedicinalChemistryLetters,Vol.9,Issue11,1999年6月7日，ppl625-1630)和中国专利ZL97180299.8中描述了一种3_(取代二氢异吲哚酮-2-基)-2,6-哌啶二酮，特别是3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮。2005年12月，3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮(来那度胺，商品名为Revlimid)，作为一种具有抗肿瘤性质的免疫调节剂在美国被批准上市，用于治疗骨髓增生异常综合症和多发性骨髓瘤。美国细胞基因公司在中国专利申请文件CN1871003A(公开号)中描述了3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮的八种多晶型物并提供的制备方法，其制备方法是将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮加入到3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮几乎不溶的水或有机溶媒中(如己烷、甲苯、丙酮、乙腈、甲醇、乙酸乙酯)加热溶解后降温析出晶体或在固液二相的浆化体系中长时间搅拌转晶而得。由于3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮几乎不溶于水或己烷、甲苯、丙酮、乙腈、甲醇、乙酸乙酯等有机溶媒，即使在加热情况下也需要使用大量(100倍以上)的溶媒，不利于工业化规模稳定平行生产制备；另外，申请文件CN1871003A这种方法不能使产品的外观色泽有所改善由原来的浅黄色变为白色或类白色；并且也没有考虑到在最终产品制备时应尽量避免使用甲苯等对人体有害较大的有机溶剂以减少产品中会残留有机溶媒对人体造成的不良影响。此外，DR.REDDY'SLABORATORIESLTD.在2009年9月17日公开的专利国际申请(公布号WO20091114601A2)中公开了一种3_(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮无定形物及其制备方法。对于药物的多晶型而言，不同的多晶型可以具有不同的化学和物理特性，包括熔点、化学稳定性、表观溶解度、溶解速率、光学和机械性质、蒸汽压和密度。这些性质可以直接影响原料药和制剂的处理或生产，并且会影响制剂的稳定性、溶解度和生物利用度等。因此，药物的多晶型对于药物制剂的质量、安全性和有效性具有重要的意义。对于3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮而言，本领域存在着这样的需求适于工业化规模生产、理化性能优异的新晶型。
发明内容本发明的发明人经大量的研究，令人惊奇地发现了新的3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体，成功地解决了现有技术存在的不足，其具有理化性质优异、稳定性好、更适于工业化规模制备等优点。本发明的目的是提供新的3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶-2，6-二酮晶体IV。本发明的另一个目的是提供上述新晶体IV的制备方法。本发明的第三个目的是提供含有上述新晶体IV的药用组合物。具体地说，本发明提供了一种新的3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体IV。本发明所提供的3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体，使用Cu-Ka辐射，其X-射线衍射图，以度表示的2θ在7.7士0.2,11.9士0.2有衍射峰，特别是，在7.7士0.2、11.9士0.2和25.8士0.2有衍射峰，更特别是，在15.6士0.2、16.4+0.2,17.6+0.2,20.4+0.2,21.2+0.2,24.0+0.2,24.7+0.2,27.4+0.2,29.0士0.2还有一个或多个(以任意组合，包括两个以上，或者全部)衍射峰；晶体IV的X-射线衍射图谱见图1。3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_2!1-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV的X-射线衍射图谱<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>本发明所提供的3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮的晶体，其DSC扫描在第一个吸热峰的范围在115142°C之间，特别是在121.00°C左右有吸热峰，其第二吸热峰的范围在261271°C之间，最大吸热转变约在266.17°C。本发明的3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体的DSC图谱见图2，TGA图谱见图3。此外，本发明的3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6-二酮晶体IV用KBr压片测得的红外吸收图谱，其特征为在约3652.1^\3505.3430.3cm"\3409.7cm"\3224.lcm"\3090.9cm"\2985.6cm"\2911.2cm"\l726.6cm"\1697.5cm"\l674.8cm"\l641.6cm"\l608.3cm"\l494.2cm"\l463.0cm"\l412.Ocnf1、1378.2cm_\l348.5cm_1U295.6cm_1U269.6cm_\l241.7cm_\l204.3cm_1和1181.5cm_1处有吸收峰；见图4。本发明所提供的3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6-二酮晶体IV，呈无色透明块状(见图6)，为正交晶系空间群为P2(l)/c晶胞参数a=8.5250(17)，b=22.509(5),C=13.665(3)A。晶胞体积V=2575.8(9)A3晶胞内分子数Z=4。图5所示为单晶晶体照片，图7所示为分子立体结构投影图，图8所示为分子沿c方向的晶胞堆积图。用Noniuscad4面探测仪收集衍射强度数据，MoKa辐射，石墨单色器，管压50kv，管流30mA，ω扫描，最大2θ角为50.0°，扫描范围h从-10到10、k从0到26、1从0至Ij16，扫描速度为1.5°/min，独立衍射点为4684个，可观察点为3258个。表1.原子坐标参数及等价温度因子χyζBlVsoNl0.6095(4)-0.02515(15)1.1350(3)0.0480(8)N20.8590(3)-0.05940(13)1.3781(2)0.0363(7)N30.9310(4)-0.23775(14)1.5139(2)0.0436(8)N40.0445(3)0.38162(13)0.7809(2)0.0361(7)N50.3136(3)0.25431(13)0.7658(2)0.0332(7)N60.5464(4)0.14031(15)1.0137(2)0.0476(8)010.3749(4)0.02127(15)1.0853(3)0.0661(9)020.8424(4)-0.07464(17)1.1787(2)0.0703(10)031.0725(3)0.00379(12)1.3786(2)0.0539(8)040.3016(3)0.36486(12)0.8554(2)0.0494(7)05-0.2061(3)0.40290(13)0.7027(2)0.0561(8)060.4059(3)0.25672(13)0.61749(19)0.0452(7)070.1232(5)0.12288(19)1.0233(3)0.0899(12)Cl0.4786(5)0.00364(17)1.1542(3)0.0459(10)C20.4666(5)0.0137(2)1.2614(3)0.0543(11)C30.5747(4)-0.02774(18)1.3337(3)0.0451(10)C40.7414(4)-0.02512(16)1.3104(3)0.0377(9)C50.7395(5)-0.04451(19)1.2036(3)0.0438(9)C60.8273(4)-0.11934(16)1.4099(3)0.0358(8)C70.9910(4)-0.13857(15)1.4622(2)0.0313(8)C81.0380(4)0.19257(16)1.5090(2)0.0343(8)C91.2001(4)0.19775(18)1.5522(3)0.0420(9)ClO1.3070(5)0.1527(2)1.5481(3)0.0508(11)Cll1.2612(4)0.09929(18)1.5012(3)0.0446(10)C121.1001(4)0.09370(16)1.4581(3)0.0351(8)C131.0156(4)0.04335(17)1.4014(3)0.0372(8)C140.0983(4)0.36674(16)0.7204(3)0.0371(8)C15-0.1155(4)0.30477(16)0.6794(3)0.0389(9)C160.0152(4)0.26251(16)0.7269(3)0.0347(8)C170.1771(4)0.29237(15)0.7338(3)0.0321(8)C180.1835(4)0.34833(16)0.7969(3)0.0341(8)C190.3501(4)0.22448(16)0.8628(2)0.0335(8)C200.4967(4)0.18936(15)0.8532(3)0.0316(8)C210.5886(4)0.15212(16)0.9232(3)0.0351(8)C220.7225(4)0.12626(18)0.8943(3)0.0476(10)C230.7596(5)0.13579(18)0.8009(4)0.0496(11)C240.6667(4)0.17216(17)0.7310(3)0.0413(9)C250.5355(4)0.19902(15)0.7604(3)0.0321(8)C260.4165(4)0.23974(15)0.7040(3)0.0310(8)C270.0532(10)0.0683(3)1.0229(6)0.123HlA0.6118-0.03211.07340.058H2A0.35680.00781.26880.065H2B0.49500.05451.27900.065H3A0.8318-0.23321.48780.052H3B0.9633-0.27051.54320.052H3C0.5766_0.01521.40180.054H3D0.5343-0.06811.32610.054H4A0.77570.01651.31600.045H4B0.04760.41500.81190.043H6A0.7871_0·14481.35350.043Η6Β0.7519-0.11911.45500.043H6C0.46170.15601.02820.057H6D0.60480.11721.05560.057Η7Α0.15540.12770.97090.135Η9Α1.2363-0.23281.58470.050HlOA1.4134-0·15821.57770.061HllA1.3339-0.06881.49850.053Η15Α-0.11650.30640.60830.047Η15Β-0·21770.28900.68850.047Η16Α0.01130.22660.68730.042Η16Β-0·00080.25160.79300.042Η17Α0.18320.30550.66620.039Η19Α0.26340.19870.87300.040Η19Β0.37240.25290.91700.040Η22Α0.78860.10190.93920.057Η23Α0.84900.11730.78480.059Η24Α0.69060.17830.66810.050Η27Α0.06210.05441.09020.185Η27Β0.10570.04090.98590.185H27C-0·05750.07120.99240.185注Biso是热椭圆体主轴的平均数(theMeanofthePrincipalAxesoftheThermalEllipsoid.)表2.键长和键角Nl-Cl1.358N4-C141.379N1-C51.381N4-C181.384Nl-HlA0.8600N4-H4B0.8600N2-C131.362N5-C261.367N2-C41.452N5-C171.445N2-C61.458N5-C191.467N3-C81.376N6-C211.377N3-H3A0.8600N6-H6C0.8600N3-H3B0.8600N6-H6D0.8600Ol-Cl1.230C14-C151.50102-C51.207C15-C161.51503-131.231C15-H15A0.9700C1-C21.505C15-H15B0.9700C2-C31.534C16-C171.522C2-H2A0.9700C16-H16A0.9700C2-H2B0.9700C16-H16B0.9700C3-C41.515C17—C181.522C3-H3C0.9700C17-H17A0.9800C3-H3D0.9700C19-C201.505C4-C51.520C19-H19A0.9700C4-H4A0.9800C19-H19B0.9700C6-C71.507C20-C251.387C6-H6A0.9700C20-C211.397C6-H6B0.9700C21-C221.402C7-C121.381C22-C231.387C7-C81.397C22-H22A0.9300C8-C91.403C23-C241.388C9-C101.372C23-H23A0.9300C9-H9A0.9300C24-C251.395ClO-Cll1.383C24-H24A0.9300C10-H10A0.9300C25-C261.473C11-C121.39507-C271.366Cll-HllA0.930007-H7A0.8200C12-C131.482C27-H27A0.960004-C181.220C27-H27B0.960005-C141.218C27—H27C0.960006-C261.229C1-N1-C5127.2C26-N5-C19113.4Cl-Nl-HlA116.4C17-N5—C19124.6C5-N1-H1A116.4C21-N6-H6C120.0C13-N2-C4122.5C21-N6—H6D120.0C13-N2-C6113.8H6C-N6-腳120.0C4-N2-C6122.505-C14-N4120.4C8-N3-H3A120.005-C14-C15122.0C8-N3-H3B120.0N4-C14-C15117.6H3A-N3-H3B120.0C14-C15-C16114.2Ol-Cl-Nl120.4C14-C15—H15A108.701-C1-C2121.8C16-C15-H15A108.7N1-C1-C2117.8C14-C15—H15B108.7C1-C2-C3113.2C16-C15-H15B108.7C1-C2-H2A108.9H15A-C15-H15B107.6C3-C2-H2A108.9C15-C16-C17109.5C1-C2-H2B108.9C15-C16-H16A109.8C3-C2-H2B108.9C17-C16-H16A109.8H2A-C2-H2B107.7C15-C16—H16B109.8C4-C3-C2108.4C17-C16-H16B109.8C4-C3-H3C110.0H16A-C16-H16B108.2C2-C3-H3C110.0N5-C17—C18112.2C4-C3-H3D110.0N5-C17—C16115.2C2-C3-H3D110.0C18-C17—C16109.7H3C-C3-H3D108.4N5-C17—H17A106.4N2-C4-C3114.1C18-C17—H17A106.4N2-C4-C5109.9C16-C17-H17A106.4C3-C4-C5110.404-C18—N4121.0N2-C4-H4A107.404-C18-C17124.2C3-C4-H4A107.4N4-C18—C17114.8C5-C4-H4A107.4N5-C19-C20101.602-C5-N1121.3N5-C19-H19A111.502-C5-C4123.6C20-C19-H19A111.5N1-C5-C4115.1N5-C19—H19B111.5N2-C6-C7101.6C20-C19—H19B111.5N2-C6-H6A111.5H19A-C19-H19B109.3C7-C6-H6A111.5C25-C20-C21121.4N2-C6-H6B111.5C25-C20-C19110.0C7-C6-H6B111.5C21-C20-C19128.6H6A-C6-H6B109.3N6-C21—C20121.6C12-C7-C8121.1N6—C21—C22122.4C12-C7-C6110.0C20-C21-C22116.0C8-C7-C6128.9C23—C22—C21122.2N3-C8-C7122.0C23-C22—H22A118.9N3-C8-C9121.8C21-C22-H22A118.9C7-C8-C9116.2C22-C23-C24121.7C10-C9-C8122.1C22-C23-H23A119.2C10-C9-H9A119.0C24-C23-H23A119.2C8-C9-H9A119.0C23-C24-C25116.3C9-C10-C11122.0C23-C24-H24A121.9C9-C10-H10A119.0C25-C24-H24A121.9Cl1-C10-H10A119.0C20-C25-C24122.4ClO-Cl1-C12116.4C20-C25—C26108.5ClO-ClI-HlIA121.8C24—C25—C26129.1C12-C11-H11A121.806-C26—N5125.4C7-C12-C11122.306-C26-C25128.0C7-C12-C13108.4N5—C26—C25106.6.C11-C12-C13129.3C27-07—H7A109.503-C13-N2125.807-C27-H27A109.503-C13-C12128.007-C27-H27B109.5N2-C13-C12106.2H27A-C27—H27B109.5C14-N4-C18126.607-C27-H27C109.5C14-N4-H4B116.7H27A-C27-H27C109.5C18-N4-H4B116.7H27B-C27-H27C109.5C26-N5-C17121.9C5-N1-C1-01176.1C18-N4-C14-05-170.8C5-N1-C1-C2-3.2C18-N4-C14-C1510.101-C1-C2-C3161.405-C14-C15—C16-167.2N1-C1-C2-C3-19.4N4-C14-C15-C1611.8C1-C2-C3-C450.0C14-C15-C16—C17-46.2C13-N2-C4-C3-148.9C26-N5-C17-C18-119.8C6-N2-C4-C344.2C19-N5-C17—C1864.6C13-N2-C4-C586.5C26-N5-C17-C16113.8C6-N2-C4-C5-80.4C19-N5-C17-C16-61.8C2-C3-C4-N2176.1C15-C16-C17-N5-172.3C2-C3-C4-C5-59.5C15-C16-C17-C1860.0C1-N1-C5-02172.9C14-N4-C18-04-177.0C1-N1-C5-C4-7.0C14-N4-C18-C175.1N2-C4-C5-02-14.0N5-C17-C18-0412.5C3-C4-C5-02-140.7C16-C17-C18-04141.9N2-C4-C5-N1165.9N5-C17-C18—N4-169.7C3-C4-C5-N139.2C16C17-C18-N4-40.4C13-N2-C6-C72.3C26-N5-C19-C201.3C4-N2-C6-C7170.2C17-N5-C19-C20177.2N2-C6-C7-C12-0.4N5-C19-C20—C25-0.1N2-C6-C7-C8-179.9N5-C19-C20-C21179.2C12-C7-C8-N3179.8C25-C20-C21-N6-177.0C6-C7-C8-N3-0.8C19-C20-C21-N63.7C12-C7-C8-C90.9C25-C20-C21-C221.0C6-C7-C8-C9-179.6C19-C20-C21-C22-178.3N3-C8-C9-C10-179.5N6-C21-C22-C23176.4C7-C8-C9-C10-0.6C20-C21-C22-C23-1.6C8-C9-C10-C110.2C21-C22-C23-C240.7C9-C10-C11-C120.0C22-C23-C24-C250.7C8-C7-C12-C11-0.9C21-C20-C25-C240.4C6-C7-C12-C11179.6C19-C20-C25-C24179.8C8-C7-C12-C13178.2C21-C20-C25-C26179.7C6-C7-C12-C13-1.3C19-C20-C25-C26-0.9ClO-Cl1-C12-C70.4C23-C24-C25-C20-1.3ClO-Cl1-C12-C13-178.5C23-C24-C25-C26179.6C4-N2-C13-038.7C17-N5-C26-060.2C6-N2-C13-03176.7C19-N5-C26-06176.3C4-N2-C13-C12-171.1C17-N5-C26-C25-177.9C6-N2-C13-C12-3.1C19-N5-C26-C25-1.8C7-C12-C13-03-177.1C20-C25-C26-06-176.4C11-C12-C13-031.9C24-C25-C26-062.8C7-C12-C13-N22.7C20-C25-C26-N51.7C11-C12-C13-N2-178.4C24-C25-C26-N5-179.1在本发明的实施方案中，本发明还提供了3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_2H_异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体的制备方法，该方法包括如下步骤3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_2!1-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮在搅拌下溶于热的乙腈中，梯度降温至室温静置。在20°C左右将溶剂长时间缓慢挥发，直至晶体缓慢析出。过滤收集固体，收集得到的固体于室温下挥干。这里，3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮与乙腈的重量体积比可在20-200倍之间；优选地，选自3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮与乙腈的重量体积比可在30-150倍之间；最优选地，选自3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮与乙腈的重量体积比可在40-120倍之间；热溶的温度可选自室温至乙腈的回流温度之间；优选地选自30°C至乙腈的回流温度之间；最优选地，选自40°C至乙腈的回流温度之间。溶剂挥发的时间可为12小时至一个月乃至数月；也可在1天至20天之间’最好选自3至12天。在本发明中，本发明所涉及的X-粉末衍射测试仪器及测试条件为阳极转靶X-射线衍射仪D/max-2500/PC型(日本理学)；铜靶、石墨单色器、管电压40kv、管电流100mA、发散狭缝与防散射狭缝均为1°、接收狭缝为0.3mm、扫描速度5°/min、扫描范围340°。本发明所涉及的DSC测试仪器及测试条件为美国PerkinElmerDiamondDSC；以IO0C/min速度加热，从25°C至300°C。本发明所涉及的TGA测试仪器及测试条件为美国PerkinElmerThermalAnalysisPyris1TGA；以10°C/min速度加热，从25°C至500°C。本发明所涉及的有关物质检测条件及方法为照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。色谱条件与系统适用性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.01mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调节PH值至3.5)-甲醇-乙腈(80155)为流动相；检测波长240nm；理论塔板数按3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮峰计算应不低于2000。3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。溶出度的测定条件及方法照中国药典2005年版二部附录XC第一法测定。取本品，照溶出度测定法，以水500ml(5mg规格)和1000ml(10mg和25mg规格)为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液(5mg和10mg规格)；精密量取续滤液10ml，用水稀释至25ml，作为供试品溶液(25mg规格)。另精密称取3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮对照品适量，用水制成每1ml中约含3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮10yg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版二部附录IVA)，在240nm波长处测定吸光度，按外标法以吸光度计算每粒(或片)的溶出量。3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_211-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV的特性一、溶解性参照中国药典2000年版二部凡例进行试验。方法精密称取3-(4-氨基氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体IV适量，缓慢加入一定量的溶剂，每隔5分钟强力振摇30秒，观察30分钟内的溶解情况，结果见表1。表13_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6_二酮晶体IV溶解度试验<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>二、稳定性1、光照试验将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶_2，6_二酮晶体IV均勻分摊至敞口培养皿中，厚度≤5mm，调节距离，使光照强度为4500士5001^，分别于5，10天取样检测，并与0天的结果进行对照。结果见表2。表2光照试验(4500士5001x)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注温度变化2326°C；相对湿度变化56%63%2、高温试验将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶_2，6_二酮晶体IV原料放置于密封洁净玻璃瓶中，置于60°C恒温干燥箱中，分别于5，10天取样检测，并与0天的结果进行对照。结果见表3。表3高温试验(60°C)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注相对湿度变化54%62%3、高湿试验将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶_2，6_二酮晶体IV原料均勻分摊至敞口培养皿中，厚度彡5mm，置于室温(25°C左右)，相对湿度为75士5%的恒温恒湿培养箱中，分别于5，10天取样进行测定，并与0天的结果进行对照。结果见表4。表4高湿试验(室温，相对湿度、75士5%)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注温度变化2326°C4、加速试验将3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶-2,6-二酮晶体IV的原料用聚乙烯薄膜塑料袋密封包装，置于40士2°C，相对湿度为75士5%的恒温恒湿培养箱中，放置六个月，分别于1，2，3，6个月末取样检测，并与0月的结果进行对照。结果见表5。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>在本发明的另一种实施方案中，本发明提供了含有上述3_(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮以及可药用赋形剂的药用组合物，优选地，该药用组合物单位剂量(即一剂)含有3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_211-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体l-500mg，特别优选地，含有3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6-二酮晶体约5、10、15、25毫克。根据本领域现有技术的教导，并参考本发明所引用的专利，本发明的药用组合物可制成各种的剂型，并选择适宜的药用赋形剂。例如，根据待治疗疾病和对象，本发明的药用组合物，通过口服、肠胃外(例如肌肉内、腹膜内、静脉内、ICV、脑池内注射或灌注、皮下注射或灌注)、吸入喷雾、鼻、阴道、直肠、舌下或局部给药途径给药，优选地，为口服固体制剂，例如片剂、颗粒剂或者胶囊。本发明包含3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV的药用组合物，视需要还可含其它治疗成分。本发明的药用组合物是每日一次或多次日剂量而给药的，日剂量约为0.10-500毫克/天，更优选为约1-250毫克/天。或者，隔天给药，约0.10-150毫克/天，或约1-250毫克/天。本发明的3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV可用于治疗疾病和症状的例子包括但不限于治疗骨髓增生性疾病、骨髓发育不良综合症、血管生成、癌症、疼痛、黄斑变性、骨髓发育不良综合症、石棉沉滞症、贫血症、神经系统疾病、睡眠不良、皮肤病、肺高血压、免疫缺陷疾病、寄生性疾病、中枢神经系统损伤等，具体的方法和剂量可参考中国专利申请，申请号为97180299.8、98805614.3、03825761.0,03825567.7,03813733.X,03816899.5,200610150484.3,200380107531.0、200710103924.4,200380108093.X,200380108398.0,200480043341.1,200480038171.8、200480035556.9,200480020445.0,200480043535.1,200480040004.7,200480041252.3、200480042208.4,200580017546.7,200580016344.0,200580020628.7,200580037220.0、200580047364.4,200580046371.2,200580047031.1，在此上述中国专利申请的全部内容引入这里。本发明的有益技术效果体现在尽管现有技术CN1871003A专利文献的报导了八种3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮8种多晶型物及其制备方法，但是专利CN1871003A提供的制备3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮的多晶型物通过试验得知其多晶型物A、B在0.1摩尔/升的稀盐酸以及氧化破坏实验中显示其化15学稳定性差且该专利教导的转晶方法并不适于工业规模化平行性生产。现有技术CN1871003A专利文献其制备方法是将3_(4_氨基氧代_1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮加入到3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6-二酮几乎不溶的水或有机溶媒中加热溶解后降温析出晶体或长时间固液二相浆化搅拌转晶制得。1、在专利文件US5635517和中国专利申请CN101080400A中制备目标物3_(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮的最后一步化学反应是通过钯碳加氢还原硝基制得本目标化合物，正因为3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮在各种反应的溶剂体系中溶解性极差，该转晶方法无益于金属指标的降低及改善；2、以专利文件CN1871003A和CN101080400A中教导的制备多晶型物的方法制得的多晶型物A、B在0.lmol/L的盐酸以及在氧化破坏中在较短时间内就极易破坏降解，显示其化学稳定性很差。总之CN1871003A和CN101080400A制备多晶型的方法不适于工业化平行稳定生产。然而，本发明提供了适于工业化生产的一种3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体IV，克服了现有技术中存在的问题。本发明采用了简便易行的制备方法1、本发明制备的晶体IV物稳定性好，适于长期贮放；2、可明显地降低产品中重金属残留超标或过高的问题；3、本发明所公开的晶体IV在水和0.lmol/L的盐酸溶液以及氧化破坏实验中的稳定性相比于专利CN1871003A中公开的多晶型物A的稳定性好，在上述溶液中基本不破坏分解或分解程度明显小于CN1871003A中公开的多晶型物A。这使得本发明的多晶型物更加有益于制剂的要求；以上的优点使本发明有益于对产品的质量的显著提高并且更适宜于工业化生产。图1是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体的XRPD图。图2是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体的DSC扫描图。图3是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体的TGA扫描图。图4是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体的IR衍射图谱。图5是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮单晶晶体照片。图6是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体粉末照片。图7是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮分子立体结构投影图。图8是本发明3_(4_氨基-1-氧代_1，3-5氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮分子沿c方向的晶胞堆积图晶体。图9是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮片剂处方1溶出曲线。图10是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮片剂处方2溶出曲线。图11是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮胶囊处方1溶出曲线。图12是本发明3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮胶囊处方2溶出曲线。实施例1制备3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮IV晶体3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢_211-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮5克在搅拌下溶于60°C的乙腈350ml中，加入活性炭0.25克，搅拌十分钟后过滤。滤液在搅拌下每2小时降温5°C的速率梯度降温至室温后静置。在20°C左右将溶剂长时间缓慢挥发，直至晶体析出。过滤收集固体于室温下挥干至恒重。称重2.1克；收率42%。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>实施例2片剂的处方及制备工艺按下述方法用几种赋形剂将上述3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体IV配制成每片含10mg的片剂。处方情况<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>制备过程含3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV片剂的制造方法是将上述赋形剂与3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体按等量递增法混合均勻，加入10%PVP溶液做粘合剂适量，制成软材，过筛制粒，湿颗粒烘干，过筛整粒，加入硬脂酸镁混合均勻，压片。片剂处方1累积溶出度测定结果见表6，片剂处方1溶出曲线见图9。片剂处方2累积溶出度测定结果见表7，片剂处方2溶出曲线见图10。表6片剂处方1累积溶出度测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>实施例3胶囊的处方及制备工艺按下述方法用几种赋形剂将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚_2_基)哌啶_2，6-二酮晶体IV配制成每粒含10mg的胶囊。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>制备过程含3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6_二酮晶体IV胶囊的制造方法是将上述赋形剂与3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体混合均勻，加入10%PVP溶液，制成湿颗粒，烘干，过筛整粒，加入硬脂酸镁，混合均勻，装入胶囊制得。或不制粒，将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体与上述赋形剂混合均勻，过筛，直接装入胶囊制得。胶囊处方1累积溶出度测定结果见表8，胶囊处方1溶出曲线见图11。胶囊处方2累积溶出度测定结果见表9，胶囊处方2溶出曲线见图12。表8胶囊处方1的累积溶出度测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表9胶囊处方2的累积溶出度测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>对比试验以CN1871003A所公开方法制备3_(4_氨基-1-氧代-1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮多晶型物A、B(以下简称为“多晶型物A、B”)为代表，与本发明的晶体IV(以下简称为“晶体”)对比破坏实验的稳定性考察方法及结果见表10表10多晶型物A、B与晶体IV的破坏实验稳定性考察结果晶型物类别对比条"f^M^比多晶型物A多晶型物B晶体IV破坏前原料主要杂质总杂:0.06%tR5.9480.01%tR6.8550.01%tRll.1650.04%总杂:0.07%tR5.9210.01%tR6.8470.01%tRll.1650.05%总杂:0.05%tR5.8320.01%tRl0.9550.04%氧化破坏产生的主要杂质总杂:0.82%tR5.6550.39%tRl0.4010.08%tR32.3180.08%tR35.0980.14%总杂:0.89%tR5.6490.36%tRl0.3970.11%tR32.3020.10%tR35.0630.13%总杂:0.21%tR5.6720.08%tRl0.3780.04%tR32.2830.01%tR35.0880.03%0.lmol/L酸破坏1小时产生的主要杂质总杂:1.13%tR4.7220.33%tR7.3780.72%tRl1.1000.04%总杂:1.22%tR4.7170.33%tR7.3670.72%tRl1.0960.04%总杂:0.75%tR4.7410.25%tR7.3870.49%tRl1.0720.01%实验方法酸破坏取样品50mg，精密称定，置于100ml量瓶中，加0.lmol/L的盐酸溶液10ml，室温放置1小时后，加入等量的0.lmol/L的氢氧化钠溶液中和，再用流动相稀释至刻度，摇勻，高效液相色谱法检测。氧化破坏取样品50mg，精密称定，置于100ml量瓶中，，加入30%双氧水10ml，室温放置2小时后，用流动相稀释至刻度，摇勻，高效液相色谱法检测。有关物质测定高效液相色谱法的条件与系统适用性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01!1101/1磷酸二氢钾(用磷酸调节口11值至3.5)-甲醇-乙腈(80155)为流动相；检测波长240nm；理论塔板数按3_(4_氨基-1-氧代_1，3_二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮峰计算应不低于2000。3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶_2，6-二酮峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。测定法取样品，加流动相溶解并制成每1ml中含0.5mg的溶液，量取20u1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按峰面积归一化法计算总杂及单个杂质。实验结果表明，无论是在酸性条件下还是氧化条件下，本发明晶体相比于多晶型物A、B更稳定，更适于制成药品。权利要求一种3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮的晶体，使用Cu-Ka辐射，其X-射线衍射图，以度表示的2θ在7.7±0.2、11.9±0.2有衍射峰，特别是，在7.7±0.2、11.9±0.2和25.8±0.2有衍射峰。2.根据权利要求1所述的晶体，其中，其X-射线衍射图，以度表示的2Θ还在15.6+0.2,16.4+0.2,17.6+0.2,20.4+0.2,21.2+0.2,24.0+0.2,24.7+0.2,27.4士0.2、29.0士0.2有一个或多个衍射峰。3.根据权利要求1或2所述的晶体，其DSC扫描在第一个吸热峰的范围在115142°C之间，其第二吸热峰的范围在261271°C之间。4.根据权利要求3所述的晶体，其DSC扫描在第一个吸热峰在121.00°C左右有吸热峰，其第二吸热峰即最大吸热转变约在266.17°C。5.根据权利要求1或2所述的晶体IV，用KBr压片测得的红外吸收图谱，其特征为在约3562.lcm"\3505.7cm_1>3430.3cm_1>3409.7cm"\3224.lcm"\3090.9cm"\2965.6cm"\2911.2cm"\l726.6cm"\l697.5cm"\l674.8cm"\l641.6cm"\l608.3cm"\l494.2cm"\1463.0cm"\l412.0cm"\l378.2cm"\l348.5cm"\l295.6cm"\l269.6cm"\l241.7cm"\1204.3cm_1和1181.5cm_1处有吸收峰。6.根据权利要求1所述的晶体IV，为正交晶系空间群为P2(l)/c晶胞参数:a=8.5250(17)，b=22.509(5),C=13.665(3)A,晶胞体积V=2575.8(9)A3晶胞内分子数Z=4。7.权利要求1至6中任一权利要求所述晶体的制备方法，包括如下步骤3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮在搅拌下溶于热的乙腈中，脱色，滤液梯度降温至室温静置，在20°C下将溶剂长时间缓慢挥发，直至晶体缓慢析出；收集所得固体。8.根据权利要求7所述的制备方法，包括如下步骤将3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮在搅拌下溶于热的乙腈中，梯度降温至室温，加入晶种，在20°C下将溶剂长时间缓慢挥发，直至晶体析出；收集所得固体。9.一种包含权利要求1至6中任一权利要求所述晶体的药用组合物。10.根据权利要求10所述的组合物，其中，所述药用组合物单位剂量含权利要求1至6中任一权利要求所述3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮晶体l_500mg。全文摘要本发明公开了一种3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2，6-二酮的晶体IV，其X-射线衍射图，以度表示的2θ在7.7±0.2和11.9±0.2有衍射峰。此外，本发明还公开了该晶体的制备方法和药用组合物。文档编号A61P37/02GK101817813SQ20101000343公开日2010年9月1日申请日期2010年1月15日优先权日2010年1月15日发明者严荣,杨浩,许永翔申请人:南京卡文迪许生物工程技术有限公司;许永翔