专利名称：从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是从陕西省特有的银莲花属植物(太白银莲花)中分离有抗癌活性的化合物，具体地说是从太白银莲花中提取分离到的一种三萜皂苷类化合物及其在制备抗胶质瘤药物中的应用。
背景技术：
人胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的一种，致残率和死亡率高，5年生存率为20% 30%，在所有胶质瘤中占半数的胶质母细胞瘤患者5年生存率不足5%。目前用以治疗胶质瘤的化疗药物主要有亚硝脲类烷化剂尼莫司汀(ACNU)、卡莫司汀、洛莫司汀以及甲基苄胼、 甲氨喋呤、环磷酰胺、替尼泊苷等，但这些药物对恶性胶质瘤的有效率较低，一般小于50%， 对生存时间延长不明显，而且很易造成严重的肝脏损害及骨髓抑制，往往因为药物的毒副反应重而不得不放弃化疗；此外，至少半数以上胶质瘤对常用的化疗药物耐药。因此，与对其他肿瘤的治疗相比，目前临床上更缺乏对胶质瘤有效的治疗药物，新型安全高效的化疗药物的开发是治疗该病的迫切需求。毛茛科银莲花属植物在我国分部广泛，约有50余种，其中已有许多作为药用，药用部位主要为其发达的根状茎，其中多被银莲花的根茎为《中华人民共和国药典》收载的传统中药两头尖，有祛风湿和消痈肿的功效，用于风寒湿痹、四肢拘挛、骨节疼痛和痈肿溃烂， 本属的常用药材还有地乌(林荫银莲花根茎)和九节菖蒲(阿尔泰银莲花根茎)。迄今已有10余种该属植物化学成分和药理活性的研究报道，共分离鉴定了包括抗癌活性成分竹节香附素A等以三萜皂苷为主的100多个化学成分，其中约有70个为从该属植物中首先发现的新化合物。大量研究表明，从银莲花属植物中分离得到的三萜皂苷类化合物具有抗肿瘤、抗炎、抗惊厥、镇痛和抑菌等作用。太白银莲花(Anemone taipaiensis)为陕西省特有的银莲花属植物，有关该植物化学成分及药理活性的研究尚未见报道。本课题为首次对其化学成分进行研究，并对分离得到的化合物进行抗肿瘤药理活性的筛选，为进一步开发利用该植物提供参考，也为开发这一陕西省特有药用植物资源提供科学依据。我们从采自太白银莲花中分离鉴定了 30种三萜皂苷，深入的药理研究表明，这些三萜皂苷类化合物多数具有显著的肿瘤细胞毒性。其中一种新化合物3 β-ο-{ β-D-xylopy ranosyl-(l — 3)- α -L-rhamnopyranosyl- (1 — 2) - [ β -D-glucopyranosyl- (1 — 4) ] - α -L~ara binopyranosyl} hederagenin对人胶质瘤U-251MG细胞有显著的细胞毒性，IC5tl值与临床常用于恶性脑肿瘤治疗的盐酸尼莫司汀接近，但不影响原代培养的人神经胶质细胞生长。该化合物即下述式I所示化合物。其化学结构以及对K-562人白血病细胞和BEL-7402人肝癌细胞的细胞毒性已由我们报道(Xiao-YangWang1，Xiao-Li Chen1*，Hai-Feng Tang1, Hui Gao2, Xiang-Rong Tian3, Ping-Hu Zhang4Cytotoxic Triterpenoid Saponins from the Rhizomes of Anemone taipaiensis. J Planta Med. 2011，23)，但其抗胶质瘤活性尚未见有过文献报道和专利申请。
发明内容
本发明的目的旨在提供提取自太白银莲花的三萜类化合物在制备抗胶质瘤药物方面的应用。本发明的目的是这样实现的，从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物，其特征在于，它的分子式为C52H84O21，式I所示化合物
权利要求
1.从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物，其特征在于该化合物的化学结构式如下
2.根据权利要求1所述的从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物，其特征是该化合物XRGA的制备方法是取太白银莲花干燥根茎^g，粉碎后以70 %乙醇加热回流提取，提取液过滤并合并为总提取物。总提取物浓缩干燥得650g，将其分散于8L水中，再依次用石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取，分别得到15g石油醚和IlOg正丁醇两个萃取部位；IlOg正丁醇层进行硅胶柱层析，洗脱剂CHCl3 MeOH H2O的体积比为30 1 0-6 4 0. 8， 取Ilg层析后物质再次硅胶柱层析，洗脱剂CHCl3 n-BuOH的体积比为6 1-1 3，此后的1.5g层析后物质，用kphadexLH-20进行纯化，MeOH洗脱，最后经高效液相色谱仪分离纯化，体积比为87 13的甲醇-水混合溶剂为流动相洗脱，得式I化合物XRGA的纯品。
3.根据权利要求1所述的从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物，其特征是所述的从太白银莲花中提取分离式I化合物XRGA的方法，除应用常规的溶剂提取、溶剂萃取和各种色谱分离技术外，在应用硅胶柱层析方法从总苷提取物制备总三萜皂苷时，对于包含有 XRGA的总三萜类皂苷的确定是采用如下手段来检查的以硅胶薄层层析检测，采用体积比为12 3 5的正丁醇-乙酸-水混合溶剂或体积比为15 4 1的氯仿-甲醇-水混合溶剂展开，收集&值在0. 15 0. 2处显示紫红色斑点的流份，即为太白银莲花总皂苷。
4.根据权利要求1所述的从太白银莲花提取的三萜皂苷类化合物，其特征是所述的式I化合物XRGA可以单独使用或与其他辅料混合，配制成在临床上使用不同剂型，如注射剂、或散剂、或丸剂、或胶囊剂、或片剂、或微囊剂、或软胶囊剂、或膜剂、或膏剂、或酊剂、或颗粒剂、或气雾剂。
全文摘要
本发明提供了一种三萜皂苷类化合物，分子式为C52H84O21，化学名称为3β-O-{β-D-吡喃木糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖}常春藤皂苷元(3β-O-{β-D-xylopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl}hederagenin)。体外抗肿瘤试验表明，该化合物对C6大鼠恶性胶质瘤细胞以及U87MG、U251MG、BT325和SHG44四种人恶性胶质瘤细胞有明显的抑制作用，而不影响原代培养的人神经胶质细胞生长。该化合物可望用于制备治疗胶质瘤的药物。
文档编号A61P35/02GK102295678SQ20111018208
公开日2011年12月28日 申请日期2011年6月30日 优先权日2011年6月30日
发明者曹军, 李华, 杨志福, 汤海峰, 王啸洋, 程光 申请人:中国人民解放军第四军医大学