专利名称：一种适合工业化生产的脂质体制备方法
技术领域：
本发明技术领域涉及药物新剂型的设计与制备，提供了一种适合工业化生产
的脂质体制备方法。
背景技术：
脂质体具有缓释、靶向、提高药物稳定性及改善药物动力学特性等优点，是近20年国内外新型给药系统研究领域的热点之一。由于脂质体在输送至肿瘤血管时，可通过毛细管上皮组织间隙进入肿瘤组织，从而达到一定的肿瘤组织靶向作用。脂质体载药系统的被动靶向作用，因其改变了药物的体内分布，所以可在提高疗效的同时降低毒性，作为提高药物载药量的良好载体。通过脂质体的应用，良好的解决了难溶性药物溶解度低的问题，起到了降低毒性反应，消除副反应的作用，有较高靶向分布特性。所以脂质体作为新型传递系统，在注射用抗癌药物的研究与开发方面占有重要的地位。然而，国外脂质体制剂的上市产品迄今仍屈指可数；在国内，除了个别外用制剂的基质，脂质体研究基本处于实验室阶段。主要原因是(1)脂质体混悬液在贮存期间易发生聚集、融合及药物渗漏，尤其水溶性药物的渗漏更显著；同时，天然磷脂易氧化、水解，难以满足药物制剂稳定性的要求；( 脂质体制剂的制备工艺较复杂，不易扩大生产。常用的脂质体制备方法有薄膜分散法和乙醇注入法，前者难以扩大生产，后者有严重的溶剂残留问题，对液态脂质体进行冷冻干燥可在一定程度上缓解贮存稳定性问题，但工艺复杂、成本高。
发明内容
本发明提供了一种注射用脂质体的新型制备方法，其制备工艺可以除菌除热源，无需特殊设备，利于放大，生产时间短，更加易于工业化生产，提高了药物及辅料的稳定性，为广大患者提供了更加安全稳定的注射用冻干脂质体制剂。本发明通过如下设备制备
装有菱形转子的三颈圆底烧瓶放置于磁力搅拌水浴锅内。三颈圆底烧瓶的三个口分别连有如下装置左侧口为抽真空口 1 ；中间为加料口 2，加料时连有加料漏斗，制备时用胶塞密封；右侧为出料口 3，制备时用胶塞密封。设备图见图1。制备工艺如下
1、载体溶于注射用水，药物、脂质材料和稳定剂溶于有机溶剂，分别加入活性炭过滤除热原；
2、在20-70°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；
3、在20-70°C，磁力搅拌的条件下，将2减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有乳化剂的水化介质水化，通过外加作用力降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4、将3加入冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的7-乙基-10-羟基喜树碱脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。
其中，载体选自氯化钠，糖类物质，如葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇等中的一种或几种。脂质材料为磷脂，选自神经鞘磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、心磷脂中一种或几种混合物。稳定剂选自叔丁基对羟基茴香醚、2，6- 二叔丁基化羟基甲苯、氮气、α -生育酚，α -醋酸生育酚、硫代二丙酸二月桂酯等中的一种或几种混合物。乳化剂选自泊洛沙姆，聚氧乙烯氢化蓖麻油、吐温类、司盘类等中的一种或几种混合物。冻干保护剂为糖类物质，如乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等中的一种或几种。本发明的制备方法对于可以用薄膜分散法制备脂质体的药物均适用。
图1为本发明的制备的设备图。
具体实施例方式
以下为脂质体冻干粉针剂的制备为具体实例。实施例一
1) Ikg葡萄糖载体溶于2L注射用水，10g7-乙基-10-羟基喜树碱、200g大豆卵磷脂和0. 01 μ moL/mL α -生育酚溶于20L乙醇，分别加入1%活性炭过滤除热原；
2)在20°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；
3)在20°C，磁力搅拌的条件下，将2)减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有Ig泊洛沙姆的氢氧化钠-磷酸缓冲溶液IOL水化，通过超声波震荡降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4)将3)加入500g甘露醇，经冷冻干燥后去除水分，得到干燥的7-乙基-10-羟基喜树碱脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。实施例二
1)2kg氯化钠载体溶于4L注射用水，20g紫杉醇、300g神经鞘磷脂和0.02 μ moL/mL叔丁基对羟基茴香醚溶于20L乙醇，分别加入1%活性炭过滤除热原；
2)在30°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；
3)在30°C，磁力搅拌的条件下，将2)减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有3g聚氧乙烯氢化蓖麻油的醋酸-醋酸盐缓冲溶液IOL水化，通过手摇震荡降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4)将3)加入400g蔗糖，经冷冻干燥后去除水分，得到干燥的紫杉醇脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。实施例三
1)3kg甘露醇载体溶于4L注射用水，30g多西紫杉醇、IOOg心磷脂和0. 03 μ moL/mL2，6- 二叔丁基化羟基甲苯溶于20L乙醇，分别加入1%活性炭过滤除热原；
2)在50°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂
4质材料的有机溶剂中；
3)在50°C，磁力搅拌的条件下，将2)减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有5g吐温80的盐酸溶液水化10L，通过磁力搅拌降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4)将3)加入300g乳糖，经冷冻干燥后去除水分，得到干燥的多西紫杉醇脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。实施例四
1)5kg山梨醇载体溶于6L注射用水，40g替加氟、400g大豆卵磷脂溶于20L乙醇，分别加入1%活性炭过滤除热原，通氮气保存；
2)在60°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；
3)在60°C，磁力搅拌的条件下，将2)减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有7g吐温20的柠檬酸缓冲溶液IOL水化，通过探头超声降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4)将3)加入200g右旋糖苷，经冷冻干燥后去除水分，得到干燥的替加氟脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。实施例五
1)7kg蔗糖载体溶于IOL注射用水，17g 5-氟尿嘧啶、500g大豆卵磷脂和0.04μπιΟ νmL硫代二丙酸二月桂酯溶于20L乙醇，分别加入1%活性炭过滤除热原；
2)在70°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；
3)在70°C，磁力搅拌的条件下，将2)减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有8g司盘20的碳酸-碳酸盐缓冲溶液IOL水化，通过乳勻机降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；
4)将3)加入IOOg海藻糖，经冷冻干燥后去除水分，得到干燥的5-氟尿嘧啶脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。按上述实施例方法制得的各类药物脂质体冻干粉针剂，任取其中合格的六份，测定包封率，载药量，粒径，细菌检查，和热源检查，均符合标准。通过上述具体实施事例所得脂质体冻干粉针剂克服了普通方法制备的脂质体制剂稳定性差，难于实现工业生产的缺点，并已证明本发明工艺简单可行，产品安全有效，质
量稳定。本发明申请的保护权限并不仅限于此，并且在不背离其基本特征的条件下本发明也可以其它形式体现，因此我们认为本发明具有实施方案和实施事例总的来说是说明性的、而不是限制性的，保护范围按照权利要求书而不是按照上述说明确定，因此所有在权利要求的含义及其等同范围内的变化都应该包括在本发明范围中。与常用技术薄膜-冻干技术比较
1应用薄膜-冻干技术制备脂质体，水化形成脂质体的过程需要30min ；应用技术制备脂质体，水化时载体迅速溶解后迅速形成脂质体，水化过程仅需要5min。2薄膜-冻干技术在实验室最为常用，但因为无法在大型容器中实现形成均一的薄膜，所以较难实现工业生产，只能通过增加旋转蒸发仪的数量扩大生产规模。本发明的减压载体-冻干技术在载体表面成膜，扩大生产时，只需增加载体量即可，对生产设备无特殊要求。3减压载体-冻干技术和薄膜-冻干技术产率比较，结果见表1。表 权利要求
1.一种适合工业化生产的脂质体制备方法，其特征在于将减压载体制备脂质体技术与冻干技术相结合，其具体步骤为(1)载体溶于注射用水，药物、脂质材料和稳定剂溶于有机溶剂，分别加入活性炭过滤除热原；(2)在20-70°C，磁力搅拌的条件下，将溶有载体材料的注射用水逐渐加入到溶有药物与脂质材料的有机溶剂中；(3)在20-70°C，磁力搅拌的条件下，将2减压除去有机溶剂和注射用水，然后加入含有乳化剂的水化介质水化，通过外加作用力降低水化后的溶液的粒径，经0. 22 μ m滤膜过滤除菌，得到均勻的脂质体溶液；(4)将3加入冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的7-乙基-10-羟基喜树碱脂质体冻干粉针剂，使用前水化振摇后复原成脂质体，注射给药。
2.根据权利要求1所述的脂质体制备方法，其特征在于，所述的载体为氯化钠，糖类物质，选自葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的脂质体制备方法，其特征在于，所述的脂质材料为磷脂，选自神经鞘磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、心磷脂中一种或几种混合物。
4.根据权利要求1所述的脂质体制备方法，其特征在于，所述的稳定剂为无水亚硫酸钠、Vc、氮气、二丁基羟基甲苯、α-生育酚，α-醋酸生育酚、氢醌中的一种或几种混合物。
5.根据权利要求1所述的脂质体制备方法，其特征在于，所述的乳化剂为泊洛沙姆，聚氧乙烯氢化蓖麻油、吐温类、司盘类中的一种或几种混合物。
6.根据权利要求1所述的脂质体制备方法，其特征在于，所述的冻干保护剂为糖类物质，选自乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种。
7.根据权利要求1中所述的脂质体制备方法，其特征在于，外加作用力为手摇震荡，超声波清洗机超声，探头超生，磁力搅拌，过乳勻机。
8.—种如权利要求1所述的脂质体制备方法的设备，其特征在于，装有菱形转子的的三颈圆底烧瓶放置于磁力搅拌水浴锅内，三颈圆底烧瓶的三个口分别连有如下装置左侧口为抽真空口(1)；中间口为加料口(2)，加料时连有漏斗，制备时用胶塞密封；右侧为出料口(3)，制备时用胶塞密封。
全文摘要
本发明的目的是提供了一种适合工业化生产的脂质体制备方法。本发明的制备方法如下将脂溶性成分溶于有机溶剂,载体溶于水相，将载体溶液在水浴磁力搅拌条件下滴加入有机溶剂中，减压除去有机溶剂和水分，用水化介质复溶后通过外加作用力降低粒径，加入冻干保护剂冷冻干燥得到脂质体粉末，使用前复溶即得脂质体溶液。本发明利用减压载体冻干技术制备脂质体，可以大幅度提高脂质体的稳定性，且本制备方法易于生产放大，为脂质体的工业化提供了新的思路。
文档编号A61J3/00GK102552142SQ20111045418
公开日2012年7月11日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者叶田田, 王淑君 申请人:沈阳药科大学