专利名称：一种提取分离青钱柳总黄酮的树脂纯化方法
技术领域：
本发明涉及医药分离技术领域，特别涉及一种利用大孔吸附树脂制备高纯度青钱柳总黄酮的提取分离工艺。
背景技术：
青钱柳又名青钱李(江西)、山麻柳(四川)、甜茶树(贵州)、一串钱(湖北)，系双子叶植物纲胡桃科青钱柳属植物。属国家二级保护树种。广泛分布于江西、浙江、江苏、安徽、福建、台湾、湖北、四川、贵州、云南等海拔420 2500m的山区、溪谷或石灰岩山地。《全国中草药名鉴》记载青钱柳树皮，叶，根有杀虫止痒，消炎止痛祛风之功效。《中国中药资源志要》记载，青钱柳叶具清热消渴解毒之效。中医临床用于治疗糖尿病，因其有药理作用能明显降低血糖、减脂肪和尿糖。现代科学实验发现青钱柳叶含黄酮、多糖、三萜化合物、皂·苷、甾体化合物、生物碱、有机酸等多种重要药效成分，同时还检出氨基酸，维生素，锗，硒，铬，钒，锌，铁，钙等多种珍贵的微量元素。它具有降血糖、降血脂、降血压、抗氧化、防衰老、增强免疫等功效，具有广阔的应用前景。目前青钱柳有效成分的提取方法已引起广泛关注，中国专利申请号为200810073472. 4公开了一种“从青钱柳提取多糖及有效成分的方法”，采用膜分离法提取制备青钱柳多糖。中国专利申请号为200810061167. 3公开了“一种天然植物提取物的制备方法”，采用醇提、减压浓缩制备青钱柳粗品提取物。中国专利申请号201010138672. O公开了一种“青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺”，醇提、石油醚萃取、大孔树脂分离等方法提取青钱柳皂苷的工艺。现有的专利未涉及高纯度青钱柳总黄酮的制备工艺。
发明内容
本发明的目的在于提供一种青钱柳总黄酮的大孔树脂分离纯化方法，是将青钱柳提取液经树脂上柱、洗脱、收集洗脱液、浓缩、干燥，获得高纯度的青钱柳总黄酮。本发明提供的一种提取分离青钱柳总黄酮的树脂纯化方法，通过以下步骤实现(I)将青钱柳粉碎，用8 12倍一定浓度的乙醇回流提取2 4小时，提取2 3次，合并提取液。(2)将提取液回收乙醇，浓缩至适量体积，加入大孔树脂吸附，先用2 5倍树脂体积的纯化水洗脱，再用I 3倍树脂体积的碱溶液洗脱，再用2 5倍纯化水洗脱，收集碱以及水洗脱液。(3)将步骤(2)中的碱以及水洗脱液加酸调Ph至2 5后，上大孔树脂吸附，再用50% 80%的乙醇洗脱，收集醇洗脱液。(4)将醇洗脱液减压浓缩，干燥，既得青钱柳总黄酮。步骤(I)中的乙醇浓度为50% 90%步骤(2)中的碱可选碳酸钠、碳酸钙、碳酸氢钠、碳酸氢钙。大孔树脂型号可以为AB-8、D101、HPD100、HPD400、HPD427、HPD600、HPD722、HPD826 中的一种，药材重量树脂体积为I : I I : 3。步骤(3)中的酸可选盐酸、磷酸或硫酸的一种。大孔树脂型号可以为AB_8、D101、HPD100, HPD400、HPD427、HPD600、HPD722、HPD826 中的一种。药材重量树脂体积为I O. 5 I : I。本发明具有以下优点I、本发明提供的青钱柳总黄酮树脂纯化方法操作简便、快捷；2、所选用的大孔树脂具有吸附量大、解析率大，可再生重复使用；3、用本发明纯化青钱柳,其总黄酮的转移率达90 %以上，青钱柳总黄酮含量达75%以上。
为青钱柳总黄酮的纯化工艺流程图。
具体实施例方式实施例I将青钱柳药材lkg，粉碎，用10倍量70%乙醇回流提取2次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇，并减压浓缩至适量，浓缩液用IOOOml的AB-8大孔树脂吸附，用5000ml纯化水冲洗，弃去洗脱液，再用2%的碳酸钙溶液3000ml洗脱，并加3000ml纯化水续洗，收集碱及水续洗液；将续洗液加盐酸调Ph至4 5，用500ml的HPD600大孔树脂吸附，再用80%乙醇1500ml洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得青钱柳总黄酮9. Sg，含量78%。实施例2将青钱柳药材1kg，粉碎，用8倍量90%乙醇回流提取2次，每次2. 5小时，合并提取液，回收乙醇，并减压浓缩至适量，浓缩液用2000ml的DlOl大孔树脂吸附，用8000ml纯化水冲洗，弃去洗脱液，再用2%的碳酸纳溶液5000ml洗脱，并加6000ml纯化水续洗，收集碱及水续洗液；将续洗液加硫酸调Ph至3 4，用1500ml的HPD400大孔树脂吸附，再用60%乙醇2000ml洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得青钱柳总黄酮9. lg，含量80%。实施例3将青钱柳药材1kg，粉碎，用11倍量60%乙醇回流提取3次，每次4小时，合并提取液，回收乙醇，并减压浓缩至适量，浓缩液用3000ml的HPD400大孔树脂吸附，用6000ml纯化水冲洗，弃去洗脱液，再用3%的碳酸氢钠溶液4500ml洗脱，并加6000ml纯化水续洗，收集碱及水续洗液；将续洗液加盐酸调Ph至2 3，用3000ml的HPD427大孔树脂吸附，再用70%乙醇4500ml洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得青钱柳总黄酮8. 9g，含量85%。实施例4将青钱柳药材1kg，粉碎，用12倍量50%乙醇回流提取3次，每次4小时，合并提取液，回收乙醇，并减压浓缩至适量，浓缩液用1500ml的HPD722大孔树脂吸附，用45000ml纯化水冲洗，弃去洗脱液，再用2%的碳酸氢钙溶液4500ml洗脱，并加4500ml纯化水续洗，收集碱及水续洗液；将续洗液加盐酸调Ph至3 4，用1500ml的HPD826大孔树脂吸附，再用50%乙醇4500ml洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得青钱柳总黄酮8. 5g，含量88%。·
权利要求
1.一种提取分离青钱柳总黄酮的树脂纯化方法，其特征在于包括以下几个步骤 (1)将青钱柳粉碎，用8 12倍一定浓度的乙醇回流提取2 4小时，提取2 3次，合并提取液； (2)将提取液回收乙醇，浓缩至适量体积，加入大孔树脂吸附，先用2 5倍树脂体积的纯化水洗脱，再用I 3倍树脂体积的碱溶液洗脱，再用2 5倍纯化水洗脱，收集碱以及水洗脱液； (3)将步骤(2)中的碱以及水洗脱液加酸调pH至2 5后，上大孔树脂吸附，再用50% 80%的乙醇洗脱，收集醇洗脱液。
2.根据权利要求I所述纯化青钱柳总黄酮的方法，其特征在于步骤(I)中乙醇的浓度可以为50% 90%。
3.根据权利要求I所述纯化青钱柳总黄酮的方法，其特征在于步骤(2)、(3)中所用的大孔树脂可以为 AB-8、D101、HPD100、HPD400、HPD427、HPD600、HPD722、HPD826 中的一种。
4.根据权利要求I所述纯化青钱柳总黄酮的方法，其特征在于步骤(2)中的碱可选碳酸钠、碳酸钙、碳酸氢钠、碳酸氢钙。
5.根据权利要求I所述纯化青钱柳总黄酮的方法，其特征在于步骤(2)中药材重量树脂体积为I : I I : 3。
6.根据权利要求I所述纯化青钱柳总黄酮的方法，其特征在于步骤(3)中药材重量树脂体积为I : O. 5 I : I。
全文摘要
本发明涉及一种纯化青钱柳总黄酮的方法，属于中药领域。工艺步骤包括药材用乙醇回流提取，大孔树脂吸附后水洗，弃去水洗液，再用碱洗，水续洗，收集碱洗液与水续洗液，加酸调pH后上大孔树脂吸附，再用一定浓度的乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩、干燥，得青钱柳总黄酮提取物。采用本发明生产青钱柳总黄酮，工艺简单，能耗低，大孔树脂和乙醇可以重复使用，所得产品纯度高。该工艺适合工业化生产。
文档编号A61K36/52GK102895303SQ20121044381
公开日2013年1月30日 申请日期2012年11月9日 优先权日2012年11月9日
发明者郦红岩, 赵雷, 陈建, 兰雪莲 申请人:江苏吉贝尔药业有限公司