专利名称：用于加强使用针对表皮生长因子受体的抗体的疗法的效果的治疗组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，特别是特异的癌症免疫疗法。本发明基于针对表皮生长因子受体的单克隆抗体(抗-EGFR Mab)和I型干扰素(IFN)的联合使用对于转移生长的协同效应。因此，本发明提供了这样的治疗工具，其克服了针对EGFR的单一疗法的局限性。
现有技术
抗-EGFR单克隆抗体EGFR及其配体在正常组织中表达，除了造血细胞外(Carpenter G. Annu RevBiochem 1987;56:881-914)。已在许多种人上皮肿瘤中检测到这些蛋白质的过表达(Salomon DS 等人，Crit Rev Oncol Hematoll995 ;19:183-232)。临床前研究已证实，EGFR-配体自分泌和旁分泌环调节肿瘤细胞的增殖和形成转移的能力(Verbeek BS等人，FEBSLett 1998 ；425:145-50 ；0-Charoenrat P 等人，Int J Cancer 2000 ；86:307-17 ；Radinsky R 等人，Clin 20 Cancer Res 1995;1:19-31)。因此，有效且选择性的 EGFR 拮抗剂目前正在临床试验中(Pal SK, Pegram M. Anticancer Drugs 2005;16:483-94)。当前，临床开发中最成功的疗法是嵌合Mab IMC-C225/西妥昔单抗。西妥昔单抗与受体的细胞外结构域的亚结构域III结合，与配体竞争，并通过影响受体二聚化而阻断受体的活化。此外，西妥昔单抗诱导EGFR的内在化和降解(Shiqing L等人，Cancer Cell2005 ；7 :301-11)。此外，Naramura等人证实,西妥昔单抗可以通过激活患者外周血单核细胞来诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，这暗示这种机制可能促成这种抗-EGFR Mab的抗肿瘤活性(Naramura M 等人，Cancer Tmmunol Immunother 1993;37:343-9)。使用西妥昔单抗的临床前研究已使得过表达EGFR的人异种移植肿瘤完全消退(Goldstein J等人，JTmmunol 1997 ; 158:872-9)。在具有晚期表达EGFR的实体瘤的患者中进彳丁的I期临床试验已证实，西妥昔单抗是被良好耐受的(Robert F 等人，J Clin Oncol 2001 ； 19:3234-43 ；Baselga J 等人，JClin Oncol 2000 ； 18:904-14 ；Shin DM等人，Clin Cancer Res 2001 ;7 :1204_13)。可归因于西妥昔单抗的最临床相关的不利事件是过敏反应和皮肤毒性(Shin DM等人,ClinCancerRes 2001;7:1204-13)。近来，西妥昔单抗已被美国食品和药物管理局(FDA)的批准用于治疗具有可检测的EGFR表达的晚期结肠直肠癌患者，以单一疗法或与伊立替康相联合(ImClone Systems,Erbitux(Cetuximab). US Prescribing IFNormation. ImClone System,2004)。此外，西妥昔单抗的广泛的II和III期临床测试已在胰腺癌患者(Xiong HQ等人，J Clin Oncol 2004 ;22:2610-6)、非小细胞肺癌(NSCLC)患者(Lynch TJ等人，Proc Am SocClin Oncol 2004 ;RosellR 等人，Proc. Am. Soc Clin. Oncol. 2004)以及头与颈鱗状细胞癌(SCCHN)患者(Bonner JA 等人，Proc. Am. Soc. Clin. Oncol. 2004)中继续进行。此外，已评估了人源化抗体 h_R3/TheraCIM (Center of Mo I ecular Immuno logy )0这种Mab具有与原始鼠类抗体类似的抑制EGFR/EGF结合的能力(Mateo C等人，Immunotechnology 1997 ;3:71_81)。h_R3抑制处于单层中的A431细胞系的增殖的能力类似于西妥昔单抗。在使用h-R3的临床前研究中，已获得了过表达EGFR的人肿瘤异种移植物的完全消退(Viloria-Petit A 等人，Cancer Res 2001;61:5090-101)。h_R3 在古巴被“药物质量控制中心”(Center for Drug QualityControl, CECMED)注册用于治疗晚期头与颈癌患者(Crombet T等人，J Clin Oncol 2004 ;22:1646-54)。此外，已在其他位置继续进行h_R3的临床试验测试,例如脑、乳腺、前列腺和肺(Crombet T,personal communication)。具有类似作用机制的其他抗-EGFR Mab目前正在临床研究中。ABX-EGF是抑制配体依赖性受体活化并且抑制人肿瘤异种移植物生长的完全人类的IgG2抗-EGFR MabCYangX等人，Cancer Res 1999;59:1236-43)。近来，已报告了 ABX-EGF在结肠直肠癌患者中的 III 期临床测试的阳性结果(Tyagi P. Clin Colorectal Cancer 2005;5:21-3)。此外，·在直肠癌和NSCLC患者中使用这种Mab的II期临床试验正在进行中(Tiseo M等人，Curr·Med Chem Anticancer Agents2004 ;4:139-48)。EMD 72000 (人源化的抗-EGFR Mab)已在胰腺癌患者中进行了评估(Graeven U等人，Br J Cancer 2006;94:1293-9)。然而，使用抗-EGFR Mab治疗的转移癌患者未达到显著的存活收益。例如，使用西妥昔单抗治疗的伊立替康-难治性结肠直肠癌患者能够使疾病稳定，但它们未达到存活增加(Cunningham D等人，N. Engl. J. Med. 2004 ；351 :337_345)。这些结果导致需要研究允许增加抗-EGFRMab功效的治疗组合。通过基于Mab的被动疗法来诱导细胞毒性T淋巴细胞交叉呈递((31'088-口16861^31:;
注射到C57BL/6小鼠(10只小鼠/组)的侧面尾静脉中。在肿瘤攻击后第6天，静脉内施用7A7和对照Mab(2. 8mg/kg，在100μ I PBS中)。进行实验后21天，处死小鼠并取出肺。计数D122肺转移的数目。与对照Mab相比较，7A7Mab的施用显著减少了 D122肺转移的数目(图3)，这种差异是统计学上显著的(Mann-Whitney检验，p〈0. 0001)。实施例3 7A7Mab对于D122肿瘤的抗转移效应依赖于⑶8+T细胞。将D122细胞(2. 5X IO5)注射到C57BL/6小鼠(10只小鼠/组)的侧面尾静脉中。在肿瘤攻击后第6天，静脉内施用7A7和对照Mab (2. 8mg/kg，在100 μ I PBS中)。在肿瘤攻击后第6天开始由特异性抗体(腹膜内注射)对于CD8+细胞的耗竭，并继续直至该测定法结束时。在小鼠的脾和肺中评估耗竭的效果。进行实验后21天，处死小鼠并取出肺。计数D122肺转移的数目。
在这个实验中，验证了 7A7Mab对于D122肿瘤的抗转移效应，与对照小鼠相比较，观察到在用7A7处理的小鼠中D122肺转移数目的显著减少(Dunn检验，p〈0.01)(图4/表I )。CD8+细胞耗竭取消了 7A7Mab的抗转移效应，获得大于关于对照组的肺转移数目平均值的关于7A7组的肺转移数目平均值(Dunn检验，p〈0. 05)(图4/表I)。表I.实验组的转移数目平均值
权利要求
1.抗表皮生长因子受体的抗体在制备用于刺激CD8T细胞应答的试剂中的用途。
2.权利要求I的用途，其中所述抗表皮生长因子受体的抗体是由保藏号为ECACC951110101的细胞系产生的人源化抗体h-R3。
全文摘要
本发明为用于加强使用针对表皮生长因子受体的抗体的疗法的效果的治疗组合物。本发明描述了特定的治疗组合物，其增加使用针对表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体(Mab)和I型(α/β)干扰素(IFN)的疗法的功效。
文档编号A61P35/04GK102940883SQ20121047011
公开日2013年2月27日 申请日期2007年9月27日 优先权日2006年9月29日
发明者L·E·费尔南德斯莫利纳, G·加里多伊达尔戈, R·佩雷斯罗德里格斯, B·桑切斯拉米雷斯, A·菲尔南德斯戈麦斯, A·洛佩斯莱奎纳, I·博索莱伊德尔加多 申请人:分子免疫中心