专利名称：一种注射用含细胞色素c药物组合物的冻干制剂、制备方法
技术领域：
本发明涉及一种注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂及其制备方法，属于医药领域。
背景技术：
细胞色素C药物组合物的冻干制剂，通用名称注射用细胞色素C ;英文名称Cytochrome C for Injection。本品是存在于细胞线粒体中的一种以铁卟啉为辅基的蛋白质，目前已能提纯分离。药用制剂是从动物心脏或酵母中分离出来的，细胞色素是呼吸链的一环。各种细胞色素按一定顺序排列组成细胞色素体系，其分子中的Fe3+在有关酶的作用下，能进行可逆的氧化还原反应，担负传递电子的作用，是细胞呼吸所不可少的。细胞色素C不能透过细胞膜，因此对正常人无作用，但当组织缺氧时，细胞膜通透性增高，外源性制剂即能进入细胞内，从而发挥其纠正细胞呼吸和物质代谢作用。用于各种组织缺氧急救的辅助治疗，如一氧化碳中毒、催眠药中毒、氰化物中毒、新生儿窒息、严重休克期缺氧、脑 血管意外、脑震荡后遗症、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困难和各种心脏疾患弓I起的心肌缺氧的治疗。细胞色素C药物组合物的冻干制剂为细胞色素C加适宜稳定剂和冻干保护剂的无菌冻干品，为粉红色冻干块状物。细胞色素C冻干制剂现有生产流程为药液配制-灌装半加塞-冷冻干燥、压塞-轧盖-目检包装。现有的生产工艺有(I)处方主药细胞色素C ;辅料包括葡萄糖、亚硫酸氢钠、无水亚硫酸钠、注射用水。(2)溶液配制称取处方量辅料溶解于总配制量50%的注射用水中，加处方量细胞色素C搅拌溶解，调节pH值过滤至澄明，用除菌滤器过滤后备用。(3)冷冻干燥23小时完成药液预冻、升华干燥、二次干燥、压塞过程。但是上述工艺均存在下述问题(I)细胞色素C是一种以铁卟啉为辅基的蛋白质，为辅酶类生化药物，稳定性较差，处方中的辅料虽然对细胞色素C有一定的保护作用，但按照现有处方工艺细胞色素C在经历整个生产过程后，产品质量出现不稳定性，常出现澄清度、可见异物不合格问题。(2)在冷冻干燥过程中冻干时间达到23小时，冻干时间越长细胞色素C处于非干燥状态时间越长，产品质量越不稳定，能耗越大，生产成本越高。改进冻干工艺、缩短冻干时间有利于提高产品质量和节能降耗。(3)产品在贮存过程中，细胞色素C不稳定易引起含量、活力明显降低
发明内容
本发明的目的是提供一种注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂。本发明另一目的是提供注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂的制备方法。为了实现本发明的目的，本发明提供一种注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂，所述冻干制剂包括如下重量份的组分细胞色素C75 300份；L-精氨酸3(Γ60份；依地酸二钠2 5份；甘露醇150份。优选组分为细胞色素C150份；L_精氨酸45份；依地酸二钠3份；甘露醇150份。上述冻干制剂的制备方法，包括如下步骤1)配制药液；2)冷冻干燥；所述冷冻干燥包括以下步骤预冻、一次干燥、二次干燥。所述预冻步骤包括将冷凝器温度预降至_40°C以下，药液进箱后在O. 5 1. 5小时内将板层温度降至-35°C以下，保持低温状态2 3小时。所述一次干燥步骤包括开启真空泵，保持真空度20Pa以下，I小时升温至4 5°C，保温3 4小时，进行一次干燥。所述二次干燥步骤包括一次干燥后，I小时内将板层升温至14 16°C，真空度控制在10 20Pa，保温2小时，再升温I小时至37 39°C，保温3 4小时；在冻干过程中，检查板层温度、制品温度、冷凝器温度，冻干结束后，进行液压加塞。所述冷冻干燥总时间为1Γ16小时。所述步骤I)中，将L-精氨酸和依地酸二钠加入到经活性炭过滤的甘露醇溶液中，再与细胞色素C溶液混合，采用浓度为O. 4 O. 6mol/l的磷酸或磷酸钠溶液调节pH值
6.O 7. 5，过滤得到药液。本发明具有如下技术效果(I)细胞色素C作为一种以铁卟啉为辅基的蛋白质，为辅酶类生化药物，稳定性较差，在本发明中，辅料选用依地酸二钠和L-精氨酸，有利于提高细胞色素C的稳定性，药液配制过程选用甘露醇作冻干赋形剂，既可使冻干成形，又可保证产品的质量。(2)选用磷酸或磷酸钠溶液作为pH值调节剂，可使药液pH值与产品冻干后再复溶的药液PH值保持一致，从而使产品质量更稳定。(3)在甘露醇溶液经活性炭处理后再加入细胞色素C，避免了细胞色素C因活性炭吸附而引起的含量降低问题。(4)缩短冻干时间可使细胞色素C尽快脱离非干燥状态，在本发明中，将冻干时间由23小时缩短至1Γ16小时，从而使细胞色素C的稳定性进一步得到保证。(5)由于缩短冻干时间，降低能耗达30%，同时在不增加硬件投入的情况下，可提高了生产产能30%左右，显著降低了生产成本。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1本发明的注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂由如下成分制成细胞色素C7. 5g ；L-精氨酸3g ;依地酸二钠O. 20g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制备方法如下I)称取处方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%。活性炭，煮沸，保温15分钟后，过滤脱炭，得溶液①。2)将溶液①冷却至20°C以下，先后加入处方量的L-精氨酸和依地酸二钠，得溶液②。3)取处方量的细胞色素C溶液，加注射用水补充至300毫升，得溶液③。4)将溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水补足体积至总量，调pH值6. 7，经
O.22 μ m孔径除菌滤器过滤，按每瓶Iml分装于2ml管制瓶中，管制瓶置冷冻干燥机制品室板层，待冷冻干燥。PH调节剂为5%磷酸溶液。5)冷冻干燥工艺①预冻首先将冷凝器温度预降至_42°C，产品进箱后在I小时内将板层温度快速降至-35°C以下，保持低温状态2小时。②一次干燥开启真空泵，保持真空度20Pa以下，I小时升温至5°C，保温3小时，进行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小时将板层升温至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保温2小时，再升温I小时至38°C，保温3小时(冻干总时间14小时)。④冻干过程中，检查板层温度、制品温度、冷凝器温度等，冻干结束后，进行液压加
塞，轧盖。 包装10瓶/盒X60盒/件实施例2本发明的注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂由如下成分制成细胞色素C15g ；L-精氨酸4. 5g ;依地酸二钠O. 3g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制备方法如下I)称取处方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%。活性炭，煮沸，保温15分钟后，过滤脱炭，得溶液①。2)将溶液①冷却至20°C以下，先后加入处方量的L-精氨酸和依地酸二钠，得溶液②。3)取处方量的细胞色素C溶液，加注射用水补充至300毫升，得溶液③。4)将溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水补足体积至总量，调pH值6.8，经
O.22 μ m孔径除菌滤器过滤，按每瓶Iml分装于2ml管制瓶中，管制瓶置冷冻干燥机制品室板层，待冷冻干燥。PH调节剂为5%磷酸溶液。5)冷冻干燥工艺①预冻首先将冷凝器温度预降至_44°C，产品进箱后在I小时内将板层温度快速降至-35°C以下，保持低温状态2小时。②一次干燥开启真空泵，保持真空度20Pa以下，I小时升温至5°C，保温3小时，进行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小时将板层升温至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保温2小时，再升温I小时至38°C，保温4小时(冻干总时间15小时)。④冻干过程中，检查板层温度、制品温度、冷凝器温度等，冻干结束后，进行液压加
塞，轧盖。包装10瓶/盒X60盒/件
实施例3本发明的注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂由如下成分制成细胞色素C30g ；L-精氨酸6g ;依地酸二钠O. 50g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制备方法如下I)称取处方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%。活性炭，煮沸，保温15分钟后，过滤脱炭，得溶液①。2)将溶液①冷却至20°C以下，先后加入处方量的L-精氨酸和依地酸二钠，得溶液②。3)取处方量的细胞色素C溶液，加注射用水补充至300毫升，得溶液③。4)将溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水补足体积至总量，调pH值6. 9，经
O.22 μ m孔径除菌滤器过滤，按每瓶Iml分装于2ml管制瓶中，管制瓶置冷冻干燥机制品室板层，待冷冻干燥。PH调节剂为5%磷酸钠溶液。5)冷冻干燥工艺①预冻首先将冷凝器温度预降至_45°C，产品进箱后在I小时内将板层温度快速降至-35°C以下，保持低温状态2小时。
②一次干燥开启真空泵，保持真空度20Pa以下，I小时升温至5°C，保温4小时，进行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小时将板层升温至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保温2小时，再升温I小时至38°C，保温4小时(冻干总时间15小时)。④冻干过程中，检查板层温度、制品温度、冷凝器温度等，冻干结束后，进行液压加
塞，轧盖。包装10瓶/盒X60盒/件实验例1、稳定性加速试验将实施例1 3制成的细胞色素C药物组合物的冻干制剂分别于0、1、3、6个月检查PH值、澄清度、可见异物、活力、含量五个考察项目(参见表I)。表I稳定性加速试验结果
权利要求
1.一种注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂，其特征在于，包括如下重量份的组分细胞色素C75 300份；L-精氨酸3(Γ60份；依地酸二钠2飞份；甘露醇150份。
2.根据权利要求1所述的冻干制剂，其特征在于，包括如下重量份的组分细胞色素C150份；L-精氨酸45份；依地酸二钠3份；甘露醇150份。
3.制备权利要求1或2所述冻干制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤1)配制药液；2)冷冻干燥；所述冷冻干燥包括以下步骤预冻、一次干燥、二次干燥。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述预冻步骤包括将冷凝器温度预降至_40°C以下，药液进箱后在O. 5 1. 5小时内将板层温度降至-35 V以下，保持低温状态2 3小时。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述一次干燥步骤包括开启真空泵，保持真空度20Pa以下，I小时升温至4 5°C，保温3 4小时，进行一次干燥。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述二次干燥步骤包括一次干燥后，I小时内将板层升温至14 16°C，真空度控制在10 20Pa，保温2小时，再升温I小时至37 39°C，保温3 4小时；在冻干过程中，检查板层温度、制品温度、冷凝器温度，冻干结束后，进行液压加塞。
7.根据权利要求3-6中任一所述的方法，其特征在于，所述冷冻干燥总时间为1Γ16小时。
8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤I)中，将L-精氨酸和依地酸二钠加入到经活性炭过滤的甘露醇溶液中，再与细胞色素C溶液混合，调节PH值，过滤得到药液。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述pH值为6.O 7. 5。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，采用浓度为O.4 O. 6mol/l的磷酸或磷酸钠溶液作为PH值调节剂。
全文摘要
本发明涉及一种注射用含细胞色素C药物组合物的冻干制剂，包括如下重量份的组分细胞色素C75~300份；L-精氨酸30~60份；依地酸二钠2~5份；甘露醇150份。该冻干制剂选用依地酸二钠和L-精氨酸作为辅料，有利于提高细胞色素C的稳定性，药液配制过程选用甘露醇作为冻干赋形剂，选用磷酸或磷酸钠溶液作为pH值调节剂，可使产品质量更稳定；在甘露醇溶液中经活性炭处理后再加入细胞色素C，避免了细胞色素C因活性炭吸附而引起的含量降低的问题；本发明采用的制备方法，将冻干时间由23小时缩短至14~16小时，降低能耗30%，同时在不增加硬件投入的情况下，可提高产能30%左右，显著降低了生产成本。
文档编号A61K47/18GK103055305SQ201210578970
公开日2013年4月24日 申请日期2012年12月27日 优先权日2012年12月27日
发明者尹双青, 刘永宏 申请人:蚌埠丰原涂山制药有限公司