具有肿瘤细胞靶向结合能力的短肽及其应用的制作方法

专利名称：具有肿瘤细胞靶向结合能力的短肽及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一组转铁蛋白受体结合肽，此类结合肽与高表达转铁蛋白受体的肿瘤细胞具有特异性高亲和力，能够作为肿瘤治疗药物的靶向载体，增加抗肿瘤药物对肿瘤细胞的特异性作用。
背景技术：
转铁蛋白受体(TfR)介导的内吞作用是铁吸收、储存和利用的关键环节。Fe3+是核苷酸还原酶的一个辅因子，其主要功能之一是参与DNA复制的过程，对于细胞的生长是不可缺少的。关于Fe3+进入细胞内的机理，目前国内外公认的机理是，转铁蛋白携带Fe3+结合到表达转铁蛋白受体的细胞上，通过胞吞转铁蛋白-Fe3+-转铁蛋白受体复合物进入内含体，ATP依赖的质子泵把H+泵到内涵体，PH值降低到5.5，在低PH下，转铁蛋白受体改变构象释放携带Fe3+的转铁蛋白。转铁蛋白一被释放就会立刻到达细胞表面，接下来转铁蛋白、Fe3+、转铁蛋白受体复合物就会如此循环运输Fe3+。正常情况下转铁蛋白结合Fe3+只会达到30%饱和的程度，通过转铁蛋白-转铁蛋白受体复合物进入细胞并不局限于Fe3+，铋，硼，钌，锝都会通过转铁蛋白-转铁蛋白受体复合物进入细胞。转铁蛋白受体分子量约为90KDa，是II型跨膜糖蛋白，由胞外段、跨膜段与胞内段组成。到现在为止，已经发现了两类转铁蛋白受体，TfRl与TfR2，在很多细胞包括血红细胞、网织红细胞、肝细胞、单核细胞以及血脑屏障都发现有TfRl，而TfR2有两种转录形式存在(a -TfR2, β -TfR2)，而a -TfR2显著表达在肝细胞上，β _TfR2在很多细胞上呈低表达。转铁蛋白受体几乎在所有的细胞上都有表达但表达量不同。与缓慢增殖的非肿瘤细胞相比，转铁蛋白受体在肿瘤细胞上的表达显著增加，这与肿瘤细胞快速分裂需摄入大量Fe3+有关。在很多肿瘤组织上与很多病例上都可以发现转铁蛋白受体是显著上调的，其上调与肿瘤阶段呈正相关，并且与治疗效果也有关。在前列腺癌细胞、口腔癌细胞、和肝癌细胞上，转铁蛋白受体的表达量比非肿瘤细胞至少要高出100倍，转铁蛋白受体的分子数目可以达到10000个。因此，转铁蛋白受体是肿瘤诊断与治疗的重要靶点。相关报道表明，把植物药青蒿素、治疗性蛋白、寡核苷酸序列及核糖体失活蛋白如蓖麻毒素等共价连接到转铁蛋白上，就能达到靶向治疗作用，同时最大程度的降低了毒副作用。由Xenova开发的白喉毒素-转铁蛋白复合物已经用于治疗脑肿瘤病人。与传统的耐药性治疗效果相比，在一期与二期均起到的显著性的抗肿瘤的作用(Weaver，M.J.Neurooncol.65, 3-13 (2003))。噬菌体展示技术是20世纪80年代兴起的一项蛋白质相互作用的技术，其可以用来抗原表位筛选、诊断试剂研究、疫苗研究、药物靶向研究。由于噬菌体展示技术可以将其表型与基因型联系一起，利用其配体独特的亲和力，结构简单，库容量大，所以将目的蛋白或短肽筛选出来 再进一步开发成药物成为极大的可能性(Kazuki N.Sugahara, etal.Science328，1031 (2010))。噬菌体展示技术已经成为开发药物的快速有效的方法。
本发明通过噬菌体随机展示7肽库对转铁蛋白受体进行筛选，最终得到了一组具有生物活性的短肽，并验证了此短肽与转铁蛋白受体具有良好的结合活性，能用于转铁蛋白受体的检测和作为肿瘤治疗药物的靶向载体。

发明内容
本发明的目的是提供一组新型转铁蛋白受体结合肽，其能够与转铁蛋白受体专一结合，并能够用于转铁蛋白受体的检测和作为肿瘤治疗药物的靶向载体。本发明通过噬菌体随机展示7肽库对转铁蛋白受体进行筛选，最终得到了一组具有生物活性的短肽，对与转铁蛋白受体特异性结合的短肽的结构分析，确定了与转铁蛋白受体特异结合的氨基酸序列模式。转铁蛋白受体结合肽的筛选与鉴定按照下述步骤进行:(I)准备靶分子溶液，转铁蛋白受体用NaHCO3溶液稀释16 μ g/ml包被酶标板，每孔150μ 1，4°C湿盒轻微震荡孵育过夜。如果需要稳定靶分子溶液，也可使用其他相似强度的离子溶液。(2)挑取单克隆宿主菌大肠杆菌(购自New England Biolabs公司)ER2738于IOml含抗性的LB培养基里震荡培养。(3)倾去包·被液并扣去残余液，加进封闭液，封闭至少I小时。(4)弃去封闭液，0.1 % TBST洗脱快速洗脱6次，每次要彻底洗脱底部与边缘的封闭液，均旋转以使板或孔的底部及边缘均被洗到，倾去缓冲液，倒置在干净纸巾上拍甩以除去残余溶液并注意防止干燥。(5)加上TBST稀释的原始肽库，每孔100 μ I加到已经包被好的板上上，室温温和震动60min。(6)洁净纸倾除未结合噬菌体，倒置在干净的试纸上扣去未结合肽。(7) 0.1 % TBST洗板，每次要换洁净纸避免交叉污染。(8)非特异性洗脱缓冲液0.2MGlycine-HCL洗脱，轻微震荡不超过10_20min，洗脱脱液转入离心管中，并迅速用150 μ I pH9.1 IM Tris-HCL中和上述洗脱液。剩余洗脱物应当被扩增:将洗脱物加入到20ml ER2738培养物中(菌体应当处于对数前期)，37°C剧烈摇动培养4.5hr。(9)取 1μ I 测滴度。(10)扩增剩余洗脱物。扩增过程:将洗脱物加到20ml生长到对数期的ER2738宿主菌中。ER2738宿主菌过夜培养物以1: 100接种LB四环素中，把剩余洗脱物加进去，37°C,220rpm4.5 小时左右。(11) 12000rpm,4°C, IOmin离心，转移上清到新离心管中重离心。(12)转移上清80%到新离心管中，加1/6体积PEG8000/NaCL，4°C过夜。(13) 12000rpm, 15mim, 4°C, 15min离心，弃上清，重离心并移去残余液。(14) ImlTBS重悬沉淀物，转移到微量离心管中14000rpm，5min4°C(15)转移上清到新离心管1/6体积PEG8000/NaCL重悬沉淀，置冰上15_60min。(16) 14000rpm, 10min4°C,弃上清重离心，并移去残余液。(17)TBS重悬沉淀物，再次离心以除去不溶物，转移上清到新管。
(18)测上述扩增噬菌体滴度。(19)并把此扩增的噬菌体用于下一轮的筛选。(20)进行第二轮筛选，用第一轮筛选扩增的洗脱物重复上述步骤；并注意延长洗脱时间、增大吐温浓度、减小靶分子浓度等晒算因素。(21)在LB/IPTG/Xgal平板上测定第二轮淘选所得洗脱物扩增后的滴度。(22)第三轮筛选；(23)在LB/IPTG/Xgal平板上测定第三轮淘选所得洗脱物未扩增时的滴度。第三轮洗脱物不必再扩增，滴度测定时得到的噬菌斑可做测序用:只要注意平板培养时间不要超过18小时，培养时间过长容易出现缺失。其余洗脱物4°C贮存。(24)通过噬菌体ELISA鉴定，挑取OD值比对照高的单克隆。(25)从平板上挑取分隔良好的单克隆，对其采用competitive Elisa检测，挑选阳性克隆，测序。 (26)根据测序结果，以化学方法合成对TfR亲和力最高的噬菌体展示短肽序列。(27)标记FITC (异硫氰酸荧光素)，以高表达TfR的肿瘤细胞!fepG2细胞为靶细胞、低表达TfR的正常肝细胞L-o2为对照细胞，采用免疫荧光显微(immunofluorescencemicroscopy),激光共聚焦显微扫描(confocal laser scanning microscope),竞争性抑制结合试验(competitive inhibition binding experiments)等方法检验此短肽与高表达TfR的!fepG2亲和性。通过上述筛选过程，最终筛选获得具有下列氨基酸序列的多肽:Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser(SEQ ID NO:1)；His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln(SEQ ID NO:2)；His-Ser-Ser-Leu-Gln-Thr-Pro(SEQ ID NO:3)；Met-Val-Pro-Pro-Arg-Leu-Leu(SEQ ID NO:4)。具有上述氨基酸序列的多肽可以专一性与转铁蛋白受体结合。对本发明短肽的研究结果表明，本发明筛选得到的短肽可以作为肿瘤治疗药物的靶向载体，将其与肿瘤治疗药物结合，例如与抗肿瘤多肽或蛋白融合，可以介导这些药物靶向结合到肿瘤细胞上，从而提高作用效果，并减少了对正常的细胞的杀伤与毒副作用，例如，将上述短肽与麻疯树毒蛋白(curcin)融合，可用于治疗肝癌和乳腺癌(研究表明，肝癌和乳腺癌细胞表面转铁蛋白受体的表达远远高于正常细胞(参见，Daniels TR, Delgado T, Rodriguez JA,Helguera G，Penichet ML:The transferrin receptor part I:Biology and targetingwith cytotoxic antibodies for the treatment of cancer.Clin Immunol 2006,121 (2):144-158)。另外，转铁蛋白受体结合肽作为生物制剂也存在着潜在的应用价值，例如作为配体用作转铁蛋白受体的亲和纯化，FITC标记的此短肽则可以用于探针检测转铁蛋白受体的存在，也可以检测肿瘤细胞的增殖与转移。根据转铁蛋白受体结合肽的氨基酸序列，可能存在多种获取含此种短肽的方法，例如化学方法合成(固相合成、液相合成)，或者用基因重组的方法生产得到该短肽。因此，本发明涉及下述各项:1.一种转铁蛋白受体结合肽，其氨基酸序列为SEQ ID N0:l，2，3或4。2.第I项所述的转铁蛋白受体结合肽在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。
3.第2项所述的应用，其中所述肿瘤是在肿瘤细胞表面表达转铁蛋白受体的肿瘤。4.第3项所述的应用，其中所述肿瘤选自肝癌或乳腺癌。5.一种肿瘤治疗药物，其包括有效量的第I项的转铁蛋白受体结合肽作为肿瘤治疗药物的靶向载体。6.第5项所述的肿瘤治疗药物，其中所述肿瘤是在肿瘤细胞表面表达转铁蛋白受体的肿瘤。7.第6项所述的肿瘤治疗药物，其中所述肿瘤选自肝癌或乳腺癌。8.一种检测转铁蛋白受体的试剂，所述试剂包含有效量的第I项所述的转铁蛋白受体结合肽。


从下面结合附图的详细描述中，本发明的上述特征和优点将更明显，其中:图1A为HPLC检测体外有机合成短肽的纯度；图1B为MS检测体外有机合成短肽的分子量；图2A为免疫荧光检测本发明的短肽(即，转铁蛋白受体结合肽)-麻疯树毒蛋白融合蛋白与高表达转铁蛋白受体的肝癌细胞株HepG2细胞表面结合；

图2B为免疫荧光检测本发明的短肽-麻疯树毒蛋白融合蛋白与正常肝细胞株L02细胞表面结合。
具体实施例方式下面结合实施例和附图对本发明进一步说明，但是本领域技术人员应该理解，这些具体的实施例仅是举例说明，并不限制本发明的精神和范围。需要说明的是，本领域技术人员应该理解，下述实施例中所用的试剂、酶类等除特别说明外，均为可从试剂公司商购的分析纯级别的试剂或酶类。实施例1短妝Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser, His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln,Hi s-Ser-Ser-Leu-Gln-Thr-Pro, Met-Val-Pro-Pro-Arg-Leu-Leu 的化学合成采用CS936多肽合成仪(美国CSBio公司)，Fmoc固相合成法合成上述短肽，合成过程主要包括下述步骤:a.去保护:用哌唳(piperidine,上海紫一试剂厂)溶液去除氨基的保护基团；b.激活与交联:下一个氨基酸的羧基被激活剂HBTU(HCTU/HITU)+NMM所激活溶解，激活的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键；c.循环:a、b两步反应反复循环直到整条肽链合成完毕；d.洗脱和脱保护:根据肽链所含的残基不同，用不同的脱树脂溶剂从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂(TFA)洗脱和脱保护；e.合成好的短肽经过Varian Prostar210纯化柱(美国VARIAN公司)纯化,纯化的过程中米用 UV-Vis-detector:Varian Prostar345 (美国 VARIAN 公司)检测；f.采用System Gold HPLC (美国贝克曼公司)验证纯度达到99%以上；
g.米用 Thermo Finnigan LCQ deca XP plus (美国 Thermo 公司)检测合成短妝的分子量。图1A 和 IB 分别显示了 Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser (SEQ ID NO:1)短肽的纯度与分子量检测结果，与理论值吻合。实施例2His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln (SEQ ID NO:2)短肽的 His-tag 融合多肽的表达与纯化根据短肽的氨基酸序列推导其碱基序列，并合成其互补的序列，退火后将其连接到载体PET-22b (Invitrogen公司)上的Nde I/Xho I的酶切位点，将得到的重组构建体转化DH5a感受态细胞(Invitrogen公司)，挑取单克隆并做菌落PCR，测序(上海英俊生物公司)。再回收将经过测序鉴定正确的重组子，将其转化入宿主菌E.coli BL21(购自上海北诺生物科技有限公司)，将此表达菌液以1: 50(v/v)接种到含有100 μ g/ml氨苄青霉素(Sigma公司)的LB培养基中，220rpm，37°C，摇菌4小时，待其OD值达到0.6左右，加进IPTG诱导表达4小时，离心去上清收集菌体，冰上超声破碎此菌体。12000rpm，4°C，离心10分钟。收集上清，使用N1-NTA亲和层析得到该短肽的His-tag融合多肽。实施例3ELISA检测噬菌体展示短肽与转铁蛋白受体特异性、专一性结合用由PBS 稀释浓度为 2 μ g/ml>4 μ g/ml>8 μ g/ml、16 μ g/ml、32 μ g/ml、64 μ g/ml、128 μ g/ml的转铁蛋白受体(购自美国R&D公司)包被96孔酶标板(Corning公司),每孔150μ1，留有几个孔作为不包被转铁蛋白受体的空白对照，4°C缓慢摇床过夜，倾去包被液，加进PBS稀释的I % BSA封闭液，封闭I小时。分别加入终滴度为IxiO11Pfu/ml的展示本发明的短肽的噬菌体100 μ 1，室温缓慢摇床结合I小时。0.1 % PBST洗涤6次，加入HRP-抗Μ13抗体(NEB公司)100μ1(1: 5000稀释)，37 °C孵育40分钟，PBST洗涤6次后加入显示·底物TMB(碧云天公司)50μ I显色10分钟，IM H2SO4终止显色，酶标仪 450nm 检测 OD 值。展不序列为 Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser (SEQ ID NO:1) >His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln(SEQ ID NO:2), His-Ser-Ser-Leu-Gln-Thr-Pro(SEQ IDNO:3)和 Met-Val-Pro-Pro-Arg-Leu-Leu (SEQ ID NO:4)的噬菌体的 OD 值分别为 0.7108、
0.9953,0.8965和0.8324，表明其与转铁蛋白受体具有较高的特异性、专一性结合能力。实施例4ELISA检测His-tag融合肽与转铁蛋白受体特异性、专一性结合。用由PBS 稀释浓度为 2 μ g/ml>4 μ g/ml>8 μ g/ml、16 μ g/ml、32 μ g/ml、64 μ g/ml、128 μ g/ml、256 μ g/ml的转铁蛋白受体(美国R&D公司)包被96孔酶标板(Corning,公司)，每孔150μ 1，同时设置不包被转铁蛋白受体的空白对照，4°C缓慢摇床过夜，倾去包被液，加进PBS稀释的I % BSA封闭液，封闭I小时。加入PBS稀释1.0y M His-tag融合肽(SEQ ID NO:2，由实施例2获得)，室温结合I小时。0.1 %的PBST洗涤6次后，加入鼠源的抗组氨酸标签的抗体(上海江莱生物科技有限公司)(I: 2000稀释)，37°C孵育40分钟，PBST洗涤6次后，加入HRP标记的羊抗鼠抗体(上海江莱生物科技有限公司)100 μ 1,37°C孵育40min，PBST洗涤6次后加入显示底物TMB (碧云天公司)50 μ I显色10分钟，IM H2SO4终止显色，酶标仪450nm检测OD值，OD值为0.9025，表明该肽(SEQ ID NO:2)与转铁蛋白受体具有较高的特异性、专一性结合能力。
实施例5噬菌体与短肽竞争结合表肿瘤细胞表面转铁蛋白受体根据Zvezdana Popovic (Zvezdana Popovic Douglas M.Templeton, Molecularand Cellular Biochemistry 265:37_45，2004.)，!fepG2 细胞表面表达有转铁蛋白受体，将HepG2细胞(购自上海细胞库)吹打均匀，每孔接种I X IO6个细胞到细胞培养板里。待贴壁后无血清处理3小时，I % BSA封闭I小时。将系列稀释的短肽(0.00001mM，0.0OOlmM，
0.001mM,0.0lmM,0.1mM)(即由实施例1获得的四种短肽)与！fepG2细胞在37°C共孵育3小时。同时做空白对照，M13Wild(购自New England Biolabs公司)对照，L_02(正常肝细胞，购自上海细胞库)对照。将用细胞培养基稀释、终滴度达到10npfu/ml的噬菌体与上述细胞共作用2小时，用磷酸盐缓冲液洗涤非特异性噬菌体，再用0.2M pH2.2的甘氨酸盐酸洗脱特异性噬菌体，最后在LB/Xgal/IPTG平板(在含有LB固体平板上滴加40ul2% X-Gal和7ul20% IPTG，然后涂布均匀)计数噬菌体滴度。抑制率=(对照滴度-实验滴度)/对照滴度X 100 %。结果显不，短妝Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser (SEQ ID NO: I),His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln(SEQ ID NO:2), His-Ser-Ser-Leu-Gln-Thr-Pro(SEQ IDNO:3)，Met-Val-Pro-Pro-Arg-Leu-Leu(SEQ ID NO:4)对噬菌体的抑制率分别为 65.3%,73.1%>62.5%和68.4%，表明其具有显著的竞争结合作用。实施例6His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln(SEQ ID NO:2)增强麻疯树毒蛋白(curcin)对肿瘤细胞的靶向结合能力将HepG2细胞(购自上海细胞库)吹打均匀，每孔接种I X IO6个细胞到共聚焦培养皿里，过夜生长贴壁；次日，3.7%多聚甲醛固定细胞15min，磷酸盐缓冲液洗涤2遍，甲醇孵育lOmin，，山羊血清(购自杭州四季青公司)封闭I小时；用FITC标记的本发明的短肽-麻疯树毒蛋白融合蛋白(该融合蛋白通过常规的基因工程方法获得)与细胞相互作用
1.5hs,磷酸盐缓冲液洗漆2遍；DAPI (sigma公司)与细胞作用30min,磷酸盐缓冲液洗漆2遍；激光共聚焦仪(德国蔡斯公司)检测短肽-麻疯树毒蛋白融合蛋白与细胞的定位，并设置人正常肝细胞株L02(购自上海细胞库)作为对照。结果如图2A和图2B所示，短肽-麻疯树毒蛋白融合蛋白结合于闻表达转铁蛋白受:体的HepG2细胞表面，部分进入细胞质中，L02正常细胞表面未观察到与短肽-麻疯树毒蛋白融合蛋白结合，此结果表明，该短肽增强了麻疯树毒蛋白对肿瘤细胞的靶向结合能力。实施例7Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser (SEQ ID NO:1)增强麻疯树毒蛋白(curcin)对肿瘤细胞的增殖抑制作用。取对数生长期的!fepG2细胞，胰酶消化后，调整细胞浓度为6X IO4个细胞/ml，10% FBS,5% CO2在96孔培养板中每孔加入IOOul细胞悬液。37。。，10% FBS, 5% CO2培养24小时后细胞贴壁生长，弃去培养液，加入短肽-融合蛋白，分5个剂量组，分别为2.5 μ g/ml>5 μ g/ml>10 μ g/ml>20 μ g/ml、40 μ g/ml,同时设不加融合蛋白的对照组,孵育48小时，加入20μ 1MTT， 继续孵育4小时，每孔加入150ul 二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10分钟，使结晶物充分溶解。在490nm波长下检测其OD值，计算半数抑制率IC5(I。同时做麻疯树毒蛋白单体的对照实验。结果表明，curcin和该短肽-curcin融合蛋白对HepG2细胞的IC5tl分别为0.137nmol和0.562nmol,该短肽-curcin融合蛋白对HepG2细胞的IC5tl显著低于curcin。实施例8His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln(SEQ ID NO:2)增强麻疯树毒蛋白(curcin)对肿瘤细胞的增殖抑制作用。取对数生长期的!fepG2细胞，胰酶消化后，调整细胞浓度为6X IO4个细胞/ml，10% FBS,5% CO2在96孔培养板中每孔加入IOOul细胞悬液。37。。，10% FBS, 5% CO2培养24小时后细胞贴壁生长，弃去培养液，加入短肽-curcin融合蛋白，分5个剂量组，分别为2.5 μ g/ml>5 μ g/ml、10 μ g/ml>20 μ g/ml>40 μ g/ml,同时设不加融合蛋白的对照组,孵育48小时，加入20 μ 1MTT，继续孵育4小时，每孔加入150ul 二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10分钟，使结晶物充分溶解。在490nm波长下检测其OD值，计算半数抑制率IC5(I。同时做麻疯树毒蛋白的对照实验。结果表明，curcin和该短肽-curcin融合蛋白对HepG2细胞的IC50分别为0.153nmol和0.546nmol，该短肽-curcin融合蛋白对H印G2细胞的IC50显著低于Curcin0。应该理解，尽 管参考其示例性的实施方案，已经对本发明进行具体地显示和描述，但是本领域的普通技术人员应该理解，在不背离由后附的权利要求所定义的本发明的精神和范围的条件下，可以在其中进行各种形式和细节的变化，可以进行各种实施方案的任意组合。
权利要求
1.一种转铁蛋白受体结合肽，其氨基酸序列为SEQ ID N0:l，2，3或4。
2.权利要求I所述的转铁蛋白受体结合肽在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。
3.权利要求2所述的应用，其中所述肿瘤是在肿瘤细胞表面表达转铁蛋白受体的肿瘤。
4.权利要求3所述的应用，其中所述肿瘤选自肝癌或乳腺癌。
5.一种肿瘤治疗药物，其包括有效量的权利要求I的转铁蛋白受体结合肽作为肿瘤治疗药物的靶向载体。
6.权利要求5所述的肿瘤治疗药物，其中所述肿瘤是在肿瘤细胞表面表达转铁蛋白受体的肿瘤。
7.权利要求6所述的肿瘤治疗药物，其中所述肿瘤选自肝癌或乳腺癌。
8.—种检测转铁蛋白受体的试剂，所述试剂包含有效量的权利要求I所述的转铁蛋白受体结合肽。
全文摘要
本发明公开了一组转铁蛋白受体结合肽，其氨基酸序列如下Ala-His-Leu-His-Asn-Arg-Ser、His-Glu-Asn-Gln-Thr-Arg-Gln、His-Ser-Ser-Leu-Gln-Thr-Pro、Met-Val-Pro-Pro-Arg-Leu-Leu。本发明的转铁蛋白受体结合肽在体内和体外均能结合转铁蛋白受体，能用于转铁蛋白受体的检测、作为肿瘤治疗药物的靶向载体等方面，在医学与生物学研究领域得到广泛的应用。
文档编号A61P35/00GK103254280SQ20131007327
公开日2013年8月21日 申请日期2013年3月7日 优先权日2013年3月7日
发明者郑青, 徐单单, 熊耀玲, 黄亚东, 苏志坚, 许华, 张齐好, 项琪 申请人:广州暨南大学医药生物技术研究开发中心, 暨南大学