一种异烟肼缓释微球的制备方法【专利摘要】本发明提供一种异烟肼缓释微球的制备方法，该方法包括如下步骤：步骤a，将异烟肼固体成分（S）与油相（O）、有机溶剂混匀，形成油包固体（S/O）混悬液；步骤b，将步骤a的混悬液进行喷雾干燥，制得缓释微球。该方法采用油包固体-喷雾干燥的方法制备异烟肼缓释微球，解决了现有技术存在的微球粒径大、药物突释、包封率低、制备工艺复杂、制备时间长等不足。本发明方法操作简单可控，微球粒径大小适宜，包载(封)率高，缓释效果好，无明显突释。【专利说明】一种异烟肼缓释微球的制备方法【
技术领域：
】[0001]本发明涉及一种异烟肼缓释微球的制备方法，具体涉及一种采用油包固体-喷雾干燥法制备异烟肼缓释微球的方法，属于医药领域。【
背景技术：
】[0002]结核病治疗重点和难点在于复治、难治及耐多药肺结核。常规的给药途径化疗效果差，多年迁延不愈，痰菌持续阳性或成为终生排菌者。目前肺结核的介入疗法通常选用注射剂或混悬剂作为给药的剂型，这类制剂释药速率快，患者需要频繁接受介入操作，导致其顺应性不佳。[0003]异烟肼（isoniazid，IN)为水溶性小分子药物，包裹水溶性小分子药物是长效缓释制剂制备中的难点技术问题，制备得到的微球普遍存在包载率低及突释的问题。[0004]现有技术[Sustainedreleaseofisoniazidfromasingleinjectabledoseofpoly(DL-lactide-c0-glycolide)microparticlesasatherapeuticapproachtowardstuberculosis,ManishaDutt,G.K.Khuller.[J]InternationalJournalofAntimicrobialAgentsl7(2001)115-122;Techniquetoencapsulatealowmolecularweighthydrophilicdruginbiodegradablepolymerparticlesinaliquid-liquidsystem,FuminoriIto,etal.[J]ColloidsandSurfacesA:Aspects384(2011)368-373]报道的异烟肼乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA)缓释微球制备方法，多采用复乳化-溶剂挥发法制备存在着微球粒径大（11-70微米)，药物突释，包封率低，制备工艺复杂，制备时间长等不足°也有文献报道[Inhalablemicroparticlescontaininglargepayloadofanti-tuberculosisdrugs.PavanMuttil,etal.[J]Europeanjournalofpharmaceuticalsciences32(2007)140-150;Inhalablebiodegradablemicroparticlesfortarget-specificdrugdeliveryintuberculosisandaprocessthereof.US2007/0154562A1]采用药物溶液喷雾干燥法制备异烟肼和利福布汀聚乳酸微球，但该法制备工艺复杂，条件不易控制，且微球在体内的缓释效果不明确。[0005]因此，能制备出具有微球粒径小且能适于肺部介入给药，包封率高，无药物突释效应，药物在体内持续缓慢释放，制备工艺简单之特性的异烟肼缓释微球的制备方法，尚未见类似报道。[0006]本发明目的在于建立经气管镜肺部介入治疗药物的缓释给药系统，解决局部介入治疗中缓释系统尚未建立的难题，有针对性的介入治疗难治、复治和耐多药的肺结核，缩短空洞闭合时间，促进远端病灶吸收、减少复发和播散，力争明显提高肺结核的治愈率。将抗结核药物制备成缓释给药系统应用于介入治疗，能够提高患者顺应性，提高治疗效果。【
发明内容】[0007]本发明的目的在于提供一种异烟肼缓释微球的制备方法，该方法采用油包固体-喷雾干燥技术制备异烟肼缓释微球，制得的微球粒径小，包封率高，缓释效果好，无明显突释效应。[0008]本发明的目的是通过如下技术方案实现的：[0009]-种异烟肼缓释微球的制备方法，该方法包括如下步骤：[0010]步骤a，将异烟肼固体成分（S)与油相（0)、有机溶剂混匀，形成油包固体（S/0)混悬液；以及[0011]步骤b，将步骤a的混悬液进行喷雾干燥，制得缓释微球。[0012]进一步，步骤a所述异烟肼固体成分为异烟肼微粉颗粒或包含辅料的异烟肼组合物；包含辅料的异烟肼组合物优选异烟肼-壳聚糖组合物或异烟肼-海藻酸钠组合物；[0013]更进一步，所述异烟肼微粉颗粒与油相的比例为S:0=1:15?20;更优选为S:0=l:20;更进一步，所述异烟肼微粉颗粒为异烟肼原料药经球磨法制备成的微粉颗粒；更优选为，所述球磨法为湿法球磨法；更进一步，所述异烟肼微粉颗粒的粒径为〇.l-5ym;更优选为粒径为〇.1-1μm;[0014]更进一步，所述异烟肼-壳聚糖组合物与油相的比例为S:0=l:10?15;更优选为S:0=l:10;更进一步，所述异烟肼-壳聚糖组合物中异烟肼和壳聚糖的比例为1:1?2,壳聚糖分子量为Mw50000-190000,脱乙酰度为75-85%;[0015]更进一步，所述异烟肼-海藻酸钠组合物与油相的比例为S:0=1:1?2;更优选为S:0=1:1;更进一步，所述异烟肼-海藻酸钠组合物中异烟肼与海藻酸钠的比例为5:0.5?2；[0016]进一步，所述步骤a为先将异烟肼固体成分溶解于有机溶剂中，再加入油相；[0017]进一步，所述有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、三氯甲烷、丙酮中的至少一种；更进一步，所述有机溶剂为二氯甲烷。[0018]进一步，步骤a所述油相为聚乳酸（PLA)，聚乳酸-羟基乙酸（PLGA)，聚羟基乙酸（PGA)中的至少一种；更进一步，所述油相为聚乳酸；更进一步，所述PLA粘度为0·49-1.92dl/g(CHC13/25°C);更进一步，所述PLA粘度为0·49dl/g(CHC13/25°C)。[0019]进一步，步骤b所述喷雾干燥进口温度为60_70°C，出口温度50_60°C。[0020]本发明的创新点及有益效果在于：[0021]第一，采用油包固体-喷雾干燥的方法，克服了现有技术采用复乳化-溶剂挥发法制备的微球粒径大（11-70微米)、突释明显、包封率低、工艺复杂、制备时间长等不足。本发明方法制备的微球表面光滑圆整、无明显空隙、无粘连，包封率高、突释小、载药量高；并且，微球粒径较小，一般为10μm以下，能够满足肺部给药对粒径的要求；再者，本发明方法制备过程中避免使用乳化剂，对于肺部给药而言，能够减少肺部负担。[0022]第二，在异烟肼固体成分超声分散的过程中，若按常规工艺先将PLA溶解于有机溶剂中，再加入异烟肼固体成分超声分散，则固体成分不易分散，肉眼能看到微粉颗粒的聚集，即使在有机溶剂中加入一些表面活性剂，也不能起到明显的分散效果；但是如果首先将IN固体成分超声分散于有机溶剂中，然后再加入PLA超声溶解，固体成分则能够均匀分散于PLA的有机溶剂中。因此，本发明选择先将IN固体成分超声分散于有机溶剂中，再加入PLA超声溶解。【专利附图】【附图说明】[0023]图I:不同膜材体外释放曲线；[0024]图2:异烟肼聚乳酸微球电镜扫描图[0025]A:整体图；B:放大图；[0026]图3:异烟肼聚乳酸微球体外释放曲线（PBS，ρΗ=7·4,37.4°C;mean土SD，n=3);[0027]图4:异烟肼-壳聚糖-聚乳酸微球电镜扫描图[0028]A:整体图；B:放大图；[0029]图5:异烟肼-壳聚糖-聚乳酸微球与异烟肼-壳聚糖组合物药体外释放曲线(PBS，37°C)。（mean土SD，n=3)[0030]实验例1缓释微球制备方法考察[0031]1实验方法[0032]1.1异烟肼缓释微球的制备[0033]按如下方法制备异烟肼缓释微球：[0034]方法一：水包油包固体（S/0/W)复乳化-冷冻干燥法[0035]称取200mg异烟肼微粉颗粒（S)，将其超声分散于2mll0%的PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物：（P〇ly(lactic-co_glycolicacid)，PLGA))二氯甲烧溶液（0)中，在磁力搅拌下将制备的S/0混悬液加入到2%聚乙烯醇（W)溶液中进行乳化，低转速搅拌4h，挥发有机溶剂，离心分离微球，去离子水洗3次，冷冻干燥得到微球。[0036]方法二：油包固体（S/0)-喷雾干燥法[0037]称取40mg异烟肼微粉颗粒（S)，超声分散于50ml二氯甲烷中，加入800mgPLA(聚乳酸：polylacticacid,PLA)(0)超声溶解的S/0混悬液，将制备的混悬液喷雾干燥制得微球。[0038]1.2包封率和载药量的测定[0039]按如下方法测定异烟肼缓释微球的包封率和载药量。[0040]精密称取样品IOmg,加入2mL二氯甲烧超声5min溶解微球表层的聚乳酸，加入4mL去离子水萃取,涡旋5min,静置30min分层，吸取上清液。然后再加入去离子水萃取,萃取步骤重复三次。合并萃取液，离心（lOOOOrpm,IOmin)，稀释适当倍数后，采用HPLC进行定量分析。包封率、载药量按如下公式计算：[0041]包封率（EF)=(微球中药物量/投药量）X100%[0042]载药量（DL)=(微球中药物量/微球总重量）X100%[0043]1.3体外释放测定[0044]体外释放采用恒温振荡法。精密称取样品20mg，装入预先处理好的透析袋，加入3mL释放介质，两端扎紧，放入装有50mL释放介质的锥形瓶中。在（37±0.5)°C条件下恒温水浴，振荡频率为l〇〇rpm。定时取样lmL，并即时补加同体积、同温度的释放介质。样品经释放介质适当稀释，离心后，采用HPLC进行检测，计算累积释放率。[0045]2实验结果[0046]2.1包封率和载药量测定结果[0047]实验结果见表1。[0048]表1包封率和载药量结果[0049][0050]2·2体外释放试验结果【权利要求】1.一种异烟肼缓释微球的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：步骤a，将异烟肼固体成分（S)与油相（0)、有机溶剂混匀，形成油包固体（S/0)混悬液；以及步骤b，将步骤a的混悬液进行喷雾干燥，制得缓释微球。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a为先将异烟肼固体成分溶解于有机溶剂中，再加入油相。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、三氯甲烷、丙酮中的至少一种。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤a所述油相为聚乳酸，聚乳酸-羟基乙酸，聚羟基乙酸中的至少一种。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述油相为聚乳酸。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤a所述异烟肼固体成分为异烟肼微粉颗粒或包含辅料的异烟肼组合物；包含辅料的异烟肼组合物优选异烟肼-壳聚糖组合物或异烟肼-海藻酸钠组合物。7.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述异烟肼微粉颗粒与油相的比例为S:0=1:(15?20)。8.如权利要求7所述制备方法，其特征在于，所述异烟肼微粉颗粒为湿法球磨法制备的颗粒。9.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述异烟肼-壳聚糖组合物与油相的比例为S:0=1:(10?15)。10.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述异烟肼-海藻酸钠组合物与油相的比例为S:0=1:(1?2)。【文档编号】A61P31/06GK104367554SQ201310356858【公开日】2015年2月25日申请日期:2013年8月15日优先权日:2013年8月15日【发明者】朱春燕,张丽梅,张运申请人:中国医学科学院药用植物研究所