葱莲中具有抗肿瘤作用的化合物及其分离制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了从葱莲中分离得到的具有抗肿瘤作用的化合物及其分离制备方法和应用，具体公开了来源于植物葱莲的生物碱类化合物的活性及结构，包括抗肿瘤活性良好的化合物N-苯乙基文殊兰定碱及葱莲碱A和葱莲B的分离纯化制备方法和相关活性。研究证实其对白血病HL-60、K562、肺癌A-549、肝癌HepG2和结肠癌HT-29肿瘤细胞细胞增殖有抑制活性，可以作为治疗白血病、肺癌、肝癌、结肠癌等肿瘤疾病的药物。
【专利说明】葱莲中具有抗肿瘤作用的化合物及其分离制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】，涉及抗肿瘤化合物化合物，具体涉及抗肿瘤化合物化合物分离纯化过程，结构确证，抗肿瘤细胞增殖作用实验等内容。
【背景技术】
[0002]人早急性幼粒白血病是以早幼粒细胞增生为主的急性白血病，为急性髓细胞白血病(AML)的一种特殊类型，被FAB协作组定为急性髓细胞白血病M3型。急性早幼粒细胞白血病在临床上并不少见，发病人群以30~38岁之间年青者为主。中国发病率比西方国家高出10%，一些地区(东北油田)发病率在AML中所占比例高达20%~30%。
[0003]葱莲(Zephyranthes Candida)是蒜科葱莲属多年生草本植物葱莲(ZephyranthesCandida(Lindl.)Herb)的全草。在日本亦称“玉帘”，原产南美，我国南部广泛引种栽培，资源丰富。民间以全株入药，有平肝熄风、散热解毒的功能；用于小儿急惊风、癫痫；外用于痈疮红肿。在秘鲁同属的植物Zephyranthesparul被用作治疗肿瘤,而葱莲在非洲做为药用植物被广泛用于治疗糖尿病。
【发明内容】
[0004]我们在抗肿瘤活性筛选的指导下，对葱莲抗肿瘤活性成分进行了系统研究，分离得到了化合物1-16，其中N-甲基文殊兰定碱、N-丙酸乙酯基文殊兰定碱、N-丁酸乙酯基文殊兰定碱、N-苯乙基文殊兰定碱、N-异戊基文殊兰定碱、甲氧基尼润碱、葱莲新碱、葱莲碱A和葱莲碱B为新化合物。结构式如(I)所示。通过这16个化合物对5种人体肿瘤细胞抗肿瘤活性研究，发现化合物3、5、6、7、8对白血病HL-60、K562、肺癌A-549、肝癌!fepG2和结肠癌HT-29肿瘤细胞细胞增殖有抑制活性。
[0005]本发明涉及葱莲中相关生物碱类化合物的分离制备、以及它具有抑制白血病HL-60、K562、肺癌A-549、肝癌!fepG2和结肠癌HT-29肿瘤细胞细胞增殖的活性。可以作为
治疗白血病、肺癌、肝癌、结肠癌等肿瘤疾病的药物。
[0006]
【权利要求】
1.具有以下式所示结构的化合物N-苯乙基文殊兰定碱:
2.权利要求1所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
3.权利要求1或2所述的化合物在制备用于治疗白血病、肺癌、肝癌或结肠癌的药物中的应用。
4.从葱莲中分离制备N-苯乙基文殊兰定碱的方法，包括:将葱莲干燥全草(IOkg)粉碎后用95%乙醇(含2% HCl) 25L冷浸提取三次，第四次加热回流提取，合并提取液回收溶剂后用含2% HCl的水溶液3L混悬，3L氯仿萃取四次，水相用浓氨水调PH值至碱性，再次以3L氯仿萃取四次，氯仿层回收溶剂得总碱，总碱用中压色谱系统经硅胶柱色谱，氯仿至甲醇梯度洗脱得五部分，第一部分经正相硅胶，反相硅胶柱色谱，凝胶色谱和高效液相色谱分离得到具有以下结构式的N-苯乙基文殊兰定碱，
【文档编号】A61P35/02GK103588776SQ201310559346
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2011年12月22日 优先权日:2011年12月22日
【发明者】张勇慧, 姚广民, 王富乾, 张锦文 申请人:华中科技大学