沙蓬总黄酮提取物及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明属中药、天然药物制药领域，涉及一种制造沙蓬总黄酮有效部位提取物的生产工艺及其在制药领域的用途，提供一种能保证药品疗效的沙蓬总黄酮有效部位提取物的生产工艺。本发明所述的沙蓬总黄酮提取物，是从我国产的藜科沙蓬属植物沙蓬的干燥地上部分，分离纯化得到的总黄酮有效部位提取物。本发明的沙蓬总黄酮有效部位提取物，其中总黄酮含量超过50%（紫外法），异鼠李素-3-O-芸香糖苷含量为5%-10%（高效液相色谱法）。本发明的制备方法工艺经济、简便、适用于工业化大生产。所述的总黄酮有效部位提取物具有降血糖药理作用，可制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等剂型及其复方制剂，用于治疗糖尿病。
【专利说明】沙蓬总黄酮提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明属中药、天然药物制药领域，涉及沙蓬总黄酮提取物及其制备方法和应用。【背景技术】
[0002]糖尿病(diabetes mellitus, DM)是由于胰岛素绝对或相对不足引起的以高血糖和多并发症并存为特征的内分泌代谢性常见病、多发病，成为一种仅次于癌症、心脑血管疾病，严重威胁人类健康的常见终身性慢性疾病。目前中国糖尿病的患病率为3.21%，并呈递增趋势，大城市的患病率已经达到5%~6%。我国的糖尿病患者人数已达4000万左右，占世界糖尿病人群总数的五分之一，每年新增加糖尿病患者超过120万人。我国已成为糖尿病发病的“重灾区”，是全球糖尿病第二大国，并有向年轻化发展的趋势。糖尿病在发生发展过程中，并发症发病率高达96.15%，表现复杂，是导致糖尿病患者致死、致残的主要原因。糖尿病主要并发症有感染、低血糖昏迷、糖尿病酮症酸中毒、糖尿病肾病、糖尿病血管病变(包括糖尿病视网膜病变，即微血管病变)、神经病变、糖尿病高渗性昏迷等。
[0003]目前糖尿病患者临床上主要采用注射胰岛素(I型糖尿病)、口服降糖药(2型糖尿病)和中医中药等方法治疗。I型糖尿病属于胰岛素依赖型糖尿病，主要通过补充胰岛素治疗。治疗2型糖尿病主要通过口服降糖药物。临床应用的降糖药物主要有磺酰脲类(sulfonylurea)、双胍类(biguanide)、餐时血糖调节剂(胰升糖素抑制剂，insulinantagonist inhibitor)、膜岛素增敏剂(insulin sensitizer)、α-葡萄糖苷酶抑制剂(a -glucosidase inhibitor)等。这些口服降糖药物均为化学合成药物,分别具有很强的毒副作用，长期使用将对患者的各个药物代谢器官造成严重损害。开发疗效高、毒副作用低的新型降糖药物，解除糖尿病患者的痛苦，具有十分重要的科学意义和社会效益，是医药工作者的重大课题和任务。
[0004]蒙药具有悠久的历史和鲜明的特点，是蒙古族农牧民在与疾病长期斗争中积累的宝贵知识财富。藜科植物沙蓬Agriophyllum squarrosum(L.)Moq.的干燥全草，自古以来蒙医作为一种常用的蒙药“楚力格日”应用，具有祛疫，清热，解毒，利尿功效。主要用于治疗疫热增盛、头痛、身目黄疸、口糜、齿龈溃烂、尿道灼痛、肾热、口渴、胃“赫依”以及毒热等疾病。内蒙古地区农牧民用于治疗糖尿病，效果极佳。可利用这种药用植物资源开发一种治疗糖尿病新药。
[0005]沙蓬中主要化学成分为黄酮类、三萜皂苷类、生物碱类及留醇类等。通过对沙蓬的前期研究证实，沙蓬总黄酮提取物具有较好的降血糖药理作用。
[0006]目前沙蓬总黄酮提取物的生产工艺国内外还是空白。纵观国内外文献报道，均未见沙蓬Agriophyllum squarrosum(L.)Moq.的干燥地上部分总黄酮提取物的制备工艺研究；未见对沙蓬总黄酮提取物进行降血糖药理作用研究；未见用沙蓬总黄酮提取物开发治疗糖尿病药物的研究。
【发明内容】
[0007]本发明所解决的技术问题在于提供一种沙蓬总黄酮提取物及其制备方法和在制备治疗糖尿病药物方面的应用。
[0008]本发明通过如下技术方案实现:
[0009]本发明以异鼠李素-3-0-芸香糖苷为定量指标，其中总黄酮含量超过50%，异鼠李素-3-0-芸香糖苷含量为5%~8%。
[0010]本发明具体采用下述步骤制备沙蓬总黄酮提取物:
[0011](I)取沙蓬干燥药材，粉碎，加10~15倍量的50%~95%的乙醇水溶液浸泡I~5小时，加热回流提取2~3次，每次2~3小时；
[0012](2)过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.00~1.20，浓缩液备用；
[0013](3)将步骤(2)所得浓缩液，按浓缩液:有机溶剂1:1的比例用石油醚萃取3次，去除非极性或低极性的化学成分。然后再用正丁醇萃取3次，合并正丁醇层萃取液减压回收溶剂，浓缩得浸膏。按浸膏:蒸馏水1:20~40的比例将浸膏加蒸馏水溶解，抽滤，滤液备用；
[0014](4)将步骤(3)所得滤液，按药材:树脂重量比为10:8.5~12.0上大孔树脂柱，大孔树脂型号为AB-8型、HPD300型、HPD400型、DlOl型。静态吸附3~12小时，依次用蒸馏水(Ikg药材:0.5~IL蒸馏水)洗脱4~8个柱体积、8%~20%的乙醇水溶液(Ikg药材:0.5~IL乙醇水溶液)洗脱5~8个柱体积除去杂质，洗脱速度为0.1~0.2L/h。再用25%~35%的乙醇水溶液(Ikg药材:1~2L乙醇溶液)洗脱8~15个柱体积，洗脱速度为0.1~0.2L/h。收集25%~35%的乙醇洗脱液，回收溶剂，浓缩干燥，粉碎，过筛，得沙蓬总黄酮提取物。
[0015]本发明所涉及的制备沙蓬总黄酮提取物的方法，是经过大量实验优化后制定的方法。将正丁醇萃取物浸膏水溶液上大孔树脂吸附后，采用蒸馏水和8%-20%的乙醇水溶液洗脱去除极性大的杂质，然后用25%~35%的乙醇水溶液洗脱总黄酮类化合物，具有去除杂质率高，可获得具有明确降血糖药理作用的沙蓬总黄酮有效部位提取物的特点。若用高于35%乙醇水溶液浓度的乙醇洗脱，则得到的总黄酮提取物中其他类化合物杂质含量高，总黄酮和异鼠李素-3-0-芸香糖苷含量过低。
[0016]所得沙蓬总黄酮提取物的成分分析:经TLC和HPLC分析方法定性分析，并通过ES1-MS JH-NMR和13C-NMR波谱数据解析验证，确定其中含有异鼠李素-3-0-芸香糖苷。
[0017]
【权利要求】
1.沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，制备方法如下: (1)取沙蓬干燥药材，粉碎，加乙醇水溶液浸泡，加热回流提取； (2)过滤，合并滤液，浓缩，浓缩液备用； (3)将步骤(2)所得的浓缩液，用石油醚萃取，然后再用正丁醇萃取，将正丁醇层萃取液减压回收溶剂，浓缩得浸膏，浸膏加蒸馏水溶解，抽滤，滤液备用； (4)将步骤(3)所得滤液，用大孔树脂柱吸附，依次用蒸馏水、8%~20%的乙醇水溶液洗脱，再用25%~35%的乙醇洗脱，收集25%~35%的乙醇洗脱液，回收溶剂，浓缩干燥，粉碎，过筛，得沙蓬总黄酮提取物。
2.如权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，步骤(1)中所述的乙醇水溶液的浓度为50%~95%，为药材的5~15倍量，浸泡I~5小时，加热回流提取2~3次，每次2~3小时。
3.如权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，所述的大孔树脂柱为ΑΒ-8型、HPD300、HPD400或DlOl型大孔树脂。
4.如权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，步骤(3)中浓缩液用石油醚、正丁醇各萃取3次，每次萃取采用的有机溶剂用量按浓缩液:有机溶剂1:1的比例萃取，正丁醇萃取物浸膏加蒸馏水溶 解，按浸膏:蒸馏水1:20~40的比例加入蒸馏水溶解浸膏。
5.如权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，步骤(4)中蒸馏水洗脱4~8个柱体积，8%~20%的乙醇水溶液洗脱5~8个柱体积，25%~35%的乙醇洗脱8~15个柱体积。
6.一种药物组合物，包含权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物。
7.权利要求1所述的沙蓬总黄酮提取物或权利要求6所述的药物组合物与药学上可接受的载体制备成临床可接受的药物制剂。
8.如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
9.权利要求1-5任何一项所述的沙蓬总黄酮提取物或权利要求6所述的药物组合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。
10.如权利要求1-5任何一项所述的沙蓬总黄酮提取物，其特征在于，以鼠李素-3-0-芸香糖苷计，其中总黄酮含量大于50%，异鼠李素-3-0-芸香糖苷含量为5%~8%。
【文档编号】A61K31/7048GK103599148SQ201310576889
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年11月15日 优先权日:2013年11月15日
【发明者】李玉山, 回业乾, 李英华, 曲俊业, 刘铮, 赵宇姣 申请人:沈阳药科大学