同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及药物领域，特别是涉及抗肿瘤药物领域，更为具体的说是涉及一种抗肿瘤药物。本发明的目的在于提供一种全新的抗肿瘤药物，创造性地发现了同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明所公开的化合物作为肿瘤靶向载体，通过放射性同位素标记后，可以在病变处选择性聚集。且选择性高、靶向性好，副反应小，肿瘤治疗效果显著。
【专利说明】同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物领域，特别是涉及抗肿瘤药物领域，更为具体的说是涉及同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002]肿瘤正严重威胁着人类健康，寻找有效的抗肿瘤药物与方法是世界医学界的重要研究课题。近年来，尽管人类在肿瘤治疗方面如手术、化疗、放疗取得了一些进展。但是由于现有的化疗药物和放疗方法的选择性不高，杀伤肿瘤细胞的同时也损害了体内的正常细胞，导致患者在治疗中常出现较明显的毒副反应，所以寻找一种对肿瘤细胞选择性高、杀伤作用强，但对正常组织副作用小的抗肿瘤药物非常有意义。
[0003]放射性同位素标记的化合物可以利用其放射性核素所发出的射线在病变部位高度选择性聚集，利用对病变部位的照射，在局部产生足够的电离辐射生物学效应，从而达到抑制或者破坏病变组织的目的。
[0004]为了减少对周围组织的破坏，就必须保证这一放射性核素选择性地聚集，也就是说为了更好地确保副反应小，减少对自身组织的伤害，就必须要提高药物对肿瘤组织的选择性。
[0005]同位素标记金丝桃素、原金丝桃素也曾作为肿瘤靶向药物研究，但是，经研究发现金丝桃素和原金丝桃素分别为萘并二蒽酮、苯并二蒽酮类化合物，其空间结构为类平面，易于形成自聚体，降低其靶向性和治疗效果，导致同位素标记的金丝桃素、原金丝桃素长时间滞留正常器官及网状内皮系统，引起患者长期的正常器官的损伤和骨髓抑制反应，造成患者难以控制的感染。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种全新的抗肿瘤药物，创造性地发现了同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0007]所述的二蒽酮类化合物具有式I所示的结构通式，
[0008]其中:
[0009]更为优选地，本发明进一步公开了所述二蒽酮类化合物优选为番泻苷A及其苷元、番泻苷B及其苷元、番泻苷C及其苷元、番泻苷D及其苷元、番泻苷E及其苷元、掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C中的任意一种或者几种；
[0010]同时，本发明还进一步公开了优选的同位素标记方式为32P、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、90Y^105Rh,111Ag^117Sn,149Pm,153Sm,166Ho,177Lu,1311,186Re,188Re,211Bi,212Bi,213Bi,214Bi,211At 标记。
[0011]二蒽酮类化合物为两分子蒽酮脱去I分子氢后，通过Cltl-Cltl’单键偶联而成，具有高度立体的化学结构，完全不同于萘并二蒽酮、苯并二蒽酮类化合物的类平面结构，在作为肿瘤靶向载体的应用中具有萘并二蒽酮、苯并二蒽酮类化合物不能实现的高选择性、高靶向性以及高血浆清除率。通过放射性同位素标记后，可以在病变处选择性聚集，具有显著的肿瘤治疗效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1为实施例5中番泻苷A、番泻苷元A与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图；
[0013]图2为实施例5中番泻苷B、番泻苷元B与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图；
[0014]图3为实施例5中番泻苷C、番泻苷元C与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图；
[0015]图4为实施例5中番泻苷D、番泻苷元D与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图；
[0016]图5为实施例5中番泻苷E、番泻苷元E与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图；
[0017]图6为实施例5中掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C与对照组、金丝桃素及原金丝桃素对肿瘤治疗效果的对比图。
【具体实施方式】
[0018]本发明实施例部分所使用的材料，除非特别说明，其他均为市售产品。
[0019]实施例组I样品的配制
[0020]实施例1-1131I标记的金丝桃素的制备
[0021]称取1.0mg粉末状的金丝桃素，溶于2.0ml DMSO中，振荡摇匀，得0.5mg / ml金丝桃素DMSO溶液。将浓度为0.5mg/ml的金丝桃素DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应，测量标记率，标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mxI / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而131I标记金丝桃素保留在原点。
[0022]实施例1-21311标记的原金丝桃素的制备
[0023]称取1.0mg粉末状的原金丝桃素，溶于2.0ml DMSO中，振荡摇匀，得0.5mg/ml原金丝桃素DMSO溶液。将浓度为0.5mg / ml的原金丝桃素DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 u g的涂管中，加入100 U I的200 u Ci Na131I溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记原金丝桃素保留在原点。
[0024]实施例l-3mI标记的番泻苷A的制备
[0025]称取2.0mg粉末状的番泻苷A，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得2.0mg/ml番泻苷ADMSO溶液。将浓度为2.0mg/ml的番泻苷A DMSO溶液400 加入到制备好1dogen含量为40 ii g的涂管中，加入100 u I的200 u CINa131I溶液，振荡摇匀水浴锅中45°C加热，反应90min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记番}与昔A保留在原点。
[0026]实施例1-41311标记的番泻苷元A的制备
[0027]称取2.0mg粉末状的番泻苷元A，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得2.0mg/ml番泻苷元A DMSO溶液。将浓度为2.0mg/ml的番泻苷元A DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40ii g的涂管中，加入100 U I的200 y Cl Na131I溶液，振荡摇匀水浴锅中45°C加热,反应90min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。
[0028]标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，
0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而mI标记番泻苷元A保留在原点。
[0029]实施例1-51311标记的番泻苷B的制备
[0030]称取1.2mg粉末状的番泻苷B，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.2mg/ml番泻苷B DMSO溶液。将浓度为1.2mg / ml的番泻苷B DMSO溶液400 加入到制备好1dogen含量为40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应，测量标记率，标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而mI标记番泻苷B保留在原点。
[0031]实施例1-61311标记的番泻苷元B的制备
[0032]称取1.0mg粉末状的番泻苷元B，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.0mg / ml番泻苷元B DMSO溶液。将浓度为1.0mg/ml的番泻苷元B DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记番湾苷元B保留在原点。
[0033]实施例1-71311标记的番泻苷C的制备
[0034]称取1.1mg粉末状的番泻苷C，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.lmg/ml番泻苷C DMSO溶液。将浓度为1.1mg / ml的番泻苷C DMSO溶液400 yl加入到制备好1dogen含量为40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应，测量标记率，标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法 测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而mI标记番泻苷C保留在原点。
[0035]实施例1-S131I标记的番泻苷元C的制备[0036]称取1.0mg粉末状的番泻苷元C，溶于2.0ml DMSO中，振荡摇匀，得0.5mg / ml番泻苷元C DMSO溶液。将浓度为0.5mg/ml的番泻苷元C DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记番^与昔兀C保留在原点。
[0037]实施例1-91311标记的番泻苷D的制备
[0038]称取1.4mg粉末状的番泻苷D，溶于2.0ml DMSO中，振荡摇匀，得0.7mg / ml番泻苷D DMSO溶液。将浓度为0.7mg/ml的番泻苷D DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 u g的涂管中，加入IOOu I的200 u GiNa131I溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应，测量标记率，标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / LHCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而mI标记番泻苷D保留在原点。
[0039]实施例1-1O131I标记的番泻苷元D的制备
[0040]称 取1.1mg粉末状的番泻苷元D，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.lmg/ml番泻苷元D DMSO溶液。将浓度为1.lmg/ml的番泻苷元D DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记番湾苷元D保留在原点。
[0041]实施例1-1l131I标记的番泻苷E的制备
[0042]称取1.2mg粉末状的番泻苷E，溶于2.0ml DMSO中，振荡摇匀，得0.6mg/ml番泻苷E DMSO溶液。将浓度为0.6mg/ml的番泻苷E DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应，测量标记率，标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而mI标记番泻苷E保留在原点。
[0043]实施例1-121311标记的番泻苷元E的制备
[0044]称取1.0mg粉末状的番泻苷元E，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.0mg/ml番泻苷元E DMSO溶液。将浓度为1.0mg/ml的番泻苷元E DMSO溶液400 U I加入到制备好1dogen含量为40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的mI分布在在溶剂前沿，而131I标记番湾苷元E保留在原点。[0045]实施例l-13131I标记的掌叶大黄二蒽酮A的制备
[0046]称取1.0mg粉末状的掌叶大黄二蒽酮A，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.0mg/ml掌叶大黄二蒽酮A DMSO溶液。将浓度为1.0mg/ml的掌叶大黄二蒽酮A DMSO溶液400iμ加入到制备好1dogen含量为40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振荡摇匀，20-25°C反应60min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，
0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而131I标记掌叶大黄二蒽酮A保留在原点。
[0047]实施例1-14131i标记的掌叶大黄二蒽酮B的制备
[0048]称取1.0mg粉末状的掌叶大黄二蒽酮B，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.0mg/ml掌叶大黄二蒽酮B DMSO溶液。将浓度为1.0mg/ml的掌叶大黄二蒽酮B DMSO溶液400iμ加入到制备好1dogen含量为40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振荡摇匀，20_25°C反应60min左右，将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，
0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而131I标记掌叶大黄二蒽酮B保留在原点。
[0049]实施例1-151311标记的掌叶大黄二蒽酮C的制备
[0050]称取1.5mg粉末状的掌叶大黄二蒽酮C，溶于1.0ml DMSO中，振荡摇匀，得1.5mg/m1掌叶大黄二蒽酮C DMSO溶液。将浓度为1.5mg/ml的掌叶大黄二蒽酮C DMSO溶液400加入到制备好1dogen含量为40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振荡摇匀水浴锅中45°C加热，反应90min左右,将反应液取出终止反应,测量标记率,标记率大于90%,表明标记成功。标记率测量方法:反应液用纸层析法测定标记率，Whatman滤纸作为载体，0.1mol / L HCl作为流动相展开。标记物采用纸层析法测量标记率，游离的131I分布在在溶剂前沿，而131I标记掌叶大黄二蒽酮C保留在原点。
[0051 ] 以上标记过程中，番泻苷A及其苷元、番泻苷B及其苷元、番泻苷C及其苷元、番泻苷D及其苷元、番泻苷E及其苷元、掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C均为现有化合物，可以通过直接购买或者按照现有制备公开文献中的方法获取。
[0052]实施例2溶解度实验
[0053]固-液平衡装置测定金丝桃素在混合溶剂(其中DMS0、PEG400、丙二醇、生理盐水的比例为1:1:1:2)中的溶解度
[0054]在平衡管中放入过量的金丝桃素，然后加入一定量的混合溶剂(其中DMSO、PEG400、丙二醇、生理盐水的比例为1:1:1:2)，橡皮塞封闭，先超声一段时间后再放入固液平衡装置中，磁子搅拌。水浴恒温(25°C )，精度0.01K。搅拌60小时后，避光静置48小时。
[0055]取样分析:从玻璃管中取上层清液放入5ml离心管中，以4000r / min的转速离心15min，取上清液进行HPLC分析，然后根据标准曲线计算溶解度，溶解度为1.31mg / ml。
[0056]色谱条件:2695泵，2475突光检测器,色谱柱:C18 (250mmX4.6mm, 5 μ m),流动相:甲醇:0.06mmol / L磷酸缓冲液,柱温:30°C,流速:1.0ml / min。
[0057]按照实施例2中的方式，分别对原金丝桃素、番泻苷A、番泻苷元A、番泻苷B、番泻苷元B、番泻苷C、番泻苷元C、番泻苷D、番泻苷元D、番泻苷E、番泻苷元E、掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C进行溶解度测定实验。实验结果见表1。
[0058]表1金丝桃素、原金丝桃素、番泻苷A、番泻苷元A番泻苷B、番泻苷元B、番泻苷C、番泻苷元C、番泻苷D、番泻苷元D、番泻苷E、番泻苷元E、掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C的溶解度
[0059]
【权利要求】
1.同位素标记的二蒽酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述二蒽酮类化合物为通式I所示的化合物，
3.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述二蒽酮类化合物为番泻苷A及其苷元、番泻苷B及其苷元、番泻苷C及其苷元、番泻苷D及其苷元、番泻苷E及其苷元、掌叶大黄二蒽酮A、掌叶大黄二蒽酮B、掌叶大黄二蒽酮C中的任意一种或者几种。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征是:所述同位素标记为32P、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、90Y^105Rh,111Ag^117Sn,149Pm,153Sm,166Ho,177Lu,1311,186Re,188Re,211Bi,212Bi,213Bi,214Bi,211At 标记。`
【文档编号】A61P35/00GK103585647SQ201310606546
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月27日 优先权日:2013年11月27日
【发明者】张健, 倪以成, 孙自平, 高萌, 蒋翠花, 李玥, 江骁, 姚楠, 黄德健 申请人:江苏省中医药研究院