包含抗cd79b抗体的免疫偶联物的制作方法
【专利摘要】本发明提供包含与奈莫柔比星衍生物共价连接的抗CD79b抗体的免疫偶联物以及使用它们的方法。
【专利说明】包含抗CD79B抗体的免疫偶联物 发明领域
[0001] 本发明涉及包含抗CD79b抗体的免疫偶联物和使用它们的方法。
【背景技术】
[0002] CD79是由含有CD79a(Ig，mb-l)和CD79b(Ig，B29)的共价异二聚体组成的B细胞 受体的信号传导组分。CD79a和CD79b各自含有细胞外免疫球蛋白（Ig)结构域、跨膜结构 域和细胞内信号传导结构域，后者为基于免疫受体酪氨酸的活化基序（ITAM)结构域。CD79 在B细胞上并且例如在非霍奇金氏（Non-Hodgkin's)淋巴瘤细胞（NHL)上表达（Cabezudo 等，Haematologica, 84 :413-418(1999) ;D，Arena等，Am.J.Hematol. ,64 :275-281(2000); Olejniczak等，Immunol.Invest.，35 :93-114 (2006))。CD79 的表面表达都需要CD79a和 CD79b以及slg(Matsuuchi等Curr.Opin.Immunol.，13 (3) :270-7))。CD79b在NHL上的平均 表面表达与在正常B细胞上的相似，但具有更大范围（Matsuuchi等，Curr.Opin.Immunol., 13(3) :270-7(2001))。
[0003] 本领域需要用于诊断和治疗CD79b相关的病状（诸如癌症）的靶向CD79b的药剂。 本发明满足该需要并提供其他益处。
[0004] 发明概述
[0005] 本发明提供抗CD79b抗体和免疫偶联物以及使用它们的方法。
[0006] 在一些实施方案中，提供包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫 偶联物。在一些实施方案中，细胞毒性剂为奈莫柔比星（nemorubicin)衍生物。在一些实 施方案中，结合⑶79b的抗体包含（i)含有SEQIDN0:21的氨基酸序列的HVR-H1，（ii) 含有SEQIDNO: 22的氨基酸序列的HVR-H2,和（iii)含有SEQIDNO: 23的氨基酸序列的 HVR-H3。在一些实施方案中，抗体还包含（i)含有选自SEQIDNO: 18、24和35的氨基酸序 列的HVR-Ll，（ii)含有SEQIDNO:25的氨基酸序列的HVR-L2,和（iii)含有SEQIDNO: 26的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗体包含含有SEQIDNO: 24的氨基酸序 列的HVR-Ll。
[0007] 在一些实施方案中，抗体包含：a)与SEQIDNO: 11的氨基酸序列具有至少95% 序列同一性的VH序列；或b)与SEQIDNO:12的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的 VL序列；或c)如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列。在一些实施方案中，抗体包含具 有选自SEQIDNO:7、9、11和13的氨基酸序列的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具 有SEQIDNO: 11的氨基酸序列的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具有选自SEQID NO:8、10、12和14的氨基酸序列的VL序列。在一些实施方案中，抗体包含具有SEQIDNO: 12的氨基酸序列的VL序列。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
[0008] 在一些实施方案中，提供包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫 偶联物，其中所述抗体包含（a)具有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH序列和具有SEQID NO:12的氨基酸序列的VL序列，并且其中所述细胞毒性剂为奈莫柔比星衍生物。
[0009] 在一些实施方案中，免疫偶联物具有式Ab-(L-D)p，其中：(a)Ab为抗体；(b)L为连 接子；（c)D为细胞毒性剂；并且（d)p的范围为1-8。
[0010] 在一些实施方案中，D为奈莫柔比星衍生物。在一些此类实施方案中，D具有选自 以下的结构：
[0011]
【权利要求】
1. 一种包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫偶联物，其中结合 ⑶79b的所述抗体包含（i)含有SEQIDNO:21的所述氨基酸序列的HVR-H1，（ii)含有SEQ IDNO:22的所述氨基酸序列的HVR-H2,和（iii)含有SEQIDNO:23的所述氨基酸序列的 HVR-H3 ;并且其中所述细胞毒性剂为奈莫柔比星衍生物。
2. 根据权利要求1所述的免疫偶联物，其中所述抗体还包含（i)含有选自SEQIDNO: 18、24和35的氨基酸序列的HVR-L1，（ii)含有SEQIDN0:25的所述氨基酸序列的HVR-L2， 和（iii)含有SEQIDNO:26的所述氨基酸序列的HVR-L3。
3. 根据权利要求2所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含含有SEQIDNO:24的所述 氨基酸序列的HVR-L1。
4. 根据权利要求1至3中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含： a) 与SEQIDNO: 11的所述氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；或 b) 与SEQIDNO: 12的所述氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VL序列；或 c) 如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列。
5. 根据权利要求1至4中任一项所述的免疫偶联物，其包含具有选自SEQIDNO:7、9、 11和13的氨基酸序列的VH序列。
6. 根据权利要求5所述的免疫偶联物，其包含具有SEQIDNO:11的所述氨基酸序列 的VH序列。
7. 根据权利要求1至6中任一项所述的免疫偶联物，其包含具有选自SEQIDNO:8、 10、12和14的氨基酸序列的VL序列。
8. 根据权利要求7所述的免疫偶联物，其包含具有SEQIDNO: 12的所述氨基酸序列 的VL序列。
9. 一种包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫偶联物，其中所述抗体 包含（a)具有SEQIDN0 :11的所述氨基酸序列的VH序列和具有SEQIDNO:12的所述氨基 酸序列的VL序列，并且其中所述细胞毒性剂为奈莫柔比星衍生物。
10. 根据权利要求1至9中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
11. 一种根据权利要求1至10中任一项所述的免疫偶联物，其中所述免疫偶联物具有 所述式Ab-(L-D)p，其中： (a) Ab为所述抗体； (b)L为连接子； (c)D为所述细胞毒性剂；并且 (d)p的范围为1-8。
12. 根据权利要求11所述的免疫偶联物，其中D为奈莫柔比星衍生物。
13. 根据权利要求12所述的免疫偶联物，其中D具有选自以下的结构：
14. 根据权利要求11至13中任一项所述的免疫偶联物，其中所述连接子可被蛋白酶裂 解。
15. 根据权利要求14所述的免疫偶联物，其中所述连接子包含val-cit二肽或 Phe-homoLys二月太。
16. 根据权利要求11至13中任一项所述的免疫偶联物，其中所述连接子为酸不稳定 的。
17. 根据权利要求16所述的免疫偶联物，其中所述连接子包含腙。
18. 根据权利要求13所述的免疫偶联物，其具有选自以下的式：
o
19. 根据权利要求11至18中任一项所述的免疫偶联物，其中p的范围为1-3。
20. -种免疫偶联物，其具有选自以下的式：
f- 其中Ab为包含以下的抗体⑴包含SEQIDNO:21的所述氨基酸序列的HVR-H1，（ii) 包含SEQIDN0:22的所述氨基酸序列的HVR-H2，（iii)包含SEQIDN0:23的所述氨基酸序 列的HVR-H3,（iv)包含SEQIDNO:24的所述氨基酸序列的HVR-L1，（v)包含SEQIDNO: 25的所述氨基酸序列的HVR-L2,和（vi)包含SEQIDNO:26的所述氨基酸序列的HVR-L3 ; 并且其中P的范围为1至3。
21. 根据权利要求20所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含SEQIDNO:11的VH序列 和SEQIDNO:12 的VL序列。
22. 根据权利要求21所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含SEQIDNO:39的重链和 SEQIDNO:37 的轻链。
23. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为单克隆抗体。
24. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为人抗体、人源化抗 体或嵌合抗体。
25. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为结合CD79b的抗 体片段。
26. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体结合人CD79b。
27. 根据权利要求26所述的免疫偶联物，其中人⑶79b具有SEQIDNO:40或SEQID NO:41的所述序列。
28. -种药物制剂，其包含前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物和药学上可接受 的载体。
29. 根据权利要求28所述的药物制剂，其还包含另外的治疗剂。
30. -种治疗患有CD79b阳性癌症的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用有效 量的根据权利要求1至27中任一项所述的免疫偶联物。
31. 根据权利要求30所述的方法，其中所述CD79b阳性癌症选自淋巴瘤、非霍奇金氏淋 巴瘤（NHL)、侵袭性NHL、复发性侵袭性NHL、复发性无痛NHL、顽固性NHL、顽固性无痛NHL、 慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤、白血病、多毛细胞白血病（HCL)、急性 淋巴细胞性白血病（ALL)、伯基特氏淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。
32. 根据权利要求31所述的方法，其还包括向所述个体施用另外的治疗剂。
33. 根据权利要求32所述的方法，其中所述另外的治疗剂包含结合CD22的抗体。
34. 根据权利要求33所述的方法，其中所述另外的治疗剂为包含结合与细胞毒性剂共 价连接的CD22的抗体的免疫偶联物。
35. -种抑制CD79b阳性细胞增殖的方法，所述方法包括在允许所述免疫偶联物与所 述细胞的表面上的CD79b结合的条件下使所述细胞暴露于根据权利要求1至27中任一项 所述的免疫偶联物，从而抑制所述细胞的增殖。
36. 根据权利要求35所述的方法，其中所述细胞为肿瘤B细胞。
37. 根据权利要求36所述的方法，其中所述细胞为淋巴瘤细胞。
38. -种治疗患有⑶79b阳性癌症的个体的方法，其中所述⑶22阳性癌症对第一治疗 剂有抗性，所述方法包括向所述个体施用有效量的根据权利要求1至27中任一项所述的免 疫偶联物。
39. 根据权利要求38所述的方法，其中所述CD79b阳性癌症选自淋巴瘤、非霍奇金氏淋 巴瘤（NHL)、侵袭性NHL、复发性侵袭性NHL、复发性无痛NHL、顽固性NHL、顽固性无痛NHL、 慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤、白血病、多毛细胞白血病（HCL)、急性 淋巴细胞性白血病（ALL)、伯基特氏淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。
40. 根据权利要求38或权利要求39所述的方法，其中所述第一治疗剂包含结合抗原而 非CD79b的第一抗体。
41. 根据权利要求40所述的方法，其中所述第一治疗剂是包含结合抗原而非CD79b和 第一细胞毒性剂的第一抗体的第一免疫偶联物。
42. 根据权利要求40或权利要求41所述的方法，其中所述第一抗体结合CD22。
43. 根据权利要求38或权利要求39所述的方法，其中所述第一治疗剂包含结合CD79b 的第一抗体。
44. 根据权利要求43所述的方法，其中所述第一治疗剂是包含结合CD79b和第一细胞 毒性剂的第一抗体的第一免疫偶联物。
45. 根据权利要求41至44中任一项所述的方法，其中所述第一细胞毒性剂和根据权利 要求1至27中任一项所述的免疫偶联物的细胞毒性剂是不同的。
46. 根据权利要求45所述的方法，其中所述第一细胞毒性剂为MMAE。
47. 根据权利要求46所述的方法，其中所述⑶79b阳性癌症表达P-糖蛋白（P-gp)。
48. -种治疗患有⑶79b阳性癌症的个体的方法，其中所述⑶22阳性癌症表达P-gp， 所述方法包括向所述个体施用有效量的根据权利要求1至27中任一项所述的免疫偶联物。
49. 根据权利要求48所述的方法，其中所述CD79b阳性癌症选自淋巴瘤、非霍奇金氏淋 巴瘤（NHL)、侵袭性NHL、复发性侵袭性NHL、复发性无痛NHL、顽固性NHL、顽固性无痛NHL、 慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤、白血病、多毛细胞白血病（HCL)、急性 淋巴细胞性白血病（ALL)、伯基特氏淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。
【文档编号】A61K47/48GK104411337SQ201380035877
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2013年7月8日 优先权日:2012年7月9日
【发明者】P·波拉基斯, A·波尔森, S·D·斯潘塞, S-F·于, 郑冰 申请人:基因泰克公司