一种绞股蓝皂苷长循环脂质体制剂及其制备方法
【专利摘要】一种绞股蓝皂苷长循环脂质体制剂及其制备方法。本发明公开了提供一种利用聚乙二醇对β-谷甾醇进行修饰后制备绞股蓝皂苷长循环脂质体的方法，与普通磷脂聚乙二醇修饰的长循环脂质体相比，材料合成成本大幅度降低，分离变得更为容易，收率大大提高，大幅降低了长循环脂质体的成本。该新型长循环脂质体原料易得，来源丰富，价廉，稳定性好，能显著延长绞股蓝皂苷在体内的滞留时间，使绞股蓝皂苷被动靶向于肿瘤细胞，提高肿瘤治疗的效果，降血脂作用优的特点。
【专利说明】一种绞股蓝皂苷长循环脂质体制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物制剂领域，尤其涉及一种生产绞股蓝皂苷长循环脂质体的方法，更具体地说，本发明涉及绞股蓝皂苷长循环脂质体和含有绞股蓝皂苷长循环脂质体的药物制剂。
【背景技术】
[0002]脂质体是靶向给药系统的一种新剂型，它是由脂质双分子层构成的内部为水相的封闭囊泡。脂质体作为一种智能给药载体，具有靶向性，生物相容性，提高药物稳定性以及降低毒副作用等显著优点，因而得到人们越来越多的关注。普通脂质体虽然能够改善药物的疗效，但是进入体内后很快被体内网状内皮系统吞噬，主要靶向在肝、脾、骨髓等网状内皮系统器官中，药物在体内滞留时间短，且在体内易受蛋白、酶等的作用而发生渗漏，影响疗效，使毒性增大。
[0003]近年来，长循环脂质体成为国内外的研究热点。长循环脂质体是靶向制剂的一种，它具有长效、降低毒性及稳定包封药物等优点，用长循环脂质体包封后提高了药物的靶向性，降低了毒性。长循环脂质体是一种表面修饰了天然或合成亲水性聚合物的新型脂质体，这些聚合物形成的立体柔性亲水表面，增加了脂质体的亲水性和空间位阻，防止生物分子、细胞与脂质体相互作用，使脂质体不易被血液中的调理素识别，从而可以降低体内网状内皮系统对脂质体的吞噬，增加其在体内环境中的稳定性，使其具有更长的体内循环时间，更高的血药浓度，因此可以更好的发挥疗效，降低毒性。长循环脂质体中，研究最多的就是聚乙二醇(PEG)修饰的脂质体(Advanced Drug Delivery Reviews,1997，24，235-242)，表面修饰聚乙二醇的脂质体在静脉注射后具有“隐形”的特点，即可逃避血浆中的调理素的调理，从而减少巨噬细胞对药物的吞噬，阻碍血液蛋白成分及磷脂的结合，延长药物在体内的循环时间(Clinical and Experimental Pharmacology andPhysiology, 2006, 33，557-562)。由于聚乙二醇修饰的一般为磷脂，聚乙二醇与磷脂分子量均较大，磷脂价格昂贵，且分子链上仅包含少量的活性基团，在合成的过程中，反应活性很低，且在与副产物分离时，很容易吸附在树脂柱上，分离也很困难，造成磷脂聚乙二醇修饰的长循环脂质体在实际应用中成本过高，得不到广泛应用。
[0004]绞股蓝又名七叶胆、五叶参，主要有效成分为多糖类、黄酮类、皂苷类及微量元素类，其功效主要是促进人体脂肪类物质代谢、营养人体细胞，同时具有不错的解毒消炎作用，广泛应用于高血脂、脂肪肝、肥胖、便秘、失眠、乙肝、慢性呼吸道炎症(咽喉炎、肠胃炎等)的治疗与保健。皂苷是其中一种有效成分。绞股蓝皂苷之所以“神奇”是因为其皂苷类成分(84种)超过人参所含的数倍，其对治疗和预防高血压等心血管疾病、糖尿病、便秘、痔疮、哮喘、偏头痛、痤疮、色斑等症状有显著功效，并有较为明显的镇静、催眠、消除疲劳、增进食欲、抗衰老的作用，对肿瘤、肝炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡、胃下垂、口腔炎、冠心病、动脉硬化、胆结石、肢体麻木、皮肤粗糙、男性不育、性功能衰退、肥胖及白发秃顶等具有较佳疗效。绞股蓝皂苷还可能成为21世纪人类征服心血管疾病、糖尿病、紧张症、癌症和艾滋病的主要生理活性物质。
[0005]绞股蓝皂苷长循环脂质体首次以聚乙二醇修饰的β -谷留醇为膜材，制备绞股蓝皂苷长循环脂质体，使药物以最小的损失到达作用部位，可以提高绞股蓝皂苷的药效，减少用量，是一种新型的剂型，是技术创新的结果，具有良好的市场前景。因为它具有靶向性，能准确地达到作用部位，这种给药方法是其他方法所不能比拟的。本实验采用逆向蒸发法，薄膜分散法，乙醇注入法制备了绞股蓝皂苷长循环脂质体，并考察了其包封率，筛选出一种制备绞股蓝皂苷长循环脂质体的最优方法，使其利用效率达到最高。绞股蓝皂苷长循环脂质体能以最少的用量，达到最好的治疗效果，可能作为未来一种给药的主要发展方向。
[0006]目前尚未见有关绞股蓝皂苷长循环脂质体的相关报道。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于提供一种利用对β_谷留醇进行聚乙二醇修饰生产长循环绞股蓝皂苷脂质体的处方和方法，该方法工艺简单。出于该方法中介绍方法是对小分子β_谷留醇进行聚乙二醇修饰，避免了对大分子量磷脂的修饰，合成过程大为简化。且在分离过程中，本方法中聚乙二醇修饰的β-谷留醇也比聚乙二醇修饰的磷脂对色谱柱的吸附要少，从而分离变得更为容易，收率大大提高，与普通磷脂聚乙二醇修饰的长循环脂质体相t匕，成本大幅度降低，不仅如此，与普通磷脂聚乙二醇修饰的长循环脂质体相比，该新型长循环脂质体还能显著延长绞股蓝皂苷在体内的滞留时间，使绞股蓝皂苷更有效地被动靶向于肿瘤细胞，提高抑瘤率，减少绞股蓝皂苷的用药量，提高治疗效率。稳定性实验表明该新型长循环脂质体与普通长循环脂质体相比稳定性大大增加。降血脂实验也表明，该新型长循环脂质体的降血脂效果也显著优于普通长循环脂质体与单一的β-谷留醇组。
[0008]本发明中提供一种如式I所示的聚乙二醇化β -谷留醇的制备方法，所述的方法不仅可以有效进行，而且可以得到产率较高的、易于分离的、价格便宜的式I化合物。
[0009]
【权利要求】
1.一种聚乙二醇修饰β-谷留醇为膜材的绞股蓝皂苷长循环脂质体，其特征在于，材料中含有如式I所示的化合物，该化合物的制备方法包括步骤: (1)将β-谷甾醇、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶混合于二氯甲烷中，在30-60°C反应得到如式II所示的化合物； (2)将式II化合物、聚乙二醇、4-二甲氨基吡唆、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐混合于二氯甲烷中，在30-60°C反应得到如式I所示的化合物； 步骤⑴的反应中β_谷甾醇、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1:0.8—10:0.8-5 ； 步骤(2)中式II化合物、聚乙二醇、4-二甲氨基吡啶、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二
2.如权利要求1所述的长循环脂质体，其特征在于它主要是由绞股蓝皂苷、磷脂材料、式I化合物所组成。
3.如权利要求1、2所述的长循环脂质体，其特征在于，所述磷脂材料为:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、甘油磷脂酸、二磷脂酰甘油、鞘磷脂中的一种或几种的混合物。
4.如权利要求1、2所述的脂质体，其特征在于，所述脂质体的组成还包括甘露醇、葡萄糖、吐温-80、维生素E或聚乙二醇中的一种或几种。
5.如权利要求1、2所述的脂质体，其特征在于按重量百分比该脂质体含如下组分:绞股蓝皂苷2 %~45 %，磷脂材料40~85 %，式I化合物占制剂重量的10~40 %。
6.权利要求1-5任一项所述脂质体的制备方法，其特征在于它包括如下步骤: (1)将绞股蓝皂苷溶解于pH为6.8~8.0磷酸冲液中，制成质量浓度为0.1~20mg /mL绞股蓝皂苷缓冲液； (2)当固体单位为毫克时，液体单位以毫升计，以此类推。磷脂材料:式I化合物:乙醚:绞股蓝皂苷缓冲液溶液的比例按100~300份:15~200份:2~5份:5~30份选取，备用； (3)绞股蓝皂苷脂质体的制备:将磷脂材料、式I化合物和乙醚混合，然后旋转蒸发使其成均匀类脂薄膜覆盖在梨形瓶内底部，向瓶中加入绞股蓝皂苷缓冲液溶液，加入玻璃珠，在30~60°C下旋转振荡15~60min后，放置0.5~2h充分水合即得。
7.权利要求1-5任一项所述脂质体的制备方法，其特征在于它包括如下步骤: (1)油相的制备:当固体单位为毫克时，液体单位以毫升计，以此类推。绞股蓝皂苷:磷脂材料:式I化合物:乙醇的比例按10~30份:40~300份:10~100份:5~50份的比例选取材料，混合均匀，制备油相； (2)水相的制备:当固体单位为毫克时，液体单位以毫升计，以此类推。水相为磷酸盐缓冲液5~50份，缓冲液的pH为6.8~8.0 ; (3)脂质体的制备:在恒温搅拌状态下，将油相用针头匀速注入到温度为35~60°C的水相中，恒温搅拌I~4h除乙醇，即得。
8.权利要求1一5任一项所述脂质体的制备方法，其特征在于它包括如下步骤: (1)当固体单位为毫克时，液体单位以毫升计，以此类推。磷脂材料:式I化合物:二氯甲烷的比例为40~300份:10~200份:50~500份制备油相，将油相置于圆底烧瓶中，旋转蒸去二氯甲烷； (2)当固体单位为毫克时，液体单位以毫升计，以此类推。10~200份绞股蓝皂苷溶解于10~500份磷酸盐缓冲液中，制成水相； (3)将水相加入油相中，冰浴下，探头超声5~30min，形成均匀的乳剂； (4)旋蒸除去 有机相，形成胶态后加入磷酸盐缓冲液10~150份，继续减压蒸发0.5~2h,探头超声3~20min，即得。
9.如权利要求1所述的脂质体，其特征在于其可以制成冻干针剂、注射剂、透皮制剂、气雾剂、口服液、溶液剂、眼用制剂、片剂或胶囊剂。
【文档编号】A61P3/06GK103816207SQ201410066575
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2014年2月25日 优先权日:2014年2月25日
【发明者】喻樊 申请人:盐城师范学院