本发明涉及生物医药
技术领域：
，具体涉及一种环二核苷酸cGAMP在防治肿瘤的联合用药物治疗新用途。
背景技术：
：恶性肿瘤是严重威胁人类健康的常见多发病，已成为人类死亡的一个重要原因。目前，肿瘤的主要治疗手段包括药物治疗、外科手术治疗和放射治疗。尽管以分子靶向药物为代表的新型抗肿瘤药物不断地涌现出来，在相当一段时期内，传统的细胞毒抗肿瘤药依然在肿瘤的药物治疗中占据主导地位。传统的细胞毒抗肿瘤药主要通过影响肿瘤细胞的核酸和蛋白质结构与功能，直接抑制肿瘤细胞增殖或诱导肿瘤细胞凋亡。尽管人们在肿瘤的药物治疗方面做出很多努力，研究新的化疗药物，改进化疗方案，但是治疗效果仍不理想。传统的细胞毒抗肿瘤药对肿瘤细胞和正常细胞缺乏理想的选择作用，在杀伤恶性肿瘤细胞的同时，对人体的正常组织也有损害，从而导致严重的全身不良反应，其中比较常见的不良反应为骨髓抑制、消化道反应和脱发。所以很多患者无法坚持，甚至放弃化疗，临床上难以期望通过增加药物剂量来获得理想的效果。这些因素严重影响了化疗疗效。最近有研究表明，环二核苷酸合成酶（cGAS）在结合DNA后的活化条件下催化cGAMP的合成，进一步通过STING介导IRF-3的活化，进而促进IFN-β的合成。外源性给予重组cGAS在DNA结合条件下促进环二核苷酸cGAMP的生成，发挥抗病毒、增强免疫的作用。也有专利报道，体外合成的环二核苷酸cGAMP具有抗肿瘤的应用。目前，尚没有文献报道将环二核苷酸cGAMP和传统的细胞毒抗肿瘤药联合使用治疗肿瘤的相关报道。技术实现要素：本发明的技术方案是提供了环二核苷酸cGAMP制备抗肿瘤的联合用药物中的用途。本发明的另一技术方案是提供了抗肿瘤联合用药物组合。其中，所述的药物组合是与化疗药物组合，包括：cGAMP+氟尿嘧啶，cGAMP+环磷酰胺，cGAMP+甲氨蝶呤，cGAMP+顺铂，cGAMP+卡铂，cGAMP+紫杉醇，cGAMP+长春新碱，cGAMP+丝裂霉素，cGAMP+吉西他滨，cGAMP+放线菌素。所述的抗肿瘤的联合用药物中的用途是指医药、食品或试剂等
技术领域：
中，用于预防、保护、治疗肿瘤及其直接相关疾病的产品，是包括药物、试剂、食品或保健食品等类型中的一种或多种。本发明经实验研究表明，cGAMP与传统的细胞毒抗肿瘤药氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素合用后，可以增强抗肿瘤作用，降低毒性。本发明中，所述cGAMP与化疗药物组合包括但不限于氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素。本发明中，所述肿瘤包括但不限于结肠癌。本发明还涉及利用cGAMP与抗肿瘤药合用所制备的抗肿瘤药。本发明中cGAMP与抗肿瘤药合用所制备的抗肿瘤药可以按常规药剂学制备成各种剂型，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂等。本发明中cGAMP与抗肿瘤药合用所制备的抗肿瘤药可以采取口服或注射（包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种）等中的一种或多种给药途径进行肿瘤相关疾病的预防、保护或治疗。本发明提供的cGAMP与抗肿瘤药合用所制备的抗肿瘤药在肿瘤的药物治疗中具有良好的应用前景。一、具体实施方式下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。实施例1：cGAMP的制备cGAMP按文献方法在结合DNA后的活化条件下，由环化二核苷酸合成酶（cGAS）催化合成，纯度在98％以上。（PingweiLi，etal.,Immunity,2013,39(6),1019-1031.）实施例2：cGAMP与化疗药物联合用于抗肿瘤的动物实验采用荷瘤鼠模型检测cGAMP与抗肿瘤药联合对动物皮下移植瘤生长的抑制作用及对动物的毒性作用。1、动物健康雄性昆明白杂交Babl/c的F1代小鼠，体重20～25g，每组10只/笼群养，共分10组。购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，质量合格证号（动物合格证号：SCXK（沪）2007-0005）。饲养于清洁级动物房。2、药物表1抗肿瘤化疗药物药物厂家氟尿嘧啶上海旭东海普药业环磷酰胺江苏盛迪医药有限公司甲氨蝶呤齐鲁制药有限公司顺铂齐鲁制药有限公司卡铂齐鲁制药有限公司紫杉醇上海新亚药业有限公司长春新碱广州白云山明兴制药有限公司丝裂霉素上海新亚药业有限公司吉西他滨南京正大天晴制药有限公司放线菌素D上海新亚药业有限公司将实验大鼠进行分组：正常组：不接种肿瘤，给予与药物实验组等量的生理盐水阴性对照组：接种肿瘤，给予与药物实验组等量的生理盐水。cGAMP组：接种肿瘤，给予cGAMP5mg/kg药物1组：接种肿瘤，给予氟尿嘧啶10mg/kg。药物2组：接种肿瘤，给予氟尿嘧啶10mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物5组：接种肿瘤，给予环磷酰胺50mg/kg。药物6组：给接种肿瘤，给予环磷酰胺50mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物7组：接种肿瘤，给予甲氨蝶呤50mg/kg。药物8组：接种肿瘤，给予甲氨蝶呤50mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物9组：接种肿瘤，给予顺铂1mg/kg。药物10组：接种肿瘤，给予顺铂1mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物11组：接种肿瘤，给予卡铂20mg/kg。药物12组：接种肿瘤，给予卡铂20mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物13组：接种肿瘤，给予紫杉醇5mg/kg。药物14组：接种肿瘤，给予紫杉醇5mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物15组：接种肿瘤，给予长春新碱0.1mg/kg。药物16组：接种肿瘤，给予长春新碱0.1mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物17组：接种肿瘤，给予丝裂霉素1mg/kg。药物18组：接种肿瘤，给予丝裂霉素1mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物19组：接种肿瘤，给予吉西他滨50mg/kg。药物20组：接种肿瘤，给予吉西他滨50mg/kg+cGAMP5mg/kg。药物21组：接种肿瘤，给予放线菌素D1mg/kg。药物22组：接种肿瘤，给予放线菌素D1mg/kg+cGAMP5mg/kg。3、实验方法小鼠结肠癌细胞株Colon26（购自中国科学院细胞库），细胞培养，传代，在细胞对数期收集细胞，做成浓度为1.0×107的细胞悬液，小鼠右前肢腋下注射0.2ml细胞悬液，10d左右肿瘤长至直径约5mm，致瘤成功，动物随机均分组，每天给药1次，腹腔注射，连续给药14天。14天后，处死小鼠并称瘤体重量，抑瘤率=（阴性对照组平均瘤重-实验组平均瘤重）／阴性对照组平均瘤重×100％。尾静脉抽取小鼠血液，检测各组小鼠血液中的白细胞、红细胞和血小板的数量。4、统计分析数据采用所有的数据均用±s表示，统计学分析采用t检验。5、实验结果（1）药物的抑瘤率结果显示，氟尿嘧啶，磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素与环二核苷酸cGAMP联合用药后与单用氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素相比，疗效明显增强，见表2-1和表2-2。表2-1实验各药物的抑瘤率组别药物N平均抑瘤率（%）阴性对照组生理盐水10/cGAMP组cGAMP1035.4±1.8药物1组氟尿嘧啶1040.7±0.7药物2组cGAMP+氟尿嘧啶1065.0±2.3a药物5组环磷酰胺1041.4±2.0药物6组cGAMP+环磷酰胺1069.0±1.7c药物7组甲氨蝶呤1042.6±0.6药物8组cGAMP+甲氨蝶呤1061.7±1.8d药物9组顺铂1041.2±1.0药物10组cGAMP+顺铂1057.8±1.9eap<0.01，与药物1组比较；bp<0.01，与药物3组比较；cp<0.01，与药物5组比较；dp<0.01，与药物7组比较；ep<0.01，与药物9组比较表2-2实验各药物的抑瘤率组别药物N平均抑瘤率（%）阴性对照组生理盐水10/cGAMP组cGAMP1034.9±1.5药物11组卡铂1041.7±2.0药物12组cGAMP+卡铂1062.0±3.7f药物13组紫杉醇1046.8±2.4药物14组cGAMP+紫杉醇1065.1±3.8g药物15组长春新碱1041.0±1.3药物16组cGAMP+长春新碱1057.6±2.9h药物17组丝裂霉素1043.3±0.8药物18组cGAMP+丝裂霉素1062.9±2.0i药物19组吉西他滨1044.7±1.9药物20组cGAMP+吉西他滨1069.6±2.8j药物21组放线菌素1046.8±1.6药物22组cGAMP+放线菌素1061.6±2.3kfp<0.01，与药物11组比较；gp<0.01，与药物13组比较；hp<0.01，与药物15组比较；ip<0.01，与药物17组比较；jp<0.01，与药物19组比较；kp<0.01，与药物21组比较（2）药物对小鼠血常规指标的影响结果显示，氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素与环二核苷酸cGAMP联合用药后与单用氟尿嘧啶，，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素相比，白细胞数量和血小板数量明显增加，见表2，表3和表4。表3实验各组小鼠白细胞水平（±s）s组别药物N白细胞数量（109/L）阴性对照组生理盐水1065.27±2.41cGAMP组cGAMP1050.04±1.69药物1组氟尿嘧啶103.17±0.09药物2组cGAMP+氟尿嘧啶108.60±0.86a药物5组环磷酰胺102.64±0.10药物6组cGAMP+环磷酰胺109.76±0.32c药物7组甲氨蝶呤102.32±0.08药物8组cGAMP+甲氨蝶呤109.55±0.19d药物9组顺铂103.68±0.24药物10组cGAMP+顺铂1011.31±0.33e药物11组卡铂105.02±0.18药物12组cGAMP+卡铂1014.56±0.74f药物13组紫杉醇105.66±0.37药物14组cGAMP+紫杉醇1015.32±0.90g药物15组长春新碱104.17±0.26药物16组cGAMP+长春新碱1012.34±0.32h药物17组丝裂霉素103.12±0.11药物18组cGAMP+丝裂霉素1011.98±0.40i药物19组吉西他滨103.94±0.17药物20组cGAMP+吉西他滨1014.11±0.35j药物21组放线菌素103.58±0.23药物22组cGAMP+放线菌素1012.56±0.39kap<0.01，与药物1组比较；bp<0.01，与药物3组比较；cp<0.01，与药物5组比较；dp<0.01，与药物7组比较；ep<0.01，与药物9组比较；fp<0.01，与药物11组比较；gp<0.01，与药物13组比较；hp<0.01，与药物15组比较；ip<0.01，与药物17组比较；jp<0.01，与药物19组比较；kp<0.01，与药物21组比较表4实验各组小鼠血小板水平（±s）s组别药物N血小板数量(109/L)阴性对照组生理盐水10629±37cGAMP组cGAMP10580±65药物1组氟尿嘧啶10593±33药物2组cGAMP+氟尿嘧啶10526±40药物5组环磷酰胺10219±25药物6组cGAMP+环磷酰胺10394±44c药物7组甲氨蝶呤10298±16药物8组cGAMP+甲氨蝶呤10375±30d药物9组顺铂10359±27药物10组cGAMP+顺铂10431±36e药物11组卡铂10347±24药物12组cGAMP+卡铂10425±40f药物13组紫杉醇10398±26药物14组cGAMP+紫杉醇10469±47g药物15组长春新碱10312±26药物16组cGAMP+长春新碱10498±30h药物17组丝裂霉素10319±39药物18组cGAMP+丝裂霉素10477±48i药物19组吉西他滨10326±39药物20组cGAMP+吉西他滨10479±43j药物21组放线菌素10202±39药物22组cGAMP+放线菌素10387±40kap<0.01，与药物1组比较；bp<0.01，与药物3组比较；cp<0.01，与药物5组比较；dp<0.01，与药物7组比较；ep<0.01，与药物9组比较；fp<0.01，与药物11组比较；gp<0.01，与药物13组比较；hp<0.01，与药物15组比较；ip<0.01，与药物17组比较；jp<0.01，与药物19组比较；kp<0.01，与药物21组比较上述实验结果表明，氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素与cGAMP联合用药后与单用氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，卡铂，紫杉醇，长春新碱，丝裂霉素，吉西他滨，放线菌素相比，抗肿瘤疗效明显增强，骨髓抑制不良反应明显减弱。因此，环二核苷酸cGAMP可用于防治肿瘤的联合用药，具有增效减毒的作用。当前第1页1 2 3