N‑(2,6‑二(1‑甲基乙基)苯基)‑N′‑((1‑(4‑(二甲基氨基)苯基)环戊基)甲基)脲盐酸盐的固体药物形式以及涉及其的组合物、方法和试剂盒与流程

背景本发明涉及n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基氨基)苯基)环戊基)甲基)脲盐酸盐(还称为“atr-101”)的新型固体药物形式，以及涉及其的组合物、方法和试剂盒。相关技术描述肾上腺由两部分组成：其中产生某些激素的外部皮质，和内部髓质，所述内部髓质是神经系统的一部分，其中产生神经系统激素。皮质专注合成糖皮质激素、盐皮质激素和雄激素。特定的皮质细胞产生特定激素，包括醛固酮、皮质醇和雄激素，如雄烯二酮。肾上腺皮质瘤在皮质中发生。存在两种主要类型的肾上腺皮质瘤：良性的腺瘤(adenomas)和恶性的肾上腺皮质癌(adrenocorticalcarcinomas)。在许多人中，腺瘤不产生症状，但在一些情形中，该肿瘤引起过量的激素产生。肾上腺皮质癌可以产生多种激素，即皮质醇、醛固酮、雌激素或睾酮以及其他的激素。肾上腺皮质癌(acc)是罕见的、高度恶性的肿瘤。该肿瘤常常释放这些激素，这些激素在女性中能够导致男性性状。过量的激素可能引起或可能不引起症状。一般来说，通过摘除肾上腺或使用治疗干预来治疗腺瘤。类似地，肾上腺皮质癌能够导致引起明显身体变化的激素产生，所述身体变化诸如增重、流体累积(fluidbuild-up)、儿童早熟(earlypuberty)或女性过多的面部毛发或体毛。尽管起因是未知的，但肾上腺皮质癌在低于5岁的儿童中和三十多岁以及四十多岁的成年人中最常见。肾上腺皮质癌可能与家族传下来的(遗传的)癌症综合征相关。男性和女性都可能发展这种肿瘤。尽管随着现代分子技术的出现对于疾病的理解已有进步，但是患有晚期疾病的患者(他们占诊断的大约一半)的预后仍然令人失望。靶向疗法正处在临床开发中，但是其是否将在疾病的管理中产生突破仍然是未知的(hammer，g.d.和t.else，编，adrenocorticalcarcinoma，basicscienceandclinicalconcepts，2011，newyork：springer)。fda核准用于acc的唯一的治疗剂是米托坦(mitotane)(o，p′-ddd)，其是杀虫剂ddt的一种衍生物，在二十世纪五十年代发现，那时发现其破坏狗的肾上腺皮质。尽管使用了半个世纪，但是其分子机制仍然是不清楚的。该药物需要化学转化成活性的自由基形式，然后该自由基形式诱导脂质过氧化和细胞死亡。米托坦还阻抑类固醇生成并且抑制其它细胞色素p450-种类的酶类(id.)。尽管米托坦广泛用于治疗acc，但是其仅在四分之一到三分之一的患者中具有增加的无进展存活。对于得到治疗益处的患者，效果是暂时的，平均延缓疾病进展五个月(id.)。米托坦作为治疗剂具有多种问题，这使得其应用困难，并且需要对患者密切监护。因此，对于用于治疗acc和其他相关的疾病或病况的新型治疗剂存在重大需求。一种这样有希望的药剂是n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基-氨基)苯基)环戊基)甲基)脲盐酸盐(“atr-101”)。atr-101的游离碱形式具有下述化学结构：之前trivedi等人(j.med.chem.37：1652-1659，1994)已经报道了atr-101的化学合成。然而，该过程没有提供适于固体给药(特别是关于胶囊或片剂形成)的形式的atr-101，并且没有提供高纯度的atr-101。尽管在该领域中，特别是在atr-101的情形中，已经取得了显著进步，但是对于有此需要的患者，包括患有acc和/或其他病症或病况(如库欣综合征和先天性肾上腺增生(congenitaladrenalhyperplasia，cah))的患者，对用于atr-101的口服给药的改进的技术和产品仍然存在重要的需求。简述本发明一般提供n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基氨基)苯基)环戊基)甲基)脲盐酸盐(还称为“atr-101”)的新型固体药物形式，以及用于其口服给药的组合物、方法和/或试剂盒。atr-101在异常肾上腺皮质细胞活性(包括acc和下文中更详细描述的其他病况)的治疗中具有特别用途。本文提供的atr-101的固体药物形式提供高负载能力，由此允许将atr-101配制成适于口服给药的形式。在一个实施方案中，提供具有下述特定粒度分布的atr-101固体药物形式：d(0.1)约为2μm，d(0.5)约为12μm，以及d(0.9)约为49μm。在一个实施方案中，提供具有在约228.28℃的差示扫描量热法(dsc)开始和在约230.93℃的吸热作用(endotherm)的atr-101固体药物形式。在一个实施方案中，提供具有超过下述任一值的纯度的atr-101固体药物形式：95％(w/w)，96％(w/w)，97％(w/w)，98％(w/w)和99％(w/w)。在一个实施方案中，提供一种口服剂量产品，其包含atr-101的固体药物形式，诸如胶囊、片剂或丸剂。在一个实施方案中，提供适于口服给药的单位剂型的固体药物组合物。所述组合物包含与一种或多种药用载体或赋形剂组合的atr-101，其中atr-101以约250-750mg范围内的水平(按照atr-101的游离碱形式测量)存在于单位剂型的固体药物组合物中。在更具体的实施方案中，按照atr-101的游离碱形式测量，atr-101以处于或超过单位剂型总重量的50重量％、60重量％、65重量％或70重量％的水平存在于固体药物组合物中。在另一个实施方案中，提供用于施用固体药物组合物的方法，所述方法包括向有此需要的受试者口服施用单位剂型的atr-101。在更具体的实施方案中，所述方法包括在口服施用单位剂型的atr-101的时候或在相近的时候口服施用酸性剂。所述酸性剂用于提高胃液酸度(降低ph)，并且，包括例如，酸性水溶液，如非饮食性可乐饮料，以及固相剂型的酸性剂。在甚至更具体的实施方案中，共同施用包括与所述固体药物组合物的口服施用同时、或在紧密相近的时候吞服或饮用非饮食性可乐饮料的全部或一部分。代表性的酸性水溶液具有下述范围的ph：2.0-3.5，2.2-3.0或2.3-2.7，包括端点值。在另一个实施方案中，提供用于与酸性剂共同施用atr-101的试剂盒。所述试剂盒包括多个与用于共同施用的酸性剂组合的atr-101口服单位剂型和/或用于在口服施用单位剂型的atr-101的时候或相近的时候与酸性剂共同施用的使用说明。在一个实施方案中，提供用于治疗有此需要的患者中的肾上腺皮质癌的方法，所述方法包括给所述患者施用治疗有效量的包含atr-101固体药物形式的口服剂量产品。在一个实施方案中，提供用于治疗有此需要的患者中的先天性肾上腺增生或库欣综合征的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的包含atr-101固体药物形式的口服剂量产品。在一个实施方案中，提供用于治疗有此需要的患者中的良性腺瘤、增加的激素产生、肾上腺皮质癌、先天性肾上腺增生、过量的皮质醇产生、与过量的皮质醇产生相关的症状、醛固酮增多症(hyperaldosteronism)或21-羟化酶缺乏的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的包含atr-101固体药物形式的口服剂量产品。在一个实施方案中，提供用于减少有此需要的患者中的肾上腺皮质瘤尺寸的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的包含atr-101固体药物形式的口服剂量产品。在一个实施方案中，所述方法进一步包括施用第二治疗剂。在更具体的实施方案中，所述第二治疗剂是化疗剂。在一个实施方案中，提供制备高纯度atr-101的方法，所述方法包括在合成中使用结晶的2，6-二异丙基苯胺盐酸盐(2，6-diisopropylanalinehydrochloridesalt)作为中间体的步骤。具体而言，在用于形成作为游离碱的atr-101的异氰酸盐偶联步骤中使用2，6-二异丙基苯胺盐酸盐。该步骤允许大规模产生高纯度水平的atr-101，使2，4-二异丙基区域异构体(regioisomer)和2-正丙基-6-异丙基异构体杂质减至最少。在另一个实施方案中，在原位(与分离的中间体相对)形成相应的异氰酸酯，从而避免形成另外的杂质；即，下文讨论的对称的脲。通过使用这些合成步骤，能够以大规模产量获得高纯度的atr-101，诸如纯度超过98％(w/w)或99％(w/w/)。本发明的这些和其他方面在参考下述详细描述时将变得清楚。为了这一目的，本文列出了多篇参考文献，它们更详细地描述了某些背景信息、步骤、化合物和/或组合物，并且分别通过引用以其整体结合在本文中。附图简述图1是atr-101固体药物形式的lc/ms质谱。图2是atr-101固体药物形式的质子nmr谱。图3是atr-101固体药物形式的2-d1hnmr谱(cosy)。图4是atr-101固体药物形式的13cnmr谱。图5是atr-101固体药物形式的ft-ir谱。图6是atr-101固体药物形式的dsc结果。图7是atr-101固体药物形式的xrpd衍射。图8是atr-101固体药物形式的晶体结构中的两种无序组分的叠置(为了清楚，省略了h原子)。图9是显示作为粒度的函数的暴露的曲线图。详述在下述描述中，列出某些具体的详细信息，以提供对多个实施方案的透彻理解。然而，本领域技术人员应该明白，没有这些详细信息也可以实施本发明。在其他情形中，为了避免不必要地使实施方案的描述变得不清楚，没有显示或详细描述公知的结构。除非上下文另外需要，在整个说明书以及之后的权利要求书中，词语“包括”及其变体，诸如“包含”和“含有”应该以开放式包含意义解释，即，解释为“包括，但不限于”。此外，本文提供的标题仅是为了便利，而不是解释本发明的范围或意思。在整个说明书中，提及“一个实施方案”或“某个实施方案”意指与该实施方案相联系所述的特定的特征、结构或特点包括在至少一个实施方案中。由此，在整个说明书的不同地方出现短语“在一个实施方案中”或“在某个实施方案中”不必要都是指该实施方案。此外，在一个或多个实施方案中，特定的特征、结构或特点可以以任何适当的方式组合。并且，当用在本说明书和后附的权利要求书中时，单数形式“某个”、“一个”和“这个”包括复数引用，除非内容另外清楚表明。还应该注意，术语“或”通常以其包括“和/或”的意义使用，除非内容另外清楚表明。用于本文时，“约”意指所述值的±20％，并且更具体地包括所述值的±10％、±5％、±2％和±1％的值。用于本文时，“异常肾上腺皮质细胞行为”包括增加的激素产生，库欣综合征，良性腺瘤、肾上腺皮质癌(acc)，转移性肾上腺皮质癌，先天性肾上腺增生，醛固酮增多症，包括康恩综合征(connsyndrome)，单侧醛固酮产生腺瘤(unilateralaldosterone-producingadenoma)，双侧肾上腺增生(bilateraladrenalhyperplasia)(或特发性高醛固酮症(idiopathichyperaldosteronism，iha))，肾素响应性腺瘤(renin-responsiveadenoma)，原发性肾上腺增生(primaryadrenalhyperplasia)和可用糖皮质激素治疗的醛固酮增多症(glucocorticoid-remediablealdosteronism，gra)，以及21-羟化酶缺乏。用于本文时，“与异常肾上腺皮质细胞行为相关的病症”用在本文中意指直接或间接由异常的肾上腺皮质细胞行为引起的症状和/或病况。在本文中将清楚的是，这些直接或间接由异常的肾上腺皮质细胞行为引起的症状和/或病况为数众多。用于本文时，“肾上腺皮质”和“肾上腺的皮质”旨在具有相同的意思。用于本文时，“库欣综合征”意指由身体组织长期暴露于高水平的皮质醇所引起的激素病症。库欣综合征有时称作“皮质醇增多症(hypercortisolism)”(过量的皮质醇产生)。库欣综合征包括该疾病的多种亚型，包括库欣病，肾上腺库欣综合征，和异位acth综合征，其按照皮质醇增多症的起因分类。库欣病，也称为脑垂体库欣病，由垂体腺肿瘤引起，所述垂体腺肿瘤过量分泌acth，过量的acth又刺激肾上腺产生更多的皮质醇。异位acth综合征由在垂体腺外产生的肿瘤引起，所述肿瘤能够产生acth，所述acth刺激皮质醇产生。肾上腺库欣综合征由引起过量皮质醇分泌的肾上腺异常(通常是肾上腺肿瘤)引起。用于本文时，“受试者”意指哺乳动物，包括人。用于本文时，短语术语“治疗有效量”是指治疗剂治疗、改善或预防疾病或病况或表现出可检测的治疗或预防效果的量。例如，该效果通过肿瘤尺寸的减小来检测。例如，该效应也通过化学标记、甾醇水平或抗原水平检测。治疗效果还包括物理症状的减少，诸如降低的体温。对于受试者精确的有效量将取决于受试者的大小和健康状况、病况的性质和程度、选择施用的治疗剂或治疗剂组合和本领域技术人员已知的其他变量。对于给定的情形，有效量通过常规实验确定，并且在临床医师的判断之内。用于本文时，“治疗”包括减缓或终止病症进展的治疗性应用、预防病症发展的预防性应用和/或病症的逆转。病症的逆转不同于减缓或终止病症的治疗性应用，不同在于，使用逆转的方法，不仅病症的进展被完全终止，在某种程度上推动细胞行为至在不存在所述病症时将观察到的正常状态。在一个实施方案中，所述病症与异常的肾上腺皮质细胞行为相关。由此，在该情形中，“治疗”包括减缓或终止与异常的肾上腺皮质细胞行为相关的病症的进展的治疗性应用，预防与异常的肾上腺皮质细胞行为相关的病症的发展的预防性应用，和与异常的肾上腺皮质细胞行为相关的病症的逆转。在这种情形中，病症的逆转不同于减缓或终止病症的治疗性应用，不同在于，使用逆转的方法，不仅病症的进展被完全终止，在某种程度上推动细胞行为至在不存在异常肾上腺皮质细胞行为时将观察到的正常状态。在另一个实施方案中，所述病症是得益于酰基-辅酶a：胆固醇转移酶(acat)的抑制的病症。为了该目的，atr-101是一种acat1抑制剂。acat是定位在内质网中的完整膜蛋白，并且催化由胆固醇和脂肪酰基辅酶a形成胆固醇基酯(ce)(还称为胆固醇酯)。胆固醇基酯作为细胞质装置小滴存储在细胞中。在哺乳动物中，存在两种acat同工酶，即acat1和acat2。acat2在肝和肠中表达。acat1的表达更普遍，并且存在于细胞和组织中，诸如巨噬细胞、肝细胞、肠细胞、肾小管细胞和神经元中，并且在肾上腺和肾上腺皮质中高表达。改变的脂质代谢已被鉴定为癌症中的重要过程。例如，在晚期前列腺癌中发现异常的胆固醇基酯积累，并且已经报道抑制胆固醇酯化，减弱癌症的侵袭性(yue等人.“cholesterylesteraccumulationinducedbyptenlossandpi3k/aktactivationunderlieshumanprostatecanceraggressiveness(由pten丧失和pi3k/akt活化诱导的胆固醇基酯积累是人前列腺癌侵袭性的基础)，”cellmetab.4：393-406，2014)。因此，在该实施方案中，“治疗”包括减缓或终止病症的进展的治疗性应用、预防病症发展的预防性应用或病症的逆转，所述病症将得益于对acat的抑制，包括将得益于对胆固醇酯化抑制的病症。在这一点上，代表性的病症包括其中存在异常的胆固醇基酯积累的癌症，和/或其中胆固醇酯化减弱癌症生长或侵袭性的癌症。在这一点上，代表性的癌症包括(但不限于)前列腺癌和卵巢癌。atr-101的固体药物形式，特别是在适于胶囊或片剂配制的固体粉末的情形中，已经证明使用现有的药物产品形式是困难的。例如，现有药物产品的缺陷包括缺少流动性和不适合胶囊或片剂配制的堆密度(bulkdensity)。固体药物组合物的atr-101可以由其颗粒的中值直径表征，所述中值直径使用装备有scirocco2000模件的malvernmastersizer2000(测量范围为0.02至2000μm)以干燥-分散模式确定。例如，“d(0.5)”粒度分布是粒度分布的中值直径，并且表示有50％的颗粒大于该d(0.5)值且有50％的颗粒小于该d(0.5)值的粒度。类似地，“d(0.1)”值是有10％的颗粒更小且有90％的颗粒更大的粒度，并且“d(0.9)”值是有90％的颗粒更小且有10％的颗粒更大的粒度。在一个实施方案中，固体药物组合物的atr-101具有约12μm的d(0.5)粒度分布，并且可以进一步表征为：具有约2μm的d(0.1)粒度分布，和/或具有约49μm的d(0.9)粒度分布。在其他实施方案中，固体药物组合物的atr-101具有在5至20μm、6至18μm、8至16μm、10至14μm或2至10μm范围内的d(0.5)粒度分布。在另一些实施方案中，固体药物组合物的atr-101具有大于1μm的d(0.1)粒度分布和/或小于60μm的d(0.9)粒度分布，或者，在另一个实施方案中，具有小于50μm的d(0.9)粒度分布。在其他实施方案中，固体药物形式具有在5至20μm、6至18μm、8至16μm或10至14μm范围内的d(0.5)粒度分布。在另一些实施方案中，固体药物形式具有大于1μm的d(0.1)粒度分布和/或小于60μm的d(0.9)粒度分布。在其他实施方案中，提供具有在约228.28℃的差示扫描量热法(dsc)开始和在约230.93℃的吸热作用的atr-101固体药物形式。在其他实施方案中，提供具有在约228-229℃的差示扫描量热法(dsc)开始和在约231-232℃的吸热作用的atr-101固体药物形式。在另一些实施方案中，提供具有超过98％(w/w)的纯度的atr-101固体药物形式。在其他实施方案中，提供具有超过98.5％(w/w)或99％(w/w)的纯度的atr-101。可以将atr-101固体药物形式进行碾磨、研磨和/或过筛，条件是得到的产品的粒度分布保持在上述范围内。可以使用此类另外的碾磨或研磨，从而提供更均匀的粒度分布。用于其的步骤是固体药物材料研磨/碾磨领域的技术人员已知的。固体药物组合物可以采用适于口服施用的多种形式，诸如胶囊、丸剂、颗粒剂、混悬液、小药丸(pellet)、片剂或粉剂，并且包含一种或多种药用载体或赋形剂。在一个具体的实施方案中，所述固体药物组合物采用压缩的片剂的形式，其可以被包覆，例如，用非功能性膜或改变释放的包衣包覆。药用载体和赋形剂在本领域中是公知的，诸如在remington：thescienceandpracticeofpharmacy(remington：制药科学与实践)，第22版，allen，lloydv.，jr.编(2012)(通过引用结合在本文中)中公开的那些，并且包括(但不限于)稀释剂、粘合剂、粘附剂、崩解剂、湿润剂、润滑剂、抗粘附剂、助流剂、张度剂和/或表面活性剂。在一个实施方案中，atr-101固体药物形式不与任何另外的组分一起配制。在该情形中，适当的固体形式包括粉剂。当atr-101采用胶囊形式时，所述胶囊可以仅包含所述固体药物形式，诸如粉末形式的atr-101，不存在任何的填充剂或载体。在该实施方案中，胶囊可以包含，例如，25至1000mg，诸如25mg，50mg，100mg，125mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，750mg或1000mg的atr-101固体药物形式(作为游离碱测量)。在另一个实施方案中，atr-101固体药物形式可以被配制为药物组合物，所述药物组合物除atr-101固体药物形式外还包含remington’spharmaceuticalsciences(雷明顿药物科学)第16版，osol，a.，编(1980)中所述的一种或多种另外的药用组分。药用载体和/或稀释剂是本领域技术人员所熟悉的，并且通常没有不利地影响所述组合物的所需特征。在多个方面中，所述固体药物组合物单独或组合包含稀释剂，诸如，并且不限于，乳糖，包括无水乳糖和乳糖一水合物；乳糖醇；麦芽糖醇；甘露醇；山梨醇；木糖醇；葡萄糖和葡萄糖一水合物；果糖；蔗糖和基于蔗糖的稀释剂，如可压缩糖，糖果店的糖和糖球；麦芽糖；肌醇；水解的谷物固体(hydrolyzedcerealsolids)；淀粉(例如，玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，木薯淀粉等)，淀粉组分，如直链淀粉和葡聚糖结合剂(dextrates)，和改性的或加工的淀粉，如预胶化的淀粉；糊精；纤维素，包括粉状纤维素，微晶纤维素，硅化的微晶纤维素，α-和无定形纤维素以及粉状纤维素的食品级来源，和乙酸纤维素；钙盐，包括碳酸钙，磷酸钙，磷酸氢钙二水合物，硫酸氢钙一水合物，硫酸钙和颗粒状乳酸钙三水合物；碳酸镁；氧化镁；膨润土；高岭土；氯化钠；等等。所选的一种或多种稀释剂应该表现出适当的流动特性，并且在需要片剂的情形中，表现出适当的可压缩性。在多个方面中，所述固体药物组合物包含粘合剂或粘附剂，其是有用的赋形剂，特别是在组合物以片剂形式存在的情形中。此类粘合剂和粘附剂应该给配制在片剂中的掺和物赋予充分的内聚性，以足以允许正常的加工操作，诸如分筛，润滑，压缩和包装，但是在摄入时仍然允许片剂崩解和化合物吸收。适当的粘合剂和粘附剂包括单独的或组合的下述各项：阿拉伯胶；黄蓍胶；葡萄糖；聚葡萄糖；淀粉，包括预胶化的淀粉；明胶；改性的纤维素，包括甲基纤维素，羧甲纤维素钠，羟丙基甲基纤维素(hpmc或羟丙甲纤维素)，羟丙基纤维素，羟乙基纤维素和乙基纤维素；糊精，包括麦芽糊精；玉米醇溶蛋白(zein)；海藻酸和海藻酸盐，例如，海藻酸钠；硅酸镁铝；膨润土；聚乙二醇(peg)；聚环氧乙烷；瓜耳胶；多糖酸；聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)，例如，聚维酮k-15，k-30和k-29/32；聚丙烯酸(卡波姆)；聚甲基丙烯酸酯；等等。在多个方面中，一种或多种粘合剂和/或粘附剂，如果存在的话，共组成所述组合物重量的约0.5％至约25％，例如约0.75％至约15％，或约1％至约10％。在多个方面中，所述固体药物组合物包含崩解剂。适当的崩解剂包括单独的或组合的下述各项：淀粉，包括预胶化的淀粉和乙醇酸淀粉钠；粘土；硅酸镁铝；基于纤维素的崩解剂，如粉状纤维素，微晶纤维素，甲基纤维素，低取代的羟丙基纤维素，羧甲纤维素，羧甲纤维素钙，羧甲纤维素钠和交联羧甲纤维素钠；海藻酸盐；聚维酮；交联聚维酮；聚克立林钾(polacrilinpotassium)；胶，如琼脂，瓜耳胶，槐豆，刺梧桐树胶(karaya)，果胶和黄蓍胶；胶体二氧化硅；等等。一种或多种崩解剂，如果存在的话，通常共组成所述组合物重量的约0.2％至约30％，例如，约0.2％至约10％，或约0.2％至约5％。在多个方面中，所述固体药物组合物包含湿润剂。湿润剂，如果存在的话，通常选择用来保持化合物与水紧密联系，这是一种被认为提高组合物的生物利用度的条件。可以用作湿润剂的表面活性剂的非限制性实例包括单独的或组合的下述各项：季铵化合物，例如，苯扎氯铵，苄索氯铵和西吡氯铵；二辛基磺基琥珀酸钠；聚氧乙烯烷基苯基醚，例如，壬苯聚醇9，壬苯聚醇10和辛苯昔醇9；泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段共聚物)；聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油，例如，聚氧乙烯(8)辛酸/癸酸单酸甘油酯和甘油二酯，聚氧乙烯(35)蓖麻油和聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油；聚氧乙烯烷基醚，例如ceteth-10，laureth-4，laureth-23，oleth-2，oleth-10，oleth-20，steareth-2，steareth-10，steareth-20，steareth-100和聚氧乙烯(20)鲸蜡硬脂酰醚；聚氧乙烯脂肪酸酯，例如聚氧乙烯(20)硬脂酸酯，聚氧乙烯(40)硬脂酸酯和聚氧乙烯(100)硬脂酸酯；脱水山梨糖醇酯；聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯，例如，聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80；丙二醇脂肪酸酯，例如，丙二醇月桂酸酯；十二烷基硫酸钠；脂肪酸及其盐，例如，油酸，油酸钠和三乙醇胺油酸酯；脂肪酸甘油酯，例如，单油酸甘油酯，单硬脂酸甘油酯和棕榈酰硬脂酸甘油酯；脱水山梨糖醇酯，例如，单月桂酸脱水山梨糖醇酯，单油酸脱水山梨糖醇酯，单棕榈酸脱水山梨糖醇酯和单硬脂酸脱水山梨糖醇酯；泰洛沙泊(tyloxapol)；等等。一种或多种湿润剂，如果存在的话，通常共组成所述组合物重量的约0.25％至约15％，优选约0.4％至约10％，并且更优选约0.5％至约5％。在多个方面中，所述固体药物组合物包含润滑剂。润滑剂减少在片剂制剂压缩过程中在成片剂混合物与成片剂设备之间的摩擦。适当的润滑剂包括单独的或组合的下述各项：山嵛酸甘油酯；硬脂酸及其盐，包括硬脂酸镁，硬脂酸钙和硬脂酸钠；氢化植物油；棕榈酰硬脂酸甘油酯；滑石；蜡；苯甲酸钠；乙酸钠；延胡索酸钠；硬脂酰延胡索酸钠；peg(例如，peg4000和peg6000)；泊洛沙姆；聚乙烯醇；油酸钠；十二烷基硫酸钠；十二烷基硫酸镁；等等。一种或多种润滑剂，如果存在的话，通常共组成所述组合物重量的约0.05％至约10％，例如约0.1％至约8％，或约0.2％至约5％。硬脂酸镁是特别有用的润滑剂。在多个方面中，所述固体药物组合物包含抗粘剂。抗粘剂减少片剂制剂与设备表面的粘结。适当的抗粘剂包括单独的或组合的下述各项：滑石，胶体二氧化硅，淀粉，dl-亮氨酸，十二烷基硫酸钠和金属硬脂酸盐。一种或多种抗粘剂，如果存在的话，通常共组成所述组合物重量的约0.1％至约10％，例如约0.1％至约5％，或约0.1％至约2％。在多个方面中，所述固体药物组合物包含助流剂。助流剂改善流动特性并且减少成片剂混合物中的静电。适当的助流剂包括单独的或组合的下述各项：胶体二氧化硅，淀粉，粉状纤维素，十二烷基硫酸钠，三硅酸镁和金属硬脂酸盐。一种或多种助流剂，如果存在的话，通常共组成所述组合物重量的约0.1％至约10％，例如约0.1％至约5％，或约0.1％至约2％。在多个方面中，所述固体药物组合物包含表面活性剂。也可以加入表面活性剂，以减少化合物的聚集和/或使制剂中颗粒的形成最小化和/或减少吸附。示例性的表面活性剂包括非离子表面活性剂，如聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)或泊洛沙姆(例如，泊洛沙姆188)。示例性表面活性剂浓度可以在约0.001％至约0.5％，或约0.005％至约0.2％，或备选地约0.004％至约0.01％w/v的范围内。在多个方面中，所述固体药物组合物也可以包含各种改变剂量单位的物理形式的物质。例如，所述组合物可以包含在活性成分周围形成包衣壳的物质。形成包衣壳的物质通常是惰性的，并且可以选自，例如，糖，虫胶，聚合物，塑化剂，色素，或其他包衣试剂。在多个方面中，所述固体药物组合物是固体粉末的形式，并且包裹在适当的胶囊中，诸如明胶胶囊。包含在此类胶囊中的药物的量可以变化，这取决于认识到的因素，诸如治疗的频率和持续时间，剂量给药时间间隔，排泄速率，接受者的年龄，体重，性别，饮食，医学病史和一般状态(例如，健康)，疾病的严重性，和/或要治疗的肿瘤的尺寸、恶性和侵袭性。由此化合物是适当的形式，并且以足以获得需要的治疗效果或预防效果的剂量施用。固体剂型atr-101的施用通常是一个或多个单位剂量的形式，其中，例如，单个片剂或胶囊是单个单位剂量。选择剂量的量和频率，以产生治疗有效水平的药剂。例如，频率可以是每日一次；每日两次、三次或四次；隔日；每三天；或每周2，3，4，5或6次；每周一次；每月两次；每月一次或更频繁或更少频率，按需要确定，这取决于响应或病况和接受者对治疗的耐受性。考虑在较长时间期间，诸如4，5，6，7，8，10或12周或更久维持剂量，并且剂量可以按需要调整。类似地，还考虑间歇性给药，其中给药停止一段时间，然后再重新开始。治疗的进展可以通过常规技术和测定监测，如通过监测肿瘤尺寸和/或皮质醇水平，并且在本领域的技能之内。在一个实施方案中，考虑多个剂量单位的口服施用，每天一次，每天两次，每天三次或每天四次。取决于，例如，单个片剂中包含的atr-101的量，多个单位剂型可以是每天一次、每天两次、每天三次或每天四次施用的2-30片片剂的范围内。在一个实施方案中，并且取决于下文讨论的暴露，施用可以是4-24片片剂，每天两次，或6-12片片剂，每天两次。在一些实施方案中，所述固体药物形式按每日基础以约0.1mg/kg至约200mg/kg的剂量施用。适当的剂量包括，但不限于，0.5mg/kg至150mg/kg，0.75mg/kg至100mg/kg，1mg/kg至50mg/kg，2mg/kg至40和3mg/kg至35mg/kg。适当的剂量还包括1mg/kg至5mg/kg和2mg/kg至4mg/kg，以及10mg/kg至50mg/kg和20mg/kg至40mg/kg。在更具体的实施方案中，在固体药物组合物中，atr-101以处于或超过单位剂型总重量的50重量％的水平存在(按照atr-101的游离碱形式测量)。在另一个实施方案中，在固体药物组合物中，atr-101以处于或超过单位剂型总重量的60重量％的水平存在(按照atr-101的游离碱形式测量)。在另一个实施方案中，在固体药物组合物中，atr-101以处于或超过单位剂型总重量的65重量％的水平存在(按照atr-101的游离碱形式测量)。在又一个实施方案中，在固体药物组合物中，atr-101以处于或超过单位剂型总重量的70重量％的水平存在(按照atr-101的游离碱形式测量)。令人惊讶地，atr-101本身的性质，包括粒度分布，堆密度，压缩性等，允许所述固体药物组合物中此种升高的药物水平。在一个实施方案中，所述固体药物组合物可以与酸性剂共同使用，以增加口服施用时atr-101的暴露。在一些实施方案中，共同施用的药剂是酸性水溶液，以增加口服施用时atr-101的暴露。在其他实施方案中，酸性剂是固体剂型的，例如，酸(如柠檬酸)的固体剂型。因此，在一个实施方案中，提供用于共同施用与酸性水溶液组合的固体药物组合物的方法。所述酸性水溶液用于增加胃液酸度(降低ph)，并且由此增加口服施用时atr-101的暴露。在更具体的实施方案中，共同施用包括与所述固体药物组合物的口服施用同时、或在紧密相近的时候吞服或饮用所述酸性水溶液。例如，受试者可以使用所述酸性水溶液作为辅助物来吞服一片或更多片包含atr-101的片剂，诸如通过在吞服所述片剂之前、与其同时或在吞服所述片剂之后立即饮用所述酸性水溶液。酸性水溶液通过增加胃液酸度(降低ph)或维持胃液酸度而增加atr-101的暴露，并且由此辅助atr-101吸收到受试者的血流中。为了这一目的，代表性的酸性水溶液具有下述范围的ph：2.0-3.5，2.2-3.0或2.3-2.7，包括端点值。在一个实施方案中，所述酸性水溶液是非饮食性可乐饮料，诸如()、()等。与固体药物组合物共同施用的酸性水溶液的量应该足以使胃液酸度增加或维持在口服施用时获得增加的atr-101暴露的水平。例如，共同施用可以包括单次啜饮(sip)或吞服，其通常是约0.5盎司的液体，或可以包括多次啜饮或吞服，例如，这取决于在给定时间吞服的单位剂量(例如，片剂)的数量。因此，共同施用的酸性水溶液的量通常在单次啜饮(0.5盎司)至24次啜饮(其将对应于12盎司罐的非饮食性可乐饮料)的范围内。本发明的方法包括通过给有此需要的受试者施用治疗有效量的包含atr-101的固体药物组合物而治疗病症。在多个实施方案中，所述方法包含向有此需要的受试者共同施用与酸性剂组合的治疗有效量固体药物组合物，所述酸性剂诸如酸性水溶液或酸性固体剂型。在多个方面中，还提供用于减缓或终止病症进展、预防病症或逆转病症的方法。在一个实施方案中，所述病症是与异常的肾上腺皮质细胞活性相关的病症，并且所述方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的固体药物组合物。在多个方面中，还提供用于减缓或终止与异常的肾上腺皮质细胞活性相关的病症的进展的方法。在多个方面中，还提供用于预防与异常的肾上腺皮质细胞活性相关的病症的方法。在多个方面中，还提供用于逆转与异常的肾上腺皮质细胞活性相关的病症的方法。在该实施方案中，本发明所述的方法包括治疗：增加的激素产生，良性腺瘤，肾上腺皮质癌(acc)，转移性肾上腺皮质癌，先天性肾上腺增生，库欣综合征，过量的皮质醇产生，与过量的皮质醇产生相关的症状，醛固酮增多症，康恩综合征，单侧醛固酮产生腺瘤，双侧肾上腺增生(或特发性高醛固酮症(iha))，原发性肾上腺增生，可用糖皮质激素治疗的醛固酮增多症(gra)和/或21-羟化酶缺乏。此类方法涉及向有此需要的受试者施用治疗有效量的固体药物组合物。在其他实施方案中，本发明所述的方法包括通过向有此需要的受试者施用治疗有效量的固体药物组合物减小患者中肾上腺皮质肿瘤尺寸和/或抑制异常的肾上腺激素产生。本发明所述的方法还包括减缓或终止下述各项的进展：增加的激素产生，良性腺瘤，肾上腺皮质癌，转移性肾上腺皮质癌，库欣综合征，过量的皮质醇产生，与过量的皮质醇产生相关的症状，先天性肾上腺增生，醛固酮增多症，康恩综合征，单侧醛固酮产生腺瘤，双侧肾上腺增生(或特发性高醛固酮症(iha))，肾素响应性腺瘤，原发性肾上腺增生，可用糖皮质激素治疗的醛固酮增多症(gra)，21-羟化酶缺乏。此类方法涉及向有此需要的受试者施用治疗有效量的固体药物组合物。在其他实施方案中，所述病症是将得益于对acat的抑制的病症，并且所述方法向有此需要的受试者施用治疗有效量的固体药物组合物。在多个方面中，还提供用于减缓或终止将得益于对acat的抑制的病症的进展的方法。在多个方面中，还提供用于预防将得益于对acat的抑制的病症的方法。在多个方面中，还提供用于逆转将得益于对acat的抑制的病症的方法。在该实施方案中，本发明所述的方法包括治疗前列腺癌和卵巢癌。本发明所述的方法还包括通过施用第二治疗剂的共同治疗，所述第二治疗剂包括已知的化疗剂、靶向剂、肾透析剂(adrenalysisagents)、二甲双胍(metformin)、依维莫司(everolimus)和/或igflr拮抗剂。在一个实施方案中，共同施用还包括施用米托坦。适当的化疗剂和放疗剂的实例包括，但不限于：抗代谢药；dna-破坏剂；用作化疗剂的细胞因子；共价dna-结合药；拓扑异构酶抑制剂；抗有丝分裂剂；抗肿瘤抗生素；分化剂；烷基化剂；甲基化剂；激素或激素拮抗剂；氮芥(nitrogenmustard)；放射性敏感剂；光敏剂；辐射源，任选地与放射性敏感剂或光敏剂一起使用；或其他常用的治疗剂。在另一个实施方案中，提供用于共同施用atr-101与酸性剂的试剂盒，用以增加口服施用时atr-101的暴露。所述试剂盒包括多个与用于共同施用的酸性剂组合的atr-101口服单位剂型。备选地，所述试剂盒包括多个atr-101口服单位剂型，其与用于共同施用酸性剂的使用说明组合。在其他实施方案中，提供用于制备高纯度的atr-101的方法，特别是在大规模制造的情形中。如在实施例5中更详细地描述的，提供一种制备高纯度的atr-101的方法，所述方法包括使用结晶的2，6-二异丙基苯胺盐酸盐作为合成的中间体的步骤。具体地，所述方法在用于形成作为游离碱的atr-101的异氰酸酯偶联步骤(上文所示)中使用2，6-二异丙基苯胺盐酸盐70。该步骤允许大规模制备高纯度水平的atr-101，使2，4-二异丙基区域异构体和2-正丙基-6-异丙基异构体杂质减至最少。在另一个实施方案中，在原位(与分离的中间体相对)形成相应的异氰酸酯，从而避免形成另外的杂质；即，下文讨论的对称的脲。通过使用这些合成步骤，能够以大规模生产获得高纯度的atr-101，诸如纯度超过98％(w/w)或98.5％(w/w)或99％(w/w/)。在本文中描述了本发明的多个备选实施方案和实施例。这些实施方案和实施例是举例说明性的，并且不应该理解为限制本发明的范围。实施例实施例1atr-101固体药物形式的合成步骤1：由腈1制备伯胺2在反应器容器中填装四氢呋喃(thf)和化合物1，并且缓慢加入在thf中的氢化铝锂(lah)溶液。加入后，将反应混合物温热到45℃并搅拌，直到过程中hplc分析表明反应完全。将反应混合物冷却至0-10℃，并缓慢加入水性naoh，同时控制温度在0-10℃。然后，将混合物温热到20-25℃，并且通过过滤去除任意的无机盐。然后，将固体用另外的thf洗涤。将滤过液在真空中蒸馏。加入乙腈(mecn)并且继续蒸馏以减少总体积。加入h2o并将溶液冷却至20℃，并且在需要时，接入晶种。向浆料中加入另外的水并且冷却至0-5℃并过滤。将结晶容器和滤饼用mecn和水(1∶2的混合物)洗涤，并且在真空中在40-45℃干燥，以产生化合物2。标准产率为：85％。步骤2：制备atr-101游离碱通过在二氯甲烷(dcm)和10％水性naoh的混合物中搅拌，将2，6-二异丙基苯胺盐酸盐(化合物3)转化为相应的游离碱。分离有机相并用水洗涤。将包含苯胺游离碱的dcm溶液通过蒸馏浓缩。向分开的反应容器中填装4-二甲基氨基吡啶(dmap)和dcm。将混合物冷却，并且缓慢加入碳酸二-叔丁酯(boc2o)在dcm中的溶液，同时将温度保持在0-5℃。然后将苯胺游离碱溶液缓慢加入到反应容器中。通过过程中hplc分析验证苯胺向异氰酸酯的完全转化。向分开的容器中填装化合物2和mecn，并且将该溶液冷却至0-5℃。缓慢加入异氰酸酯中间体溶液(上文制备的)，同时将温度保持在0-5℃，并且搅拌，直到过程中hplc表明反应完全。将反应混合物在真空下蒸馏，并且加入异丙醇(ipa)并继续蒸馏。将得到的溶液冷却，并且在需要时，加入晶种。在结晶发生后，加入水，并且将混合物冷却至0-5℃，并过滤。将结晶容器和滤饼用异丙醇∶水(1∶1)洗涤，并且将产物饼在真空下干燥，得到作为游离碱的atr-101。典型产率为：89％。步骤3：制备atr-101固体药物形式将atr-101游离碱溶解在丙酮中，并且过滤，以去除颗粒。使用另外的丙酮冲洗蒸馏容器和滤器。加入浓盐酸(hcl)，同时将反应保持在室温。将得到的浆料过滤，并且用丙酮洗涤滤饼。将得到的固体在真空下在40-45℃干燥，以得到atr-101固体药物形式。典型产率为：70-80％。实施例2atr-101固体药物形式的表征分析atr-101固体药物形式以完全表征该物质并提供结构证据。元素分析一式两份进行atr-101固体药物形式的元素(chn)分析。结果总结在表1中，并且与为c27h39n3ohcl的分子atr-101药物物质式计算的理论值一致。表1元素理论值实验结果％c70.7970.63％h8.808.44％n9.179.14％o3.503.56％cl7.747.84氯化物含量将atr-101固体药物形式制备为其盐酸盐(hclsalt)。为了证实氯化物含量(和化学计量)，使用验证的方法通过离子色谱法分析盐酸盐。w/w％结果显示存在7.8％的氯化物。关于单盐酸盐的理论值是7.7％。实验结果与关于单盐酸盐的理论值相符。质谱法使用absciexapi2000lc/ms/ms系统按照usp＜736＞进行质谱法研究。通过以正极模式的电喷雾电离分析样品。观察到的基峰为422.3(m+h-hcl)，与母本化合物一致(见图1)。观察到在301.3和202.3的两个次峰(未表征的片段)。lc/ms和chn结果的合并数据支持c27h39n3o的分子式分配和游离碱的421.63g/mol质量以及单盐酸盐的c27h39n3o.hcl(质量为458.09g/mol)。核磁共振(nmr)-1hnmr使用variangemini400mhz光谱仪得到atr-101固体药物形式的质子nmr光谱。样品溶解在cd3od中。得到的质子nmr谱显示在图2中。二维(2d)nmr图3所示的2d质子nmr谱(cosy)证实了关于atr-101固体药物形式预期的一些连接性(connectivity)。具体地，在1.2ppm的共振与在3.1的共振强相关。这种相关性以及对于在3.1的峰观察到的分裂模式强烈表明是异丙基结构部分。此外，来自这些光谱的数据显示在1.6-2.2ppm的每个宽缝之间的强相关性，这与其中不存在杂原子或其他非烷基取代的环烷基官能性一致。碳13nmr(13cnmr)使用variangemini400mhz光谱仪得到atr-101固体药物形式的100mhz13cnmr光谱。样品溶解在cd3od中。得到的13cnmr光谱显示在图4中。用于光谱分析的碳原子的编号显示在下文中，并且解释显示在表2中。观察到的信号与atr-101的结构一致。表2位移(ppm)预测(ppm)#碳数目分配159.8155.01c10151.6146.12c14148.5145.71c5141.9143.11c2133.4138.31c11130.4128.92c4128.7128.01c16124.1124.62c3121.4123.32c1553.854.51c947.250.31c636.541.62c129.635.32c724.628.72c1224.424.94c1323.625.12c8傅里叶变换红外光谱(ir)使用atr-101固体药物形式进行红外(ir)光谱。图5中显示的得到的光谱与atr-101药物物质的结构一致。主峰分配显示在表3中。表3波数(cm-1)官能团3232n-h(脲)2959c-h延伸2380苯胺-hcl1668c＝o(脲)区域1200-1600芳香族的示差扫描量热法(dsc)使用ta设备q2000获得atr-101固体药物形式的dsc热分析图。使用10℃/分钟的温度上升至300℃。在228.64℃观察到吸热事件，开始温度是225.87℃。结果显示在图6中。x-射线粉末衍射分析(xrpd)使用配备有石墨单色仪和在50kv，40ma操作的cux-射线源的西门子d500自动化粉末衍射仪(siemensd500automatedpowderdiffractometer)确定atr-101固体药物形式的x-射线粉末衍射模式。样品使用4-40°2θ的测量范围，0.050°的步长和每步1.2秒的测量时间进行分析。图7所示的得到的xrpd光谱表明样品实际上是晶体。单晶x-射线衍射单晶x-射线衍射是在装备有在150k操作的oxfordcryosystem低温装置的agilentsupernova双源衍射仪上对atr-101固体药物形式(固体形式溶液)进行的研究。使用cu-kα辐射收集数据，分辨率为。在整合和应用多扫描系统误差校正(crysalispro)后，将数据合并在点组2/m中。通过电荷跳跃法(charge-flipping)(superflip)解析结构，并且使用全部数据(shelxl-2012)通过针对f2的最小二乘法精细化。单晶结构，以及无序组分的叠加显示在表8中。批次分析表4总结了关于atr-101固体药物形式的批次分析结果。表4实施例3与现有技术的atr-101合成(trivedi等人，j.med.chem.37：1652-1659，1994)比较在本实验中，按照上述流程合成10.6gatr-101，所述流程对应于trivedi等人，j.med.chem.137：1652-1659，1994中记载的流程(下文称为“trivedi流程”)。发现通过trivedi流程制备的atr-101的纯度为94.9％，相比较而言，通过实施例1的流程制得并在实施例2中评价的atr-101的纯度为98.3％。步骤1：对-硝基苯基乙腈的烷基化初始烷基化反应以15.0g规格运行，并且，按照trivedi流程，应该产生15.7g(79％)产物52。然而，发生了一些问题，并且产率远低于预计产率(6.0g，30％的产率)，尽管通过1hnmr和熔点(实际：71-72℃，报道：76℃)确定的纯度看起来良好。通过向nah中加入1，4-溴代丁烷和对-硝基苯基乙腈大约一半时，从紫色溶液中沉淀出黑色固体，引起烧瓶中的搅拌子跳动。在其余的添加时间过程中必须监测搅拌速率，以保持溶液缓慢的且效率低的混合。在环境温度搅拌过夜以确保反应结束后，按流程指示对反应进行后处理(worked-up)。首先，使用空气鼓泡去除过量的醚，并且通过过滤分离黑色固体。然后加入二乙醚，直到所有的固体溶解产生清澈的黑色溶液。然而，当用2nhcl洗涤醚溶液时，从溶液中沉淀出黑色无定形固体。在trivedi流程中没有关于该黑色固体的注释，因此，不修改继续后处理。黑色固体最终处于水性洗液中，或者粘在分液漏斗上。后处理的其余部分如预期继续进行，并且粗固体的热己烷萃取产生浅粉色平面晶体。以认为导致低产率的两个变化重复该流程：将无水溶剂(来自瓶子)过筛干燥，以去除痕量的水，并且将搅拌子替换为机械搅拌器，以确保溶液更均匀混合。再次以10g规格运行流程，其应该产生10.5g的化合物52。然而，尽管改变了流程，得到的产物和产率几乎与第一次运行相同(4.5g，34％的产率，71-72℃的熔点)。在确定物质块处于何处的尝试中，将来自该反应的水性层用二乙醚再次萃取，但是仅产生痕量的物质。在后处理过程中形成的黑色固体经过滤分离，并且对该物质采集nmr。nmr显示对应于化合物52的峰。推测起来，在hcl形成后产生的该无定形黑色固体是失去的物质的主要来源，因为似乎有几克它。步骤2：硝基化合物的还原以两个步骤进行硝基化合物52向二甲基胺53的转化：钯催化的硝基化合物氢化，产生游离胺52b，之后是亚胺形成和还原成二甲基胺53。使用可用物质(1.0g化合物52)的十分之一(1/10)运行研究性的小规格反应。以1克规格的硝基化合物的还原非常快速，3-4小时后氢消耗停止。反应混合物的等分试样的粗nmr显示非常纯的胺(52b)。加入甲醛，以及另外的pd/c，并且继续氢化。氢的消耗不像对于亚胺还原那么快，并且当容器增压至55psi并摇动过夜(约16小时)时，反应仍然进行。16小时后，烧瓶中的压力降至30psi，这表明过夜氢化仍然进行。等分试样的nmr证实反应还没有进行到结束。在大规格上，硝基还原进行地非常顺利，以非常快的速度消耗氢，并且也在3-4小时内结束。反应器增压至55psi并且摇动过夜，如初始流程所示，然后加入pd/c，接着加入甲醛。同样观察到氢消耗非常缓慢，因此使氢罐的阀门对容器开放，并且反应摇动24小时。24小时摇动后，将对容器的阀门关闭，经过1小时观察到5psi的下降，这表明反应还没有进行到结束。tlc也显示一些极性产物，这表明反应仅完成大约50％。用氢将氢化容器增压至55psi，并且将阀门再开放另外24小时的氢化时间。24小时后，反应停止消耗氢，并且吹扫容器，将内容物过滤以去除钯催化剂。与小规格相似地进行后处理，并且在通过柱色谱纯化之前将两份反应合并，产生5.7g(57.5％的产率)需要的二甲基胺产物53。步骤3：氰基化合物的还原进行小规格的rani氢化，并且测试反应顺利进行。氢消耗快速，并且在大约2小时后似乎反应完全。氢消耗停止，并且tlc表明没有化合物53剩余。在过滤去除雷尼镍后，通过等分试样的nmr证实反应完全。使用相同的条件将剩余的物质进行还原，并且氢消耗和tlc分析同样表示反应在2小时后结束。将物质过滤并与更小规格的反应物质合并。在浓缩至干燥后，发现粗产量为5.5g(96.5％的产率)，这与报道的产率(99％)非常接近。步骤4：形成脲化合物脲形成是一个直接的流程，并且使用胺54(500mg)的小规格测试反应与在20份乙酸乙酯中的1.0当量的异氰酸酯合并。在搅拌16小时后，将溶液浓缩至干，以产生白色固体。固体的粗1hnmr证实光谱与trivedi流程中报道的光谱相匹配。剩余的物质没有困难地继续进行到atr-101游离碱，并且将多个产物合并。在去除残余的乙酸乙酯的尝试中，将固体溶解在10ml甲苯中，然后在减压下浓缩。在高真空中干燥后，atr-101游离碱分离为粘性的白色泡沫物(10.6g，99％的产率)。终产物的1hnmr显示甚至在延长的干燥后仍有痕量的甲苯，并且物质继续进行到hcl盐的形成。后来测量固体的熔点，并且发现该熔点出乎意料地低(50-56℃，预测：132-133℃)。固体的性质(油性泡沫)使得熔点的确定变得困难，但是判断其在高于60℃完全熔融。步骤5：hcl盐形成向在甲苯中的atr-101游离碱中加入37％hcl，立即有粘性白色固体沉淀出来。通过dean-stark设备，利用剧烈搅拌和加热(浴温：160℃)，经过大约3小时将溶液干燥。干燥后，将溶液冷却，并且通过过滤分离细小的晶体固体，并用丙酮和二乙醚洗涤。干燥产物atr-101，直到得到恒定的重量(10.6g，92％的产率)，并且充分表征。总结成功地重复了trivedi流程，合成了10.6克atr-101。过程中的初始步骤证明是困难的，报道了相当低的产量。硝基化合物还原为胺顺利进行，但是使用甲醛的甲基化和得到的亚胺的氢化非常缓慢，产生比预测产率低的产率。腈的雷尼镍还原顺利进行，得到的胺具有预期的产率和纯度。脲的形成和最终hcl盐的形成也顺利进行，从而经过最后的步骤以优异的产率提供atr-101。发现通过trivedi流程合成的atr-101的纯度为94.9％(见下表5)。特别注意的是非常高水平的2-正丙基-6-异丙基异构体(rrt1.02)，以及2，4-二异丙基区域异构体(rrt1.09)。表5通过trivedi流程制备的atr-101的分析rt性质rrt面积％5.18---0.240.09319.985---0.930.32920.129---0.940.3820.806---0.970.05821.376atr-101(hcl盐)1.0094.85821.757正丙基-6-异丙基异构体1.021.97623.3162，4-二异丙基区域异构体1.092.00530.891---1.450.09231.517---1.470.05232.24---1.510.07235.292---1.650.086实施例4大规模合成-低纯度通过上文所示的流程进行初始大规格的合成。在第一步中，将4-硝基苯基乙腈用1，4-二溴丁烷烷基化，产生62，这是使用koh作为碱在dmso中进行的。然后通过先使用mtbe作为萃取溶剂进行水性后处理，并随后将溶剂浓缩至干燥而分离产物(深色固体)。分别以～3kg的规格运行几个批次，以产生在92-100％范围内的产率和83-95％范围内的纯度。第二步实现硝基还原成相应的苯胺，随后用甲醛和acoh进行双重还原性胺化，以提供二甲基苯胺64。这通过使用典型的pd/c催化剂，以dme作为反应溶剂而实现。在观察反应完成后，过滤催化剂，并且在水性后处理以及浓缩溶剂至干燥后得到粗形式的产物。然后，通过将粗固体在庚烷中加热至80℃(这提供双相混合物)并从底层的“红色软泥”相滗析澄清的上层相而纯化。然后，将以这种方式得到的庚烷萃取物浓缩至干燥。然后，在用于下一步骤之前，将得到的固体从ipa/h2o中重结晶。这一顺序以2.6kg规格进行四次，并且将粗物质合并在一起用于上述的纯化程序；以51％的产率得到产物，通过hplc测定的纯度为97.5％。该顺序的第三步是将腈还原成相应的伯胺66，这通过使用在thf中的lah(作为沉淀物的来源)进行。在反应完全后，利用典型的“fieser”猝灭使铝盐转化成可过滤的形式。过滤铝盐后，然后通过将滤过液浓缩至干燥而得到固体产物。这以500g的规格进行，并且以95％的产率产生产物。工序的第四步是将胺66与2，6-二异丙基苯基异氰酸酯偶联产生atr-101游离碱。这通过向66在thf中的混悬液中加入异氰酸酯(纯的)而实现。当反应完全时，将thf蒸发至特定的体积，加入丙酮，并且通过加入水使产物沉淀出来。然后，过滤和干燥提供16aa70040。在300g规格上，这产生产率为74％、纯度为97.5％的产物。工序的最后一步是将atr-101游离碱转化为相应的hcl盐(atr-101)。这通过向在ipa中的游离碱浆料中添加浓hcl而实现(浆料-到-浆料转化)。将得到的浆料浓缩以减少ipa的体积，并且加入mtbe作为对抗溶剂。然后，通过过滤分离产物，以94％的产率(400g规格)提供粗atr-101。随后将物质从meoh/mtbe中重结晶，以提供产率为84％、通过hplc确定的纯度为99.7％(后来发现不正确)的纯化的atr-101。然而，后来发现通过上述技术制备的这些批次被两种没有通过hplc解析的异构体杂质污染；即，2，4-二异丙基区域异构体和2-正丙基-6-异丙基异构体：由此，尽管相信以高纯度水平得到atr-101，但是事实上其以低得多的纯度水平(即，小于95％)产生，原因在于存在上述杂质(这些杂质仅在制备后通过更灵敏的hplc方法分析时溶解)。严重的是，发现要从atr-101中清除这些密切相关的杂质是非常困难的。实施例5大规模合成-高纯度发现实施例4的流程具有一些缺点，更重要的是其不能得到高纯度的atr-101。为了避免产生2，4-二异丙基区域异构体和2-正丙基-6-异丙基异构体，研究由2，6-二异丙基苯胺制备2，6-二异丙基苯基异氰酸酯的备选方案。进行初步实验，以评价文献流程(knolker等人，aciee，34(22)：2497-2500，1995)，该流程使用在mecn中的boc2o(1.4当量)和dmap(1.0当量)制备异氰酸酯。发现对称脲(显示在下)的形成是有问题的。在该实验中，在室温下进行反应导致仅形成这种杂质。进一步的实验(使用1.4当量的boc2o和1.0当量的dmap)揭示，通过确保反应温度保持在0℃一直到异氰酸酯形成完成可以避免对称脲的形成。还发现dcm是用于产生异氰酸酯的可接受的溶剂，但是使用thf产生不可接受量的对称脲，甚至在-20℃运行时也产生。由于可能在适当的溶剂中纯净地产生异氰酸酯，因此将其作为原位产生的中间体使用，而不是作为分离的中间体。(注意，这种策略需要在如下文讨论所应用之前纯化2，6-二异丙基苯胺)。首先，使用mecn作为反应溶剂，证明该方法的可行性。在使用上文所述的条件产生异氰酸酯后，加入66导致向atr-101游离碱的非常纯净的转化。然后，可以使用水性后处理而去除残余的dmap。为了简化所述后处理，使用dcm作为反应溶剂(避免与水混溶的反应溶剂)进行进一步的实验。在短时间优化后，将boc2o的化学计量减至1.05当量(以使boc-保护的66的偶然形成减至最少)，并将dmap(其作为催化剂起作用)的量减至10mol％。在这些条件下，主要反应物(2，6-二异丙基苯胺和66)可以以1∶1的摩尔比使用。还发现用于反应的溶剂的量存在灵活性，因为大部分的反应组分(除了66)在dcm中都是高度可溶的。另外，可以加入纯的boc2o和苯胺，或作为dcm溶液加入，这允许我们更容易定制反应体积，使其适合大规模生产中使用的设备。在得到优化的反应条件后，然后将注意力集中于鉴定分离atr-101游离碱的适当条件。溶剂的筛选表明meoh、ipa和mecn都是用于结晶atr-101游离碱的潜在候选物。与meoh相比，从ipa中结晶更好产生，并且发现使用mecn的混合物非常粘稠，因此最终选择ipa作为结晶溶剂。取决于物质的纯度，我们预计也可以使用水作为对抗溶剂以使回收最大化。还发现，一起避免水性后处理也可能是可行的，原因在于在反应中使用的dmap的量已经减少至仅有10mol％，并且除了残余的boc2o和t-buoh之外，应该没有其他副产物需要去除。为了这一目的，使用dcm作为反应溶剂进行实验，并且在反应结束时，将反应混合物从dcm中进行溶剂交换到ipa中。然后，容易地发生结晶，并且分离产物，产率为79％，没有残余dmap的污染。关于hcl盐形成的步骤，对ipa作为产生atr-101的结晶溶剂进行评价。尽管ipa给出高于90％的产率，但是关于形成异丙基氯的可能性的担忧导致对其他溶剂系统的评价。评价thf、dma和丙酮，并且它们都很好地起作用，并且选择丙酮作为最优的，原因在于其容易干燥，具有高ich界限，并且不贵。另外，游离碱可以容易地溶解在丙酮中，并且在加入hcl之前精炼过滤(与实施例4的流程相反，其是浆料-到-浆料转化)。上述实验使用商购的2，6-二异丙基苯胺，发现其包含不可接受的高水平的不需要的2，4-二异丙基区域异构体和2-正丙基-6-异丙基异构体。为了解决这个问题，发现可以将该商购的物质纯化为其盐酸盐，然后，异氰酸酯偶联可以随后使用苯胺盐酸盐替代相应的游离碱。这通过首先使苯胺盐酸盐在dcm/水性naoh中游离碱化而实现。然后，将得到的包含纯化的2，6-二异丙基苯胺的dcm溶液蒸馏至适合用在异氰酸酯偶联中的体积。所述蒸馏也用于确保溶液在使用之前是干燥的。由于2，6-二异丙基异氰酸酯(一种不容易商购得到的油)的纯化是行不通的，使用通过结晶为hcl盐对母本苯胺的纯化(见上述方案)。早期实验表明，需要的盐酸盐70可以从ipa中结晶出来。在开发工作过程中，观察到该物质的不同的多形形式。发现在室温向苯胺溶液中加入浓hcl导致一种特定形式的产物的结晶。如果然后将这种浆料加热回流(当全部或大部分物质溶解时)并且随后允许冷却至室温，得到不同的(并且较不可溶的)多形形式的物质。重要的是，第二种多形形式似乎以比第一种形式更高的纯度结晶。在该流程之后的验证实验中，从5体积ipa和1.05当量的hcl得到产率为72％的高纯度的(每种＜0.2％的不需要的异构体)的需要的70。在该实验中结合产物饼的mtbe洗涤，以促使产物的干燥。然而，遇到的一个小问题是在室温向苯胺在ipa中的溶液中加入hcl导致随着产物结晶形成不可接受的粘稠的混合物。出于这种原因，将hcl放大填装到苯胺在ipa中的热溶液(60℃)中。以这种方式，反应混合物将保持搅动。综合上述发现，产生高纯度atr-101的完全的大规模反应方案如下：烷化步骤向套层反应器容器中填装koh(薄片；2.5当量)和dmso(2.0体积)，产生混悬液。在分开的烧瓶中，在dmso(3.5体积)中制备苯胺(1.0当量)和1，4-二溴丁烷(1.05当量)的溶液。然后将该溶液经4.5小时缓慢经套管导入到koh混悬液中，同时保持反应温度在30℃以下。使用15℃的套层温度，观察到最大批次温度为27℃。在17-18℃搅拌过夜后，等分试样的hplc分析表明残余5％的腈。将该批次温热到25-30℃，并且加入另外的5mol％的1，4-二溴丁烷。再过一小时后，残余的腈的量＜3％，并且因此认为反应完全。将反应混合物过滤，以去除无机物质，并且将反应器和滤饼用dmso(1体积)洗涤。然后，将该批次在三个相等部分中进行后处理。将每个部分填装到干净的套层反应器容器中，然后缓慢加入h2o(13体积)，同时保持批次温度在30℃以下(约2小时，套层温度为10-15℃)。老化2小时后，通过过滤收集产物，并且将反应器和滤饼用冰冷的6∶1meoh∶h2o(3.33体积)洗涤。以这种方式分离每部分，然后在真空中在40-45℃干燥至恒重。这一流程产生产物71，总产率为78.3％，hplc纯度为～96％(具有～2％的二聚体杂质)。氢化步骤向套层反应器中填装71(1.0当量)、10％pd/c(7.0wt％)和meoh(10体积)。将反应器的内容物用n2钝化，然后用h2加压至6.0bar。套层开始时设置为18℃，以涵盖接着发生的最小的放热反应(exotherm)。2小时后，将套层温度调整为35℃，以实现可接受的反应速率。将反应混合物在这些条件下搅拌过夜。反应混合物的等分试样的hplc分析揭示，向中间体苯胺的转化是完全的(残余＜0.1％的羟胺中间体)。然后向反应器中填装acoh(1.0当量)、甲醛(在meoh中37％的溶液，2.7当量)和10％pd/c(3.0wt％)。将反应混合物再次用n2钝化，然后用h2加压至6.0bar并且加热至45℃。2小时后，hplc分析表明反应是完全的(残余＜0.1％的单甲基中间体)。将反应混合物用n2钝化，然后用通过celite过滤，同时仍保持在45℃。将反应器和滤饼用另外的meoh(2.0体积)洗涤，并且将得到的滤过物转移到干净的套层反应器容器中。然后，将溶液蒸馏至10体积的水平，同时保持釜中温度为40-50℃(套层温度为55℃，250托)。这在蒸馏结束时产生均相的溶液。然后，将溶液经1小时冷却至20℃。在～33℃开始发生结晶。然后经1小时逐滴加入水(5.0体积)，同时保持批次温度为～20℃。将得到的浆料老化处理过夜，然后过滤。将反应器和滤饼用冰冷的1∶1meoh∶h2o(5.0体积)洗涤。在真空中在40-45℃干燥至恒重后，得到72，产率为90％，hplc纯度为96.0％(2.8％的二聚体相关的杂质)。lah还原步骤将起始物质和thf(5.0体积)填装到套层反应器容器中，产生红色/橙色溶液。经10分钟的时间加入lah溶液(在thf中2.4m，1.5当量)，1并且然后将得到的溶液加热至45℃。发现反应在1.5小时后完成(残余0.9％亚胺中间体)。然后在制备中将反应混合物冷却至0℃进行淬灭。然后非常缓慢地添加包含50％naoh(1.5当量；0.56体积)和水(1.29体积)的溶液，同时保持批次温度为～0℃。所述添加需要1.5小时完成，并且导致形成致密的、颗粒状固体。然后将反应混合物温热到20℃并且过滤。使用另外的thf(2x3.5体积)洗涤反应器和滤饼。然后将滤过液转移到干净的套层反应器中，并且在真空中蒸馏至4体积，同时保持釜中温度为～40℃(套层50℃，300托)。然后，填装mecn(12体积)，将溶液再在真空中蒸馏至4体积，同时保持釜中温度为50℃。然后加入水(2.0体积)，同时保持温度在50℃。然后将溶液冷却至40℃并且接入晶种(0.1wt％)。然后将反应混合物经2小时冷却至20℃。混合物开始变得非常粘稠，在～30℃产生结晶的产物。一旦浆料冷却至20℃，经30分钟添加另外的水(4.0体积)，同时将批次温度保持在20℃。将浆料经1小时冷却至0℃，老化1小时，然后过滤。将反应器和滤饼用冰冷的1∶2mecn∶h2o(3.0体积)洗涤。然后，将产物在真空中在40-45℃干燥至恒重，以提供85.0％产率的73，其hplc纯度为97.2％(具有1.5％二聚体相关的杂质)。异氰酸酯偶联步骤通过水性后处理，苯胺盐酸盐酸盐70(1.0当量)被转化为相应的游离碱。将该物质在dcm(5.0体积)和10％水性naoh(5.0体积)的混合物中搅拌30分钟。分离有机相，然后用水(2x5.0体积)洗涤。然后将包含苯胺游离碱的dcm溶液在旋转蒸发器(rotovap)上浓缩至体积为2.0体积。然后向分开的烧瓶中填装dmap(10mol％)和dcm(3体积)。将得到的溶液冷却至0℃，然后通过套管经5-10分钟加入在dcm(1.0体积)中的boc2o(1.05当量)溶液，同时保持批次温度在0℃。然后通过套管经30分种加入苯胺溶液，同时保持批次温度在0℃。再搅拌另外30分钟后，通过hplc观察到向异氰酸酯的完全转化(残余0.6％苯胺)。向分开的烧瓶中填装73和dcm(3.0体积)。然后将得到的溶液冷却至0℃，并且由套管经20分钟添加异氰酸酯溶液，同时保持温度在0℃。10分钟后，hplc分析表明反应完全(残余0.3％73和2.1％异氰酸酯)。然后将反应混合物在真空蒸馏至体积为5.0体积，同时保持釜中温度为～30℃(40°套层，500托)。然后加入ipa(22体积)，并且将反应混合物在真空蒸馏至体积为20体积，同时保持釜中温度为50-60℃(套层65℃，350-200托)。当蒸馏完成时，将溶液冷却至40℃然后接入晶种(0.1wt％)。然后将溶液经1小时冷却至20℃，并且得到粘稠的浆料。然后经1.5小时加入h2o(7.3体积)，同时保持批次温度在20℃。然后将得到的浆料冷却至0℃，老化3小时，然后过滤。将反应器和滤饼用冰冷的1∶1ipa∶h2o(10体积)洗涤，将产物在真空中在40-45℃干燥至恒重。得到atr-101游离碱，产率为89％，hplc纯度为99.7％。hcl盐制备将游离碱溶解在丙酮(7.0体积)中并且精炼过滤。使用另外的丙酮(3.0体积)冲洗滤器并将溶液转移到反应器容器中。然后经10分钟加入浓hcl(1.3当量)，同时保持温度在20℃。在添加的中途，产物开始结晶。在添加完成后，允许得到的浆料老化2小时，然后过滤。将反应器和滤饼用丙酮(3.0体积)洗涤，然后将产物在真空中在40-45℃干燥至恒重。干燥完成后，得到92.5％产率的atr-101，hplc纯度为99.7％。实施例6制备含有atr-101的片剂可以按照下文所述的流程制备含有500mgatr-101(作为游离碱)的片剂，并且示例性的片剂的组成在表1和2中列出。a.高剪切力湿法制粒1.称重atr-101。2.称重甘露醇，并且过no.30目筛子。3.称重微晶纤维素、交联羧甲纤维素和预胶化的淀粉，并且过no.30目筛子。4.使用v-掺混机制备内加(intragranular)赋形剂(上述成分2和3)和atr-101的成粒前混合物。5.称重羟丙甲纤维素并且搅拌溶解在水中。6.使用高剪切力成粒机将成粒前混合物用羟丙甲纤维素溶液湿法成粒。7.过no.7目筛子使湿性颗粒不成团。然后将颗粒在流化床干燥机中干燥。干燥的终点通过干燥失重(lod)确定。b.加入外加(extragranular)赋形剂1.将干燥的颗粒过no.20目筛，并且重新引入到v-掺混机中。1.将交联羧甲纤维素和硬脂酸镁过no.30目筛，并且加入到v-掺混机中。2.然后将干燥的颗粒和外加赋形剂混合。c.压缩1.使用重力输送的旋转式压片机(gravityfedrotarytabletpress)压缩片剂核心。d.薄膜包衣1.可以使用适当的包衣溶液将核心片剂包衣。表6代表性的500mgatr-101片剂的成分成分mg/片剂atr-101(作为游离碱)500mg甘露醇150mg101型微晶纤维素170mg交联羧甲纤维素钠20mg预胶化的淀粉50mg羟丙甲纤维素30mg102型微晶纤维素50mg硬脂酸镁20mg水(在加工过程中去除)--以与上述相似的方式制备下述包衣片剂。表7代表性的500mgatr-101片剂的成分成分mg/片剂atr-101(作为游离碱)500mg甘露醇54.3mg101型微晶纤维素54.3mg交联羧甲纤维素钠36.2mg预胶化的淀粉14.5mg羟丙甲纤维素14.5mg硬脂酸镁7.2mg白色欧巴代ii(opadryiiwhite)21.7mg水(在加工过程中去除)--实施例7利用胃酸化的增强的暴露为了检验按照实施例6制备的atr-101片剂的药物代谢动力学和暴露，在用五肽胃泌素(pentagastrin)预处理以降低胃ph或用法莫替丁(famotidine)预处理以提高胃ph的狗中进行体内研究。在两个处理中使用同龄群组的狗，并且在治疗组之间包括5天的洗胃。在给药前，将雄性小猎犬(约6.5-12.5kg，n＝6)禁食过夜，并采集前4小时的血液样品。对于五肽胃泌素组，在测试制品施用前16-22分钟，将动物用单次肌内注射五肽胃泌素(0.06mg/ml，剂量水平为6μg/kg，剂量体积为0.01ml/kg)注射。对于法莫替丁组，在片剂施用前59-60分钟，将动物用20mg法莫替丁的单次口服片剂剂量预处理。在片剂施用后，每个动物通过口管饲接受30ml自来水。将动物用口服施用的单片125mgatr-101片剂处理。该片剂如上文实施例6所述制备，并且包含表6中列出的成分，但是atr-101的量是125mg(作为游离碱)而不是500mg，其余的成分按相同的重量百分数减少。对两个处理组，在0小时(给药前)、给药后1、2、4、8和24小时采集用于血浆的pk血液样品。通过颈静脉将样品(～1ml)采集到包含k2edta的采血管中，在冷冻(2-8℃)条件下离心，收集血浆并且在-60至-90℃冷冻。通过lc/msms确定atr-101浓度。与用法莫替丁预处理相比，在用五肽胃泌素预处理的狗中，atr-101表现出57％的系统暴露增加，这表明在atr-101的口服施用中酸性的胃环境是有利的。实施例8粒度研究对十只颈静脉插管的雌性sprague-dawley大鼠的组以约3mg/kg施用单次口服剂量的各种atr-101制剂，如表8所示，其中所述大鼠约13周龄，具有225至275克的目标重量。atr-101以9号明胶胶囊(组1-3)或通过管饲法(组4)施用。表8制剂在给药后1、2、4和8小时将血液样品采集到包含k2edta的管中。表9显示在大鼠中关于不同粒度的atr-101制剂得到的cmax和暴露(auc0-24hr)。如图9中所示，随着粒度减小，观察到暴露增加。使用d(0.9)＜5μm的粒度的制剂观察到最大暴露。在具有d(0.9)＜1μm的粒度的纳米-研磨的制剂的暴露中没有进一步增加。表9不同粒度的cmax和auc0-24具有较小粒度的制剂表现出增加难度的操作特征。纳米-研磨的制剂表现出低堆密度和非常差的流动特征。另外的研究评估了该片剂制剂的药物负载能力约为25％，而对于粒度为d(0.9)＜18.5的制剂，药物负载能力为～70％。这种制剂的高(70％)药物负载能力的确令人惊讶，并且表明药物的物理-机械特性和/或表面特性导致更高的粘聚现象。本说明书中引用的和/或申请数据表中列出的全部美国专利、美国专利申请公布、美国专利申请、外国专利、外国专利公布和非专利公布都通过引用完全结合在本文中，包括于2014年9月26日提交的美国临时专利申请号62/055,964，和2014年12月1日提交的62/086,153。在必要时，实施方案的各个方面可以修改，以使用各个专利、申请和公布的理念，从而提供其他的实施方案。尽管在本文中公开了本发明的多个实施方案，但是，按照本领域技术人员的公知常识，可以在本发明的范围内进行多种修改和改进。所述改进包括用已知的等价物替换本发明的任意方面，从而以基本上相同的方式实现相同的结果。本说明书中引用的任意在先的文件和全部公开，包括但不限于专利和专利申请，如同指示每个单独的公布专门而且单独地通过引用结合在本文中并且如同在本文中充分描述一样通过引用结合在本文中。本发明包括基本上如本文之前描述的并且参考实施例和附图的所有实施方案和变化形式。当前第1页12当前第1页12