本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一种中药组合物在制备预防和/或治疗手足口病的药物中的应用。
背景技术：
手足口病是由肠道病毒引起的传染病，引发手足口病的肠道病毒有20多种(型)，其中以柯萨奇病毒a16型(coxa16)和肠道病毒71型(ev71)最为常见，病毒经口咽部侵入人体后，首先与宿主口咽部至下消化道黏膜上皮细胞膜蛋白受体结合，植入宿主细胞并脱去衣壳，释放rna至宿主细胞内，进行转录、复制和增殖。随后病毒由原发病灶经淋巴通道转移到局部淋巴组织增殖，继之进入血液循环形成第一次病毒血症；病毒随血流扩散进入单核吞噬细胞中增殖，然后播散至带有病毒受体的全身器官，进一步增殖并再一次释放入血形成第二次病毒血症，引起相应的临床症状。
临床上多进行抗病毒治疗，如，药物利巴韦林通过损害病毒rna和蛋白合成，使病毒的复制与传播受抑，从而达到治疗手足口病的作用，但大多数西药都可能导致严重的副作用。
申请号为cn200810117302.1的中国专利公开了一种中药组合物在制备治疗手足口病的药物中的应用。该中药组合物是由连翘、金银花、麻黄、苦杏仁等药味组成，该中药组合物在实验例中仅对ev71型病毒表现出抑制作用，限制了其应用范围。
有鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种中药组合物在制备预防和/或治疗手足口病的药物中的应用，该中药组合物副作用小，疗效快。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种中药组合物在制备预防和/或治疗手足口病的药物中的应用，所述的中药组合物是由下述原料药制成的：
优选的，所述的中药组合物是由下述原料药制成的：
所述的中药组合物可以加入辅料制成药剂学意义上的任何剂型，含喷雾剂、片剂、胶囊、糖浆剂、颗粒、滴丸、丸剂或贴片等，优选喷雾剂、片剂或胶囊，更优选喷雾剂。
所述的中药组合物可以加入辅料甜菊素1-5重量份、聚山梨酯15-90体积份、95％乙醇6-25体积份制成喷雾剂。
优选的，所述的中药组合物可以加入辅料甜菊素4重量份、聚山梨酯30体积份、95％乙醇12体积份制成喷雾剂。
本发明中，乙醇的百分比指的是体积百分比。
中医方面，尽管各医家有关手足口病的病因病机未完全达成一致，但是基本认为手足口病的病因为外感时邪疫毒，内伤湿热蕴结，心火炽盛。本发明原料药中的主要成分均具有清热解毒去火的功效，如黄芩、射干、金银花、玄参。根据中医药理，可认为本发明的中药组合物对手足口病有一定的治疗效果。本发明人还通过体外抑制试验及临床试验，也证明了本发明的中药组合物可用于治疗手足口病。
上述剂型可参照现有技术的常规工艺制备得到。
作为优选方案，本发明所述的喷雾剂的制备方法为：金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液180-220体积份，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次0.5-3小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至40-90℃相对密度为1.05-1.40，加40-95％乙醇使含醇达40-80％，充分搅拌，静置12-36小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至40-90℃相对密度为1.05-1.40的清膏；薄荷脑、冰片加适量70-95％乙醇溶解，再加聚山梨酯搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；甜菊素加适量热水溶解，冷至室温，加入上述药液中，加水至1000体积份，搅匀，滤过，灌装，即得喷雾剂。
更优选，所述的喷雾剂制备方法为：金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液190体积份，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.25，加70％乙醇使含醇达78％，充分搅拌，静置15小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至75℃相对密度为1.26的清膏；薄荷脑、冰片加适量78％乙醇溶解，再加聚山梨酯搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；甜菊素加适量热水溶解，冷至室温，加入上述药液中，加水至1000体积份，搅匀，滤过，灌装，即得喷雾剂。
以上所述重量份/体积份与g/ml相对应。
所述的手足口病为由柯萨奇病毒a16型和/或肠道病毒71型引起的。ev71和coxa16两种病毒均是手足口病常见的致病原因。
与目前临床上采用的抗病毒药相比，本发明的中药组合物避免了西药的一些副作用，又克服了传统中药疗效缓慢的缺陷。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1、喷雾剂
处方：
制备工艺：
金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液190ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.25，加70％乙醇使含醇达78％，充分搅拌，静置15小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至75℃相对密度为1.26的清膏；薄荷脑、冰片加适量78％乙醇溶解，再加聚山梨酯搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；甜菊素加适量热水溶解，冷至室温，加入上述药液中，加水至1000ml，搅匀，滤过，灌装，即得喷雾剂。
实施例2、片剂
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液200ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至70℃相对密度为1.20，加60％乙醇使含醇达70％，充分搅拌，静置26小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至70℃相对密度为1.20的清膏。薄荷脑、冰片加适量80％乙醇溶解，再加聚山梨酯85ml搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀。西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成片剂。
实施例3、胶囊剂
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液200ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至70℃相对密度为1.20，加60％乙醇使含醇达70％，充分搅拌，静置26小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至70℃相对密度为1.20的清膏。薄荷脑、冰片加适量80％7醇溶解，再加聚山梨酯85ml搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀。西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成胶囊剂。
实施例4、糖浆剂
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液180ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.05，加40％乙醇使含醇达40％，充分搅拌，静置12小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至10℃相对密度为1.05的清膏；薄荷脑、冰片加适量70％乙醇溶解，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成糖浆剂。
实施例5、颗粒
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液220ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至90℃相对密度为1.40，加95％乙醇使含醇达80％，充分搅拌，静置36小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至90℃相对密度为1.40的清膏；薄荷脑、冰片加适量95％乙醇溶解，再加聚山梨酯搅匀后，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成颗粒。
实施例6、滴丸
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液180ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.05，加40％乙醇使含醇达40％，充分搅拌，静置12小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至10℃相对密度为1.05的清膏；薄荷脑、冰片加适量70％乙醇溶解，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成滴丸。
实施例7、丸剂
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液180ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.05，加40％乙醇使含醇达40％，充分搅拌，静置12小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至10℃相对密度为1.05的清膏；薄荷脑、冰片加适量70％乙醇溶解，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成丸剂。
实施例8、贴片
处方：
制备工艺：
以上十二味，金银花、防风二味加水蒸馏，收集蒸馏液180ml，蒸馏后的水溶液滤过，另器保存；药渣与黄芩、射干、山豆根、玄参、麦冬、甘草6味加水煎煮三次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.05，加40％乙醇使含醇达40％，充分搅拌，静置12小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇，浓缩至10℃相对密度为1.05的清膏；薄荷脑、冰片加适量70％乙醇溶解，缓缓加入上述蒸馏液中，边加边搅拌，再加入上述清膏搅匀；西瓜霜、硼砂加适量热水溶解，滤过；经常规工艺制成贴片。
试验例1、本发明的中药组合物对ev71和coxa16病毒抑制作用的考察
1、实验材料
1.1药物
受试药物:本发明实施例1、2所得药物，以培养基溶解，以0.22μm滤头过滤，4℃保存。
阳性对照药物:利巴韦林，购自广东肇庆星湖生物科技股份有限公司，批号：l071051，以培养基溶解，以0.22μm滤头过滤，4℃保存。
1.2细胞
非洲绿猴肾细胞(vreo)引自购买于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。
1.3病毒
ev71和coxa16为实验室保存病毒。
2、实验方法
2.1细胞毒性试验(mtt法)
96孔板单层细胞用pbs洗涤1次，弃上清，每孔加入100μl2倍梯度稀释的药物。空白对照组和正常细胞组每孔加入等体积培养液，34℃、5％co2条件下培养2-5天。随后每孔加入浓度为5mg/ml的mtt溶液20μl，继续孵育4小时。弃上清，每孔加入100μldmso，低速振荡5分钟，使结晶物充分融解。选择490nm波长，在酶联免疫仪上测定吸光值。计算抑制率。抑制率＝(正常4组平均od值-药物组平均od值)/(正常组平均od值-空白组平均od值)×100％。用prismnon-regressionanalysis计算药物半数毒性浓度(tc50)。
2.2抗病毒药效试验(cpe/mtt法)
96孔板单层细胞以pbs洗涤1次，加入含约100tcid50的病毒稀释液100μl/孔，37℃、5％co2培养箱中孵育2小时，弃去病毒液，加入2倍梯度稀释的药物，每个浓度设置4个复孔，以最大无毒浓度为药物起始浓度，在34℃、5％co2培养箱中孵育2-5天。其中，ev71为3天，coxa16为4天。每天记录细胞病变(cpe)。记录cpe后，用mtt染色，进行od值测定。用prismnon-regressionanalysis计算药物半抑制浓度(ic50)，计算选择指数(si)＝tc50/ic50。
3、实验结果
cpe法显示，本发明实施例1所得药物对ev71及coxa16的si分别为1.98和1.82，实施例2所得药物对ev71及coxa16的si分别为2.01和1.87，本发明实施例1、2所得药物抗病毒强度接近(具体见表1)，mtt法验证得到与cpe法接近的抗病毒强度(具体见表2)。
本发明实施例1、2所得药物对ev71及coxa16的si均大于1.00，说明实施例1、2所得药物对ev71和coxa16均有一定的体外抑制作用，而本发明实施例1、2所得药物剂型不同但原料药相同，且抗病毒强度接近，说明本发明的中药组合物对ev71和coxa16均有一定的体外抑制作用，可用于治疗手足口病。
表1ev71和coxa16的体外抑制作用(cpe法)
表2ev71和coxa16的体外抑制作用(mtt法)
试验例2、本发明的中药组合物治疗手足口病的临床疗效观察
本发明参照“干扰素联合炎琥宁治疗小儿手足口病的临床效果观察”【戴蔷蕾，李晶.干扰素联合炎琥宁治疗小儿手足口病的临床效果观察[j].当代医学，2011，288：12—14】中的方法对本发明实施例1所得药物及药物利巴韦林进行了临床测定。结果如下。
2.1各组患儿治疗后临床表现比较
观察并记录各组患儿治疗后退热时间、手足疱疹消退时间、口腔溃疡愈合时间及平均住院时间，并行t检验，见表3。
a组：采用药物利巴韦林治疗；
b组：采用本发明实施例1所得药物治疗，用法用量：喷于患处，一次5揿，一日12次；
表3各组患儿治疗后临床表现比较(d)
由表3可见，(1)退热时间比较：a组与b组有显著性差异，p＜0.05，具有统计学意义。(2)手足疱疹消退时间比较：a组与b组有显著性差异，p＜0.05，具有统计学意义。(3)口腔溃疡愈合时间比较：a组与b组有显著性差异，p＜0.05，具有统计学意义。(4)平均住院时间比较：a组与b组有显著性差异，p＜0.05，具有统计学意义。
2.2各组患儿治疗后临床效果比较
记录各组患儿治疗后的临床效果，将显效和有效病例相加，计为总有效病例，并行x2检验，见表4。
表4各组患儿治疗后临床效果比较【n(％)】
由表4可见，治疗后各组在总有效方面比较：a组与b组有显著性差异，p＜0.05，具有统计学意义。
由表3及表4的数据可知，与利巴韦林相比，本发明实施例1所得药物对手足口病的治疗效果更好,即本发明的中药组合物对手足口病有很好的治疗效果。
试验例3、本发明的中药组合物对手足口病的预防效果
某幼儿园，在手足口病高发期出现手足口病患儿，其余同学都有患病及被传染的可能。一部分同学不服用任何相关药物，作为对照组，一部分同学向口腔内挤喷本发明实施例1所得药物，每次向口腔内挤喷药液适量,一日3-4次，作为预防组，两组同学无统计学意义，10天后，对照组同学手足口病发病率为30％，预防组同学手足口病发病率仅为5％，可见，本发明实施例1所得药物在预防手足口病发病方面具有很好的效果,即本发明的中药组合物对手足口病有很好的预防效果。
以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本发明的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。