一种用于美容的制剂及其制备方法与流程

文档序号:12344478阅读:781来源:国知局

本发明涉及医学整形美容技术领域,特别涉及一种用于美容的制剂及其制备方法。



背景技术:

对于皮肤组织损伤和缺损的整形美容治疗,主要是采用软组织填充的方法进行修复。目前,在临床上用于软组织整形的填充材料,大多是人工合成材料:凝胶植入体、硅树脂等。一般人工合成材料分为临时性和永久性的材料,永久性材料缺点是其和人体组织相容性差,长期在人体组织会成为异物,并且产生慢性炎症、硬化等诸多问题;临时性材料在体内维持时间短,在半年到一年左右会被机体吸收,只能产生短期效果。近年来,在临床的实际应用中使用自体脂肪移植,用自体脂肪组织作为填充材料,但是存在自体脂肪组织存活率低的现象。

细胞因子是人体外周血产生的,对促进成纤维细胞的代谢和胶原蛋白的形成发挥着重要功能。细胞生长因子能促进皮肤组织的生长繁殖,它通过与细胞表面特异受体结合,调控皮肤上皮,内皮和基质细胞的分裂、繁殖和生长分化,促进细胞代谢,增强氧化作用;能促进与皮肤损伤有关细胞的迅速生长繁殖,并调节细胞间基质的合成、分泌及分解;能促进角质层细胞的再生,加速皮肤角质层和基质层的修复,促进人体皮肤细胞的生长;能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢,具有延缓皮肤细胞衰老、促进表皮细胞的修复和生长作用,使皮肤光滑丰润,但是,单纯从外周血中分离出细胞因子数量量较少,难以满足修复皮肤组织损伤和缺损的需要。



技术实现要素:

有鉴于此,为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于美容的制剂及其制备方法。能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢,促进表皮细胞的修复和生长。

为实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:

一种用于美容的制剂,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为1~3:1~4。

进一步,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为1.5:2。

进一步,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为2:2.5。

进一步,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为2:3.5。

进一步,所述含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.3ml~0.8ml。

本发明还提供一种细胞因子的制备方法,包括以下步骤:

ⅰ)血细胞的采集:

1)用血细胞分离机采集血细胞80ml~100ml;

2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞;

3)采用无血清培养液洗涤2~5次,获得纯度在90%以上的细胞,细胞数量需达到1x108个~3x108个;

ⅱ)细胞的培养

a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至1x106ml~4x106ml,置于培养瓶内;

b)37度,5%CO2培养箱中孵育2h,以使细胞贴壁;

c)收集悬浮细胞,用无血清培养液调整细胞浓度至1~2x106毫升;

d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养,刺激细胞的生长和增殖;

e)在培养的第7天,收获细胞,此细胞数量应达到1x109个以上;

f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子,增加细胞因子的分泌量。

本发明的有益效果为:通过体外分离,培养和扩增外周血液的细胞,并刺激这些细胞大量分泌细胞因子,和脐带血混合后,再次输入机体内以实现修复。

1)本发明细胞因子体外扩增和富集技术,通过和脐带血的配方设计,完成体外扩增自体细胞因子在整形美容的使用,实现了自体细胞因子治疗技术的突破。操作方法简单、安全,患者易于接受,避免了细胞因子活性的损失,可获得永久性的整形,疗效显著且持续时间长。

2)本发明使用了脐带血,将体外扩增自体细胞因子混于脐带血中,填充到治疗部位。细胞因子可以促进皮肤下缺损和损伤的组织再生,而脐带血可以为再生的组织提供一个生长的微环境。由于皮肤下缺损和损伤的组织的再生,因此效果是永久性的。

3)本发明采用体外扩增自体细胞因子进行整形美容治疗,其促进机体再生的作用,无排斥反应,疗效显著。

4)自体细胞因子可以进行体外大量扩增,来源充足,而脐带血可以从脐带血库获得。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,下面结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

实施例一

一种用于美容的制剂,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为1.5:2。

其中,剂带血来源于健康新生儿的脐带。

此外,含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.4ml。

一种细胞因子的制备方法,包括以下步骤:

ⅰ)血细胞的采集:此血细胞采集患者自身的外周血细胞。

1)用血细胞分离机采集血细胞80ml;

2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞;

3)采用无血清培养液洗涤2次,获得纯度在90%以上的细胞,细胞数量需达到1x108个;

ⅱ)细胞的培养

a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至1x106ml,置于培养瓶内;

b)37度,5%CO2培养箱中孵育2h,以使细胞贴壁;

c)收集悬浮细胞,用无血清培养液调整细胞浓度至1x106毫升;

d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养,刺激细胞的生长和增殖;

e)在培养的第7天,收获细胞,此细胞数量应达到1x109个以上;

f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子,增加细胞因子的分泌量。

实施例二

一种用于美容的制剂,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为2:2.5。

含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.6ml。

一种细胞因子的制备方法,包括以下步骤:

ⅰ)血细胞的采集:

1)用血细胞分离机采集血细胞90ml;

2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞;

3)采用无血清培养液洗涤3次,获得纯度在90%以上的细胞,细胞数量需达到2x108个;

ⅱ)细胞的培养

a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至2x106ml,置于培养瓶内;

b)37度,5%CO2培养箱中孵育2h,以使细胞贴壁;

c)收集悬浮细胞,用无血清培养液调整细胞浓度至1.5x106毫升;

d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养,刺激细胞的生长和增殖;

e)在培养的第7天,收获细胞,此细胞数量应达到1x109个以上;

f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子,增加细胞因子的分泌量。

实施例三

一种用于美容的制剂,包含如下按体积比计的组分:含细胞因子的生理盐水混悬液:脐带血为2:3.5。

一种用于美容的制剂,含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.8ml。

一种细胞因子的制备方法,包括以下步骤:

ⅰ)血细胞的采集:

1)用血细胞分离机采集血细胞100ml;

2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞;

3)采用无血清培养液洗涤4次,获得纯度在90%以上的细胞,细胞数量需达到3x108个;

ⅱ)细胞的培养

a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至4x106ml,置于培养瓶内;

b)37度,5%CO2培养箱中孵育2h,以使细胞贴壁;

c)收集悬浮细胞,用无血清培养液调整细胞浓度至2x106毫升;

d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养,刺激细胞的生长和增殖;

e)在培养的第7天,收获细胞,此细胞数量应达到1x109个以上;

f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子,增加细胞因子的分泌量。

使用方法:将上述美容制剂注射在缺损部位的皮下,注射1-2mL,使缺损部位充盈恢复。

18例面部皮肤组织缺损者使用上述方法注射该美容制剂,结果如下:

1)其中6例:年龄为30岁的女性,面部皮肤组织缺损较严重,使用该美容制剂后,缺损部位饱满,且融合度高,且为永久性;

2)其中6例:年龄为50岁的女性,面部皮肤松弛,使用该美容制剂后,皮肤明显出现光滑,表皮细胞的修复和生长速度明显加快;

3)其中6例:年龄为50岁的男性,面部皮肤松弛且皱纹较深,使用该美容制剂后,皱纹逐渐变浅且角质层细胞再生速度明显加快。

以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

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