用于治疗子宫内膜异位的N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸的制作方法

本申请是申请日为2010年9月24日和发明名称为“用于治疗子宫内膜异位的n-乙酰基-l-半胱氨酸”的201080053396.6号发明专利申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物，其用于治疗子宫内膜异位(endometriosis)和与子宫内膜异位相关的适应症。

背景技术：

子宫内膜异位是引起美国妇科住院治疗的第三大原因，且估计影响着一千四百万欧洲女性。常用于表示子宫内膜异位发病率的数据有：所有育龄女性的5-10％和所有女性的30-40％具有不孕问题。该疾病特征在于，子宫腔外存在组织结构与子宫内膜(在哺乳动物子宫内衬垫的膜)相同的组织。该错位组织发展为生长物或损伤(也称植入物或结节(nodule))，其对于月经周期的响应与子宫内膜组织的方式相同：每个月该组织形成、破坏和脱落。月经期间血液从子宫流出，而从子宫内膜生长物脱落的血液和组织没有流出的通道。这导致内出血、血管和损伤组织的破坏，以及所引起的慢性炎症。

子宫内膜异位的两种最常见症状是疼痛和不孕。症状可包括：痛经，即经期前后的疼痛，以及性交期间或之后的疼痛；骨盆慢性疼痛或腰背、肠疼痛；经期量过多或经期延长(heavymenstrualperiods)，或经期之间的滴血和出血；经期期间肠运动疼痛或小便涩痛；不孕。

子宫内膜异位的病因目前仍为未知，且一些理论提出了异位迁移和子宫内膜细胞的植入的原因。目前的理论将子宫内膜异位的发生与原始组织(正常位置的子宫内膜)本身状况的改变联系起来。目前本领域内越来越认可的是由于正常位置的子宫内膜细胞的紊乱而引起的子宫内膜瘤的不受控制的迁移、植入和生长所引起。

目前尚不能治愈子宫内膜异位。存在多种治疗选择，且有办法将该病症引起的症状最小化。除了用镇痛药治疗疼痛，子宫内膜异位的治疗主要涉及卵巢的雌激素分泌功能抑制，因此涉及对多种实体的激素治疗，直至在很多重症病例中引起绝经。用手术的办法除去位于直肠阴道隔或在其他位置(即膀胱和肠)的子宫内膜瘤、粘着、腹膜植入和深度损伤，并减轻疼痛。然而，药物和手术治疗后都会复发。患有子宫内膜异位的年轻女性们通常面临着关系到未来生育的艰难抉择。意在抑制卵巢功能的激素治疗，与妊娠是不相容的。

n-乙酰基-l-半胱氨酸(本文称为nac)是一种公知的药物，其主要在对乙酰氨基酚中毒的治疗中用作溶粘蛋白剂。近年来，其也公认具有其他有益性质，例如作为抗炎和抗增殖药物，且已建议用于治疗多种不同病症和症状，例如精神分裂症、糖尿病和癌症。

在此前的探索潜在的与子宫内膜异位相关的分子机制的研究中，已表明子宫内膜异位之中细胞增殖率的增加，可能是由自由基或ros引起的子宫内膜异位的组织的氧化应激所导致。因此已表明对于子宫内膜异位的新的治疗策略可基于抗氧化剂和ros清除剂，例如nac。

现有技术

charlotte等人提出(theamericanjournalofpathology(2009)，vol.175，no.1，第225-234页)，氧化应激可能引起或加强子宫内膜异位之中子宫内膜异位的细胞的增殖。因此建议将抗氧化剂(例如nac)用于治疗子宫内膜异位。对于子宫内膜异位患者的原发细胞系以及植入人源子宫内膜异位组织的小鼠模型的研究发现，nac消除了氧化应激的征兆，并增加了各模型中的增殖。因此建议将抗氧化剂例如nac用于子宫内膜异位的安全和有效的治疗。

nastaranfoyouzi等人还指出(fertilityandsterility(2004)，vol.82，suppl.3，第1019-1022页)，抗氧化剂例如nac可用于治疗子宫内膜异位。该文章公开了一项体外研究，其中用不同抗氧化剂例如nac处理分离自健康受试者以及子宫内膜异位患者的细胞。所有抗氧化剂均抑制了子宫内膜间质细胞的增殖。

在yanwo和sun-weiguo(gynecologicandobstetricinvestigation(2006)，vol.62，no.4，第193-205页；europeanjournalofobstetrics&gynecologyandreproductivebiology，(2008)，vol.137，第198-203页)；专利文献us2007/0287676a1)的研究中，对于永生的人子宫内膜间质细胞中nac对于增殖和细胞周期终止的作用进行了研究并与其他用于治疗子宫内膜异位的物质相比较。表明nac对增殖和细胞周期终止均具有一定作用，尽管与组蛋白脱乙酰基酶抑制剂相比并未达到所声称的作用。

在s.estany等人(journalofreproductiveimmunology(2007)，vol.75，第1-10页)的研究中表明，通过防止h2o2诱导的细胞毒性，nac和其他抗氧化性物质对于培养中的子宫内膜细胞的抗氧化活性增加了被氧化细胞的活力。

其他相关文献包括us2003/0190381a1，wo2004/096206a2，us6239137b1，us2003/0119875a1，us2004/0014672a1和wo2005/048822a2。

其他公开nac在癌症治疗中分子作用的背景技术包括：t.parasassi，等人(celldeathanddifferentiation(2005)，vol.12，no.10，第1285-1296页)；e.k.krasnowska等人(freeradicalsbiologyandmedicine2008，45(11):1566-72)和a.c.gustafsson等人(bmccancer(2005)，5:75)。

发明目标

据本发明者所知，nac治疗子宫内膜异位的临床结果在现有技术中尚未确定，对于治疗子宫内膜异位或将nac用于治疗与子宫内膜异位相关的适应症也没有提出一个有效的剂量治疗方案。

因此本发明的一个目标在于提供解决上述问题的方案，即提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸(nac)的药物组合物用于治疗在人和哺乳动物中的子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的适应症。本发明的一个方面是提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸(nac)的药物组合物，其以有效剂量治疗方案而使用，用于在哺乳动物(包括人)中治疗子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的症状。

技术实现要素：

前文已表明，nac可用于新的子宫内膜异位治疗策略中，该策略是基于将其用作抗氧化剂和ros清除剂。本发明的发明者已表明，nac诱导分子和细胞的变化，其不仅抑制了增殖，也引起患病组织向正常组织分化。

这些发现引领本发明的发明者提出了在人或哺乳动物患者中治疗子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的适应症的新的nac处方。此外提供了在子宫内膜异位的治疗中nac的有效剂量范围。在本发明的一个实施方案中，所述进行处方的治疗方案可用于例如控制疼痛症状(痛经、性交困难和非周期性慢性骨盆痛)的频率和强度，减小子宫内膜异位损伤的尺寸并最终使之消失，减少手术后复发和/或提高生育能力。该治疗基本无副作用，且特别是该治疗不妨碍妊娠。

本发明提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物，其用于治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物(包括人)，其中所述组合物用于脉冲式或间歇式口服给药，给药时间周期为两个月或两个月以上，n-乙酰基-l-半胱氨酸在给药日的剂量为20至90mg/kg/天。

在一个实施方案中，本发明提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述组合物用于连续给药3-5天然后中断2-4天。在另一实施方案中，所述含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物用于连续给药1-3天，然后中断1-2天。

在一个实施方案中，本发明提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述组合物在给药日以30至60mg/kg/天的n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量给药。在另一实施方案中，所述药物组合物在给药日以30至45mg/kg/天的n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量给药。

在一个实施方案中，本发明提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述药物组合物避光(protectedfromlight)。在另一实施方案中，所述药物组合物为水溶性片剂。在又一实施方案中，所述药物组合物含有碳酸氢钠。在一个实施方案中，所述药物组合物为缓释制剂和/或胃保护制剂。

在一个实施方案中，本发明提供含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物，其用于治疗由子宫内膜异位引起的疼痛。在另一实施方案中，所述药物组合物用于治疗由子宫内膜异位引起的不孕。在又一实施方案中，所述药物组合物用于在腹腔镜检查或手术之前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物。在一个实施方案中，所述药物组合物用于在腹腔镜检查或手术后治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物以防止复发。

在一个方面中，本发明提供治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物的方法，其包括将含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物口服给药于所述哺乳动物，采用脉冲式或间歇式剂量治疗方案，给药时间周期为两个月或两个月以上，n-乙酰基-l-半胱氨酸在给药日的剂量为20至90mg/kg/天。在所述方法的一个实施方案中，连续给药所述药物组合物3-5天然后中断2-4天。在另一实施方案中，连续给药所述药物组合物1-3天，然后中断1-2天。

在所述方法的一个实施方案中，在给药日n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量为30至60mg/kg/天。在所述方法的另一实施方案中，在给药日n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量为30至45mg/kg/天。

在一个实施方案中，该方法用于治疗子宫内膜异位引起的疼痛。在其他实施方案中，该方法用于治疗子宫内膜异位引起的不孕，用于在腹腔镜检查或手术之前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物，或用于在腹腔镜检查或手术之后的治疗以防止子宫内膜异位损伤的复发。

附图说明

下文将参照附图更详细地阐释本发明，其中：

图1表明nac对于小鼠中子宫内膜异位损伤生长的抑制作用，如实施例1所述。显示植入后21天每份对照(n＝10)和经nac治疗的(n＝10)动物的平均总重及其标准误差。显著性p<0.05。在直方图上方的插图中，显示对照(a)和经nac治疗的(b)病例繁殖的子宫内膜瘤的分别的图像。条：1cm。

图2a表示半定量rt-pcr的分别的凝胶，如实施例1所述。图2b表明在经nac治疗的小鼠的包囊(cyst)中cox-2和mmp-9表达减少，如实施例1所述。显示5例对照和5例经nac治疗的小鼠的平均半定量rt-pcr值及其标准误差。

图3表示e-钙粘蛋白在经nac治疗的小鼠的包囊中的重新定位，如实施例1所述。显示对照(a和b)和经nac治疗的小鼠(c和d)的子宫内膜瘤e-钙粘蛋白免疫染色的分别的图像。在对照样品中，整个上皮细胞的细胞质中可观察到弥散性褐色斑点，而在经nac治疗的样品中该斑点限制于细胞-细胞相接触的水平。初始放大40倍。

图4表明在经nac治疗的动物的包囊中cox-2染色减少，如实施例1所述。显示对照小鼠(a-c)和经nac治疗的小鼠(d-f)的包囊免疫组织化学染色的分别的图像。在对照样品中，在一些区域检测到存在明显的褐色斑点，而这在经nac治疗的样品中几乎检测不到。初始放大40倍。

图5表示在经nac治疗的动物的包囊中ki-67染色减少，如实施例1所述。显示对照小鼠(a-c)和经nac治疗的小鼠(d-f)的包囊的免疫组织化学染色的分别的图像。箭头指向染色的增殖细胞。初始放大40倍。

图6为现有技术的图示，表示用nac治疗增殖细胞时的若干作用机理和经nac治疗对癌细胞的代谢作用，以癌细胞为例。这些机理集中于细胞终末分化。本发明的实施例也显示了当根据本发明的nac用于治疗子宫内膜异位时，会产生至少一些所述作用。

图7报道了对总计64位女性(33位经nac治疗，31位为未治疗的对照)进行的临床前研究结果。nac治疗三个月后，通过超声测量最大直径来测量包囊尺寸的改变。图7a表示经治疗的患者和对照中包囊尺寸的绝对数值的变化。图7b表明包囊尺寸的百分比变化。

发明详述

nac概述

n-乙酰基-l-半胱氨酸(nac)是一种公知的低分子量药物，化学式为

nac的特征主要涉及其巯基，其使之在三肽谷胱甘肽(gsh)作用的大多数生物化学途径中是有效的，所述三肽谷胱甘肽(gsh)以相对高浓度存在于人组织中，甚至高于10mm。半胱氨酸是组成gsh的三个氨基酸之一，故nac被认为是具有去乙酰基半胱氨酸的gsh前体。nac曾经并且目前仍然广泛地用作溶粘蛋白剂，其作用方式通常归因于粘液蛋白中的敏感的半胱氨酸二硫桥键的氧化还原裂解。实际上nac参与复杂的巯基氧化还原循环，其中有若干种酶的作用。事实上，具有极为重要生理学意义的是二硫化物形成和裂解的循环，这是一种调节蛋白活性和细胞信号传导的普遍机理。酶，例如蛋白酪氨酸磷酸酶和酪氨酸激酶，例如在控制细胞周期、细胞增殖和分化中起着关键的作用，且许多这些酶通过其半胱氨酸的氧化还原状态而调节。

总之，尽管详细的作用机理尚未最终确定，nac似乎在gsh作用的所有生物化学途径中都发生作用。由gsh作用调节活性的酶和蛋白，其活性调节是直接进行或通过一系列信号转导途径进行的若干过程。在该图中，nac既可与gsh的作用平行，或者可能比gsh更有效。

gsh例如通常结合于对乙酰氨基酚形成的活性代谢物，且有助于其解毒。当对乙酰氨基酚剂量过大时，gsh却被消耗，且对乙酰氨基酚代谢物开始与细胞蛋白反应，最终导致细胞死亡。在对乙酰氨基酚中毒后暴发性肝功能衰竭的治疗中，nac在对乙酰氨基酚代谢物的解毒过程中代替gsh起作用。nac被认为实际上不存在不利的副作用，这也通过在对乙酰氨基酚中毒的治疗中用高剂量nac进行评估(对体重70kg的个体进行治疗，约40g/天)而得以证实。

与胃中可降解的三肽gsh相反，更简单的nac分子自由地扩散入所有组织和细胞中。nac药代动力学研究测定血浆峰浓度约1小时内到达，其半衰期为约三小时。6至12小时发生完全清除。

nac作为抗增殖分化剂

本发明者最近发现n-乙酰基-l-半胱氨酸(nac)对于上皮来源(与子宫内膜细胞相同的来源)的癌细胞具有显著的抗增殖作用(celldeathanddifferentiation2005，12(10)：1285-1296)。尽管癌和子宫内膜异位基本上是不相关的疾病，然而它们具有一些共同的性质，这最终使本发明者想到nac对于子宫内膜异位的治疗可能是有用的。特别是，正如癌一样，子宫内膜异位是一种增殖性疾病，尽管它还具有一些未知的潜在的分子机理和病因学。在本文中，癌症中观察到的现象将作为nac作用的背景，以及作为子宫内膜异位中一种可能的作用模式。

nac用于终止两种腺癌细胞系和原发正常角质化细胞的增殖和诱导其分化，上述两者均为上皮来源。在这些系统中，所述分化由形态学、生物化学和基因表达分析来表征(所述基因表达分析公开于bmccancer2005，5：75中)。

癌症研究中，nac的抗增殖作用与细胞死亡或毒性无关，但却是由于生理学分化途径的激活而产生，所述激活可视为使细胞功能对来源组织正常化。

除了增殖减少，经nac治疗的癌细胞的形态也有所变化。在体外，活性增殖中的上皮细胞显示出不规则的形态(间质形态)且通常形成多个细胞层。相反，当细胞经历分化过程时，由于其最终靶组织的结构和功能，它们停止增殖，它们的形态规则地变为多角形，各个细胞有时较厚，且它们形成单层的相邻细胞。该过程伴随细胞-细胞和细胞-基质接合的增加，这与从增殖间质转变为粘着性、活动性降低和分化的表型相符合。

总之，将nac补充至癌细胞之后检测到一系列复杂的代谢变化，其全都集中于使不受控制的增殖终止以及诱导其终末分化，如图6中的图示所示。

应注意，nac治疗诱导细胞-细胞和细胞-基质粘着复合物的大量增加。不受控制的增殖可视为这样的情形：细胞失去接触抑制及其对于分化信号的响应能力。进入分化途径的细胞显示细胞间接合复合物的大量增加，且该进程通常也指示为接触抑制。若干证据表明，细胞进入分化终点的信号来源于细胞-细胞复合物本身的成分。这些接合也是细胞间信号传播的一个途径。

迁移细胞，例如子宫内膜异位中的子宫内膜细胞，除了含量减少的粘着复合物之外，还必须具有和分泌足量的活性基质金属蛋白酶，该酶促进细胞外基质的降解，以使得能够通过细胞外基质进行迁移。有趣的是，在上皮癌的这一模型中，发现nac向下调节该酶，暗示阻止了细胞迁移。另外，事实上本发明的实施例1表明当根据本发明用于治疗子宫内膜异位时，nac向下调节基质金属蛋白酶9(mmp-9)的表达。这表明，nac可能妨碍以下两种细胞迁移：从正常位置的子宫内膜迁移至新植入物(防止复发)和迁移至子宫内膜异位的组织(防止进一步损伤)。

已知nac的作用还涉及其抗炎作用，这是将其加入非甾体抗炎药物(nsaid)家族的原因之一。经nac治疗的细胞的基因表达概况事实上显示了环氧化酶-2(cox-2)的向下调节，该基因的诱导与炎性反应相关。nac的这一作用在本发明的实施例1的子宫内膜异位的组织中也得以证实，表明nac也可减轻与子宫内膜异位中的炎症相关的症状。

作为nac通过敏感半胱氨酸的氧化还原状态调节细胞信号转导的能力的实例，在结肠癌(caco-2)细胞和卵巢癌(ovcar-3)细胞体外模型中研究了非受体酪氨酸激酶c-src这种酶(freeradicalsbiologyandmedicine2008，45(11):1566-72)。c-src参与增殖/分化转换，且在接合复合物和细胞骨架组织的组装/分解中是活跃的。该激酶在很多的人癌症中被激活和过度表达，特别是在结肠和卵巢癌中。国际上进行了突出的药物设计方面的努力，这些努力事实上是致力于寻找特异性的c-src抑制剂。反之，已发现用nac简单地治疗腺癌细胞可实现c-src抑制的目标，其机理涉及c-src中敏感半胱氨酸残基的氧化还原过渡，其能够切断该激酶并使其递送至溶酶体内部并在其中储存或降解。因此，腺癌细胞中nac诱导的终末分化涉及c-src的抑制。众所周知，该激酶的活性在子宫内膜细胞周期的蜕膜期中呈现关联性，因此表明其在子宫内膜异位中反向调节的增加(endocrinejournal，2008，55(5)：795-810)。

nac和子宫内膜异位

如背景技术部分所述，此前已建议nac可用于子宫内膜异位的新的治疗策略中，该策略基于其用作抗氧化剂和ros清除剂的用途。从上述的上皮癌研究，本发明的发明者注意到除了作为抗氧化剂和ros清除剂的作用以外，nac对于上皮癌细胞具有一些有利的作用；且若子宫内膜异位的细胞会有类似的响应，那么所述作用也可用于子宫内膜异位的细胞的治疗。特别是，希望当nac用于子宫内膜异位的治疗时，在癌症中发现的nac的抗增殖和分化作用也同样会出现。

相信若nac具有以下已发现于癌症以及子宫内膜异位的组织中的分子作用，那么nac对于子宫内膜异位的治疗中也将是有益的：

i)细胞-细胞和细胞-基质接合的增加，其与从增殖向分化表型的转移

相符合；

ii)基质金属蛋白酶表达的减少，其与细胞迁移的减少相关；

iii)环氧化酶-2(cox-2)表达的减少，其与炎性反应的减少相关；

iv)c-src活性的调节，以调节子宫内膜增殖/蜕膜周期并且允许妊娠。

因此，假设nac对子宫内膜异位可能具有以下生理学作用：

i)子宫内膜细胞增殖的减少；

ii)减少局部慢性炎症，且因此缓解相关的疼痛；

iii)通过更规则的增殖-分化循环使来源组织、正常位置的子宫内膜正常化；

iv)异位子宫内膜细胞的数量减少，所述减少与由于组织金属蛋白酶的减少和细胞-细胞和细胞-基质接合的增加所致的细胞活力下降有关；

v)雌激素受体构象通过相关半胱氨酸残基中二硫桥的重新组装而重组。

总之，通过临床研究中患者的响应和通过所述患者或动物模型在形态学、组织学、生物化学和分子生物学水平上的组织学分析或活组织检查，均直接或间接地证实了这些假说的结果。

特别是，本发明者发现，nac事实上减少了环氧化酶-2(cox-2)和基质金属蛋白酶9(mmp-9)在子宫内膜异位的组织中的表达。发明者们也阐明了，nac使得来自子宫内膜异位组织的细胞质的e-钙粘蛋白重新定位于经nac治疗的组织中的细胞-细胞接合处。这表明了细胞-细胞接合的增加，其与细胞增殖的减少是相符的。事实上，其他作用，例如p21的表达增加和ki-67表达的减少，也表明对于子宫内膜异位的nac治疗使得细胞增殖减少。本发明者也阐明了nac治疗子宫内膜异位的这些分子作用使得子宫内膜异位损伤的尺寸减少，缓解疼痛并允许了人们想要的妊娠。使用nac治疗子宫内膜异位或与子宫内膜异位相关的适应症的一个优势在于，不需要使用目前对于子宫内膜异位常用的激素治疗抑制卵巢功能。因此，与之相比，nac的使用增加了这些患者能够怀孕的可能性。手术前的nac治疗也致使形成更规则和致密的子宫内膜瘤，其更容易除去，并且使得腹腔镜检查中的出血极少。

剂量治疗方案

从对于nac治疗腺癌细胞系和原发正常角质化细胞的研究(celldeathanddifferentiation2005，12(10)：1285-1296)中得出结论，有效剂量的nac对于抗增殖-分化作用的诱导情况各异，并且依赖于细胞的类型。因此来源的组织即指示了对于增殖的完全阻滞的观察所需的有效nac浓度，且必须由各组织所确定。此外，nac的剂量也与细胞恶性相关。详言之，正常细胞仅需要较低的剂量以停止增殖和开始分化，而具有特征性预后不良的肿瘤细胞则需要更高的nac浓度。

出于本发明的目的，基于以下标准来研发用于治疗哺乳动物(包括人)的子宫内膜异位的nac的剂量治疗方案：

1)nac的每日剂量，其与目前的其他临床治疗相一致，且被认为没有不利的副作用；

2)剂量，其被认为足够高以满足将异常增殖细胞转换入分化途径的要求；

3)在关于延长治疗后nac血浆水平降低的报道(pendyalal，creavenpj.cancerepidemiolbiomarkersprev.1995；4:245-51)的情况下，在为期两个月或更长的治疗中每周中止治疗半周，被认为具有最佳的生物学响应。

本发明的包含nac用于治疗子宫内膜异位或与子宫内膜异位相关适应症的组合物，根据一个实施方案以大约20至90mg/kg/天的剂量给药。其下限是基于粘液溶解作用剂量的2倍，即其本身已知具有生理学作用。其上限是基于已发现更高的剂量会在许多患者中引起胃部问题的考虑。在另一实施方案中，本发明的组合物包含以大约30-60mg/kg/天的剂量给药的nac。其下限已表明对子宫内膜异位有效，其上限已知事实上不具有副作用。在又一实施方案中，本发明的组合物包含以大约30-45mg/kg/天给药的nac。已表明其中的低剂量令人惊讶地对于子宫内膜异位有效。

在一个实施方案中，所述组合物给药的时间周期为两个月或两个月以上，或优选三个月或三个月以上。为抵消延长治疗后nac血浆水平的降低，nac可以以间歇模式中进行处方的剂量(即间歇式剂量治疗方案/疗法)给药。间歇式给药或治疗是指治疗周期性地中断，即所述药物组合物给药一定的时间周期(例如数天)然后中断给药(其中药物组合物不予给药一定的时间周期，例如数天)。间歇式治疗可以是规则的，例如治疗固定的天数或周数，然后中断固定的天数或周数。其实例包括重复的以下方案：每周治疗4天然后中断3天、或治疗2周然后中断1周。规则的间歇式治疗的一个特例是脉冲式治疗，即具有规则的治疗和中断时间，例如每隔一天给药或给药2天然后中断2天等。不规则重复的不规则间歇式治疗方案或更复杂地重复的方案也是可能的，例如取决于对治疗的响应。在本发明的不同示例性实施方案中，将所述进行处方的剂量的nac连续给药3-5天然后中断2-4天，或连续给药1-3天然后中断1-2天。

在一个实施方案中，参照大约60kg的体重，nac剂量的范围为1.2至5.4g/天，优选1.8至3.6g/天。所述剂量可分为两份或多份，优选三份或四份，每天各给药一份或两份的剂量(例如丸)，其中各剂量可包含例如0.15-2.7g的nac或优选0.6-1.2g的nac。所述治疗包括脉冲式或间歇式给药上述剂量，例如每隔一天给药，或每周连续给药三至四天并分别中止四至三天。所述治疗持续的最小总时间为两个月，总时间无最大时间限制。对于其他体重(例如偏重或偏轻)的患者，每日剂量需要相应地调节。

在本发明的一个实施方案中，所述治疗子宫内膜异位或子宫内膜异位相关症状的、包含150-5400mg剂量的nac的药物组合物每天两次或三次给药，周期为至少2个月，例如至少3个月。在本发明优选的实施方案中，所述包含230-3600mg剂量的nac的药物组合物每天两次或更多次给药，周期为至少2个月，例如至少3个月。所述治疗包括脉冲式或间歇式给药上述剂量，例如每隔一天给药，或每周连续给药三至四天并分别中止四至三天。

药物制剂

本发明的药物组合物可以以药物领域技术人员本身已知的方式制备。所述组合物可包含根据本发明的有效量的nac，以及作为活性成分的载体或介质的适当的载剂或赋形剂。所述载剂或赋形剂是本领域已知的，且包括固体物质例如柠檬酸、柠檬酸钠、碳酸(氢)钠以及矫味剂。所述药物组合物优选适用于口服给药。所述组合物可以以不同形式给药，优选作为片剂形式。其他形式，例如胶囊、栓剂、溶液、混悬液、糖浆等也是可能的。

本发明需要严格地测定nac制剂中的药物品质，以得到有效剂量。因此，使用品牌或经认证的制剂。nac并非稳定分子，其活泼的巯基残基可容易地被氧气、光和其他辐射氧化，使得不能达到有效剂量。因此该制剂优选避光，形式优选为可溶性片剂，并且含有在溶解过程中帮助从水中部分除去氧的碳酸氢钠。

已观察到高剂量的nac可引起腹部疼痛。为克服这一缺点，一个选项是在具有胃保护的制剂中提供nac，其适于防止nac在胃中释放/增溶。所述制剂是本领域公知的，且可用于本发明中。例如，可使用耐胃液且允许所述药物在通过胃之后仅在肠中释放的片剂包衣。常用制剂包括聚合物，例如纤维素衍生物、甲基丙烯酸氨基酯共聚物。所述包衣通过使用对ph敏感的聚合物防止该片剂核芯在胃酸性环境中分解(其在通过胃之后由于ph的增加而膨胀或增溶，从而释放所述药物)。

另一选项是降低nac在每一次进入血流的剂量。每天给药nac三次或三次以上，对于患者而言可能是难以完成的。然而，可能需要重复给药以达到几乎恒定的nac血清浓度。为克服这些问题，对患者而言更容易操作的是每天一次或两次给药，例如在早晨和晚上给药。一个选项是在缓释制剂(也作持续释放或控释制剂)中提供nac。由于能够减小nac分散和摄取进入血流的速率，所述制剂使较长间隔的大剂量给药成为可能。然后该剂量在长时间内小量地分配到血液中，例如在每天两次的治疗方案中经12+12小时。很多不同缓释技术和制剂是本领域已知的，且可应用于本发明中。在所述技术中该活性物质例如包在包衣或基质中，所述包衣或基质在给药位置的体液中是不溶的或可溶性低的。

具有缓释和胃保护的组合作用的制剂也是可能的，且可用于本发明中。

本发明的用途/药物适应症

本发明已显示在与子宫内膜异位相关的诸多方面具有有益的性质，且可用于治疗子宫内膜异位和治疗多种与子宫内膜异位相关的适应症。治疗多种与子宫内膜异位相关的适应症是指例如：治疗以缓和疾病症状，例如疼痛和炎症；治疗以增加妊娠的可能性；手术前预先治疗，以缓和子宫内膜异位损伤的移除和提高手术效果；手术后治疗，以防止损伤的复发；和在确证的、经评定的风险因素的情况或在家族性子宫内膜异位的存在下进行预防性治疗。

根据本发明，nac已显示减小损伤尺寸和将增殖性组织恢复为更加分化的正常组织。因此，在本发明的一个实施方案中，所述药物组合物包含nac以用于治疗子宫内膜异位，以使位于直肠阴道隔或其他位置的子宫内膜瘤、粘着物、腹膜植入物和深度损伤减小并且最终消失。

根据本发明，nac已显示减轻子宫内膜异位引起的疼痛症状。因此，在本发明的另一实施方案中，所述药物组合物包含nac以减轻与子宫内膜异位相关的疼痛。

在本发明的另一实施方案中，所述药物组合物包含nac以促进患有子宫内膜异位的人实现想要的妊娠。

在本发明的又一实施方案中，所述药物组合物包含nac以在子宫内膜异位的情况下用于腹腔镜检查或手术的预治疗，以促进除去肿块(mass)，减少出血，使组织更为致密/不易破坏。

在本发明的另一实施方案中，所述药物组合物包含nac以防止腹腔镜检查或手术后的复发。

在本发明的又一实施方案中，所述药物组合物包含nac以在确证的、经评定的风险因素的情况下用于防止由于家族性影响引起的子宫内膜异位。

实施例

本发明将参考以下实施例进一步地公开和阐明。然而应注意的是，这些实施例绝不应理解为限制本发明。

实施例1.在子宫内膜异位鼠模型中的作用

材料和方法

材料。除非特别指出，所有化学物质均来自sigma-aldrich，milan，italy。

动物。36只雌性、6至8周龄balb/c小鼠购自charlesriveritalia(calco，italy)。任意提供片状饲料(浓缩标准膳食；mucedola，milan，italy)和水。在控制的条件下，以16/8小时的明/暗周期饲养动物。在任何侵入操作之前，通过腹膜内注射0.4ml的包含2.5％avertin的生理学溶液麻醉小鼠。

子宫内膜异位的诱导。子宫内膜异位的诱导是通过以下文献公开的方法进行的：somigliana等人，humreprod1999dec；14(12):2944-50。在清洁条件下进行手术介入。简言之，通过肚脐以下的腹膜空间中线的小切口将同系小鼠的子宫角除去，并将其放入包含磷酸盐缓冲盐水(pbs)的培养皿(petridish)中。通过使用保险刀片精细地切下子宫角得到子宫内膜碎片。将碎片混悬于0.6ml的pbs中，并迅速接种于受者小鼠的腹膜腔中，比例为一个供者/两个受者。诱导子宫内膜异位的小鼠随机地分为两组，每组12只小鼠：对照组和nac-治疗组。

nac治疗。在子宫内膜植入的次日，用nac在水中的100μl的10mg/ml储备溶液对治疗组的小鼠进行管饲。对照组仅接受水。每天给药nac，持续21天。考虑到小鼠平均体重为22.5±0.7，则1mg/小鼠的nac剂量对应于44mg/kg/天。给药所述基于体重的剂量，与对照组相比未注意到毒性的迹象(在治疗结束时未变化)，所述迹象包括食物消耗，理毛行为或活动水平。治疗结束时，小鼠通过颈脱位法处死。

子宫内膜瘤的收集。所述治疗结束时处死动物，且小心地从周围组织分离子宫内膜异位损伤部分，评估其总体重和总数。包囊立即固定于10％福尔马林或在液氮中冷却并储存于-80℃。

组织学和免疫组织化学。经福尔马林固定的样品包埋于石蜡中，且组织切片(5μm厚度)使用苏木精-伊红染色。通过对本研究不知情的经验丰富的病理学家对所有切片进行评价，且子宫内膜异位的组织学诊断是基于子宫内膜腺体组织和间质的形态学鉴定。

对于免疫组织化学，将切片去石蜡化，并在分级的乙醇中再水化。对于抗原回收，在0.1m柠檬酸盐缓冲液(ph6.0)中微波处理切片6分钟，且通过在3％的h2o2/甲醇中培养20分钟来阻断内生性过氧化物酶的活性。切片在pbs/tritonx-100中清洗，在1％的pbs-牛血清白蛋白(bsa)中浸渍15分钟以阻断非特异性结合位点，然后用所选择的稀释于1％pbs-bsa中的初级抗体培养。对于环氧化酶(cox)-2(兔抗鼠多克隆，caymanchemical，milan，italy)、ki-67(兔抗人多克隆，monosanxtra，dbaitalia，segrate，italy)和e-钙粘蛋白(bdbiosciences，milan，italy)的免疫检测，在4℃进行过夜培养并分别以1:100、1:600、1:200稀释。使用dakocytomationlsab2system-hrp(dakoitalia，milan，italy)继续进行免疫组织化学染色，且通过链霉素兔抗人多克隆、亲和素-生物素过氧化物酶复合物溶液使用二氨基联苯作为发色物质将抗体结合位点可视化。切片用苏木精复染，脱水，包埋于加拿大树胶中，然后用leica显微镜观察。ki-67表达的定量研究通过两位独立观察者以互不知情的方式进行；每位观察者在每一样品的多于10个随机选择的区域中数出了至少200个细胞，且以百分比来表示ki-67标记指数。

rna提取、半定量rt-pcr和qrt-pcr。用tissuelyser(qiagen，milan，italy)使用trizolreagent(invitrogen，milan，italy)根据制造商说明书将冷冻的子宫内膜包囊溶解，以分离全部rna。用1u的脱氧核糖核酸酶i(invitrogen)处理来自各样品的一微克的全部rna，并且使用20μl终体积的250ng的随机引物用200u的superscriptiii逆转录酶(invitrogen)逆转录。使用得自各样品的相同cdna产物以用于后续的pcr扩增，所述扩增使用为靶基因准备的引物组合。将18srna看家基因用作内部对照。阴性对照样品由反应混合物和引物组成，无cdna模板。引物序列(表i)使用从以下网站可得到的primer-blast软件而设计：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/。

首先，样品和看家基因的比通过在单一反应管中同时扩增基因特异性mrna和18srna而计算。由于该操作并非对于所有样品而言都能成功地防止由于竞争性作用造成的定量不准确性(可能是由于因优先扩增18smrna而造成特异性转录物的数量相对较少的原因所致)，相同rt反应中产生的靶基因和18scdna在不同的管中扩增。为了以指数的量度来记录扩增，生成了18srna扩增曲线，且选择了合适的周期数。用1μl的cdna、2mm的mgcl2、0.2mm的dntps、0.5μm的各引物和1.25u的hotstarttaqpolymerase(qiagen)，以25μl的反应体积进行半定量pcr。所述pcr扩增通过icycler(bio-rad，milan，italy)进行。然后在1.5％琼脂糖凝胶上将pcr产物进行电泳分析并用溴化乙锭染色。通过光密度扫描和针对18s负载控制进行归一化来评估靶mrna水平。使用图像软件quantityone(versadoc，bio-rad)进行pcr产物的密度分析。

表i.用于半定量和qrt-pcr的引物序列

结果

nac治疗对于子宫内膜异位损伤生长的作用。诱导子宫内膜异位21天后，将所有实验小鼠处死，切下并收集其子宫内膜瘤。在12只对照小鼠中，一只死亡且一只未发展子宫内膜瘤。在12只经nac治疗的小鼠中，两只未发展子宫内膜瘤。形态学上，异位损伤较大、囊肿并且血管化：其由充满液体的包囊组成，这些包囊的颜色为白色、红色或偶尔为褐色，且优先定位于盆腹腔的腹膜处。在图1.1的插图中，我们报道了对照(a)和经nac治疗的(b)动物的包囊的代表性照片。相比于对照组(n＝10)，在治疗组(n＝10)观察到了平均重量的显著降低(图1)。

nac减少cox-2和mmp-9的表达，并切断增殖。所述rt-pcr分析表明，相对于来自对照小鼠(n＝5)的包囊，nac治疗(n＝5)诱导了cox-2和mmp-9mrna水平的显著下降(分别下降32％和34％)，其显著性p<0.01，如18s表达的正常化(图2a和b)。通常仅在增殖周期阻断时才被表达的p21基因，在5只对照动物中从未被表达，而在5份所检查的经nac治疗的样品中有3份得以表达(代表性实施例见图2a)。

nac促使e-钙粘蛋白重新定位。e-钙粘蛋白的免疫组织化学检测，在所检查的病例中为100％阳性。标签限于腺体上皮细胞中，而没有样品呈现间质染色。在细胞水平上，在对照小鼠的包囊发现e-钙粘蛋白染色扩散于整个细胞质中，而在经nac治疗的小鼠的包囊中e-钙粘蛋白主要在细胞-细胞接合处被检测到(图3)。e-钙粘蛋白是多蛋白粘着复合物的一部分，因此其在细胞边界表达的增加表明细胞间粘着的增加。另外，与上述p21表达相一致，该重新定位与细胞增殖转化为终末分化的行为的减少相符(conacci-sorrell等人，j.clin.invest.2002，109：987–991；parasassi等人，celldeathdiffer.2005，12：1285-1296)。

nac治疗减少子宫内膜瘤中cox-2的量。炎症相关的cox-2蛋白的免疫组织化学检测表明相对于来自对照小鼠的包囊，从经nac治疗的小鼠收集的样品显示染色明显减少，在一些病例中完全消失(图4)。

nac减少增殖细胞的数量。ki-67抗原(ki-67)是细胞增殖的经典标记，静止的非周期性细胞完全缺乏表达ki-67。当用于染色来自对照小鼠的包囊时，可检测到一些被标记的细胞(如图5a-c中的箭头所示)。相反，在经nac治疗的小鼠的包囊中检测到极少的被标记的细胞(如图5d-f中的箭头所示)。对每组的8只动物进行统计学评价(10张图像/200个细胞小鼠)表明增殖细胞减少了54％(表ii)。

表ii.ki-67标记指数及其标准误差。显著性：p<0.01

讨论

子宫内膜异位动物模型中有效地诱导了异位子宫内膜的植入。只有对照组中的一只动物和经nac治疗的组中的两只动物没有显示子宫内膜瘤。

与预期相一致，包囊的重量(与尺寸成比例)在经nac治疗的小鼠中较低。这可归因于nac的抗增殖作用(parasassi等人，celldeathdiffer.2005，12：1285-1296)，如本文中通过基因表达分析和免疫组织化学进行的拓展性阐述。事实上，在60％的经nac治疗的动物中观察到了仅在分化的非增殖细胞中表达的基因p21，而在对照中未观察到。相反，对于仅在增殖细胞中表达的ki-67蛋白，在经nac治疗的小鼠中观察到ki-67蛋白比对照小鼠减少了54％。

与子宫内膜异位相关的蛋白，例如mmp-9(collette等人，humreprod2006；21：3059-3067)和cox-2(carli等人，endocrinology2009；150：3128-3137)，在nac治疗之后显示有所减少。mmp-9被认为是细胞运动和侵袭行为的基础，而cox-2是与炎症有关的酶的范例。两种相关基因均显示在nac治疗后减少约30％。此外，cox-2的量也通过包囊中的组织化学染色得以检查，且结果显示染色的相关减少。

广泛接受的观点是细胞质e-钙粘蛋白是增殖性细胞行为的标志，而与之相反的是，其在细胞间粘着复合物处的定位被认为是分化的标志和诱导者；基于此，我们也检查了对照小鼠和经nac治疗的小鼠的包囊中e-钙粘蛋白的定位。结果与我们此前关于腺癌细胞的发现完全一致(parasassi等人，celldeathdiffer.2005,12：1285-1296)，表明e-钙粘蛋白从细胞质在nac治疗后重新定位于细胞边界。e-钙粘蛋白与粘着复合物之间的这种关联也与活力低和侵袭性较低的细胞行为相符。

总之，从所有所检查的方面可见，nac可形成子宫内膜异位的最佳治疗。当转变为女性的所述治疗时，与由于激素治疗所产生的不想要的作用的程度相比，该药物具有事实上无副作用这一优势。因此nac可用于减小包囊尺寸、减少局部炎症和相关的慢性疼痛，以及减少手术后复发。其中最后一点是通过减少增殖和降低细胞活力而受到启示。

实施例2.nac治疗子宫内膜异位作用的临床前研究

研究目的。设计该中试性临床研究，以使用nac代替其他疗法来治疗患有子宫内膜异位的女性。唯一可能的附加治疗是当需要时使用镇痛药以缓解疼痛。

患者加入的条件。基于疾病的疼痛和卵巢超声证据最初诊断为子宫内膜异位的女性，以及在腹腔镜检查治疗后疼痛和/或卵巢子宫内膜瘤复发的患者加入了本研究。

治疗前，疼痛症状的强度通过10点直观类比标度(vas)的手段测量，且通过超声测量卵巢子宫内膜瘤的特征。在nac治疗期间，除了需要时用镇痛剂治疗疼痛以外，排除其他治疗。

患者。从2008年2月到2010年7月，64位诊断为卵巢子宫内膜异位的女性加入了本研究中，其平均年龄为35±7岁(±sd)。其中，33位被指定用nac治疗(平均年龄：37±6岁)，而31位没有接受nac或任何其他治疗并作为对照病例(平均年龄：33±8岁)。她们中的所有人均在一个或两个卵巢内呈现出一个或多个包囊。

治疗。所述进行处方的nac剂量与动物研究中所用的剂量接近，为30mg/kg/天。实践中，对于60kg的平均体重而言，加入的患者的处方为三次600mgnac的口服剂量，每日三次，每周连续给药三天并且中断四天。这样每天的nac剂量为1.8g，每周为5.4g，每个月为21.6g。这些精确的治疗方案是基于以下考虑：1)每天的nac剂量为1.8g，与目前其他的临床治疗相一致，且被认为是无不利的副作用；2)考虑到nac的药代动力学，每日三次给药0.6mg的剂量达到了几乎恒定的血浆水平，而不会使复合物治疗的患者出现不适；3)考虑到据报道延长治疗后nac血浆水平会下降(pendyalal，creavenpj.cancerepidemiolbiomarkersprev.1995；4:245-51)，每周中止所述治疗约半周将确保长期(例如2至6个月或更长)治疗中的最佳生物学响应。

随访。疼痛症状强度(vas疼痛量表)和卵巢子宫内膜瘤的尺寸(临床和us检查)，在治疗最初三个月之后得以评价。若需要，在三个月后进行腹腔镜检查治疗。

结果

下面报道最初三个月的随访周期之后的数据。

nac治疗三个月后通过超声测量最大直径以获得包囊尺寸的改变(未变化、增加或减少)，见于图7a(包囊的绝对数量变化)和图7b(包囊百分比变化)中。图中显示经nac治疗的患者的包囊和未治疗的对照的包囊的对比。在百分比方面(图7b)，38％的病例中观察到包囊尺寸减少，而在对照中不10％的病例显示自发的减少。在子宫内膜瘤尺寸减少的情况下，若干患者(33人中的21人)决定停止或延期进行预定的腹腔镜检查。

在nac治疗后痛感也有所变化。在该3个月的治疗之前和之后评价疼痛，评价手段为10点直观类比标度(vas)，其中0代表无疼痛，10代表可想象的最严重的疼痛。将症状强度分类为无(0)、轻度(1-4)、中度(5-7)或重度(8-10)。经nac治疗的患者报道，在三个月的治疗后平均疼痛从7.6±0.3减少至5.1±0.8(p<0.01)。

未报道不良的副作用。

尽管我们未评价患者是否想要妊娠，且因此不能根据我们的发现归纳出相应的显著性，我们仍然报道了三例妊娠，这显然是目前以抑制卵巢功能为靶点治疗子宫内膜异位的疗法所不可能实现的。

据经验丰富的外科医生报道，在nac治疗后的腹腔镜检查观察到子宫内膜瘤更规则、更致密且更容易移除，因此与腹腔镜检查中出血的相关减少有关。

在其他病例中，直肠阴道隔结节消失，表明nac的效果不仅限于卵巢子宫内膜瘤。

实施例3：脉冲式、间歇式和每天进行nac治疗，对于实验诱导的子宫内膜异位的作用：在大鼠中对作为疼痛征兆的阴道高响应性的中试研究

材料和方法

动物。使用16只未交配的雌性sprague-dawley大鼠。研究开始时其称重为200-230g，分别饲养于控温室内具有垫料的塑料笼中。大鼠可任意饮水、任意食用鼠粮，并且保持12小时的明/暗周期，其中照明于07:00开始。通过每天进行阴道灌洗确定生殖状态(动情前期、动情期、动情后期和动情间期)。

实验模型和手术前训练。子宫内膜异位的诱导前，训练大鼠以对由可充气乳胶气球造成的末端阴道扩张形成逃跑响应。将未充气的小乳胶气球系在经润滑的细导管上，然后插入中阴道腔。用空气以不同体积对气球进行充气，使阴道腔扩张。通过小体积压力传感器测量并控制各扩张体积所产生的压力。该测试装置是一种小型圆柱体有机玻璃室，其设计为容纳大鼠并恰好使之不能转身。该室后部的开口允许该连接至阴道刺激器的导管与刺激装置相连接。光感受器确定大鼠在室中的位置。若大鼠伸展(逃跑响应的一部分)，光束被破坏并且刺激终止。通过每天将大鼠置于该室中15分钟持续5天，使大鼠适应该测试室。然后在训练期间使大鼠习惯通过机械的逃跑响应以使阴道扩张放气，所述放气涉及到大鼠伸展其头部以中断光束。所有大鼠均在4个训练期间内学会了逃跑响应。一经训练，测试期间开始。

测试期间每周在不连续之日进行3次。各测试期间包括一系列经控制的逃跑训练。各训练由气球快速充气(1ml/s)至固定体积组成，该训练持续至大鼠出现逃跑响应或经过15秒的时间，且气球迅速放气。以随机的顺序释放不同的扩张体积，包括对照体积(0.01ml)。15秒的最大潜伏期视为无响应。

对于各期间，测量响应和逃跑响应时间作为扩张体积的功能，如casonam等人(hormbehav.(2003)，vol.44，第123-31页)所述。响应时间越短、造成响应的体积越小，大鼠的逃跑响应越大。对于各鼠，合并了各大鼠期间(至少12个期间)内的逃跑响应和压力/体积，并计算其平均。在所有四个实验组(见下文)中，发现子宫内膜异位手术前阴道扩张的基线逃跑响应是相似的。

子宫内膜异位的诱导。通过子宫同体组织移植片，可用实验方法在大鼠中诱导子宫内膜异位。根据从1985年vernon和wilson(fertilityandsterility，1985，vol.44，第684-694页)发展的治疗方案，进行子宫内膜异位手术。将动情间期内的大鼠麻醉，置于加热板上以保持体温并进行手术。进行腹部中线切口以暴露子宫。将四片子宫角沿供养尾端小肠的交替串联的肠系膜动脉缝合。手术后恢复中未发生事故，且在一周内所有大鼠中均继续存在规则的动情周期。

nac治疗。手术后，用nac以60mg/kg/天的剂量(在给药日适用)或用安慰剂治疗所有大鼠8周。大鼠分为四个实验组：

第一组接受脉冲式nac治疗，即每隔一天治疗。

第二组接受间歇式nac治疗，即每天治疗5天并中断2天(即2天无治疗)。

第三组每天接受nac治疗。

第四组接受假治疗，即安慰剂治疗。

8周后，评价如上所述的对于末端阴道扩张逃跑响应。

结果

结果表明，子宫手术后，大鼠中引起了阴道痛觉增敏(对于疼痛的敏感性增加)。

对于阴道腔的不同扩张体积，确定逃跑响应(即特定扩张体积下的响应时间和15秒内的响应数，与对照组对比)和阴道压力。显示了四个不同实验组(假治疗组的值用作基线值)的结果。

以0.5ml的扩张体积，相对于假治疗组的逃跑响应相对下降为：

1.对于脉冲式nac治疗组：32％逃跑响应减少。

2.对于间歇式nac治疗组：28％逃跑响应减少。

3.对于nac每天治疗组：18％逃跑响应减少。

因此该结果令人感兴趣地表明，与接受每天治疗的组相比，nac治疗带来的减少疼痛的作用在脉冲式治疗组和间歇式治疗组中更为显著。

综上所述，本发明涉及如下方面：

1.药物组合物，其为含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为

采用脉冲式或间歇式口服给药、

给药时间周期为两个月或两个月以上、和

n-乙酰基-l-半胱氨酸在给药日的剂量为20至90mg/kg/天的药物组合物。

2.根据1的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为用于连续给药3-5天然后中断2-4天的药物组合物。

3.根据1的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为用于连续给药1-3天，然后中断1-2天的药物组合物。

4.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为在给药日以30至60mg/kg/天的n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量给药的药物组合物。

5.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为在给药日以30至45mg/kg/天的n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量给药的药物组合物。

6.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物避光保存。

7.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为水溶性片剂。

8.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有碳酸氢钠。

9.根据1-6的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含用于缓释和/或胃保护的制剂。

10.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其为用于治疗由子宫内膜异位引起的疼痛的药物组合物。

11.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其为用于治疗由子宫内膜异位引起的不孕的药物组合物。

12.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其为用于在腹腔镜检查或手术前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物的药物组合物。

13.根据前述任一项的含n-乙酰基-l-半胱氨酸且用于所述用途的药物组合物，其为用于腹腔镜检查或手术后的治疗以防止子宫内膜异位损伤的复发的药物组合物。

14.所述治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物的方法，其包括将含n-乙酰基-l-半胱氨酸的药物组合物口服给药于所述哺乳动物，其中：

采用脉冲式或间歇式的剂量治疗方案，

给药时间周期为两个月或两个月以上，

n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量在给药日为20至90mg/kg/天。

15.根据14的方法，其中连续给药所述药物组合物3-5天然后中断2-4天。

16.根据14的方法，其中连续给药所述药物组合物1-3天，然后中断1-2天。

17.根据14-16中任一项的方法，其中n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量在给药日为30至60mg/kg/天。

18.根据14-17中任一项的方法，其中n-乙酰基-l-半胱氨酸的剂量在给药日为30至45mg/kg/天。

19.根据14-18中任一项的方法，其用于治疗由子宫内膜异位引起的疼痛。

20.根据14-19中任一项的方法，其用于治疗由子宫内膜异位引起的不孕。

21.根据14-20中任一项的方法，其用于在腹腔镜检查或手术前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物。

22.根据14-21中任一项的方法，其用于在腹腔镜检查或手术后的治疗以防止子宫内膜异位损伤的复发。