同型半胱氨酸核酸适体HCy3及其制备方法

同型半胱氨酸核酸适体HCy3及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于氨基酸检测技术领域，涉及一种核酸，特别是涉及高特异性和高亲和 力的同型半胱氨酸核酸适体及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 同型半胱氨酸（Homocysteine, HCys)，或称为高半胱氨酸或同半胱氨酸，是氨基酸 半胱氨酸的异种，在旁链部份硫醇基（-SH)前包含一个额外的亚甲基（-CH2-)。同型半胱氨 酸是多种疾病的危险因子，目前认为同型半胱氨酸增高是动脉粥样硬化所致心脑血管疾 病最广泛、最强独立的致病因素。与传统的血脂三项胆固醇、高密度蛋白、甘油三脂比较，同 型半胱氨酸可以作为判断心脑血管疾病危险性的独立指标，由于同型半胱氨酸升高是渐进 性的没有阈值，同时可增强传统危险因素的影响。测定同型半胱氨酸水平是心脑血管疾病 死亡率最独特、最有效的预测指标。同型半胱氨酸检测与传统的指标相比，具有更高的应用 价值。同型半胱氨酸其结构如下式所示：
[0003]
【主权项】
1. 一种同型半胱氨酸核酸适体，其特征在于，所述核酸适体的核苷酸序列其序列为： ggcactgtac ggctaagttc ccggatagtg gattggaact ggcataaccc〇
2. -种权利要求1中任一所述同型半胱氨酸核酸适体的衍生物，所述衍生物包括以下 四种中的任意一种： (1) 将权利要求1中所述核酸适体任意位置上的碱基A、T、C或G置换成稀有碱基甲基 化嘌呤、二氢尿嘧啶或次黄嘌呤后，得到的核酸适体衍生物； (2) 权利要求1中所述核酸适体的核苷酸序列的骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架； (3) 权利要求1中所述核酸适体改造成的肽核酸； (4) 权利要求1中所述核酸适体改造成的锁核酸。
3. -种权利要求1或2中所述同型半胱氨酸核酸适体或其衍生物在识别、检测同型半 胱氨酸，或者制备检测同型半胱氨酸的试剂盒方面的应用。
【专利摘要】本发明公开具有高特异性和高亲和力的同型半胱氨酸核酸适体及其制备方法。同型半胱氨酸核酸适体的核苷酸序列为：ggcactgtac？ggctaagttc？ccggatagtg？gattggaact？ggcataaccc，命名为HCy3。同型半胱氨酸核酸适体制备方法包括：构建随机序列文库，筛选靶物质-核酸复合物，分离目的寡核苷酸适体，PCR扩增目的寡核苷酸适体，循环筛选出高度特异性适体，同型半胱氨酸核酸适体的修饰。制备获得的核酸适体无毒性，分子量小，易于合成与标记，只特异性识别同型半胱氨酸，对其他异型半胱氨酸或其类似物不识别结合，可成为检测同型半胱氨酸含量的分子信标。
【IPC分类】C12N15-10, C07K14-00, C12N15-115, G01N15-14
【公开号】CN104561011
【申请号】CN201410717853
【发明人】陈燕婷, 张莘蔓, 李红梅
【申请人】陈燕婷, 张莘蔓, 李红梅
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年11月30日