一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶及其制备方法与流程

本发明涉及一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶及其制备方法，属于医药
技术领域：
。
背景技术：
：硝酸咪康唑为1-苯乙基咪唑衍生物，其活性成分为咪康唑，属抗真菌药，芽生菌属、组织浆胞菌属、隐球菌属、念珠菌属、球孢子菌属等对本品敏感，可用于妇科念珠菌等引起的阴道感染和革兰氏阳性细菌引起的重复感染。硝酸咪康唑可干扰真菌细胞色素p450的活性，抑制真菌细胞膜麦角固醇的生物合成，改变膜的通透性，导致细胞内物质外漏；也可抑制真菌的三酰甘油和磷脂的生物合成乙基氧化酶和过氧化酶的活性，引起细胞内过氧化氧积聚，导致细胞亚微结构变性和细胞坏死。申请号为200810243197.6，发明名称为一种硝酸咪康唑膜剂及其制备方法和在制药中的应用，披露了一种用于治疗妇女生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜剂，其原料包括硝酸咪康唑、成膜材料、增塑剂、膜材溶解剂和防腐剂，通过药效实验证明，硝酸咪康唑膜剂对念珠菌性阴道炎有较好的治疗作用，与达克宁栓在症状的改善及真菌清除率上有相同的疗效，而同时，在对小鼠给药时，将膜揉成团塞入小鼠阴道深处，其与栓剂的使用方式基本相同。硝酸咪康唑口服制剂药物很难大量汇集于生殖道粘膜，必须大剂量使用，才能产生疗效，因此造成较大的毒副作用，搽剂、霜剂，以及现有的凝胶，使用以后持效期短，很难达到较好的效果，而栓剂载药量大，长期使用易产生抗药性。壳聚糖是甲壳素脱乙酰产物，是我国产量最大的海洋资源之一，具有无毒、无刺激，具有可降解、生物相容性好等特点。技术实现要素：本发明的目的在于一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶及其制备方法，本发明以壳聚糖、聚卡波菲为混合基质制成阴道用缓释凝胶，可以持续12h缓慢释放，达到减少给药次数的目的。本发明的技术方案如下：一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶，由以下组分组成：硝酸咪康唑、壳聚糖、聚卡波菲、甘油、山嵛酸甘油酯、苯甲酸钠、三乙醇胺、质量分数为2％的醋酸溶液和注射用水。进一步的，缓释凝胶由以下按重量份数计的组分组成：硝酸咪康唑1-3份、壳聚糖0.3-0.8份、聚卡波菲0.5-1.5份、甘油4-7份、山嵛酸甘油酯1-3份、苯甲酸钠0.2-0.5份、三乙醇胺0.1-0.3份、质量分数为2％的醋酸溶液12-18份，加注射用水至100份。更进一步，缓释凝胶由以下按重量份数计的组分组成：硝酸咪康唑2份、壳聚糖0.5份、聚卡波菲1份、甘油5份、山嵛酸甘油酯2份、苯甲酸钠0.3份、三乙醇胺0.2份、质量分数为2％的醋酸溶液15份，加注射用水至100份。制备硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶的方法，具体步骤如下：(1)制备壳聚糖醋酸溶液：称取壳聚糖，加入盛有质量份数为2％的醋酸溶液的烧杯中，搅拌至溶解；(2)制备聚合物相：将聚卡波菲加适量注射用水浸泡过夜，充分搅拌直至完全溶胀成均匀的类凝胶聚合物，高速搅拌下缓慢加入步骤(1)制备的壳聚糖醋酸溶液；(3)制备油相：加热甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分搅拌得到均匀的油相；(4)制备水相：将苯甲酸钠、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩余的注射用水中混合，加热至65℃；(5)将油相加至热的水相中，搅拌使两相充分混合，得到均匀的混浊液，在60℃条件下，将聚合物相迅速加至混浊液中搅拌混匀，搅拌的同时，调节ph，使得ph在3.5-5.5之间。进一步的，选用氢氧化钠调节ph；优选的，选用10mg/ml氢氧化钠水溶液进行调节ph。更进一步的，调节ph在4.5-5之间；优选的，调节ph为4.8。本发明与现有技术相比具有以下优点：本发明以壳聚糖、聚卡波菲为基质制成的阴道凝胶剂，与栓剂相比较，本发明更能与阴道黏膜皱褶充分接触，不但增大了接触面积，还使药物滞留时间延长，本发明既保证了疗效又减少了给药次数，且无油腻感，使用舒适。附图说明图1为紫外吸收图谱，其中，1为硝酸咪康唑溶液；2为辅料溶液；图2为本发明缓释凝胶累积释放度曲线图。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。实施例1一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶缓释凝胶由以下按重量份数计的组分组成：硝酸咪康唑2份、壳聚糖0.5份、聚卡波菲1份、甘油5份、山嵛酸甘油酯2份、苯甲酸钠0.3份、三乙醇胺0.2份、质量分数为2％的醋酸溶液15份，加注射用水至100份。制备硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶的方法，具体步骤如下：(1)制备壳聚糖醋酸溶液：称取壳聚糖，加入盛有质量份数为2％的醋酸溶液的烧杯中，搅拌至溶解；(2)制备聚合物相：将聚卡波菲加适量注射用水浸泡过夜，充分搅拌直至完全溶胀成均匀的类凝胶聚合物，高速搅拌下缓慢加入步骤(1)制备的壳聚糖醋酸溶液；(3)制备油相：加热甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分搅拌得到均匀的油相；(4)制备水相：将苯甲酸钠、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩余的注射用水中混合，加热至65℃；(5)将油相加至热的水相中，搅拌使两相充分混合，得到均匀的混浊液，在60℃条件下，将聚合物相迅速加至混浊液中搅拌混匀，搅拌的同时，选用10mg/ml氢氧化钠水溶液调节ph为4.8。实施例2一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶缓释凝胶由以下按重量份数计的组分组成：硝酸咪康唑1.2份、壳聚糖0.3份、聚卡波菲0.7份、甘油4.5份、山嵛酸甘油酯1.3份、苯甲酸钠0.3份、三乙醇胺0.15份、质量分数为2％的醋酸溶液13份，加注射用水至100份。制备硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶的方法，具体步骤如下：(1)制备壳聚糖醋酸溶液：称取壳聚糖，加入盛有质量份数为2％的醋酸溶液的烧杯中，搅拌至溶解；(2)制备聚合物相：将聚卡波菲加适量注射用水浸泡过夜，充分搅拌直至完全溶胀成均匀的类凝胶聚合物，高速搅拌下缓慢加入步骤(1)制备的壳聚糖醋酸溶液；(3)制备油相：加热甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分搅拌得到均匀的油相；(4)制备水相：将苯甲酸钠、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩余的注射用水中混合，加热至65℃；(5)将油相加至热的水相中，搅拌使两相充分混合，得到均匀的混浊液，在60℃条件下，将聚合物相迅速加至混浊液中搅拌混匀，搅拌的同时，选用10mg/ml氢氧化钠水溶液调节ph为3.5。实施例3一种硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶缓释凝胶由以下按重量份数计的组分组成：硝酸咪康唑3份、壳聚糖0.7份、聚卡波菲1.5份、甘油6.5份、山嵛酸甘油酯2.8份、苯甲酸钠0.5份、三乙醇胺0.3份、质量分数为2％的醋酸溶液16份，加注射用水至100份。制备硝酸咪康唑壳聚糖阴道缓释凝胶的方法，具体步骤如下：(1)制备壳聚糖醋酸溶液：称取壳聚糖，加入盛有质量份数为2％的醋酸溶液的烧杯中，搅拌至溶解；(2)制备聚合物相：将聚卡波菲加适量注射用水浸泡过夜，充分搅拌直至完全溶胀成均匀的类凝胶聚合物，高速搅拌下缓慢加入步骤(1)制备的壳聚糖醋酸溶液；(3)制备油相：加热甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分搅拌得到均匀的油相；(4)制备水相：将苯甲酸钠、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩余的注射用水中混合，加热至65℃；(5)将油相加至热的水相中，搅拌使两相充分混合，得到均匀的混浊液，在60℃条件下，将聚合物相迅速加至混浊液中搅拌混匀，搅拌的同时，选用10mg/ml氢氧化钠水溶液调节ph为5.5。试验例1本发明中硝酸咪康唑含量的测定1、测定波长的确定取硝酸咪康唑加甲醇溶解并使成为质量浓度为0.25mg/ml的溶液。按处方例另取壳聚糖、聚卡波菲及其它辅料用甲醇溶解，分别将上述两种溶液在250-300nm波长范围内扫描吸收图谱，紫外吸收图谱如图1所示，结果表明硝酸咪康唑在272nm处有最大吸收，而基质及其它辅料在此波长处几乎无吸收，故选择272nm作为测定波长。2、标准曲线的制备精密称取于105℃干燥至恒重的硝酸咪康唑对照品0.25g，置于50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。分别精密量取贮备液0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。以甲醇为空白，在272nm波长处测定吸收度a，以浓度c对吸收度a进行线性回归，结果硝酸咪康唑在0.050-0.80mg/ml范围内，吸收度与浓度的线性关系良好，求得的回归方程为a＝1.4213c+0.046，r＝0.9994。3、样品含量测定共取3批次制备的缓释凝胶样品。从中取1批次制备的缓释凝胶样品，精密称取约3.0g，置于50ml容量瓶内，放水浴中使样品熔融，加入适量甲醇使其完全溶解，定容至刻度。精密量取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀。以甲醇为空白，在272nm处测定样品溶液中硝酸咪康唑的吸收度，代入回归方程，计算出浓度，从而计算出该批次缓释凝胶样品的含量。同上法，测定出另外2批次样品的含量。4、加样回收率试验按处方主药量的80％、100％、120％，分别精密称取105℃干燥至恒重的硝酸咪康唑，并按缓释凝胶处方中各组分的比例，精密称取基质及其它处方材料，用甲醇溶解各组分适量，依样品含量测定的方法测定硝酸咪康唑含量。每个试样测定3次，算出平均值，计算出加样回收率，结果见表1。表1加样回收率试验结果(n＝3)试验例2精密度试验按试验例1中标准曲线的制备项下方法，配制硝酸咪康唑0.20、0.40、0.60mg/ml的溶液，分别在日内的不同时间(0，2，4，6，8，10h)和日间(1，2，3，4d)测定吸收度，计算出日内和日间精密度，结果见表2。表2精密度试验结果试验例3本发明稳定性试验离心试验取缓释凝胶5g左右，装入带刻度的离心管中，以2500r/min转速离心30min，观察其外观性状，结果凝胶未出现分层现象。留样观察将包装好的样品于室温下放置3，6个月，以前述的质量控制标准进行检测，结果各项指标均未发现明显变化。试验例4本发明释放度测定模拟阴道液准确称取nacl3.51g、koh1.4g、ca(oh)20.222g、牛血清白蛋白0.018g、乳酸2.00g、乙酸1.00g、甘油0.16g、尿素0.4g及葡萄糖5.0g，加入到1000ml水中，用hcl将ph调节为4.2。测定方法取本发明约3.0g置于溶出样品池储库中，用尼龙膜将样品封闭，盖上池盖，紧密旋上。将样品池放入溶出杯中，储库朝上，用定位球调整浆高度，用模拟阴道液900ml作为释放介质，浆的转速为60r/min，温度为(37±0.5)℃，在0.1、0.3、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12h分别取溶液5ml，同时立即补充溶出介质5ml，测定累积释放度。得到本发明的累积释放度曲线，如图2所示，结果表明，制得的缓释凝胶1h释放35.54％，2h释放56.02％，12h释放达93.92％，从释放曲线可以看出，药物在溶出介质中先迅速释放至有效浓度，然后缓慢释放，从而达到速效缓释效果。试验例5临床试验1、纳入病历标准：25-46岁，符合妇科阴道念珠菌感染诊断的已婚妇女。2、病例纳入标准:(1)症状：明显外阴瘙痒、白带增多略带臭味、阴道烧灼感，可伴有尿急、尿痛和性交痛等症状；(2)体征检查：阴道粘膜红肿，外阴水肿、潮红，可能会有外阴表皮脱落；(3)镜检：阴道分泌物在显微镜下能够找到芽胞和假茵丝；(4)病例排除:妊娠和哺乳期妇女；对硝酸咪康唑过敏；有严重脏器疾病，如心、肝、肾等疾病以及妊娠期患者；入选前1个月内使用过治疗该疾病的类似药物；不愿意配合调查的患者；(5)退出标准：由于不良反应需终止试验者；病人用药依从性不好，不能连续用药7d者；病人不按时复诊而失访者；期间同时使用了治疗该疾病的类似药物者；合并其他生殖器感染需治疗者。3、治疗方法：(1)治疗组：月经干净3d后，睡前用温水清洗阴道，然后用涂药器将本发明缓释凝胶约3克挤入阴道深处，每晚一次，连续用药7天，治疗期间禁止性生活。(2)对照组1：睡前用温水清洗阴道后，将硝酸咪康唑阴道栓塞入阴道深处，每晚一粒，连续用药7天；(3)对照组2：睡前用温水清洗阴道后，将硝酸咪康唑霜涂抹在阴道患处，每晚一次，连用7天为一疗程。4、治疗后观察项目：(1)症状：是否好转或消失；(2)体征检查：包括外阴、阴道、宫颈及阴道分泌物检查；(3)镜检：对阴道分泌物进行镜检。(4)用药依从性：通过询问患者以及收回未用完的药物和药盒来了解研究对象的服药依从性。5、疗效评价标准(1)治愈：症状、体征消失，镜检(-)；(2)显效：床症状、体征改善,镜检(-)；(3)有效：症状、体征缓解，镜检(+)；(4)无效：症状、体征均未改善甚至加重，镜检(+)。总有效率＝(治愈人数+显效人数+有效人数)/总人数×100％6、结果(1)一般资料：本试验共筛选入组病例134例，不按时复诊而失访者14例，连续用药不到7d者5例，期间同时使用了治疗该疾病的类似药物(洁尔阴洗液)者1例；合并其他生殖器感染需治疗者退出试验者1例；所以实际完成试验的病例数为113例。(2)疗效统计结果，如表3所示：表3三组治疗念珠菌性阴道炎的治疗效果比较组别病例数治愈显效有效无效有效率(％)治疗组483574295.83对照组1321964390.62对照组2332062584.85当前第1页12