用于降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的组合物及应用该组合物的产品的制作方法

本发明涉及医药
技术领域：
，尤其是涉及一种用于降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的组合物及应用该组合物的产品。
背景技术：
：溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，uc)是一种特发于结肠的，以黏膜和黏膜下层浸润为主的慢性非特异性结肠炎症，属于中医学“泄泻”范畴。本病的病因和发病机制尚不十分明确，与易感基因、环境因素及免疫系统异常相关。但越来越多的研究表明该病与肠黏膜免疫屏障功效异常及其导致的肠粘膜免疫失衡相关。肠粘膜免疫屏障(gutmucosalimmunebarrier)是区别于系统性免疫的功能发达的局部黏膜免疫，其对防御外来抗原物质对机体的侵袭和维持机体内环境的稳定至关重要，且其功能异常与uc发病密切相关。肠道通过发挥免疫监视和免疫应答功能维持肠粘膜免疫屏障的正常，淋巴细胞能够在肠粘膜发挥免疫效应是因为其致敏后从循环的血液中定向迁移到肠粘膜表面，即通过肠淋巴细胞归巢发挥作用，所以淋巴细胞归巢过程的正常决定了肠粘膜免疫屏障功能的坚固。循环血液中的淋巴细胞之所以能够定向归巢到肠道而不是其他部位，是因为淋巴细胞表面的归巢受体与肠粘膜毛细血管高内皮静脉(highendothelialvenules，hev)表面的配体即归巢配体特异性识别和粘附，归巢受体与配体的辨认与结合，是肠淋巴细胞得以归巢的分子基础。肠淋巴细胞归巢是肠粘膜免疫系统重要的正常免疫活动之一，但过度的淋巴细胞归巢是免疫紊乱的病理基础。淋巴细胞功能相关抗原αlβ2(cd18)与其配体细胞间粘附分子icam-1(cd54)是介导淋巴细胞归巢的重要粘附分子。溃疡性结肠炎发生发展过程中，大量的炎细胞浸润，炎症介质和炎症因子释放增多，可刺激肠粘膜内皮细胞过度表达icam-1，同时引起αlβ2的活化，活化后的αlβ2与icam-1相结合，使淋巴细胞强烈的黏附于内皮细胞上，从而吸引大量的淋巴细胞向炎症部位趋化聚集，这些淋巴细胞又不断释放大量炎症介质造成肠粘膜组织的进一步破坏。因此，icam-1及αlβ2对溃疡性结肠炎过程中免疫细胞黏附、定向迁移、组织破坏起了关键性作用。近年来，针对溃疡性结肠炎进行治疗的研究有了一定的进展，但这些药物引起的严重不良反应不得不使实验叫停。因此，开发一种高效、低毒、能够有效治疗溃疡性结肠炎的药物成为研究热点。有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：本发明的第一个目的在于提供含大黄提取物和巴豆霜的组合物在制备降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的产品、制备减少淋巴细胞归巢的产品、制备减轻肠道炎症反应的产品或制备促进肠粘膜愈合的产品任一项中的应用，本发明的第二个目的在于提供一种用于降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达、减少淋巴细胞归巢、减轻肠道炎症反应或促进肠粘膜愈合的药物，以缓解现有技术中存在的缺乏有效治疗溃疡性结肠炎的药物及现有的药物存在严重不良反应的技术问题。本发明提供了含大黄提取物和巴豆霜的组合物在如下(a)-(d)任一项中的应用：(a)制备降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的产品；(b)制备减少淋巴细胞归巢的产品；(c)制备减轻肠道炎症反应的产品；(d)制备促进肠粘膜愈合的产品。进一步地，所述组合物按重量份计主要由如下组分组成：大黄提取物10-40份，巴豆霜5-18份。进一步地，所述组合物由以下重量份的组分组成：大黄提取物15-30份，巴豆霜6-12份；优选地，所述组合物由以下重量份的组分组成：大黄提取物20份，巴豆霜8份。进一步地，所述大黄提取物为大黄多糖。进一步地，所述淋巴细胞归巢受体为肠淋巴细胞归巢受体；所述淋巴细胞归巢配体为肠淋巴细胞归巢配体。进一步地，所述淋巴细胞归巢受体为αlβ2、α4β7、l-selectin、lfa-1、ccr2、ccr9、tlr4或vla-4；所述淋巴细胞归巢配体为icam-1、icam-2、mad或vcam-1。进一步地，在(a)、(b)、(c)或(d)中任一项所述的产品为药物。另外，本发明还提供了一种用于如下(a)-(d)任一项的药物，包括含大黄提取物和巴豆霜的组合物：(a)降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达；(b)减少淋巴细胞归巢；(c)减轻肠道炎症反应；(d)促进肠粘膜愈合。进一步地，所述组合物按重量份计主要由如下组分组成：大黄提取物10-40份，巴豆霜5-18份。进一步地，所述大黄提取物为大黄多糖。大黄提取物和巴豆霜的组合物能够有效止泻，本发明通过实验证明，大黄提取物和巴豆霜的组合物能够降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达，从而减少淋巴细胞归巢，减轻肠道炎症反应，进一步促进肠粘膜愈合，为大黄提取物和巴豆霜的组合物达到修复肠粘膜损伤提供又一证据，对溃疡性结肠炎的预防和/或治疗具有潜在价值。本发明提供的药物，包括大黄提取物和巴豆霜，可用于降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达、减少淋巴细胞归巢、减轻肠道炎症反应和促进肠粘膜愈合，具有疗效好，副作用低的优点。附图说明图1a为本发明实施例4提供的正常对照组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图1b为本发明实施例4提供的模型组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图1c为本发明实施例4提供的高剂量组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图1d为本发明实施例4提供的中剂量组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图1e为本发明实施例4提供的低剂量组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图1f为本发明实施例4提供的阳性药物组结肠组织中αlβ2(cd18)表达量的结果图(400×)；图2a为本发明实施例4提供的正常对照组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图2b为本发明实施例4提供的模型组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图2c为本发明实施例4提供的高剂量组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图2d为本发明实施例4提供的中剂量组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图2e为本发明实施例4提供的低剂量组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图2f为本发明实施例4提供的阳性药物照组结肠组织中icam-1(cd54)表达量的结果图(400×)；图3为本发明实施例4提供的各组大鼠结肠cd18表达的比较结果图；图4为本发明实施例4提供的各组大鼠结肠cd54表达的比较结果图。具体实施方式下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明提供了含大黄提取物和巴豆霜的组合物在如下(a)-(d)任一项中的应用：(a)制备降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的产品；(b)制备减少淋巴细胞归巢的产品；(c)制备减轻肠道炎症反应的产品；(d)制备促进肠粘膜愈合的产品。在本发明中，组合物按重量份计主要由如下组分组成：大黄提取物10-40份，巴豆霜5-18份。其中，大黄提取物例如可以为，但不限于10份，15份，20份，25份，30份，35份或40份；巴豆霜例如可以为，但不限于5份，8份，10份，12份，15份或18份。在一个优选的实施方式中，组合物由以下重量份的组分组成：大黄提取物20份，巴豆霜8份。在本发明中，淋巴细胞归巢受体为肠淋巴细胞归巢受体；淋巴细胞归巢配体为肠淋巴细胞归巢配体，淋巴细胞归巢为肠淋巴细胞归巢。其中，淋巴细胞归巢受体为αlβ2、α4β7、l-selectin、lfa-1、ccr2、ccr9、tlr4或vla-4；淋巴细胞归巢配体为icam-1、icam-2、mad或vcam-1。在一个优选的实施方式中，淋巴细胞归巢受体为αlβ2；淋巴细胞归巢配体为icam-1。淋巴细胞功能相关抗原αlβ2(cd18)属白细胞整合素亚家族(β2亚家族)，αlβ2是发生炎症反应时介导白细胞在内皮细胞表面牢固粘附的主要分子，表达于淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞等多种免疫细胞表面，可参与免疫系统中抗原呈递和细胞介导的杀伤反应等多种粘附反应。内皮细胞粘附分子-1(intecrellularahdesionmoleeule-l，icam-1，cd54)属于粘附分子免疫球蛋白超家族，是具有多种生物功能的糖蛋白，能介导中性粒细胞、淋巴细胞与血管内皮间的粘附，从而促使炎细胞从血管中渗出并到达炎症部位。溃疡性结肠炎发生发展过程中，大量的炎细胞浸润，炎症介质和炎症因子释放增多，可刺激肠粘膜内皮细胞过度表达icam-1，同时引起αlβ2的活化，活化后的αlβ2与icam-1相结合，使淋巴细胞强烈的黏附于内皮细胞上，从而吸引大量的淋巴细胞向炎症部位趋化聚集，这些淋巴细胞又不断释放大量炎症介质造成肠粘膜组织的进一步破坏。因此，icam-1及αlβ2对溃疡性结肠炎过程中免疫细胞黏附、定向迁移、组织破坏起了关键性作用。本发明提供的大黄提取物和巴豆霜的组合物能够用于制备降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达的产品，可下调溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中αlβ2和icam-1的表达，证实该药对可通过下调αlβ2和icam-1的表达，阻断细胞黏附和活化，减少肠粘膜组织的淋巴细胞过度归巢，进而减轻肠道炎症反应，促进肠粘膜愈合。在本发明中，在(a)、(b)、(c)或(d)中任一项所述的产品为药物。本发明通过实验证明，大黄提取物和巴豆霜的组合物能够降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达，从而减少淋巴细胞归巢，减轻肠道炎症反应，进一步促进肠粘膜愈合，为大黄提取物和巴豆霜的组合物达到修复肠粘膜损伤提供又一证据，对溃疡性结肠炎的预防和/或治疗具有潜在价值。另外，本发明还提供了一种用于如下(a)-(d)任一项的药物，包括含大黄提取物和巴豆霜的组合物：(a)降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达；(b)减少淋巴细胞归巢；(c)减轻肠道炎症反应；(d)促进肠粘膜愈合。在本发明中，组合物按重量份计主要由如下组分组成：大黄提取物10-40份，巴豆霜5-18份。其中，大黄提取物例如可以为，但不限于10份，15份，20份，25份，30份，35份或40份；巴豆霜例如可以为，但不限于5份，8份，10份，12份，15份或18份。在本发明中，淋巴细胞归巢受体为肠淋巴细胞归巢受体；淋巴细胞归巢配体为肠淋巴细胞归巢配体，淋巴细胞归巢为肠淋巴细胞归巢。其中，淋巴细胞归巢受体为αlβ2、α4β7、l-selectin、lfa-1、ccr2、ccr9、tlr4或vla-4；淋巴细胞归巢配体为icam-1、icam-2、mad或vcam-1。在一个优选的实施方式中，淋巴细胞归巢受体为αlβ2；淋巴细胞归巢配体为icam-1。本发明提供的药物，包括大黄提取物和巴豆霜，可用于降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达、减少淋巴细胞归巢、减轻肠道炎症反应和促进肠粘膜愈合，具有疗效好，副作用低的优点。为了有助于更好的理解本发明，现通过具体的实施例详细介绍如下。如未明确指出，以下实施例中采用的实验动物为清洁级雄性wistar大鼠，6-8周龄，体重200±20g，购自中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所动物实验中心，动物批号：scxx-(军)2014-0001，饲养于中国医学科学院放射医学研究所天津实验动物中心，自动物购入后清洁级环境平衡饲养3天进行后续实验。以下实施例中采用的主要试剂耗材及仪器设备为显微镜：日本奥林巴斯，bx51t-phd-j11；数字显微成像系统：leicadm3000b，德国；多功能真彩色细胞图象分析管理系统：美国mediacybernetics公司image-proplus；大黄多糖及巴豆霜：由天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂提供；免疫组化检测试剂盒：北京中杉金桥生物技术有限公司，产品编号：sp-9000，批号：wk160327；浓缩型dab试剂盒：北京中杉金桥生物技术有限公司，产品编号：zli-9017；兔抗大鼠cd18一抗：北京博奥森生物工程有限公司，产品编号：bs-0503r，批号：ab08011569；兔抗cd54一抗：北京博奥森生物工程有限公司，产品编号：bs-0608r，批号：ae090704。实施例1给药浓度计算及主要试剂配制给药浓度大黄多糖用量：高剂量按400mg/(kg×d)给药，中剂量按300mg/(kg×d)给药，低剂量按200mg/(kg×d)给药。巴豆霜用量：134mg/(kg×d)柳氮磺胺吡啶片(salazosulfapyridine，sasp)，按500mg/(kg×d)给药。主要试剂配制3％苦味酸乙醇溶液：取苦味酸3g置于100ml容量瓶，加入70％乙醇30ml，左右摇晃溶解，最后加蒸馏水定容至100ml。tnbs灌肠液：首先将无水乙醇与灭菌生理盐水等体积混合，配制成50％(v/v)的乙醇溶液，然后再将5％tnbs原液和50％乙醇溶液等体积混合即配制成含有25g/ltnbs和250ml/l乙醇的灌肠液。0.5％cms溶液：取cms1g置于烧杯中，加入蒸馏水，定容至200ml，在磁力搅拌器上连续搅拌直至溶液澄清，然后再用此溶液进行灌胃用药的配制。大黄多糖高、中、低剂量：分别按每80mg、60mg、40mg大黄多糖药粉悬浮于2ml的0.5％cms溶液中的比例配制。巴豆霜用蒸馏水配置成浓度1.67×10-1mg/ml。pbs及枸橼酸盐缓冲液：将固体粉末按产品说明加入适量蒸馏水充分溶解。一抗工作液：将cd18、cd54一抗分别用抗体稀释液按1:100比例稀释。dab工作液：在1mldab底物缓冲液中，加入一滴(约50μl)dab浓缩液，混合均匀，得到dab工作液。此溶液必须现用现配，配好后避光保存，6h内使用，剩余的液体应弃去。盐酸乙醇分化液：首先配制70％乙醇495ml，然后加入浓盐酸5ml，得到1％的分化液。各组灌胃药物每次配足3日用量，分装于药瓶中置于4℃冰箱保存，每日灌胃前1h放置室温平衡后使用。实施例2模型制备及给药分组将实验大鼠于造模前24小时将大鼠用苦味酸标记并按照随机数字表分组，每组10只，共6组，分别为正常对照组(n)、模型对照组(c)、巴豆霜+大黄多糖高(b+r80)、中(b+r60)、低(b+r40)剂量组，柳氮磺胺吡啶组(阳性药物)所有的动物禁食不禁水，于造模当天10％水合氯醛(3ml/kg)行腹腔注射麻醉，以倒悬位放于大鼠固定器内，将改装后的8fr号导尿管(沿导尿管末端向上截取约12cm，将5ml注射器针头金属针部分拔除，剩余塑料部分与导尿管截取处粘合，然后以四氟胶带将结合部位缠紧，以确保其密封性，用记号笔在距导尿管末端8cm处做好标记，最后验证整条导尿管的畅通性)缓慢插入直肠约8cm处，除n组外其余各组大鼠均缓慢灌入tnbs灌肠液[灌肠液体积(ml)＝0.8ml×大鼠造模时体重(g)÷200g]，随之注入0.5ml空气，n组按同样计算公式灌入生理盐水。保持倒悬位5分钟防止灌肠液流出，取头低臀高位放置于单独观察笼中，待其清醒后按组别归笼饲养，并恢复各组动物正常饲料及饮水。自造模后24小时开始每天记录大鼠的整体状态、体重变化、查看粪便性状、检测便潜血情况，直至实验结束。于造模后第4天开始，各组大鼠开始灌胃给药，给药量(ml)＝2ml×大鼠即时体重(g)÷200g，其中n组给予等量的cms溶液，连续给药七天。对比例1本对比例与实施例2的不同之处在于，大鼠灌胃给药大黄多糖用量为80mg/(kg×d)，巴豆霜用量为35mg/(kg×d)。对比例2本对比例与实施例2的不同之处在于，大鼠灌胃给药大黄多糖用量为500mg/(kg×d)，巴豆霜用量为200mg/(kg×d)。对比例3本对比例与实施例2的不同之处在于，大鼠灌胃给药为大黄多糖200mg/(kg×d)。对比例4本对比例与实施例2的不同之处在于，大鼠灌胃给药为巴豆霜，按80mg/(kg×d)给药。实施例3标本采集方法给药7天后，将上述实施例2、对比例1至4中实验大鼠禁食不禁水24小时，10％水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射行麻醉。将麻醉后的大鼠仰卧位置于鼠板上，选取一侧腹股沟处备皮，暴露股动脉，剪断股动脉迅速取血2ml，edta抗凝，置于4℃保存。取血后立即游离结肠组织，沿肠系膜纵轴剖开，在4℃生理盐水中清洗3遍，滤纸吸除多余水分，观察、记录结肠大体形态损伤情况并评分、拍照，截取溃疡病变处结肠组织约1cm置于10％中性甲醛溶液中以备石蜡包埋切片；将剩余结肠组织平铺于滤纸上，固定一端，用载玻片轻轻刮取肠粘膜组织，称重后取100mg用于组织匀浆制备，标注剩余组织并迅速投入-70℃液氮中，待动物处理结束后移入-80℃冰箱待测。打开大鼠胸腔，快速取出胸腺及脾脏，置于4℃生理盐水中反复冲洗，剔除附着组织及脂肪，在滤纸上吸除多余水分，称重记录，计算脏体比。实施例4测定结肠组织αlβ2和icam-1的表达免疫组化二步法测定上述实施例3提供的结肠组织中αlβ2、icam-1的表达，具体包括如下步骤：(1)取实施例3提供的组织材料：组织尽可能新鲜；(2)固定和包埋：用4％多聚甲醛(0.1mpbs，ph7.0～7.6，含0.1％depc)进行固定，经70％乙醇30分钟、80％乙醇30分钟、90％乙醇30分钟两次、95％乙醇30分钟两次、100％乙醇30分钟两次、二甲苯透明30分钟两次、55℃石蜡中30分钟两次、用铜制模具包埋组织块；(3)切片：将厚度3-5μm的组织切片附于经多聚赖氨酸附膜的载玻片上，60℃烘烤过夜；(4)石蜡切片脱蜡、入水：将切片浸于二甲苯ⅰ10min→二甲苯ⅱ10min→无水乙醇ⅰ5min→无水乙醇ⅱ5min→95％酒精5min→80％酒精5min→70％酒精5min；(5)自来水冲洗、pbs洗两次；(6)滤纸吸去组织周围pbs，滴加3％h2o2去离子水，室温条件下于湿盒中避光敷育10min，以消除内源性过氧化酶的活性；(7)弃液，蒸馏水冲洗，pbs浸泡5min×3次；(8)抗原修复：将切片浸入0.01m柠檬酸盐缓冲液(ph6.0)中，放入微波炉中火加热至沸腾，冷却至室温后继续微波加热至沸腾，待修复液降至室温后，用蒸馏水冲洗，pbs洗5min×2次；(9)封闭：滤纸擦干组织周围pbs，滴加试剂a(山羊血清封闭液)，室温下置于湿盒敷育15min，弃去多余液体，不洗；(10)滤纸擦干周围血清，实验组滴加一抗工作液，对照组滴加pbs，置于湿盒中4℃过夜；(11)取出玻片复温至室温后，移除一抗，pbs洗5min×3次，擦干周围pbs，滴加试剂b(生物素化二抗工作液)，37℃湿盒孵育20min，取出玻片，弃液，pbs洗5min×3次；(12)切片上滴加试剂c(辣根酶标记链霉卵白素工作液)，37℃湿盒敷育20min，弃液，pbs洗5min×3次；(13)dab显色：吸去周围pbs，把事先配好的dab工作液加至标本上，湿盒中反应5min，并于显微镜下观察染色情况，后用蒸馏水冲洗，pbs洗5min×3次；(14)苏木素复染细胞核2分钟，充分水洗，1％盐酸酒精分化3秒，自来水充分冲洗；(15)经70％乙醇5分钟、80％乙醇5分钟、90％乙醇5分钟两次、95％乙醇5分钟两次、100％乙醇5分钟两次脱水、二甲苯透明5分钟两次、中性树脂封片。采用双人双盲法，选择染色均匀的区域，每组计测5例检体切片，每张切片随机选取3个视野，使用image-proplus6.0图像分析软件计算每个视野阳性细胞累积光密度值(ido)，取其平均值作为每张切片的表达量。αlβ2的表达主要分布于uc结肠组织上皮基底膜或结缔组织中的胶原，阳性染色以细胞膜为主，正常的结肠粘膜αlβ2呈低表达，模型组染色呈强阳性，结果如图1a、图1b、图1c、图1d、图1e和图1f所示。icam-1主要表达于血管内皮细胞、白细胞和上皮膜的顶端部分，阳性染色以细胞质和(或)细胞膜为主，空白组大鼠结肠组织icam-1仅有少量表达或不表达，模型大鼠结肠组织颜色深染，结果见图2a、图2b、图2c、图2d、图2e和图2f所示。如图3和图4所示，与空白对照组相比，模型组结肠组织αlβ2、icam-1阳性表达显著增多。与模型组相比，b+r高、中、低剂量组结肠icam-1阳性表达有意减少，而就αlβ2来看，b+r80、b+r40组可见阳性细胞表达有意降低且与空白组相近。从结果图中可以看出，在炎症反应发生时，uc大鼠结肠粘膜组织αlβ2、icam-1相互作用介导了白细胞与内皮细胞的稳态粘附,使白细胞渗出血管到达炎症部位。这可能是炎细胞向炎症组织大量异常归巢，促使uc炎症反应放大、迁延的原因之一。药物治疗后，αlβ2与icam-1染色程度均呈不同程度减轻，说明大黄多糖+巴豆霜组合可下调uc大鼠结肠组织中αlβ2和icam-1的表达。通过下调αlβ2和icam-1的表达，阻断细胞黏附和活化及肠粘膜组织的淋巴细胞异常归巢，可能是大黄+巴豆霜药对有效减轻结肠粘膜炎症反应，促进肠粘膜愈合的又一作用靶点。对上述实施例2、对比例1至4的检测结果如表1所示。表1各组大鼠结肠αlβ2(cd18)、icam-1(cd54)表达的比较组别ncd18(iod值)cd54(iod值)n1590784.77±21406.9489336.79±28399.23c15200403.16±78762.15##218860.56±65623.88##b+r801597109.32±16511.54**136333.09±31367.46##*b+r6015135114.66±27084.27##129048.96±20102.21#**b+r401598033.45±36402.00**117064.92±27998.76**阳性药物15130430.15±26657.17##116913.11±47648.13**对比例115165294.61±31063.75173467.37±26081.23对比例215172376.87±36751.21184697.66±32479.27对比例315196782.37±24619.34201348.71±26074.27对比例415193761.82±41260.37196751.43±35698.12与n组比较#p＜0.05，##p＜0.01；与c组比较*p＜0.05，**p＜0.01。从表1中可以看出，与空白对照组相比，模型组结肠组织αlβ2、icam-1阳性表达显著增多，差异有统计学意义(p＜0.01)。与模型组相比，b+r高、中、低剂量组结肠icam-1阳性表达有意减少，而就αlβ2来看，b+r80、b+r40组可见阳性细胞表达有意降低(p＜0.01)且与空白组相近。与阳性药物组相比较，icam-1表达与b+r组合的高、中、低剂量组间差异无显著性(p＞0.05)；而αlβ2表达比较，b+r80、b+r40组下调阳性表达效应明显优于阳性药物组(p＜0.01)。通过实施例2与对比例1至4的结果比较可知，本发明提供的药物通过特定的组分和配比间的协同配合，能够更高效地降低淋巴细胞归巢受体和/或淋巴细胞归巢配体的表达，减少淋巴细胞归巢，从而达到轻肠道炎症反应，促进肠粘膜愈合的目的。最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。当前第1页12