本发明涉及化妆品
技术领域：
，尤其涉及一种组合物及其在制备具有抗炎功能的化妆品中的应用。
背景技术：
：爱美之心，人皆有之，人类对美的追求随着文明的进步不断提高。中国美容文化源远流长，最早可追溯到新石器时代，是人类生活不可或缺的组成部分。中华民族的美容文化中，除了爱大自然之美，也爱心灵美和容貌美。中医美容是以中医理论为基础，以一些具有中医特色的方法和方药为手段，通过调整脏腑功能、改善血液循环，从而实现清洁颜面，美化皮肤的目的。查阅经典古籍，诸多古代美女深谙养颜之道，经常使用具有养颜功效的产品。随着社会的进步及人民生活水平的提高，人们追求健康的意识日益增强，由于植物活性成分不仅副作用小而且功效较佳，以植物活性成分为主的美容产品越来越受到消费者的青睐。从天然植物或中药中分离，提取活性成分制作美容护肤品日益引起世界的瞩目。花是植物的繁殖器官，她艳丽多彩，千姿百态，气味芬芳，人人都爱。貌美如花，是中华民族对美的一种表达。中医认为，鲜花质地轻扬，易达到肌肤底层，促进血液循环，新陈代谢。现代药理学研究已经为花卉的美容护肤提供了科学依据：花卉中含有各种生物碱，酯类，有机酸，维生素和微量元素等，这些物质具有较好的护肤，养颜，美容作用。随着人们健康生活意识增强，人们越来越热衷于植物化妆品和回归自然的美容黄发，由此我们相信，花卉美容，萃百花精粹，以花养颜，大有可为。目前，市场上以植物为原料的化妆品的品种混乱，品质良莠不齐。分析原因，一方面是个别商家追求的是利益最大化，以假充真，以劣充好；另一方面，是化妆品的配方没有经过更进一步的验证，各个组分之间不能很好的起到协同作用；而更重要的原因在于，植物组分与化妆品中其他的成分配合不当，造成了植物组分的降解和失效。因此，应进一步开发植物原料，并使这些原料良好的应用于化妆品中。技术实现要素：有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种组合物及其在制备具有抗炎功能的化妆品中的应用，该组合物能够抑制炎症因子释放、清除自由基、抑制水分散失、提高皮肤含水量。且能够在辅料的作用下，更好的发挥植物成分的功效。本发明提供的组合物由如下质量分数的组分组成：金银花提取物0.5份～1份；接骨木花提取物0.2份～1份。一些实施例中，所述组合物由如下质量分数的组分组成：金银花提取物0.5份；接骨木花提取物0.5份。另一些实施例中，所述组合物由如下质量分数的组分组成：金银花提取物0.5份；接骨木花提取物0.2份。本发明采用了金银花，接骨木花为“以花抗炎”组方，以金银花中绿原酸和异绿原酸为抗菌有效组分，抑制细菌，通过金银花中皂苷抑制1L-4水平，激活神经钙蛋白，从而增强巨噬细胞功能，保护胶原蛋白不受自由基伤害；采用接骨木花抑制ROS导致的炎症反应，抑制内皮细胞连接蛋白VCAM-1和ICAM-1的表达，抑制白细胞附着，防止血红蛋白氧化，有利于预防黑眼圈和眼袋的形成，预防衰老。实验表明，相对于单独使用植物提取物的组合，本发明提供的组合物的上述功能效果更好，而在置换或缺失了其中一种或多种辅料的情况下，无法实现相当的效果。本发明还提供了一种精华液，由甘油、丁二醇、丙二醇、β-葡聚糖、寡聚透明质酸钠、海藻糖、烟酰胺、肌醇、肌肽、熊果苷和本发明所述的组合物组成。本发明将金银花提取物、接骨木花提取物进行复配，所得组合物用于制备化妆品的精华液，实验表明，该精华液能够有效提升皮肤水分含量为79.38％～83.68％，给予肌肤充分保湿滋养，有利于皮肤屏障完整，有效抵御外部炎症因子入侵。该组合物能够在120min内，降低皮肤水分散失百分量1.08％～2.7％，与对照样相比，具有修复皮肤屏障的优势，能够有效抵御外部炎症。具有较好的抑制NO释放量，减少NO释放量为16.32％～21.14％；该组合物对自由基的清除率达到42.60％～47.60％，具有较好的抗氧化活性，内源性的消除自由基诱导的炎症反应。本发明提供的精华液中，甘油、丁二醇、丙二醇等组分，能够配合本发明提供的组合物，进一步提高组合物抑制油脂生成、补水、保湿的作用。具体的，本发明提供的精华液由如下质量分数的组分组成：一些实施例中，本发明提供的精华液由如下质量分数的组分组成：一些实施例中，本发明提供的精华液由如下质量分数的组分组成：一些实施例中，本发明提供的精华液由如下质量分数的组分组成：本发明提供的精华液中，还包括水、防腐剂和增稠剂。所述防腐剂为PHL；所述增稠剂为黄原胶。所述精华液中，所述水的质量分数为85.61％～86.91％。其中，所述防腐剂的质量分数为1％，所述增稠剂的质量分数为0.15％。本发明所述精华液在制备抗炎化妆品中的应用。本发明所述精华液在制备抗氧化的化妆品中的应用。本发明所述精华液在制备补水化妆品中的应用。本发明所述精华液在制备保湿化妆品中的应用。本发明所述精华液的制备方法包括：75℃～80℃，将甘油、丁二醇、丙二醇、寡聚透明质酸钠、海藻糖、β-葡聚糖、熊果苷、烟酰胺、肌醇、增稠剂和水混合，500r/min～600r/min搅拌30min；降温至55℃～60℃，依次加入肌肽，金银花提取物、接骨木花提取物，300r/min～350r/min搅拌15min；降温至45℃～50℃，加入防腐剂，150r/min～200r/min搅拌10min；冷却至室温。所述室温为18℃～30℃。本发明还提供了一种补水、保湿、抗炎和/或抗氧化的化妆品，包括本发明所述精华液。本发明所述的化妆品包括：面贴膜或眼贴贴。所述化妆品为面膜，则其中还包含面膜基质。本发明将金银花提取物、接骨木花提取物进行复配，所得组合物与甘油等组分进行混合，形成的精华液能够具有抗炎、抗氧化、补水、保湿作用。实验表明，本发明的精华液能够有效提升皮肤水分含量为79.38％～83.68％，并能够在120min内，降低皮肤水分散失百分量1.08％～2.7％；该精华液对自由基的清除率达到42.60％～47.60％，且能够减少NO释放量。附图说明图1示各样品对NO释放量的影响；图2示各样品清除自由基的效果；图3示各样品对皮肤水分散失的影响；图4示各样品对皮肤含水量的影响。具体实施方式本发明提供了一种组合物及其在制备具有抗炎功能的化妆品中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明采用的原料皆为普通市售品，皆可于市场购得。金银花，又名忍冬花，为忍冬科半常绿缠绕灌木。本发明提供的金银花提取物主要含绿原酸、异绿原酸、木犀草素和皂苷，能够有效抑制金黄色葡球菌，大肠杆菌，绿脓杆菌等，且能够提升1L-4水平，激活神经钙蛋白，增强巨噬细胞功能，保护胶原蛋白。本发明采用湖南隆回花瑶地区小沙江金银花三青期，即采用绿蕾制备忍冬花提取物，且采摘时间为上午9:00至11：00；提取物的制备采用水浸提法。经检测，该提取物中绿原酸与异丙绿原酸活性组分含量较高，具有优异的抗菌，抗炎和抗氧化性能。接骨木(Sambucusnigra)为忍冬科植物，接骨木的花期为每年6～7月，花色黄白，带有麝香葡萄优雅甜香味。本发明采用接骨木的花朵为原料，采用水浸提法进行提取，所得提取物的活性成分主要为花色素，单宁，黄酮。玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰的花蕾。经研究表明，玫瑰花所含营养成分有：黄酮、有机酸、酚类、鞣质、生物碱、糖、氨基酸和蛋白质及多种矿物质元素。本发明采用玫瑰的花朵为原料，以水浸提法行提取，制备玫瑰提取物，该提取物中主要成分为：玫瑰多糖，玫瑰多酚，玫瑰黄酮。由于玫瑰花提取物中有效成分与接骨木花提取物类似，因此以该组分替换接骨木花提取物，进行效果的对比。甘油又称丙三醇，具有吸水作用，用作保湿剂。丁二醇是多元醇的一种，在化妆品中常做为保湿剂或溶剂使用，本发明采用的丁二醇为1,3丁二醇；丙二醇具有保湿和抗菌的作用，本发明采用的丙二醇为1,2-丙二醇；β-葡聚糖是又称右旋糖酐，主要由D-葡萄吡喃糖以α，1→6键连接，支链点有1→2、1→3、1→4连接。本发明采用的β-葡聚糖的分子量为6万～50万。寡聚透明质酸钠是由透明质酸降解制备的分子量极低的透明质酸分子，具有皮肤保湿的功能。本发明采用的寡聚透明质酸钠的分子量为10000。海藻糖又称漏芦糖、蕈糖等，具有细胞保护的功能。烟酰胺，又称尼克酰胺，是烟酸的酰胺化合物，在化妆品中作为营养性添加剂。肌醇又名肌糖、环己六醇或纤维醇(肌糖)，参与体内新陈代谢活动。肌肽(L-Carnosine)，学名β-丙氨酰-L-组氨酸，是由是一种由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的二肽，实可清除在氧化应激过程中使细胞膜的脂肪酸过度氧化而形成的活性氧自由基(ROS)以及α-β不饱和醛。熊果苷又名熊果素，能够减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，同时还有杀菌、消炎的作用。其可提取自植物，也可通过人工化学合成。下面结合实施例，进一步阐述本发明：实施例1～3配方如表1表1实施例1～3配方1)按照配方配比称量甘油，丁二醇，丙二醇，寡聚透明质酸钠，海藻糖，β-葡聚糖、熊果苷、烟酰胺，肌醇，黄原胶和去离子水，将温度升高至75～80℃，以500～600r/min，搅拌30min，直至组分全部溶解；2)将温度降低至55～60℃，依次加入肌肽，金银花提取物，接骨木花提取物，以300～350r/min搅拌15min，直至全部均匀混合；3)将温度降低45～50℃，添加防腐剂PHL，以150～200r/min搅拌10min，冷却到室温即可。对比例1～3配方如表2表2对比例1～3配方1)按照配方配比称量甘油，丁二醇，丙二醇，寡聚透明质酸钠，海藻糖，β-葡聚糖、熊果苷、烟酰胺，肌醇，黄原胶和去离子水，将温度升高至75～80℃，以500～600r/min，搅拌30min，直至组分全部溶解；2)将温度降低至55～60℃，依次加入肌肽，金银花提取物，提取物B，以300～350r/min搅拌15min，直至全部均匀混合；3)将温度降低45～50℃，添加防腐剂PHL，以150～200r/min搅拌10min，冷却到室温即可。功效评测1LPS诱导RAW264.7细胞释放NO抑制作用1.1实验原理：LPS(脂多糖)：位于革兰氏阴性细菌细胞壁最外层的一层较厚(8-10nm)的类脂多糖类物质，由类脂A、核心多糖和O-特异侧链3部分组成。脂多糖是内毒素和重要群特异性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分组成。脂质A(LipidA)为构成内毒素活性的糖脂，以共价键联结到杂多糖链，有两部分：一是核心多糖，在有关的株内是恒定的；另一O特异性链(O-specificchain)是高度可变的。大肠杆菌的脂多糖在实验室免疫学中是常用的B细胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonalactivator)。本实验利用LPS诱导RAW264.7细胞产生过敏反应，释放NO(一氧化氮)。Griessassay–NO含量测试方法NO在体内或水溶液中极易氧化成NO2，在酸性条件下，NO与重氮盐磺胺发生重氮反应，并生成重氮化合物，后者进一步与萘基乙烯基二胺发生耦合反应，该反应生成的产物浓度与NO浓度具有线性关系，在540nm处有最大吸收峰。1.2实验材料和方法：1.2.1材料：DMEM，FBS，LPS，MTT，Griessreagent1.2.2实验方法：RAW264.7细胞培养将RAW264.7细胞用移液枪吸取DMEM培基吹散分散细胞，利用Hemacytometer来计数细胞，然后利用DMEM来稀释细胞，稀释到浓度为5×104cells/ml。稀释后的细胞溶液分别接种到96well中，每一孔为100ul，即5×103cells/well。在37℃，5％CO2的培养箱中培养24小时。待测样品和空白样准备：待测样品用DMEM培基稀释，稀释后的浓度分别为：1％(该浓度通过前面的MTT测试，结果为无毒)名称ControlSample(实施例1～3、对比例1～3)样品组成LPS10ppmLPS10ppm+1％sample细胞培养24小时后，观察细胞是否完全贴壁生长，如果细胞完全贴壁生长的话，将原培基移除，用DPBS洗涤。将DPBS移除之后，分别加入前面准备好的样品。样品的溶度根据毒性测试的结果选择安全浓度1％(20ul/well)。样品加入之后，放入37℃，5％CO2的培养箱中培养20小时。20小时后，移取50ul的培养基到新的96Well上，加入相同体积的1％Griessreagent，充分混合后，于暗处反应10分钟。利用ELISAreader在540nm处测试样品的吸光光度值。NO抑制作用NOInhibition％＝((〖OD〗_Control-〖OD〗_Sample)/〖OD〗_Control)×100％其中：〖OD〗_Control-空白样的吸光光度值〖OD〗_Sample-样品的吸光光度值1.3抑制炎症结果如图1，结果显示，本发明的精华液具有较好的抑制NO释放量，能够减少16.32％～21.14％的NO释放量，说明该精华液具有较好的抗炎性能。与各对照样相比，实施例1～3的效果更优，存在显著性差异(p<0.05)，与对比例1相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，接骨木花提取物与金银花提取物复配能够取得更好的抗炎效果；与对比例2相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明辅料对组合物的效果产生显著的影响。与对比例3相比，实施例3的抗炎效果更优，该效果存在统计学差异(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，只有维持适当的配比，才能够取得良好的增效协同的效果。在各个实施例中，实施例3的效果最优，与实施例1～2存在显著性差异(p<0.05)，说明该配比与用量为最适选择。2DPPH法自由基清除能力测定2.1测试准备(1)DPPH测试液配置准确称量1mgDPPH，95％乙醇定容与50ml容量瓶，超声3min使之完全溶解。量取1ml溶液测量519nm处吸光度A，A值在0.6～0.8之间可用。(2)Vc标准曲线测定Vc用去离子水配置成0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mmol/L五个不同浓度。小试管中加入2mlDPPH溶液，100μlVc溶液，400ul95％乙醇，混合摇匀，静置5min，测A值(519nm)。空白对照为100μl去离子水。作图-1浓度-吸光度标准曲线。Vc清除率＝(A0-AX)/A0A0：去离子水空白对照，Ax：Vc吸光度(3)样品测定样品溶液100μl，照(2)中步骤检测，为避免溶液颜色影响，设置不加DPPH对照组，计算吸光度为样品吸光度减去对照组吸光度。每测一个用量需要测三个平行数据。而且在每测一个用量的三个平行数据后，都要重测一次A0。测得样品吸光度、清除率、对比Vc抗氧化能力和样品总抗氧化能力如表-1。2.2实验结果如图2，结果显示，实施例1～3的精华液具有自由基清除的功能，自由基清除率达到42.60％～47.60％，说明具有较好的抗氧化活性，内源性的消除自由基诱导的炎症反应。与对比例1相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，接骨木花提取物与金银花提取物复配能够取得更好的抗氧化效果；与对比例2相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明辅料对组合物的效果产生显著的影响。与对比例3相比，实施例1的抗氧化效果更优，该效果存在统计学差异(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，只有维持适当的配比，才能够取得良好的增效协同的效果。在各个实施例中，实施例3的效果最优，与实施例1～2存在显著性差异(p<0.05)，说明该配比与用量为最适选择。3经皮水分散失评价3.1测试原理该试验仪器的测量原理来源于FICK菲克扩散定律：dm/dt＝D.A.dp/dx。通过两组温度、湿度传感器测定近表皮(约1cm内)由角质层水分散失在不同亮点形成的水蒸气压梯度，直接测出经皮散发的水分量。TEWL值是皮肤屏障好坏的一个重要标志，皮肤的TEWL值越低，说明皮肤的屏障功能越好，反之越差。3.2试验条件和志愿者要求测试环境条件：测试环境温度为22±1℃，湿度为50±5％，并且进行实时动态检测；志愿者要求：有效志愿者至少30人，年龄在16-65岁之间(妊娠或浦乳期妇女除外)：前臂测试区域电容法皮肤水分测定意义的基础值在15-100之间：无严重系统疾病，无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；无活动性过敏疾病者；既往对护肤类化妆品无严重过敏史者；近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者：为参加其他临床试验者；按规定使用受试药物且资料齐全；测试前所有自愿者应填写知情同意书；3.3测试前准备受试部位前2-3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品)。实验前，受试者需要同意清洁双手前臂内测，用干的面巾纸擦拭干净。清洁后受试者双手前臂内测做好测量区域标记。正式测试前应在符合标准房间内静坐至少30min，不能喝水，前臂暴露，呈测试状态放置，保持放松。3.4测试步骤实验中左右手臂内侧标记3×3cm2试验区域，同一手臂可以标记多个区域，区域间隔1cm。测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上。使用电容法皮肤测定仪进行受试区域和对照区域的测量。每个区域依照平行测定15次。先测量各测试区域的空白纸，然后按2.0±0.1mg样品/cm2的用量，使用乳胶指套将试验均匀涂布于试验区内。涂抹分别测量1，2小时，4小时，受试区域和空白对照区域的皮肤含水量(验证时按此时间测定)，同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。3.5测试结果按实验设计分别测得各时段的TEWL值。其皮肤水分散失减少计算公司如下：T％＝(T0-T1)/T0×100％T％:皮肤水分散失减少百分比；T0：使用产品前皮肤水分散失量；T1：使用产品后皮肤水分散失量；结果如表3和图3：表3皮肤水分散失量(％)0min30min60min120min对比例10-7.19-16.04-10.22对比例20-6.03-10.78-5.01对比例30-7.40-9.24-6.88实施例10-4.21-5.56-3.16实施例20-0.381.341.08实施例30-3.850.572.70注：表中负值代表相对于T0皮肤水分散失量升高；正值代表相对于T0皮肤水分散失量降低。各实施例组合物能够在120min，降低皮肤水分散失百分量至1.08％～2.7％，具有修复皮肤屏障的优势，能够有效抵御外部炎症。与各对照样相比，实施例1～3的效果更优，存在显著性差异(p<0.05)，与对比例1相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，接骨木花提取物与金银花提取物复配能够取得更好的保湿效果；与对比例2相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明辅料对组合物的效果产生显著的影响。与对比例3相比，实施例3的保湿效果更优，该效果存在统计学差异(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，只有维持适当的配比，才能够取得良好的增效协同的效果。在各个实施例中，实施例3的效果最优，与实施例1～2存在显著性差异(p<0.05)，说明该配比与用量为最适选择。4皮肤水分含量MMV测试方法4.1测试原理此方法采用电容法测试人体皮肤角质层的水分含量，它的原理是基于水和其他物质的介电常数差异显著，按照皮肤含水量不同，测得皮肤的电容值不同，其观测参数可代表皮肤水分值。测试设备:德国CK公司多功能皮肤测试仪，型号CUTOMETERDUALMPA580，本专利选用皮肤水分含量测试探头和皮肤水分散失TEWL测试探头。4.2试验条件和志愿者要求测试环境条件：测试环境温度为22±1℃，湿度为50±5％，并且进行实时动态检测；志愿者要求：有效志愿者至少30人，年龄在16-65岁之间(妊娠或浦乳期妇女除外)：前臂测试区域电容法皮肤水分测定意义的基础值在15-100之间：无严重系统疾病，无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；无活动性过敏疾病者；既往对护肤类化妆品无严重过敏史者；近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者：为参加其他临床试验者；按规定使用受试药物且资料齐全；测试前所有自愿者应填写知情同意书；4.3测试前准备受试部位前2-3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品)。实验前，受试者需要同意清洁双手前臂内测，用干的面巾纸擦拭干净。清洁后受试者双手前臂内测做好测量区域标记。正式测试前应在符合标准房间内静坐至少30min，不能喝水，前臂暴露，呈测试状态放置，保持放松。4.4测试步骤实验中左右手臂内侧标记3×3cm2试验区域，同一手臂可以标记多个区域，区域间隔1cm。测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上。使用电容法皮肤测定仪进行受试区域和对照区域的测量。每个区域依照平行测定15次。先测量各测试区域的空白纸，然后按2.0±0.1mg样品/cm2的用量，使用乳胶指套将试验均匀涂布于试验区内。涂抹分别测量1小时，2小时，4小时，受试区域和空白对照区域的皮肤含水量(验证时按此时间测定)，同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。4.5测试数据按实验的设计分贝测得各时间段的MMV值。其水分含量计算公式如下：W％＝(W1-W0)/W0×100％W％:皮肤水分含量增加百分比；W0:使用产品前皮肤水分含量；W1:使用产品后皮肤水分含量；结果如表4和图4：表4皮肤水分含量增加(％)0min30min60min120min对比例1084.2366.2175.28对比例2088.2871.6267.05对比例3085.6456.3858.08实施例10115.85105.0779.38实施例20102.3387.0380.17实施例30113.4793.6283.68本发明组合物能使皮肤水分含量提高79.38％～83.68％，给予肌肤充分保湿滋养，有利于皮肤屏障完整，有效抵御外部炎症因子入侵。与各对照样相比，实施例1～3的补水效果更优，存在显著性差异(p<0.05)，与对比例1相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，接骨木花提取物与金银花提取物复配能够取得更好的补水效果；与对比例2相比，实施例3的效果更优(p<0.05)，说明辅料对组合物的效果产生显著的影响。与对比例3相比，实施例1的补水效果更优，该效果存在统计学差异(p<0.05)，说明在同等提取物用量下，只有维持适当的配比，才能够取得良好的增效协同的效果。在各个实施例中，实施例3的效果最优，与实施例1～2存在显著性差异(p<0.05)，说明该配比与用量为最适选择。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3