创伤性脑损伤的治疗的制作方法

本发明为医学营养学领域，更具体地涉及用于治疗创伤性脑损伤以及与其相关的症状和从创伤性脑损伤以及与其相关的症状中恢复的营养组合物。
背景技术：
：创伤性脑损伤(tbi)是获得性脑损伤的一种形式。tbi是一种严重的医学病症，可能在大脑受到重大外部物理撞击后发生。tbi是45岁以下人群残疾和死亡的主要原因，全球每年约有1000万新病例。根据“精神障碍诊断和统计手册(dsm-5)”中详细描述的诊断标准，tbi具有以下特征中的一项或多项：意识水平的改变；记忆障碍；与定向缺陷有关的混乱；神经系统体征，例如神经影像学可观察到的脑损伤、癫痫症的新发或恶化、视野缺损和轻偏瘫。虽然某些症状可能在受伤后立即出现，但其他症状可能会随着时间的推移而发展，这与受伤后神经基质的解剖学变化一致。tbi的初级阶段形成了由于球形肿块效应引起的挫伤或缺氧对脑组织的直接损害。只有通过改善的预防，才能减轻tbi的原发性损伤。继发性损伤在创伤后开始，并且成为与tbi相关的功能缺陷的基础。其随后通过诸如再灌注损伤、延迟的皮质水肿、血脑屏障(bbb)破坏、谷氨酰胺能过度兴奋和局部电解质失衡等机制发生。这些紊乱本身通过钙释放、谷氨酸盐毒性、脂质过氧化和线粒体功能障碍导致活性氧(ros)介导的神经变性。这种继发性损伤可能发生在与最初的假定损伤部位相邻的大脑中，从而可能在损伤后数月内使损伤区域意外扩大。目前，尚无治疗方法可应对此类不良后果。因此，开发有效的治疗性干预措施以在tbi后保护大脑并促进修复是一项特别紧迫的任务。tbi幸存者会经历许多缺陷，感觉运动障碍以及认知障碍是该损伤的常见后果。感觉运动障碍包括轻偏瘫、姿势不平衡、步态障碍和惊吓反射的早期急性破坏。tbi可导致运动迟缓、摇摆不正常和受损的反应时间。早期平衡障碍是tbi后预后恶化的预兆。感觉运动问题可能会随着时间的推移而改善，尽管取决于严重程度，缺陷可能会持续至创伤后的前1-2年。在认知领域，在记忆、注意力和信息处理速度方面观察到障碍，与轻度或中度tbi相比，更严重的tbi引起更大和更持久的缺陷。尚没有足够的tbi治疗方法来预防这些长期影响。许多脂质共混物已被用于制备用于改善脑功能的食品。tbi事故发生后立即(静脉)输注大量dha可减少tbi对动物模型脑功能的不利影响。据信，每天只有少量的dha进入大脑，并且仅在事故发生后数小时内给予dha补充才有用。wo2006/118665公开了一种通过使用所谓的生酮饮食增加内源酮水平来减少哺乳动物脑中蛋白质聚集的方法。与标准喂养的患者相比，禁食或维持生酮样饮食以尽量减少高血糖的tbi患者表现出明显降低的血浆葡萄糖和乳酸浓度、升高的β-羟基丁酸酯水平和更好的尿液氮平衡。生酮饮食(kd)被认为导致脑能量代谢的适应性改变，从而增加了能量储备。据信，这有助于神经元在能量需求增加的情况下保持稳定，并可能给予神经保护作用。在生酮饮食中，碳水化合物水平受到限制。标准的生酮饮食包含一定量的脂质(重量)，约为蛋白质和可消化的碳水化合物总重量的4倍。脂肪酸被用作主要的能量(fuel)来源。这些通过细胞线粒体中的脂肪酸氧化来使用。正常情况下，大脑仅由葡萄糖提供能量，血浆脂蛋白形式的脂质因此无法在很大程度上跨越血脑屏障。肝脏可以使用长链脂肪酸合成3种酮体β-羟基丁酸酯、乙酰乙酸酯和丙酮。这些酮体可以在条件下进入大脑并充当葡萄糖的替代物。此外，中链脂肪酸辛酸(c8)和庚酸(c7)可以穿过血脑屏障并被大脑使用。当葡萄糖和酮体同时被呈递至神经元时，葡萄糖将成为最优选的能源。这就是为什么标准的生酮饮食具有大量的脂质，几乎没有任何可消化的碳水化合物的原因。通常，当饮食中可消化的碳水化合物的量增加时，生酮性的程度会大大降低。中链甘油三酸酯生酮饮食(mctkd)是其变体。1970年代开发的最初mct饮食，其60％的卡路里源自mct油。而且，食用此量的mct油会引起腹部绞痛、腹泻和呕吐，这是其使用的严重缺点。这种饮食就像生酮饮食一样，不适口，这使得其难以坚持被食用。另外，高脂饮食对生命的健康影响可能是相当大的。低血糖指数饮食是另一种变体。血糖指数在0-100范围内将碳水化合物按照其升高血糖的潜力进行分类。低血糖指数饮食允许更多的可消化的碳水化合物摄入，但碳水化合物仅限于血糖指数低(通常认为血糖指数为55或更低)的那些。在实践中，低血糖指数营养不会诱发生酮状态，且人们发现饮食通常难以坚持被食用。改良的阿氏饮食(mad)是传统生酮饮食的另一种更为丰富的变化，其主要受限于可消化的碳水化合物的量。虽然生酮饮食通常以4∶1或3∶1的生酮比率(即脂肪量与蛋白质和可消化的碳水化合物的总量之比)提供，但mad的比率约为1∶1，这允许更多蛋白质和碳水化合物的摄入量，并且需要更少的脂肪摄入量。然而，mad的缺点是食用mad的患者难以顺从，且摄入了维持酮症的足够脂肪。wo2015/034812涉及一种生酮饮食及其用于治疗危重病的用途。它提到标准的生酮饮食每克合并的蛋白质和碳水化合物含有3-4g脂肪，但长期的依从性是一个问题。这保持不变，但关注的是使用碳水化合物作为危重病的主要热量来源，因为这会引起一些伴随的问题。鉴于此，碳水化合物水平降低。饮食包含的脂肪部分(包括dha、epa和mct)提供50-80％的卡路里，蛋白质部分提供10-35％的卡路里，其中饮食中的任何碳水化合物都限于0-10％的卡路里。在实施例1中，提供了一种肠内组合物，其中脂肪和蛋白质各为100g。wo2012/113415描述了用于恶性脑癌和脑肿瘤的组合物。它是指它是一种营养完整的、可商购的4∶1生酮配方物。该生酮比与下面的实施例和表1中提供的比较数据一致。mayumiprins等人“thecollectivetherapeuticpotentialofcerebralketonemetabolismintraumaticbraininjury”j.lipidresearchvol.55no.12(2014)p.2450-2457描述了tbi中的脑酮代谢。它提到了可商购的生酮配方物，例如bioservf5848(3:1)、bioservef6666(4:1)和teklad96355(4:1)。因此，本发明的一个目的是提供一种饮食和营养干预，其在患有tbi的受试者中不具有生酮饮食的上述缺点，并且提高了从tbi的恢复率。技术实现要素：发明人已经观察到用于治疗创伤性脑损伤(tbi)的肠内(优选口服)给药的营养组合物，其包含(a)脂质、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包含治疗有效量的(i)二十二碳六烯酸(22:6；dha)和任选地二十碳五烯酸(20:5；epa)，和(ii)中链甘油三酸酯(mct)，优选基于脂肪酸计至少2重量％的c8和c10mct；并且所述营养组合物(d)的生酮重量比为1.4∶1至3∶1，优选为1.8∶1至2.7∶1，更优选为1.8∶1至2.5∶1。所述营养组合物成功地改善了经历创伤性脑损伤的哺乳动物受试者(优选人)的恢复。因此，本发明的组合物可以用于治疗创伤性脑损伤(tbi)和从创伤性脑损伤(tbi)中的恢复，其中营养组合物经肠内，优选口服给予。营养组合物的血糖指数优选低于69，优选低于65，蛋白质部分的存在量优选为组合物的至少15重量％，优选为组合物的至少16-25重量％，更优选为组合物的17-21重量％，并且组合物优选至少包含低聚果糖。在一个实施方案中，组合物更优选还包含纤维素，在这种情况下，纤维素和低聚果糖优选以2∶1至1∶2的重量比存在。在优选的实施方案中，组合物包含治疗有效量的(i)二十二碳六烯酸(22:6；dha)和二十碳五烯酸(20:5；epa)，优选dha和epa之和的量为1-5重量％，(ii)中链甘油三酸酯(mct)，优选基于脂肪酸重量计c8、c10和c12mct之和为至少5重量％；以及所述营养组合物的生酮重量比为1.8∶1至2.5∶1，其中所述组合物的血糖指数低于65，并且其中蛋白质部分的存在量优选为组合物的17-21重量％，并且组合物优选至少包含低聚果糖，更优选纤维素和低聚果糖，最优选以2∶1至1∶2的重量比。实验部分参照了tbi模型。在tbi小鼠模型中评估了本发明的营养组合物(“kone”)的肠内(口服)干预对学习和空间记忆、(新物体)识别和焦虑以及运动平衡和警觉性的影响。干预在上述各个方面均表现出成功，而在tbi的背景下，这些方面均受到损害。本发明还涉及一种转变为生酮代谢和/或维持生酮代谢的方法，其包括向患有创伤性脑损伤和/或与创伤性脑损伤有关的症状的受试者施用包含如上所定义的(a)-(i)、(a)-(ii)和(b)的营养组合物。附图说明下文将参考附图更详细地讨论本发明，其中：图1描绘了在实验1中进行的实验的时间轴，其中c57b16小鼠被分为4个实验组：1)进行颅骨切开术并接受对照饮食的对照组(颅骨对照)，2)经历tbi的控制性皮质撞击(cci)模型(tbi处理)并接受对照饮食的组(cci对照)，3)经历tbi处理并接受fortasynconnect饮食的组，所述fortasynconnect饮食包含dha、epa、ump、胆碱、叶酸、硒、磷脂和维生素b6、b12、c和e(cci-fc)和4)经历tbi处理并接受本发明的改良的生酮饮食的组(cci-kone)。图2a显示了在tbi处理或对照干预后的70天内，实验1的小鼠的4个不同治疗组的改良的神经病学严重性评分(mnss)。图2b显示了在所述4组动物中tbi或对照干预后第1天至第28天的mnss。使用mnss评估的神经行为结果显示，相对于cci对照组，cci-fc和cci-kone处理的动物有明显改善。注意到创伤后3天即可改善，持续了整个研究过程。相对于cci对照动物＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001。图3显示了在4组动物中，在3个测试日来自rotarod的以毫秒(msec)计的下降的等待时间。cci-fc和cci-kone处理在rotarod测试中减少了由损伤引起的损害，该测试在受伤后头3天对受伤的动物进行。相对于cci对照动物＊p＜0.05；＊＊＊p＜0.001。图4显示了4个治疗组中morris水迷宫(mwm)中首次进入平台区域的平均等待时间(以秒为单位)。在wmw测试中，cci-kone和cci-fc组中，由kone和fc补充的饮食分别消除了探索试验中显示的损伤引起的缺陷。图5显示了实验2的新型物体识别测试结果，该结果是用6组不同的c57b16小鼠进行的。首先将小鼠分为颅骨切开术(假处理)和经历tbi处理(cci)的小鼠，并在干预后分配给以下饮食干预组，其接受以下饮食：1)对照饮食(对照)，2)生酮饮食，其包含73重量％脂质(酮)或3)本发明的改良的生酮饮食(kone)。对照处理不会损害新的物体识别，而cci处理则引起探索性行为的重大损害，这在kone(cci-kone)处理的cci组中得到了显著逆转。组间差异用单向方差分析＊p＜0.05进行检验。图6显示对于实验2的动物，cci干预会导致小鼠的探索性行为和空间识别能力受损，这种作用在cci-kone组中用kone治疗后得到逆转。图7绘制了β-羟基丁酸酯(b-hb)的血浆水平，其在cci-kone组中显示出比其他组(空白(naieve)对照、颅骨对照和cci对照)更高：＊＊p＜0.01。优选实施方案列表1.一种用于治疗创伤性脑损伤(tbi)的肠内营养组合物，其包含(a)脂质部分、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包含治疗有效量的：-(i)dha和任选地epa，和-(ii)中链甘油三酸酯，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10中链甘油三酸酯；并且其中组合物的生酮重量比为1.4∶1至3∶1。2.根据实施方案1使用的肠内营养组合物，其中组合物的血糖指数低于69，优选低于65。3.根据实施方案1或2使用的肠内营养组合物，其中(c)蛋白质部分的支链氨基酸含量，优选包含基于蛋白质部分重量计至少10重量％的游离亮氨酸。4.根据前述实施方案中任一项使用的肠内营养组合物，其包含基于脂肪酸重量计小于2重量％的ala。5.根据前述实施方案使用的肠内营养组合物，其中tbi的治疗涉及提高从tbi的恢复率。6.根据前述实施方案使用的肠内营养组合物，其中tbi的治疗涉及增强从tbi的感觉运动恢复。7.根据前述实施方案使用的肠内营养组合物，其中tbi的治疗涉及增强从tbi的认知恢复。8.根据前述实施方案使用的肠内营养组合物，其中tbi的治疗涉及改善tbi后的空间记忆。9.根据前述实施方案使用的肠内营养组合物，其中组合物是管饲物。10.一种肠内营养组合物在制备用于治疗tbi的产品中的用途，其包含(a)脂质部分、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包含治疗有效量的(i)dha和任选地epa，和(ii)中链甘油三酸酯，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10中链甘油三酸酯，并且其中组合物的生酮重量比为1.4∶1至3.0∶1。11.一种治疗创伤性脑损伤(tbi)的方法，其包括给予肠内营养组合物，所述肠内营养组合物包含(a)脂质部分、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包括治疗有效量的(i)dha和任选地epa，和(ii)中链甘油三酸酯，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10中链甘油三酸酯，并且其中组合物的生酮重量比为1.4∶1至3.0∶1。12.一种肠内营养组合物，其包含(a)脂质部分、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包含：-(i)dha和任选地epa，和-(ii)中链甘油三酸酯，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10中链甘油三酸酯，并且其中组合物(d)的生酮重量比为1.4∶1至3.0∶1。13.根据实施方案12的肠内营养组合物，其中组合物的血糖指数低于69，优选低于65。14.根据实施方案12或13的肠内营养组合物，其中(c)蛋白质部分具有支链氨基酸成分，其优选包含基于蛋白质部分重量计至少10重量％的游离亮氨酸。15.根据实施方案12至14中任一项的肠内营养组合物，其包含基于脂肪酸重量计小于2重量％的ala。具体实施方式发明人发现，本发明的组合物对于tbi的治疗是有效的，并且改善了从tbi和与其相关的神经行为症状中的恢复。本发明的方法和用途包括将以下概述的组合物施用于需要其的患有tbi或患有继发于tbi的认知和/或感觉运动损伤的哺乳动物受试者，优选为需要其的人类。在优选的方面，本发明的组合物至少在诊断为tbi后不久，优选在诊断为tbi后2小时内开始给药。在优选的方面，规定给予或使用组合物至少5天，更优选至少7天，甚至更优选至少14天，最优选至少1个月，特别是至少3个月。在一个实施方案中，组合物用作唯一的营养。在优选的实施方案中，组合物提供每日能量摄入的10％至30％，更优选15％至25％。在一个优选的实施方案中，患有tbi或从tbi中恢复的受试者具有酮稳态或酮症状态。在本发明的一方面，组合物可以用作生酮饮食的一部分。在一个方面，本发明涉及如下所述的组合物，其用于预防和/或治疗特征在于由tbi诱导的脑功能障碍导致的受损的脑功能的病症，即用于患有tbi或从tbi中恢复的受试者。在一个方面，本发明涉及如下所述的组合物，其用于预防和/或治疗患有tbi的后遗症或从tbi中恢复的受试者的感觉运动障碍和/或认知障碍。或者，本发明涉及如下所述的组合物在制备用于治疗tbi和由tbi引起的认知和/或感觉运动症状的组合物中的用途。在一个方面，本发明涉及一种用于治疗创伤性脑损伤(tbi)的肠内营养组合物，其包含(a)脂质部分、(b)可消化的碳水化合物部分和(c)蛋白质部分，其中脂质部分包含治疗有效量的：(i)dha以及任选地epa，和(ii)中链甘油三酸酯，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10中链；并且其中组合物的生酮重量比为1.4∶1至3∶1。在一个方面，本发明涉及一种组合物，其包含治疗有效量的(i)二十二碳六烯酸(22:6；dha)和任选地二十碳五烯酸(20:5；epa)，和(ii)中链甘油三酸酯(mct)，优选基于脂肪酸重量计至少2重量％的c8和c10mct，和(iii)la和ala，其重量比优选在8∶1至12∶1的范围内；(b)蛋白质部分，其包含基于蛋白质部分重量计至少10重量％的游离亮氨酸；和(c)可消化的碳水化合物部分，其包含低血糖指数碳水化合物，优选半乳糖和异麦芽酮糖；(d)所述营养组合物的生酮比为1.4∶1至3∶1。在整个申请中，可以使用以下术语和缩写：中链甘油三酸酯(mct)是在少量食物中发现的一种脂肪，例如椰子油和棕榈仁油。mct被定义为具有6个碳原子(c6:0)、7个碳原子(c7:0)、8个碳原子(c8:0)、9个碳原子(c9:0)、10个碳原子(c10:0)、11个碳原子(c11:0)或12个碳原子(c12:0)的直链或支链，优选直链的饱和羧酸。标准的生酮饮食包含一定量的脂质(以重量计)，其通常是蛋白质和可消化的碳水化合物的总重量的4倍。在本发明的上下文中，所谓的生酮(重量)比是组合物中脂质的量与蛋白质和可消化的碳水化合物的组合重量的重量比。本发明的组合物优选特征在于生酮重量比为1.4∶1至3∶1，更优选为1.6∶1至2.9∶1，更优选为1.8∶1至2.7∶1，更优选为1.8∶1和2.5∶1，最优选2∶1至2.5∶1。在优选的实施方案中，本发明的饮食中的生酮重量比为约2.3∶1。在本发明的生酮比的上述(子)范围内，本发明的组合物包含的脂质含量优选为碳水化合物含量的至少两倍(按重量计)。食物的血糖指数(gi)是特定食物对血糖水平的餐后作用的0-100的等级。得分为100的标准是纯葡萄糖。在1-100的等级上，本领域技术人员通常认为食物组合物的分数低于55为低的，分数为59至56为中等。创伤性脑损伤是指由外部机械力引起的对大脑的损害。tbi可能是由跌倒、枪伤、运动事故、建筑事故和车辆事故等引起的。如所报道的，创伤性脑损伤是士兵在战争中受到的最普遍的损伤(例如，在伊拉克和阿富汗的美军中)。tbi的受害者可能会在受伤后经历许多身体、认知、社交、情感和/或行为障碍的困扰。初级影响导致主要表现出坏死性死亡的直接神经细胞丢失，然后通常继之以一系列继发性损伤，包括兴奋性中毒、氧化性应激、线粒体功能障碍、血脑屏障破坏和炎症。根据“精神障碍诊断和统计手册(dsm-5)”中详细描述的诊断标准，tbi具有以下特征中的一项或多项：意识水平的改变；记忆障碍；与定向缺陷有关的混乱；神经系统体征，例如神经影像学可观察到的脑损伤、癫痫症的新发或恶化、视野缺损和轻偏瘫。在行为水平上，tbi幸存者经历各种各样的缺陷；感觉运动障碍是这种损伤的常见后果，包括轻偏瘫、姿势不平衡、步态障碍和惊吓反射的早期急性破坏。可以使用改良的神经病学严重性评分(mnss)、rotarod和步态分析来评估tbi后的这些感觉运动障碍，如下文进一步解释。tbi还经常导致认知领域的缺陷，例如记忆、注意力和信息处理速度。可以使用莫里斯水迷宫(mwm)在小鼠中评估tbi后的空间记忆，使用新物体识别测试通过视觉物体识别记忆评估记忆改变。可以使用y迷宫交替来评估空间记忆和识别。另外，tbi幸存者经常表现出加剧的焦虑、激动和行为抑制的延迟发展。使用升高的零迷宫评估小鼠的行为抑制和焦虑。改良的神经病学严重性评分(mnss)是用于评估实验的运动能力、平衡和警觉性的方案。在tbi后用本发明的组合物的干预使得运动能力、平衡和警觉性得到改善。在本发明的一方面，tbi的治疗包括tbi后的感觉运动障碍的治疗和/或改善。感觉运动恢复是感知身体或四肢的运动、触觉和位置并产生自适应的、计划的协调运动的能力。莫里斯水迷宫(mwm)是一种行为测试，用于评估必须使用远端提示定位淹没的平台的啮齿动物的学习和空间记忆。发现在tbi的情况下学习和空间记忆受到损害。在本发明的一方面，在tbi模型中用本发明的组合物进行治疗使得mwm的性能改善。在本发明的另一方面，用治疗水平的本发明组合物进行干预使得患有tbi的受试者的学习和空间记忆得到改善。新物体识别测试基于啮齿动物在其环境中探索新物体的先天趋势，并且涉及识别记忆的评估。对新物体的优先探索表明了成功的识别。尽管发现在tbi后小鼠中识别记忆受到干扰，但是用本发明的组合物进行干预使得nor测试结果和识别得到改善。在本发明的一方面，用治疗水平的本发明的组合物的治疗使得患有tbi的受试者中的识别记忆得到改善。y迷宫交替是一种行为测试，用于测量啮齿动物探索新环境的意愿。啮齿动物通常更喜欢研究迷宫的新臂，而不是返回以前曾去过的那个臂。用本发明的组合物的干预改善小鼠的探索性行为。在本发明的一方面，用治疗水平的本发明的组合物的治疗使得患有tbi的受试者的空间记忆和空间识别得到改善。使用catwalk系统进行的猫道(catwalk)测试是一种灵敏的步态分析工具，它能够以独立于观察者的方式检测动物中精细的运动缺陷。用本发明的组合物进行干预可显著改善tbi后的步态障碍。本发明提供了一种通过在损伤后的治疗有效时间内向哺乳动物施用治疗有效量的营养组合物来治疗哺乳动物中的创伤性脑损伤，以减少脑部继发性损伤并治疗所述哺乳动物的创伤性脑损伤的方法。在本发明的一方面，治疗涉及提高从tbi的恢复率。在本发明的实施方案中，用于治疗tbi的方法改善了tbi后的神经和脑功能。在本发明的另一个实施方案中，本发明所用的方法、产品、用途或组合物可改善从tbi的恢复率。在一个实施方案中，治疗改善了tbi后的感觉运动恢复、tbi后的认知恢复、tbi后的行为表现和tbi后的空间记忆中的一种或多种。在本发明的一方面，治疗改善了tbi后的感觉运动恢复。在本发明的另一方面，治疗改善了tbi后的认知恢复。在本发明的另一方面，治疗改善了tbi后的行为表现。在本发明的另一方面，治疗改善了tbi后的空间记忆。在本发明的另一个实施方案中，本发明所用的方法、产品、用途或组合物用于产生酮体，特别是乙酰乙酸酯、β-羟基丁酸酯和丙酮，其中酮体的血浆水平足以提供对患有tbi的受试者的治疗作用。在优选的实施方案中，所有酮体之和的血浆浓度将不超过5mm。β-羟基丁酸酯的血浆浓度优选高于200μm，更优选高于250μm。在本发明的一方面，组合物旨在作为完全营养，在一个实施方案中作为管饲物。在本发明的一方面，本发明所用的方法、产品、组合物的用途是肠内组合物，优选用于口服。在一方面，组合物可以呈液体形式，呈饮料形式。在本发明的实施方案中，本发明所用的方法、产品、用途或组合物用于在不引起酮症的情况下补充酮体及其前体。在本发明的一方面，所用的方法、产品、用途或组合物为每日一次、每日两次或每日三次的营养补充剂。下文提供本发明的组合物的更多细节。凡提及本发明的组合物或仅提及组合物，均等同地适用于本发明的组合物和产品，以及其在根据本发明所用的组合物中的用途，根据本发明的用途和根据本发明的方法。类似地，根据本发明的方法的引述同样适用于所使用的组合物和根据本发明的用途，反之亦然。本发明的产品、组合物或组合通常是肠内组合物，即优选用于口服施用。优选以液体形式给药。优选地，组合物包含水，其中其他组分溶解或悬浮在其中。在优选的实施方案中，本发明的肠内组合物易于通过管给药，即其具有低粘度和低密度，它是ph中性的，具有良好的贮存稳定性，并且不离析、聚结或沉淀。优选地，本发明的肠组合物提供了完整的营养组合物。在本发明的实施方案中，(d)本发明的产品、组合物或组合的生酮比优选特征在于，生酮比为1.4∶1至3∶1，更优选为1.6∶1至2.9，更优选为1.8∶1至2.7∶1，更优选为1.8∶1至2.5∶1，最优选为2∶1至2.5∶1。在优选的实施方案中，提供的本发明的饮食的生酮重量比为约2.3∶1。在本发明的生酮比的上述(子)范围内，本发明的组合物优选包含的脂质含量为可消化的碳水化合物的至少两倍(以重量计)。在一个实施方案中，用于治疗tbi的方法包括向需要其的哺乳动物受试者口服施用包含脂质部分的产品、组合物或组合。脂质部分用于提供本发明的脂质部分(a)的脂质的合适来源是食品级成分，例如衍生自鸡蛋、牛奶、蔬菜或植物材料、海洋生物如鱼或藻类、天然或突变的生物的那些，或通过修饰天然脂质制备的脂质，来自这些来源如提取物、分离物、酯交换的脂质等的加工脂质，合成化合物或其组合。在一个实施方案中，脂质部分优选提供本发明的组合物、组合或产品的卡路里总量的至多85％，更优选卡路里总量的至多80％，更优选至多75％的卡路里，更优选至多70％的卡路里，优选至多65％的卡路里。在一个实施方案中，脂质部分优选提供卡路里的55-85％，更优选卡路里的55-80％，更优选卡路里的55-75％，甚至更优选卡路里的55-70％。其余的卡路里通常由可消化的碳水化合物和蛋白质提供。这是基于以下假设：脂质、碳水化合物和蛋白质分别产生约9、4和4kcal/g，这3种成分共同组成了组合物的所有热量供应。ω-3lc-pufa本发明的方法、产品、组合物或组合优选包含治疗有效量的(i)至少一种ω-3长链多不饱和脂肪酸(lc-pufa；链长为18个或更多碳原子)，其选自二十二碳六烯酸(22:6，n-3；dha)和二十碳五烯酸(20:5n-3；epa)。优选地，本发明的组合物、产品或组合至少包含dha。lcpufa优选以甘油三酸酯、甘油二酸酯、甘油单酸酯、游离脂肪酸或其盐或酯、磷脂、溶血磷脂、甘油醚、脂蛋白、神经酰胺、糖脂或其组合的形式提供。优选地，本发明的产品、组合物或组合至少包含甘油三酸酯形式的dha。合适的ω-3lcpufa和/或dha来源包括金枪鱼油、(其他)鱼油、富含dha的烷基酯、藻油、蛋黄或富含ω-3lcpufa的磷脂，例如磷脂酰丝氨酸-dha。优选地，本发明的产品、组合物或组合包含提供ω-3lcpufa的鱼油。ω-3lcpufa的另一个特别合适的来源是藻油。就产品、组合物、组合或方法而言，方法、产品或组合物中ω-3lcpufa(至少dha，优选dha和epa)在总脂肪酸中的比率优选为总脂质部分的1至40％，更优选1至30重量％，更优选1至15重量％，更优选1至10重量％，甚至更优选1至6重量％，最优选1至3重量％。在优选的实施方案中，碳数大于20的长链多不饱和脂肪酸的量为每100g脂肪酸至少2g，优选每100g脂肪酸3-50g，更优选每100g脂肪酸4-35g，最优选每100g脂肪酸5-20g。就每日剂量而言，本发明的方法优选包括每天施用400-5000mgdha+epa，更优选每天500-4500mgdha+epa，甚至更优选每天1000-4000mgdha+epa，最优选每天1500-3000mg。dha的施用量优选为每天200-4500mg，更优选为每天500-4000mg，最优选为每天750-3250mg。epa的施用量优选为每天200-4500mg，更优选为每天500-4000mg，最优选为每天750-3250mg。ala优选地，组合物中的α-亚麻酸[18:3n-3，ala]含量保持在低水平。虽然用于治疗阿尔茨海默氏症的产品提到“正常”ala水平高于总脂肪酸成分的3重量％，即约5重量％，但发现ala浓度优选维持在基于所有脂肪酸重量计小于2.0重量％，更优选小于1.5重量％，特别是小于1.0重量％的水平。优选的是，组合物包含基于脂肪酸重量计至少0.5重量％的ala。在实施例中列出的动物研究中，水平为每100g脂肪酸约1.5g。在一个实施方案中，亚油酸[18:2n-6，la]的浓度也显著降低至＜15g/100g脂肪酸的量，甚至小于10重量％。la浓度优选为脂肪酸的至少1重量％。la∶ala的重量比优选为4∶1至15∶1，更优选为7∶1至12∶1，甚至更优选为8∶1至12∶1，最优选为8.5∶1至10∶1。在一个实施方案中，本发明的组合物中的ω-3/ω-6重量比优选为0.3∶1至7∶1，优选为1.4∶1至5.9∶1，更优选为3∶1至5.5∶1，最优选为3∶1至5∶1，特别是小于5∶1。ω-6lcpufa的量优选小于组合物中脂肪酸的50重量％，优选5至40重量％，更优选8至30重量％。中链甘油三酸酯(mct)优选地，本发明的组合物、组合或产品包含(ii)mct。mct比普通脂肪(主要由lct组成)产生更多的酮，在饮食中掺入大量mct可使患者保持酮症，同时消耗相对大量的蛋白质和碳水化合物。mct在肝脏中转化为β-羟基丁酸酯和乙酰乙酸，因此很容易在大脑中进行酮分解。在一个实施方案中，组合物含有至少1.0重量％，优选至少1.5重量％，更优选至少2.0重量％的少于14个碳原子的脂肪酸。在优选的实施方案中，mct成分包含基于脂肪酸的总量计至少2重量％，更优选至少2.5重量％的c8:0(辛酸(caprylicacid或octanoicacid))和c10:0(癸酸(capricacid或decanoicacid))mct，更优选至少3.0重量％，更优选至少3.5重量％，甚至更优选至少4.0重量％。在另一个优选的实施方案中，mct成分包含基于脂肪酸的量计至少5重量％的c8和c10以及c12(月桂酸或十二烷酸)mct，更优选至少5.5重量％，更优选至少6重量％，甚至更优选至少6.5重量％，最优选7重量％，基于脂肪酸的量计。本发明的组合物优选包含基于脂肪酸重量计1至10重量％的mct，优选地组合物包含5至10重量％的mct。在一个实施方案中，中链脂肪酸c6:0+c7:0+c8:0的总重量相对于c9:0和c10:0的总重量小于2∶1，更优选小于1.8∶1，更优选小于1.6∶1，甚至更优选小于1.4∶1。饱和脂肪酸在本发明的实施方案中，碳长度为10至24的饱和脂肪酸(sfa)的量小于每100g脂肪酸50g，优选地每100g脂肪酸5-45g，更优选地每100g脂肪酸5至30g，最优选每100g脂肪酸5至15g。在优选的实施方案中，饱和脂肪酸部分富含棕榈酸(c16：0)，其中“富集”定义为形成了大于30重量％的sfa部分。在优选的实施方案中，基于sfa部分计，sfa部分包含至少50重量％的棕榈酸，更优选为sfa部分的至少65重量％，甚至更优选至少70重量％。在本发明的实施方案中，sfa部分的脂肪酸占总脂质部分的至少40重量％，优选至少45重量％，甚至更优选至少50重量％。在另一个实施方案中，sfa部分占营养组合物的至少20重量％，更优选至少25重量％。在一个实施方案中，c16:0和c18:0脂肪酸的量为sfa部分的50至85重量％，优选为60至80重量％，甚至更优选为70至75重量％。在本发明的实施方案中，单不饱和脂肪酸(mufa)的量为每100g脂肪酸30至65g。在优选的实施方案中，脂质部分包含油酸。换句话说，mufa部分优选包含油酸或甚至为油酸。磷脂本发明的组合物优选包含至少一种磷脂，其量为每100ml0.01至1g，更优选为每100ml0.05至0.5g，最优选为每100ml80至600mg。在一个实施方案中，基于脂质的总重量计，组合物包含0.01-10重量％，优选0.1-8重量％的磷脂，更优选1-6重量％的磷脂。磷脂成分优选至少部分地，更优选完全地由卵磷脂，优选由大豆卵磷脂提供。因此，优选地，组合物包含卵磷脂，优选大豆卵磷脂，其量能够提供上述磷脂含量。蛋白质部分组合物包含蛋白质部分(c)。蛋白质包括所有蛋白质性质的物质，包括完整和(部分)水解的蛋白质、肽和氨基酸。适合用于营养组合物中的任何蛋白质来源都可以包含在本发明的组合物中。优选的蛋白质来源包括乳蛋白，例如乳清、酪蛋白、蔬菜(豆类、大豆、羽扇豆、苋菜红、马铃薯、种子、谷物块茎等)、鱼、磷虾、动物蛋白质性质的物质、鸡蛋和蘑菇。优选地，蛋白质部分包含来自至少2个来源的蛋白质。在优选的实施方案中，蛋白质部分包含酪蛋白和/或乳清，优选酪蛋白。在一个实施方案中，蛋白质部分包含50至95重量％的酪蛋白和/或乳清，优选酪蛋白。在一个实施方案中，基于蛋白质部分中蛋白质和氨基酸之和计，蛋白质部分优选地提供组合物卡路里总量的至多25％，更优选卡路里总量的至多15％，更优选卡路里的至多11％，更优选卡路里的至多10％，甚至更优选卡路里的至多8％。在优选的实施方案中，蛋白质部分提供了组合物卡路里的8％至25％，更优选为卡路里的9％至15％，更优选为卡路里的10％至12％。在优选的实施方案中，蛋白质部分的存在量为组合物的至少15重量％，优选为组合物的至少16-25重量％，更优选为组合物的17-21重量％。在一个实施方案中，蛋白质部分包含游离支链氨基酸缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。在本发明的更优选的实施方案中，蛋白质部分包含游离形式的支链氨基酸亮氨酸。基于总蛋白质含量计，蛋白质部分优选包含至少15重量％的所述支链氨基酸，更优选15至35重量％，甚至更优选16至30重量％，特别是17-25重量％。这些氨基酸优选以游离形式提供。优选地，蛋白质部分每100g蛋白质部分包含至少10g支链氨基酸，优选每100g蛋白质部分包含至少15g支链氨基酸，优选每100g蛋白质部分包含至少15-35g支链氨基酸，更优选每100g蛋白质部分包含至少20g支链氨基酸，甚至更优选每100g蛋白质部分包含至少25g支链氨基酸。在一个实施方案中，蛋白质部分每100g蛋白质部分包含至多30g支链氨基酸。优选地，支链氨基酸为游离形式，即不是蛋白质或肽序列的一部分。优选地，支链氨基酸至少包含游离形式的亮氨酸。每100g蛋白质，游离亮氨酸的量通常为5至15g，甚至更优选地，游离形式的亮氨酸的量为10至15g。在一个实施方案中，基于总蛋白质部分计，蛋白质部分提供的l-亮氨酸的总量优选为至少7重量％，优选至少8重量％，更优选9-20重量％。在本发明的上下文中，术语“亮氨酸”和“l-亮氨酸”可互换使用。在一个实施方案中，蛋白质部分中游离亮氨酸的量相对于亮氨酸的总量的比率为1∶15至1∶1，更优选为1∶10至1∶2。在本发明的实施方案中，优选的是，蛋白质部分包含相对大量的可被转化为酮体的生酮氨基酸，例如赖氨酸和亮氨酸，以及相对低含量的可通过糖异生被代谢转化为葡萄糖的生糖氨基酸，例如谷氨酰胺、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸和丝氨酸。在一个实施方案中，[赖氨酸+亮氨酸]与[谷氨酸+谷氨酰胺+丙氨酸+甘氨酸+丝氨酸]的重量比优选为至少0.5，例如在0.5至10的范围内。据信，高的生酮氨基酸与生糖氨基酸总数的比率有助于维持本发明的组合物、组合或产品的生酮特性。碳水化合物部分本发明的组合物包含碳水化合物部分(b)，优选地，本发明的组合物包含可消化的碳水化合物。组合物还可包含不可消化的碳水化合物或膳食纤维或营养纤维。在优选的实施方案中，碳水化合物部分包含(纤维素和)低聚果糖，两者优选以2∶1至1∶2的重量比存在。可，消化的碳水化合物通常，可以使用本领域已知适合用于营养组合物中的任何可消化的碳水化合物。优选地，可消化的碳水化合物选自可消化的多糖(例如淀粉、麦芽糊精)、可消化的单糖(例如葡萄糖、果糖、半乳糖)和可消化的二糖(例如乳糖、蔗糖、异麦芽酮糖)。优选地，组合物包含富含一种或多种非葡萄糖和非果糖糖类例如甘露糖、半乳糖、木酮糖、木糖、葡糖胺和唾液酸的可消化的碳水化合物。在优选的实施方案中，本发明的组合物包含一种或多种选自帕拉金糖、海藻糖、乳糖、半乳糖和异麦芽酮糖的低血糖指数碳水化合物。在优选的实施方案中，本发明的组合物、组合或产品包含半乳糖和异麦芽酮糖。低gi碳水化合物是gi为55或更小的碳水化合物。在优选的实施方案中，组合物的碳水化合物部分包含约70至100重量％的低血糖指数碳水化合物，更优选80至95重量％，更优选85至95重量％。半乳糖的量优选为碳水化合物部分的约25重量％至45重量％，更优选为碳水化合物部分的约30重量％至40重量％，并且在甚至更优选的实施方案中为碳水化合物部分的约35重量％和40重量％。在一个实施方案中，异麦芽酮糖的量优选为碳水化合物部分的约55重量％至75重量％。葡萄糖或快速消化的葡萄糖聚合物的量优选低于碳水化合物部分的10重量％，更优选低于碳水化合物部分的5重量％，甚至更优选低于碳水化合物部分的1重量％。在一个实施方案中，可消化的碳水化合物部分优选提供组合物卡路里总量的至多5％，更优选卡路里总量的至多8％，更优选卡路里的至多10％，更优选卡路里的至多15％，甚至更优选卡路里的20％。组合物的可消化的碳水化合物部分提供组合物的卡路里的至少1％，更优选至少2％。在一个实施方案中，组合物的血糖指数(gi)低于70，优选低于65，优选低于60，更优选低于55。在优选的方面，血糖指数为65至55，其中血糖指数基于葡萄糖作为设置为100的参考值。维生素在一个实施方案中，本发明的组合包含至少一种复合维生素b。维生素b选自维生素b1(硫胺素)、维生素b2(核黄素)、维生素b3(烟酸或烟酰胺)、维生素b5(泛酸)、维生素b6(吡哆辛、吡哆醛或吡哆胺或盐酸吡哆辛)、维生素b7(生物素)、维生素b9(叶酸或叶酸根)和维生素b12(多种钴胺素)。这些术语涵盖功能等价物。在一个实施方案中，至少一种维生素b选自维生素b6、维生素b12和维生素b9。优选地，本发明组合物包含至少两种选自维生素b6、维生素b12和维生素b9的维生素b。尤其地，包含维生素b6、维生素b12和维生素b9或由其组成的b族维生素的组合已经获得了良好的结果。维生素b，优选维生素b6、b9和/或b12，应以治疗有效剂量给药。如果在所述营养组合物或药剂中存在维生素b6，那么其优选以这样的量存在，即所述量提供0.1-100mg的每日剂量，尤其为0.5-25mg，更尤其为0.5-5mg。本发明组合物优选包含0.1-100mg维生素b6/100g(液体)产品，更优选0.5-5mg维生素b6/100g(液体)产品，更优选0.5-5mg维生素b6/100g(液体)产品。如果在所述营养组合物或药剂中存在维生素b12，那么其优选以这样的量存在，即所述量提供0.5-100μg的每日剂量，尤其为1-10μg，更尤其为1.5-5μg。本发明组合物优选地包含0.5-100μg维生素b12/100g(液体)产品，更优选1-10μg维生素b12/100g(液体)产品，更优选1.5-5μg维生素b12/100g(液体)产品。术语‘维生素b12’包括本领域中已知的所有钴胺素(cobalamin)等价物。如果在所述营养组合物或药剂中存在维生素b9(叶酸)，那么其优选以这样的量存在，即所述量提供50-5000μg的每日剂量，尤其为100-1000μg，更尤其为200-800μg。本发明组合物优选地包含50-5000μg叶酸/100g(液体)产品，更优选100-1000μg叶酸/100g(液体)产品，更优选200-800μg叶酸/100g(液体)产品。叶酸根(folate)包括叶酸、亚叶酸、甲基化的、次甲基化的(methenylated)和甲酰化形式的叶酸根，它们的盐或酯，以及它们与一个或多个谷氨酸的衍生物，并且所有都是还原或氧化形式。本发明的组合物优选每100g(液体)产物包含(如果有的话)小于100mg，更优选小于50mg，更优选小于25mg尿苷当量，以尿苷计算。或者，本发明的使用方法优选包括每天剂量少于50mg，更优选少于25mg尿苷当量，以尿苷计算。在一个实施方案中，没有可检测量的尿苷和ump。本发明的组合物优选每100g(液体)产品包含(如果有的话)少于50mg，更优选少于25mg选自胆碱、胆碱盐和/或胆碱酯的胆碱当量，以胆碱计算。在本发明的一个实施方案中，考虑一种不包含尿苷、尿苷一磷酸(ump)和胆碱的组合物。在一个实施方案中，本发明的组合物不包含超出fsmp准则的维生素b6、b9和b12，维生素c和e以及硒。在一个实施方案中，本发明的组合物、组合或产品包含每100g产品5-9g蛋白质，0.8-4g营养纤维，1.2-1.8g血糖指数值小于70的可消化的碳水化合物，15-24g脂质(其包含3-20重量％的海洋油、10-30重量％的mct油，其余的脂质部分由植物油形成)，其中脂质与蛋白质和可消化的碳水化合物之和的比率为1.4-3∶1。在一方面，所述产品适合用于患有tbi的受试者，其中受试者为6岁或更大。在一个实施方案中，组合物的产品包含每100ml1.3-1.9g蛋白质，其中蛋白质部分包含每100g蛋白质10-15g亮氨酸，0.6-1.0g血糖指数低于65的可消化的碳水化合物，5-7g脂质(其中脂质部分包含5-50重量％的海洋油，4-30重量％的mct油和植物油)、0.4至4g营养纤维，0.3-0.5g矿物质、微量元素和维生素，其中脂质与蛋白质和可消化的碳水化合物之和的重量比为1.4∶1-3∶1。在一方面，所述组合物或产品适合用于患有tbi的受试者，其中所述受试者小于6岁。上述组合物可被用作营养治疗、营养支持、用作医疗食物、用作用于特定医疗目的的食物或用作营养补充剂。在创伤性脑损伤的恢复和/或恢复期间，每天可消费一份、两份或三份所述产品。典型的份量是125ml。如上所述的组合物可替代地被用作完全营养物、医学食品、用于特殊医学目的的食品或管饲物。实施例为了更完整地理解本公开，现在参考以下实施例并结合附图。实施例1-在创伤性脑损伤的小鼠模型中探索神经保护作用在创伤性脑损伤的实验模型中评估了包含脂质部分的组合物的作用，所述脂质部分包含如表1所列的本发明的经改良的生酮饮食。使用体重为22-27g(charlesriverlaboratories，harlow，英国)的成年10-12周大的雄性c57bl/6小鼠。将小鼠分成四组，饲养在提供浓缩物的标准笼子中，光照/黑暗周期为12小时，随意饮食和饮水。每天监测食物摄入量和体重。根据欧盟指令2010/63/eu，所有动物程序均已获得伦敦玛丽皇后大学动物福利和道德审查机构(animalwelfareandethicalreviewbody)以及英国内政部(ukhomeoffice)的批准。在该研究中使用了可控制的皮质撞击(cci)tbi模型。简言之，在适应了1周之后，使用氯胺酮(50mg/kg)和美托咪定(0.5mg/kg)在无菌盐水中的混合物腹膜内(i.p.)给药麻醉小鼠。将小鼠置于立体定位框架中，并进行中线纵向切口以暴露头骨。使用气动钻进行右侧颅骨切开术，前囟点后2.0mm，中线后2.5mm。使用以下设置可诱发cci损伤：使用pci3000precisioncorticalimpactortm(hatterasinstruments，inc.，美国)施加的3mm撞击器尖端，速度3m/s，深度2.2mm，停留时间100ms。对照组仅进行颅骨切开术(颅骨对照)。损伤后，将颅骨瓣放回原处并缝合皮肤。使小鼠在培养箱(37℃)中恢复直至它们完全清醒并活跃。皮下注射(s.c.)的丁丙诺啡(0.05mg/kg)在术前用于先发性镇痛，并在术后用于tbi后(post-tbi)，每12h一次，共3天。损伤后，将小鼠随机分为三个tbi组，每天喂食新鲜的对照饮食(cci-对照′；n＝10)、connect(fc)多种营养组合饮食(′cci-fc′；n＝10)或改良的生酮多营养饮食(cci-kone，n＝11)，持续70天。表1列出了对照、fc和改良的生酮(kone)饮食的成分和脂肪酸谱。颅骨切开术组每天喂食对照饮食(仅颅骨切开术；n＝10)。饮食由nutriciaresearch，nutriciaadvancedmedicalnutrition(utrecht，荷兰)配制，由ssniff(soest，德国)制造并制成颗粒。饮食要在-20℃下保存直至使用，以防止脂质氧化，并每天给动物新鲜饮食。先前已经证实了在这些条件下的饮食稳定性(cansev等人，2015)。在每日平均食物摄入量和体重增加方面(各组之间，整个实验中)没有观察到显著差异。表1a.对照、fc和本发明的改良的生酮饮食(kone)的营养组成，以g/100g饮食计。表1b.基于脂肪酸总量计，对照、fc和本发明的改良的生酮饮食(kone)的脂肪酸谱，以重量百分比计。行为测试在外科手术干预之后，随时间追踪动物的行为表现。在图1中示意性地列出了进行一系列行为测试的方案。简言之，在干预后的第1天至第70天，对所有动物使用10种单独测试(表2)的神经病学严重性评分进行了测试，以评估运动能力、平衡和警觉性。在进行外科手术之前，连续3天对所有动物进行rotarod训练，然后在干预后第1、2和3天评估rotarod的表现，以评估运动协调、运动计划和平衡。干预后第1天和第2天使用猫道变现评估步态。在莫里斯水迷宫中对动物进行训练，以评估干预后第13-17天进行的与空间学习相关的记忆障碍，并在第18天进行了探索试验，其中测量了小鼠在水迷宫中找回其中先前存在一个平台的象限的时间。表2.神经病学严重性评分测试及其相应的功能评估。测试功能评估退出圆环能够主动退出直径约30cm的圆环(时间限制：2min)对位/轻偏瘫对侧上肢和/或下肢的轻偏瘫/痉挛直行警觉性、主动性和直行运动能力探寻行为生理行为是对环境“感兴趣”的标志惊吓反射先天反射；小鼠会响应响亮的拍手而跳跃横梁平衡(矩形或三角形)能够在5mm宽的横梁上用4只爪子平衡至少10秒圆棒平衡能够在5mm直径的圆棒上用4只爪子平衡至少10秒横梁行走：3cm能够以正常步态穿过3cm宽的30cm长的横梁横梁行走：2cm同样的任务，在2cm宽横梁上增加难度横梁行走：1cm同样的任务，在1cm宽横梁上增加难度通过综合的mnss得分评估，在创伤后超过70天，所有动物组均显示出tbi诱导的损伤减少，但与cci对照饮食组相比，最早在创伤后第三天在cci-kone和cci-fc处理的动物中观察到显著改善。cci对照饮食、cci-kone和cci-fc组之间在神经学评分上的显著差异一直保持到研究结束(图2a)。颅骨切开术对照动物仅表现出短暂的神经功能障碍，第一周后即可解决。在图2b中，示出了在干预后的前28天中相同动物的随访。由此可见，与cci对照处理的动物相比，cci-fc和cci-kone处理的动物均具有显著改善的神经学评分。与cci对照相比，＊＊p＜0.01和＊＊＊p＜0.001。在损伤后天数(dpi)的前3天进行的rotarod试验显示，在cci-kone和cci-fc处理的损伤动物中，性能均得到了更好的保留(图3)。与cci对照组中的动物相比，cci-kone和cci-fc动物中从rotarod掉落的平均等待时间(以毫秒为单位)要高得多。与cci组相比，颅骨切开术对照组显示出最小的协调性和平衡损伤。与cci对照相比，＊＊p＜0.01和＊＊＊p＜0.001。使用莫里斯水迷宫(mwm)评估tbi后的空间记忆，该实验广泛用于tbi研究中以检测海马依赖性空间学习和记忆中的损伤。与cci-fc和cci-kone处理的动物相比，cci导致此任务的获取中断，如cci对照组中可见，首次进入平台区域的等待时间明显更长。如图4所示，该探索试验显示cci后有严重损伤，通过fc-或kone补充饮食治疗可以完全逆转。与cci对照相比，＊p＜0.05、＊＊p＜0.01和＊＊＊p＜0.001。实施例2-与标准生酮饮食在tbi处理中的比较在与上述实施例1类似的设置中，将3组20只小鼠随机分为三个饮食干预组，以接受新鲜的对照饮食(对照n＝20)，对照生酮饮食(酮类，表3提供了对照生酮饮食的以下特征，可儿康(ketocal)4∶1无味的，nutrician.v，荷兰)或本发明的改良的生酮多元营养饮食(kone)。将每组20只小鼠分为接受颅骨切开术(假手术)的组(n＝10)和接受tbi干预(cci)的组。手术后，随意给小鼠喂食其分配的饮食70天。表3.实验2中使用的标准生酮饮食的营养特征，以g/100g饮食计。在干预后22至25天，将动物在新物体识别测试中进行训练，其中将空的不透明盒子用作打开箱子(file)并熟悉位于该领域的2个相同物体。通过评估这种自然趋势，可以确定动物是否能够区分熟悉的物体和新的物体。在获取阶段，将两个相同的物体(a和b)放置在舞台上的对称位置5min。这些物体适当地重且高，以确保小鼠既不能移动也不能爬过它们。在此训练的获取阶段后的二十四小时，将其中一个物体(随机地为a或b)替换为新的物体(c)，并在5min内再次评估了该动物的探索性行为。每次进行后，均用70％乙醇仔细清洗所有物体，以防止气味识别。探索物体的定义是：抬起物体或以小于2cm的距离嗅探物体，和/或用鼻子触摸物体。对新物体的优先探索表明了成功的识别。测量对新物体和熟悉物体所花费的时间以评估识别记忆，其中在两个物体探索中的任何差异的缺失都可以解释为记忆缺陷。该新物体识别测试的结果如图5所示。结果表示为aggleton指数：[新物体附近的时间-熟悉物体附近的时间]/[新物体附近的时间+熟悉物体附近的时间]，测量研究新物体花费的相对时间的度量。如图5所示，对照处理(假处理)不会损害新物体的识别(对照小鼠在新物体上花费的时间最多)，而cci处理则引起了严重损伤，其在cci-酮类组中被部分逆转，且在接受kone饮食的cci-kone组中完全逆转。在干预后45天，使用y-迷宫交替来评估探索性行为和空间记忆。迷宫由三个相同的臂组成，这些臂以120°的角度隔开，并由黑色树脂玻璃制成。每个臂为8x30x15cm，仅由特定视觉提示(三角形、正方形或圆形)而有所不同。一只臂被随机选作“开始”臂。在第一次试验中，持续5min，将每只小鼠放入起始臂，并随机阻塞其余两个臂中的一个以限制进入。相比之下，在第二次试验中，持续2min，开放迷宫的所有臂。将这两次试验间隔2min，在此期间将小鼠放回其生长笼(homecage)中。在两次试验期间内，测量了每个臂所花费的时间。在试验间，使用70％乙醇溶液彻底清洁迷宫，然后干燥。根据aggleton：[新臂中的时间-熟悉臂中的时间]/[新臂中的时间+熟悉臂中的时间]计算差别偏好指数。如图6所示，对照颅骨切开术处理(假处理)不会损害探索性行为，而cci处理在y迷宫中引起了探索性行为的重大损害，其在cci-酮类组中并未逆转，但在接受k-one饮食的cci-kone组却完全逆转。用治疗水平的本发明的组合物的治疗使得tbi后空间识别和空间记忆得到改善。图7显示了不同组的血浆β-羟基丁酸酯(h-bh)水平。为了评估小鼠血浆样品中的β-羟基丁酸(b-hb)水平，根据制造商的说明使用了比色的β-羟基丁酸酯测定试剂盒(sigma-aldrich)。简言之，将血浆样品离心以除去任何大的碎片，但是样品没有脱蛋白。每个样品将25μl血浆转移到96孔板中。然后制备了标准混合物，其含有具有3-羟基丁酸脱氢酶和酶底物的测定缓冲液。为了背景校正，制备了不含b-hb酶混合物的单独的标准混合物。然后将这些标准混合物加入到含有血浆的96孔板中，并在室温下孵育30分钟。随后，通过使用flexstationiii多模式读板器测量450nm处的od来确定b-hb水平。对于每个实验，测量b-hb标准曲线。通过从样品od测量结果减去背景od来确定b-hb含量，并使用标准曲线计算b-hb浓度。k-one饮食显示b-hb血浆水平为300μm，而所有对照均低得多(＊＊p＜0.01)。当前第1页1 2 3