专利名称：含异甘草素的抗心律失常药的制作方法
技术领域：
本发明涉及异黄酮类化合物的抗心律失常药物。
《伤寒论》中指出“脉结代，心动悸，灸甘草汤主之。”临床上也有不少重用甘草治疗心律失常的报道[常章富等，《北京中医学院学报》1989，12(2)，30-31；李留良等，《浙江中医杂志》1993(9)，388-389]但甘草治疗心律失常因三萜皂甙的激素样副作用而不能长期用药，且不同质量的甘草的疗效差异较大。
本发明的目的是提供一种具有强抗心律失常活性，又无激素样副作用的抗心律失常药物。
本发明的技术解决方案是根据发明人的研究，异甘草素具有很强的抗心率失常活性，又无激素样副作用是一种很好的抗心律失常药物。
异甘草素具有如下分子结构
其为黄色针晶，mp198-199℃；EI-MS256[m+]，255，163，150，129，107；UVλmaxn m234(sh)，258(sh)，300(sh)，366；1HNMR(DMSO-d6)δ6.24(1H，d，3Hz)，6.38(1H，dd，9，3Hz)，6.82(2H，d，9Hz)，7.62(1H，d，14Hz)，7.72(2H，d，9Hz)，7.80(1H，d，14Hz)，8.12(1H，d，9Hz)，13.58(1H，S)。
异甘草素可以从甘草中提取分离得到
异甘草素粗品经重结晶后得黄色针晶，mp.198-199℃，经测定为异甘草素异甘草素也可由2，4-二羟基苯乙酮和对羟基苯甲醛缩合制得(徐任生等，《化学学报》1979，37(4)，289-295)异甘草素易得，可以制成含异甘草素的抗心律失常药。
可以制成含异甘草素的抗心律失常药静脉注射液。
其制法是将异甘草素用碱溶液溶解，再用酸溶液调PH至8±0.3，加生理盐水到所需浓度，灌装，灭菌。
可按常规方法将异甘草素配辅料淀粉、糊精等混合制成含异甘草素的抗心律失常药口服片剂，胶囊剂。
可按常规方法将异甘草素与辅料淀粉、糖、碳酸钠混合制粒制成抗心律失常药冲剂。
可将异甘草素用碱液溶解，再用酸液调PH至8±0.3，加糖及水到所需浓度，灌装，灭菌制成抗心律失常药口服液。
注射剂剂量30mg/次，1-2次/日或加入葡萄糖溶液中静脉滴注。口服剂剂量25-50mg/次，3次/日。
根据药理实验结果，异甘草素能明显减少乌头碱诱发的大鼠心律失常持续时间，明显减少氯仿诱发的小鼠室颤率，明显增加出现VP、VT、VF和CA所用哇巴因剂量，明显减少氯化钡诱发的大鼠心律失常持续时间，明显减少氯化钙-乙酰胆碱混合液诱发的小鼠房颤率。
异甘草素的急性试验1.最大口服耐受量(MTD)测定给药方法和剂量取健康ICA小鼠20只，雌雄各半，禁食16小时后灌胃给药。每鼠1次给药量为异甘草素溶液0.8ml/20g(溶液浓度1.5％)，隔6小时1次，1日内连续3次，(相当于异甘草素1800mg/kg/d)。
20只小鼠在给药后连续观察7天，未见动物死亡。
结论上述试验结果说明给小鼠灌服异甘草素溶液，其1日最大耐受量大于2.4ml/20g/d(相当于异甘草素1800mg/kg/d)。
该受试药物给药量为2.4ml/20g/d，已达最大容量；溶液浓度1.5％已不能再进一步浓缩，已达最大浓度，本实验无法再加大给药剂量。
2.静脉给药急性毒性试验测定半数致死量(LD50)采用序贯法。将1.5％异甘草素溶液做比值为1∶0.7等比稀释，各鼠尾iV给药，容积均为0.2ml/10g体重，，记录以“△”表示存活，“×”表示死亡，第1次变号的前1次作为实验开始。在×、△中以总值较少者为阳性数(a)，以第1次出现阳性的剂量为中心组(Xo)，组序(d)按阳性增多的方向递增，反方向则递减。计算∑a、∑ad、∑ad2作为N、A、B，代入下列公式计算LD50＝Log-1[Xo-i(--0.5)]LD50的95％平均可信限L9595＝LD50±4.5LD50×Sm实验结果LD50＝182.8±27.0mg/kg(95％平均可信限)。
小鼠iV异甘草素，其半数致死量(LD50)182.8±27.0mg/kg(95％平均可信限)。
本发明的含异甘草素的抗心律失常药物，有良好的抗心律失常作用，它能取代甘草的抗心律失常药用，且解决了甘草因激素样副作用而不能长期用药的问题。异甘草素急性毒性低，作用稳定可靠，是一种安全度高的治疗及预防心律失常的药物，可以静脉注射，也可以口服。
实施例1.
异甘草素抗氯仿诱发小鼠心律失常取体重32-36g，健康ICR小鼠，雌雄各半，随机分为8组，各组分别iv(静脉注射)或PO(口服)异甘草素和iv利多卡因及等容积生理盐水，给药容积均为20ml/kg。iv给药5分钟或PO(口服)30分钟后，将各鼠分别置于400ml倒扣烧杯中，烧杯内放一棉球，先在其上注入5ml氯仿，(每换1鼠加0.5ml氯仿)，待小鼠呼吸停止后立即取出，剖胸检查心室纤颤阳性率并作统计学处理。结果见表1
表1异甘草素对氯仿诱发小鼠室颤的影响(X±SD)药物剂量(mg/kg) 给药途径 动物数 室颤率 P值生理盐水--iv20 18/20 --利多卡因15iv10 3/10 ＜0.01异甘草素16PO10 5/10 ＜0.05异甘草素8 PO10 8/10 ＞0.05异甘草素16iv10 2/10 ＜0.001异甘草素8 iv10 5/10 ＜0.05P值与生理盐水组比较表1结果表明异甘草素静脉给药对氯仿诱发的小鼠室颤能明显减少室颤率，经统计学处理呈显著性差异，表明异甘草素有抗氯仿诱发小鼠室颤的作用。
实施例2.
异甘草素对乌头碱诱发大鼠心率失常的治疗作用取体重335±25g，SD大鼠，雌雄各半，随机分为6组，ip乌拉坦1g/kg麻醉后背位固定，联接LMS-2B型二道生理记录仪(成都仪器厂产)和SR-071型双踪示波器(江苏扬中电子仪器厂产)，记录II导联心电图。股静脉插管，iv乌头碱(E.Marck产品)25ug/kg，待心律失常出现且稳定10分钟后，各组分别iv异甘草素和利多卡因及等容积生理盐水，给药容积均为4ml/kg。观察给药后各鼠心律失常的持续时间，记录数据并作统计学处理。结果见表2表2异甘草素对乌头碱诱发大鼠心律失常的影响(X±SD)药物 剂量(mg/kg) 动物数 心律失常持续时间(分) 减少％生理盐水 --1085.1±19.5 --利多卡因 101059.4±15.5**30.2异甘草素81052.4±14.6*** 38.4异甘草素41066.7±16.9* 21.6合成异甘草素81053.6±15.***37.0与生理盐水组比较*P(0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表2结果表明异甘草素对乌头碱诱发的大鼠心律失常能明显减少心律失常持续时间，经统计学处理呈显著性差异，表明异甘草素有抗乌头碱诱发大鼠心律失常作用。
实施例3.
异甘草素对哇巴因诱发豚鼠心律失常的预防治疗作用取体重255±30g健康豚鼠，雌雄各半，随机分为6组，iP乌拉坦15g/kg麻醉后背位固定，联接LMS-2B二道生理记录仪(成都仪器厂产)和SR-071型双踪示波器(江苏扬中电子仪器厂产)，记录II导联心电图，股静脉插管，各组分别iv异甘草素和心得安及等容积生理盐水，给药容积均为4mL/kg，给药5分钟后，静脉恒速注射哇巴因(Sigma产品)1ug/100g/min，观察各鼠出现室性早搏(VP)、室速(VT)、室颤(VF)和心搏停止(CA)的时间，算出出现VP、VT、VF、CA所用哇巴因剂量(ug/kg)并作统计学处理。结果见表3*表3异甘草素对哇巴因诱发豚鼠心律失常所用剂量影响(X±SD)药物 剂量动物 VP VT VFCA(mg/kg) 数 (ug/kg) (ug/kg) (ug/kg) (ug/kg)生理盐水-- 10 167.4±15.5 234.7±29.0 290.1±36.9 374.8±55.5心得安 2 10 251.1±54.1**** 323.2±51.7*** 391.7±64.6**480.9±91.5**异甘草素 8 10 264.2±69.2*** 342.3±75.6**435.4±112.9** 524.1±109.2**异甘草素 4 10 233.2±51.2**309.0±67.2**362.3±70.7* 451.7±87.6*与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表3结果表明异甘草素能明显增加出现VP、VT、VE和CA所用哇巴因剂量，经统计学处理呈显著性差异，表明异甘草素有抗哇巴因诱发豚鼠心律失常的作用。
实施例4.
含异甘草素的抗心律失常药静脉注射液。
将异甘草素3克、碳酸钠10克溶于800毫升蒸馏水中，搅拌均匀，用10％乙酸溶液调节PH至7.8-8.2，加入亚硫酸钠1.5克，加生理盐水至1000毫升，过滤，氮气流下灌装，每支10毫升，100℃流通蒸汽加热15分钟灭菌，得含异甘草素的抗心律失常药静脉注射液。每支含异甘草素30毫克。
实施例5.
含异甘草素的抗心律失常药口服片剂。
将异甘草素2.5克、淀粉2.5克、糊精2.5克混匀，喷洒50％酒精1毫升后过20目筛，在60-70℃下烘干，加硬脂酸镁2.5克混匀，过80目筛后压片，得含异甘草素的抗心律失常药口服片剂。片剂每片重0.1克，含异甘草素25mg。
实施例6.
含异甘草素的抗心律失常药口服胶囊。
将异甘草素2.5克、淀粉10克、糊精10克、糖粉10克、氯化钠7.5克混匀，喷洒50％乙醇4毫升后过20目筛，在60-70℃下烘干，过80目筛后装胶囊，每粒0.4克，得含异甘草素的抗心律失常药口服胶囊，每粒胶囊含异甘草素25mg。
实施例7.
含异甘草素的抗心律失常药口服冲剂。
将异甘草素2.5克、可溶性淀粉5克、糖粉80克、氯化钠2.5克、碳酸钠5克混匀，喷洒50％乙醇5毫升后过20目筛，在60-70℃下烘干，过80目筛后包装，每包重0.5克，得含异甘草素的抗心律失常药口服冲剂。
实施例8.
含异甘草素的抗心律失常药口服液。
将异甘草素2.5克、碳酸钠7.5克、蔗糖500克、苯甲醇10克溶于500ml水中，搅拌均匀，加10％乙酸溶液调节PH至7.8-8.2，加入亚硫酸钠1.5克，加水至1000毫升，过滤，灌装，每支10毫升。得含异甘草素的抗心律失常药口服液。每支口服液含异甘草素25毫克。
权利要求
1.一种抗心律失常药物，其特征是含有异甘草素。
2.根据权利要求1所述的抗心律失常药物，其特征是静脉注射液抗心律失常药含有异甘草素、碳酸钠。
3.根据权利要求2所述的抗心律失常药物的制法，其特征是将异甘草素用碱溶液溶解，再用酸液调PH至8.0±0.3，加生理盐水至所需浓度，灌装，灭菌。
4.根据权利要求1所述的抗心律失常药物，其特征是将异甘草素与辅料淀粉、糊精等混合制成的口服抗心律失常药片剂或胶囊。
5.根据权利要求1所述的抗心率失常药物，其特征是将异甘草素与辅料淀粉、糖、碳酸钠混合制粒而成的抗心律失常药冲剂。
6.根据权利要求1所述的抗心律失常药物，其特征是将异甘草素用碱溶液溶解，再用酸液调PH至8±0.3，加糖及水至所需浓度，灌装，灭菌制成的抗心律失常药口服液。
全文摘要
一种抗心律失常药，它含有异甘草素，异甘草素可以从甘草中提取，也可以用化学方法容易地合成。异甘草素具有抗氯仿、乌头碱、哇巴因等引起的心律失常作用。用异甘草素作为抗心律失常药物，无甘草三萜皂甙的激素样副作用，毒性低，能取代甘草的抗心律失常药用。它可以制成静脉注射剂或口服药片、胶囊、冲剂、口服液等剂型。
文档编号A61K31/045GK1156024SQ9611683
公开日1997年8月6日 申请日期1996年2月2日 优先权日1996年2月2日
发明者胡小鹰, 彭国平, 马允慰 申请人:南京中医药大学