专利名称：一种治疗糖尿病的药物及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物领域，具体地，涉及一种治疗糖尿病的药物。
糖尿病对人类健康的影响越来越大，严重威胁人的生命，其死亡率仅次于心脑血管疾病、癌症，居第四位。为此国际上专门有定期召开的糖尿病会议研究对策，91年的国际糖尿病会议提出了“世界糖尿病日”，95年国际糖尿病联合组织改定每年的11月14日为“世界糖尿病日”，该日旨在全世界健康人群和糖尿病人广泛宣传糖尿病的防治知识，提高人类健康水平。目前糖尿病患者在不断增加，据世界卫生组织和糖尿病联合会1991年估计，全世界的糖尿病患者超过6000万人，预计2000年将会翻一番。专家预测，到2000年单单中国糖尿病患者的数量将达到5000-6000万人。可糖尿病已成为全世界主要的公共卫生问题，研制治疗糖尿病的新型药物，已成为极为迫切的事情。
糖尿病的临床治疗药物，除胰岛素本身作为治疗药物外，有三种主要类型磺脲类、双胍类和α-糖甘酶抑制剂；目前的治疗药物仍是这三大类，最新的药物也无非是在剂型上改动了一下，应用了一些现代的新技术，如最新产品路易宁，号称是II-型糖尿病治疗的新方向，也只是磺脲类药物的格列嗓嗪控释片，活性物质和作用机制本身没有新的变化。糖尿病的新型治疗药物的研制，仍然是新药研究中的热点之一。
本发明的目的是提供一种治疗糖尿病的药物，同时提供该药物的制备方法，该方法操作简便、成本低廉。
为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案一种治疗糖尿病的药物，是以露水草为原料按照下述方法制成的药剂取露水草Cyanotis arachnoidea全草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，滤液浓缩，放置过夜，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎，加入乙醇/乙酸乙酯(1∶9--9∶1)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2-1∶5加入赋形剂，制粒压片。
制备上述药物的方法，取露水草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，滤液浓缩，放置过夜，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(1∶9--9∶1)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2-1∶5加入赋形剂，制粒压片。
制备上述药物的方法，取露水草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用10-70％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(10％--90％)(V/V)加热溶解冷却过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝或活性碳或大孔树脂或硅胶，收集层析液，浓缩精制得有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2--1∶5加入赋形剂，制粒压片。
上述制备方法中，所用吸附材料可回收套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。
上述制备方法中，粗品可用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇乙酸乙酯＝10％-90％(V/V)，然后放置冷却。
下面用药效学试验来证明本发明药物的优益效果受试药物取露水草Cyanotis arachnoidea全草，干燥粉碎后原料10公斤，用30公斤工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取2次，每次4小时，过滤，滤液浓缩，放置过夜，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎，加入乙醇/乙酸乙酯(1∶4))加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位320克(以下简称CA-1粉剂)。
溶剂羧甲基纤维素钠溶液配制方法用羧甲基纤维素钠溶液配成所需浓度的混悬液。
动物来源、种属、品系、合格证ICR品系小白鼠、SD品系大白鼠，白色家兔，均由西安医科大学实验动物中心提供。质量合格证号分别为陕医卫动证字08-004和08-005号。
□体重 小鼠18-23g，大鼠180-230g，家兔1.8-2.5kg□每组动物数 小鼠、大鼠每组10只，家兔每组6只。
□室温、湿度 室温17-20℃，相对湿度62％-72％□试验方法与结果一、对正常大鼠血糖的影响大鼠180～230g，50只，雌雄各半，按体重、性别，随机分为5组空白对照组；优降糖组(25mg/kg，天津市力生制药厂，9705024)；CA-1粉剂大、中、小剂量组(1g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg)，每组10只。给药组动物连续灌胃6d，每天一次，给药容积为20ml/kg，空白对照组给等量0.5％羧甲基纤维素钠溶媒(以下同)。末次给药前禁食12h，末次给药后1h、3h，分别断尾取血，用葡萄糖氧化酶法测血糖值。结果见表1。
表1 CA-1粉剂对正常大鼠血糖的影响(x±s)剂量动物数 给药前给药后不同时间血糖(mmol/L)组别(g/kg) (只) 血糖(mmol/L) 1h 3h空白对照组106.72±0.86 6.82±0.86 6.34±0.64优降糖组0.025 106.42±0.81 3.42±0.73**3.52±0.84**小剂量组0.25 106.76±0.71 6.96±0.52 6.92±0.55中剂量组0.5 106.09±1.14.67±1.05**4.29±1.47**大剂量组1 106.19±1.39 4.90±0.97**4.46±1.13**与对照组比较 *P＜0.05**P＜0.01结果表明，优降糖25mg/kg对正常大鼠血糖有显著影响，(P＜0.01)。CA-1粉剂0.5g/kg和1.0g/kg两个剂量组，在末次给药后1h、3h均有明显的降低正常大鼠的血糖作用。与对照组比较有非常显著的统计学意义(P＜0.01)。说明CA-1粉剂对正常大鼠有明显的降低血糖作用。二、对正常大鼠血清胰岛素水平的影响在上述实验中，采血测血糖的同时，另取一份血液，用放射免疫法，测血清胰岛素含量，进行组间t检验，结果见表2。
表2 CA-1粉剂对正常大鼠血清胰岛素含量的影响 (x±s)组别 剂量(g/kg) 动物数(只) 血清胰岛素含量(μu/ml)空白对照组 9 13.74±5.9优降糖组 0.025 9 24.1±6.92**CA-1小剂量组 0.259 15.0±7.3CA-1中剂量组 0.5 9 16.54±6.5CA-1大剂量组 1 9 21.76±7.65*与对照组比较 *P＜0.05结果表明，优降糖组可使血清胰岛素明显升高，具有显著性意义(P＜0.01)。CA-1粉剂大剂量组能升高血清胰岛素含量，有显著性意义(P＜0.05)，中、小剂量组有升高的趋势，但无显著性(P＞0.05)。三、对四氧嘧啶致大鼠高血糖的影响取大鼠90只，雌雄各半，禁食14h后，斯尾取血，用葡萄糖氧化酶法测正常血糖值。除取10只作为正常对照组外，其余动物由舌下静脉注射四氧嘧啶(Sigma公司产品)70mg/kg造高血糖模型，同时灌胃给予20％葡萄糖溶液3ml/100g以预防低血糖休克。造模48h后，测定动物禁食12h的空腹血糖值，选择血糖值在11.0mmol/L以上的动物，随机分为5组四氧嘧啶模型组；降糖灵组(75mg/kg，南通制药总厂，970116)；CA-1粉剂大、中、小剂量组(1.0、0.5、0.25g/kg)，每组10只，灌胃给药，给药体积均为20ml/kg，空白对照组和模型组给等量溶媒，每天1次，连续6天，末次给药前，禁食12h，末次给药1h后，取血测血糖值，计算血糖降低绝对值[1]，进行组间t检验，结果见表3。
表3 CA-1对四氧嘧啶致大鼠高血糖的影响(X±s，n＝10)血糖值(mmol/L)剂量 差值组别(g/kg) 正常 给药前 给药后空白对照组 6.42±0.73 6.72±1.096.52±1.03 0.23±0.32四氧嘧啶模型组 7.19±1.26 17.60±5.67△△17.44±6.17△△0.48±5.16降糖灵+四氧嘧啶组0.075 6.71±1.28 17.73±6.31△△10.26±3.63**7.46±4.63**(42.1％)CA-1+四氧嘧啶组 0.256.83±0.55 16.68±5.83△△12.01±5.03*4.67±3.88(28％)CA-1+四氧嘧啶组 0.5 7.51±1.08 16.52±6.74△△10.50±4.21**6.02±4.35*(36.4％)CA-1+四氧嘧啶组 1 6.32±0.82 18.01±6.04△△9.27±4.0**8.75±4.46**(48.5％)与模型组比较 *P＜0.05**P＜0.01(％)血糖下降率与对照组比较△△P＜0.01结果表明，以70mg/kg四氧嘧啶静脉注射可使大鼠血糖明显升高，与正常组血糖比较，均有显著性意义(P＜0.01)，造高血糖模型成立。给药6d后各剂量组可不同程度地降低四氧嘧啶致高血糖大鼠的血糖，统计学上有非常显著意义(P＜0.01或P＜0.05)。以CA-1大、中剂量的降血糖作用较强，分别可使血糖降低48.5％和36.4％。提示CA-1对四氧嘧啶致大鼠高血糖有明显的降糖作用。四、对肾上腺素所致小鼠血糖升高的影响将60只小鼠，体重18～23g，雌雄各半，按体重、性别随机分为6组空白对照组；肾上腺素模型组；优降糖组(25mg/kg)；CA-1大、中、小剂量组(1.0、0.5、0.25g/kg)，灌胃给药，给药体积0.2ml/10g，正常对照组和模型组给等量溶媒，每天给药1次，连续6天，于末次给药前禁食12h，末次给药1h后，除空白对照组外，其余5组均腹腔注射肾上腺素0.2mg/kg，于注射后30min，从眼眶静脉取血测血糖，进行组间t检验，结果见表4。
表4 CA-1对肾上腺素致小鼠血糖升高的影响组别 动物数(只)剂量(g/kg) 血糖值(mmol/L)空白对照组 10 4.97±1.39肾上腺素模型组 10 0.0002 9.59±1.88△△优降糖+肾上腺素组 10 0.0256.12±1.74**CA-1+肾上腺素组 10 0.25 9.54±1.54CA-1+肾上腺素组 10 0.5 8.04±1.05*CA-1+肾上腺素组 10 1.0 7.94±1.44*与模型组比较 *P＜0.05**P＜0.01与对照组比较△△P＜0.01结果表明，肾上腺素0.2mg/kg腹腔注射可使小鼠血糖明显升高。优降糖组动物给药后血糖明显低于模型组(P＜0.01)。CA-1大、中剂量组也能使血糖降低，具有显著性意义(P＜0.05)。结果提示，CA-1能抑制肾上腺素对小鼠的升高血糖作用。五、对家兔糖耐量的影响家兔36只，体重1.8～2.5kg，雌雄各半。按体重、性别，随机分为6组，分别为空白对照组；溶媒+葡萄糖组；降糖灵(75mg/kg)+葡萄糖组；CA-1大、中、小剂量(1g、0.5g、0.25g/kg)+葡萄糖组。实验前各组动物禁食12h、空腹采血，测其正常血糖值后，连续灌胃给药3天，给药容积为10ml/kg，空白对照组和溶媒+葡萄糖组给等量0.5％羧甲基纤维素钠溶液，末次给药1h后，除空白对照组外，其余五组均腹腔注射50％葡萄糖2.5g/kg，给糖后分别于0.5、1、2、3h从耳静脉采血，按葡萄糖氧化酶法分别测定血糖水平，绘制家兔糖耐量曲线，进行组间t检验。结果见表5及附图。
表5 CA-1对家兔糖耐量的影响 (X±s，n＝6)剂量给药前给药后ip葡萄糖不同时间血糖值(mmol/L) 血糖曲线下组别血糖(mmol/L) 面积(mmol/L.h)0.5h 1h 2h 3h(g/kg)空白对照组 7.19±1.27 7.93±1.43 7.89±1.27 8.38±0.92 7.19±0.7218.2±3.02**溶媒+葡萄糖 7.31±1.50 20.53±7.39 19.76±5.93 12.24±3.128.10±1.0732.72±8.24降糖灵+葡萄糖 0.075 7.66±1.37 11.39±4.42*11.62±5.20*8.63±0.95*8.69±2.1721.85±4.88*小剂量+葡葡糖 0.25 7.34±0.72 12.62±8.35 13.36±8.07 10.18±3.387.94±1.3024.78±9.98中剂量+葡萄糖 0.5 6.51±1.43 7.78±1.28**8.25±1.23**7.71±1.72*8.68±1.6418.33±2.89**大剂量+葡萄糖 1 6.81±0.77 8.67±2.75**7.50±1.27**6.68±1.23**7.29±0.8316.38±2.58**与溶煤+葡萄糖组比较 *P＜0.05**P＜0.01结果表明，给药前各组间无明显差异，给药及葡萄糖后0.5、1、2h，CA-1大、中剂量组动物血糖水平明显低于溶媒葡萄糖组，均可使血糖曲线下面积显著降低(P＜0.01)。小剂量组血糖曲线下面积亦有降低的趋势。但无显著性(P＞0.05)。提示，CA-1有明显提高家兔糖耐量的作用。□试验结论CA-1粉剂中剂量组(0.5g/kg)和大剂量组(1.0g/kg)，灌胃给药6天，对正常大鼠血糖有明显降低作用，大剂量组能使血清胰岛素浓度增加；对动物给于四氧嘧啶而导致胰岛β细胞破坏，分泌胰岛素减少所造成的高血糖模型，均有明显的降血糖作用；对肾上腺素促进肝糖原和肌糖原的分解而引起的血糖升高，CA-1有一定的抑制作用；家兔糖耐量试验表明，CA-1灌胃给药3天后给葡萄糖，能使家兔糖耐量曲线明显下移，有显著提高家兔糖耐量的作用。
六、对小鼠骨髓细胞微核率的影响选择体重为20-22g健康ICR小鼠60只随机分为六组，每组10只，雌、雄各半，设高、中、低3个剂量组，环磷酰胺(CP)阳性对照组、溶剂对照组和空折对照组。用12％DMSO溶液作为溶剂，将CA-1配成10％、5％、2.5％3个浓度的混悬液，即高、中、低剂量组分别为5.0，2.5，1.25g/kg体重，三组均0.5ml/10g体重等容量灌胃给予。空白对照组按0.5ml/10g体重灌胃给予蒸馏水，连续给药7天。CP阳性对照组按35mg/kg腹腔一次注射给药，于最后一次给药后30小时处死动物，常规制片，油镜观察每只小鼠1000个嗜多染红细胞并记录出现的微核数，计算微核率(％)用Poisson检验进行统计分析。结果见表6。
表6CA-1对小鼠骨髓细胞微核率的影响
**P＜0.01 与各组比较有高度显著性差异结论CA-1对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果显示，CA-1高、中、低三个剂量和空白对照、溶剂对照组微核发生率均在参考值范围(1-3％)与CP阳性对照组比较有高度显著性差异(P<0.01>，认为CA-1无致突变作用。
图1为CA-1作用下的家兔糖耐量曲线，图中1-对照组，2-溶媒葡萄糖组，3-降糖灵组，4-小剂量组，5-中剂量组，6-大剂量组。
实施例1取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用工业乙醇50公斤加热回流提取2次，每次4小时，过滤，滤液浓缩，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎，加入乙醇/乙酸乙酯(1∶5)(V/V)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位206克，按粉状物与赋形剂重量比为1∶5的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例2取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用乙醇/水40公斤加热回流提取3次，每次3小时，过滤，滤液浓缩，再过滤，滤液浓缩至块状，烘于磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(1∶4)(V/V)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位300克，按常规胶囊制剂方法制成肠溶胶囊。
实施例3取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用60公斤水加热回流提取2次，每次4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用30％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(4∶1)(V/V)加热溶解冷却过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝，收集层析液，浓缩精制得有效部位310克，按有效部位与赋形剂重量比为1∶2的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例4取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用甲醇60公斤加热回流提取2次，每次4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用40％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇∶乙酸乙酯＝9∶1(V/V)，然后放置冷却。过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝和层析硅胶套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。收集层析，浓缩精制得有效部位320克，按有效部位与赋形剂重量比为1∶3的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例5取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用80公斤乙酸乙酯加热回流提取2次，每次4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用50％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇∶乙酸乙酯＝1∶9(V/V)，然后放置冷却。过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝和层析硅胶套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。收集层析液，浓缩精制得有效部位290克，按常规胶囊制剂配制方法制成肠溶胶囊。
实施例6取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用工业乙醇30公斤加热回流提取2次，每次4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用70％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇∶乙酸乙酯＝1∶4(v/v)，放置冷却。过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝和层析硅胶套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。收集层析液，浓缩精制得有效部位300克，按有效部位与赋形剂重量比为1∶4的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例7取露水草Cyanotis arachnoidea全草干燥粉碎后原料10公斤，用工业乙醇50公斤加热回流提取2次，每次4小时，过滤，除去残渣，浓缩后过夜放置，过滤，收集滤液，滤渣再用50％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇∶乙酸乙酯＝1∶5(V/V)，放置冷却。过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝和层析硅胶套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。收集层析液，浓缩精制得有效部位310克，按有效部位与赋形剂重量比为1∶3的比例加入赋形剂，制粒压片。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的药物，其特征是以露水草为原料按照下述方法制成的药剂取露水草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，滤液浓缩，放置过夜，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎，加入乙醇/乙酸乙酯(1∶9--9∶1)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2-1∶5加入赋形剂，制粒压片。
2.制备权利要求1所述药物的方法，其特征是取露水草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，滤液浓缩，放置过夜，再过滤，滤液浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(1∶9--9∶1)加热溶解冷却过滤，滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2-1∶5加入赋形剂，制粒压片。
3.制备权利要求1所述药物的方法，其特征是取露水草，干燥粉碎，用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1-5次，每次2-4小时，过滤，除去残渣，浓缩后放置过夜，过滤，收集滤液，滤渣再用10-70％乙醇煮沸，冷却过滤，收集滤液，滤渣弃掉，合并两次滤液，浓缩至块状，烘干磨碎得粗品，粗品用乙醇/乙酸乙酯(1∶9--9∶1)加热溶解冷却过滤，弃掉残渣，收集滤液，滤液通过吸附材料中性氧化铝或活性碳或大孔树脂或硅胶，收集层析液，浓缩精制得有效部位，按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2-1∶5加入赋形剂，制粒压片。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是所用吸附材料可回收套用，醇、酯液可大体校正比例为10-90％。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是粗品可用乙醇溶解后倾入搅拌加热的乙酸乙酯中，使其醇乙酸乙酯＝10％-90％(V/V)，然后放置冷却。
全文摘要
治疗糖尿病的药物,以露水草为原料按下述方法制成的药剂:取露水草,干燥粉碎,用工业乙醇或乙醇/水或乙酸乙酯或甲醇或甲醇/水或水加热回流提取1—5次,每次2—4小时,过滤,滤液浓缩,放置过夜,再过滤,滤液浓缩至块状,烘干磨碎,加入乙醇/乙酸乙酯(1∶9—9∶1)加热溶解冷却过滤,滤液浓缩粉碎成粉状物即有效部位,按常规制剂制备方法制成胶囊或按重量比1∶2—1∶5加入赋形剂,制粒压片。
文档编号A61P3/00GK1246363SQ9911762
公开日2000年3月8日 申请日期1999年8月4日 优先权日1999年8月4日
发明者邱明华, 李忠荣, 聂瑞麟 申请人:中国科学院昆明植物研究所