一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，属于油梨资源综合利用与开发技术领域。
【背景技术】
[0002]油梨又称鳄梨、酪梨或牛油果，系樟科鳄梨属的常绿乔木树种。其果肉富含脂肪酸，且不含胆固醇，营养价值高，享有“森林黄油”及“生命之源”的美誉
[0003]上世纪二十年代引种到福建、广东等省，经多年的引种，五十年代后已分布于海南、福建、广东、广西、云南、四川及浙江等省区，产量较为丰富。目前国内外对油梨的研宄主要集中在油梨的栽培、保藏和油梨油的提取及利用等方面，而对油梨生产油梨油余下的残渣一一果仁，综合利用研宄甚少。油梨仁若不用于育苗，往往弃之，这无疑是一种资源的浪费。
[0004]植物多糖在植物中由单糖脱水形成，非淀粉、非纤维素的一类具有生理活性的高分子聚合物的总称。具有修复糖代谢混乱、抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抗凝血、抗血栓及抗病毒等药理作用和多种保健功能，是目前食品、医药领域研宄的热点领域之一，用于糖尿病等疾病的治疗。目前关于油梨仁多糖的提取工艺研宄甚少，这些问题妨碍了油梨仁多糖在医药、食品等领域的直接应用。
[0005]多酚是植物中含多个酚羟基的一类天然活性物质，主要包括黄酮醇、黄烷醇、酚酸酸类等化合物。植物多酚是良好的天然抗氧化剂，具有降血脂、降血糖、抗衰老、降血压、抗癌防癌、防止冠状动脉粥样硬化等多种药理功效，广泛应用于食品、医药保健、日化等领域。对油梨仁中多酚的提取，具有多种功能和用途，例如可以作为天然的抗氧化剂应用到食品行业中，提高油脂的稳定性，延长油脂的保质期。且原料来源于量大、廉价的油梨仁，是一类具有良好开发前途的天然产物。
[0006]目前，有关油梨仁蛋白的提取已有相关报道，但油梨仁中除了蛋白外还富含多糖、多酚等活性成分，目前尚未有一个较为成熟的工艺能从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚等活性物质，而无法合理的综合利用与开发油梨资源。
【发明内容】
[0007]本发明利用乙醇/水浸法和大孔树脂纯化法，提出一种适合产业化放大生产的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法。
[0008]本发明是通过下述技术方案实现的。
[0009]一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，包括以下步骤:
(1)油梨仁经粉碎、干燥，过50?80目的筛得到油梨仁粉末；
(2)向油梨仁粉末中加入石油醚使料液比为Ig: 4mL?Ig: 1mL下浸提，固液分离，液相浓缩回收石油醚，并得到油梨仁油，固相干燥后得到脱脂油梨仁粉末；
(3)向脱脂油梨仁粉末中加入醇/水溶剂提取使料液比为Ig: 1mL?Ig: 18mL下浸提，固液分离，得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液；
(4)将步骤(3)中所得提取液进行浓缩，调节溶液pH，固液分离，固相干燥得到蛋白；
(5)步骤(4)中的水相采用大孔树脂吸附2?5h，用水洗脱，流出液干燥得到多糖；
(6)步骤(5)中的大孔树脂用10?20%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质，再用60?95%乙醇溶液解析，收集解析液，浓缩得到多酚；
(7)步骤(3)中固液分离得到的滤渣，经滤渣干燥得到膳食纤维。
[0010]上述步骤(I)中，所得油梨仁粉末为红色或棕红色。
[0011]上述步骤(2)中，所用的石油醚沸程为30?60°C或60?90°C，于在30?90°C下连续浸提2?3次，每次I?3h。
[0012]上述步骤(3)中，所述的乙醇/水溶剂为纯水溶剂或10?50%的乙醇水溶液，在50?90°C下浸提2?4h。
[0013]上述步骤(4)中，所得提取液浓缩至原体积的一半，再以I?10%的盐酸或硫酸调节溶液pH为2.0?6.0，使蛋白沉淀；固液分离采用常压过滤、减压过滤、离心分离中的一种，固相经常压干燥或冷冻干燥得到蛋白。
[0014]上述步骤(5)中，所用大孔树脂为D3520 ;所述的干燥方式为喷雾干燥。
[0015]本发明的优点与积极效果:
(1)采用乙醇/水作为溶剂综合提取蛋白、多糖及多酚，避免了其他有机溶剂(如甲醇等)提取所带来的费用高、安全性差等不足。
(2)利用调节提取液pH至蛋白质的等电点而使得蛋白质沉降，固液分离获得蛋白。
(3)采用大孔树脂对多糖和多酚进行富集、分离及纯化，提高了产品的纯度以及生产效率，还有效的降低了能耗，实现了蛋白、多糖、多酚综合提取及分离纯化。同时大孔树脂可以重复利用，不仅能有效的解决传统提取及纯化工艺难以放大、纯化过程导致有毒溶剂残留(如多糖的纯化采用Sevag试剂(氯仿和正丁醇的混合液)、三氟乙酸等脱除蛋白)、产品失活等问题，还简化了生产工序、降低生产成本。
(4)采用乙醇和水作为溶剂，有机溶剂回收率高，水可循环使用，对环境污染小。
(5)本发明工艺设计合理，可操作性强，生产条件温和，安全无毒，操作简单，所得产品纯度较高，适用于工业化生产。
【具体实施方式】
[0016]以下通过实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0017]实施例1
(1)油梨仁粉末50g于50°C下用石油醚(30?60°C)浸提两次，料液比Ig: 10mL，每次2.0h，过滤，合并提取液，浓缩回收石油醚得到油梨仁油及脱脂油梨仁粉末。
(2)向脱脂油梨仁粉末中加入纯水，料液比Ig: 15mL，于60°C下浸提2.5h，过滤，过滤，残渣烘干即可得到膳食纤维，提取液浓缩至原来体积的一半，用5%盐酸溶液调节pH =4.0，离心分离得到沉淀下来的蛋白，干燥得到蛋白。
(3)取水相部分，用D3520大孔树脂吸附3h，用I倍柱体积纯水洗脱，收集流出液，喷雾干燥得到多糖。
(4)将D3520大孔树脂用20%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质，再用75%乙醇溶液进行解析，收集解析液，浓缩回收乙醇，并干燥得到多酚。
[0018] 实施例2
(1)油梨仁粉末500g于70°C下用石油醚(60?90°C)浸提两次，料液比Ig: 5mL，每次2.5h，过滤，合并提取液，浓缩回收石油醚得到油梨仁油及脱脂油梨仁粉末。
(2)向脱脂油梨仁粉末中加入纯水，料液比Ig: 10mL，于70°C下浸提3.0h，过滤，过滤，残渣烘干即可得到膳食纤维，提取液浓缩至原来体积的1/2，用2%硫酸酸溶液调节pH= 4.6,离心分离得到沉淀下来的蛋白，干燥得到蛋白。
(3)取水相部分，用D3520大孔树脂吸附5h，用1.5倍柱体积纯水洗脱，收集流出液，喷雾干燥得到多糖。
(4)将D3520大孔树脂用15%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质，再用85%乙醇溶液进行解析，收集解析液，浓缩回收乙醇，并干燥得到多酚。
【主权项】
1.一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)油梨仁经粉碎、干燥，过50?80目的筛得到油梨仁粉末； (2)向油梨仁粉末中加入石油醚浸提，固液分离，液相浓缩回收石油醚，并得到油梨仁油，滤渣干燥后得到脱脂油梨仁粉末； (3)向脱脂油梨仁粉末中加入醇/水溶剂提取，固液分离，得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液； (4)将步骤(3)中所得提取液进行浓缩，调节溶液pH，固液分离，固相干燥得到蛋白； (5)步骤(4)中的水相采用大孔树脂吸附，用水洗脱，流出液干燥得到多糖； (6)步骤(5)中的大孔树脂用乙醇溶液洗脱进行解析，收集解析液，浓缩得到多酚； (7)步骤(3)中固液分离得到的滤渣，经滤渣干燥得到膳食纤维。
2.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步骤(2)中，所用的石油醚沸程为30?60°C或60?90°C。
3.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步骤(3)中，所述的乙醇/水溶剂为纯水溶剂或10?50%的乙醇水溶液。
4.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步骤(4)中，所得提取液浓缩至原体积的一半，再以I?10%盐酸或硫酸溶液调节溶液pH=2.0?6.0，使蛋白沉淀；固液分离采用常压过滤、减压过滤、离心分离中的一种，固相经常压干燥或冷冻干燥得到蛋白。
5.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步骤(5)中，所用大孔树脂为D3520 ;所述的干燥方式为喷雾干燥。
【专利摘要】本发明提供了一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法，该发明方法包括：①油梨仁经粉碎、干燥、脱脂后，采用乙醇/水提取，浓缩，调节提取液pH达到蛋白质等电点而使蛋白质沉降，固液分离、干燥得到蛋白；②沉淀蛋白后的上清液，经大孔树脂吸附，流出液干燥得到较高纯度的多糖；③大孔树脂经乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩干燥得到较高纯度的多酚。本发明依次从油梨仁中获得蛋白、多糖和多酚3种产品，且工艺简单，生产条件温和，所得产品纯度较高，适用于工业生产；所用溶剂主要为水和乙醇，对环境污染小，生产成本低。
【IPC分类】A61K36-54, A23J1-00, C07K14-415, C07K1-14, C08B37-00
【公开号】CN104523836
【申请号】CN201410784044
【发明人】黎国庆, 麻文胜, 钟华锋, 杨洪元, 莫海霞, 梁立坚, 刘永智
【申请人】广西职业技术学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月18日